- •1. Понятие об экспериментальной фармакологии. Цель и основные задачи дисциплины.
- •2. Общая классификация молекулярных мишений в действии лс.
- •3. Методы поиска биологически активных веществ, влияющих на различные рецепторы. Понятия об агонистах, антагонистах и частичных агонистах.
- •4. Мишень-направленная стратегия поиска лс с использованием виртуальных технологий.
- •9. Особенности содержания животных в лаборатории при подготовке, проведении экспериментах. Основные принципы проведения исследования на животных.
- •10.Возможности использования клеточных культур, бактерий, грибов, ферментов и изолированных органов как тест систем в доклинических исследованиях.
- •11. Основные этапы проведения доклинических исследований (спецефической активности, токсических эффектов).
- •12. Этические аспекты проведения доклинических исследований.
- •13.Доклинические исследования в соответствии со стандартами надлежащей лабораторной практики (glp): площадка, оборудование и персонал.
- •14.Стандартные операционные процедуры (соп)
- •15.Основные этапы изучения безопасности лекарственных средств.
- •16.Общетоксические свойства лекарственных средств. Понятие о биодоступности.
- •17. Основные этапы изучения специфических видов токсичности лекарственных средств.
- •18. Общие представления об изучении фармакокинетики лекарственных средств.
- •19. Абсорбции, распределения, метаболизма и экскреции лекарственного средства.
- •20. Оценка фармакокинетических лекарственных взаимодействий.
- •Вопрос 21
- •Вопрос 22
- •Вопрос 23
- •Вопрос 24
- •25. Основы клинической фармакологии, цели и задачи
- •26. Цели и типы клинических исследований
- •Вопрос 27. Цель и задачи 1 фазы клинических исследований.
- •28.Цели и задачи 2-3 фазы клинических исследований.
- •29. Цель и задачи 4 фазы клинических исследований.
- •30. Понятия плацебо, контрольная группа, слепое или двойное слепое исследование.
- •31. Побочный эффект и нежелательные лекарственные реакции.
4. Мишень-направленная стратегия поиска лс с использованием виртуальных технологий.
Выбор типа моделирования зависит от имеющихся у исследователей сведений о пространственной структуре лиганда и рецептора-мишени.
Существует два основных типа моделирования: прямое и непрямое.
Прямое моделирование позволяет оценить степень сродства рецептора и лиганда. Комплементарность определенных структур активному центру рецептора можно оценить при помощи процедуры докинга. В этом случае на помощь ученым приходят специализированные базы данных, содержащие сведения об известных соединениях.
Возможно также создание при помощи компьютерных программ гипотетической структуры молекул, которые в теории могут обладать высоким сродством к рецепторам того или иного типа. Это так называемые методы denovo. Их сущность заключается в подборе небольших фрагментов молекул с повышенной энергией связывания и минимальной энергией отталкивания в отношении активного центра рецептора. Путем постепенного присоединения фрагментов конструируется цельная молекула. Данный метод, несомненно, дает положительные результаты, однако, надежность оценки сродства не всегда высока.
Непрямое моделирование заключается в построении зависимостей «структура-активность» (QSAR) и фармакофорном моделировании. Фармакофорный анализ оценивает лиганд-рецепторное взаимодействие с позиции влияния на него функциональных групп молекул. Именно они отвечают за взаимосвязь структуры и активности.
Оптимизация процесса создания ЛС
В процессе разработки лекарственных средств выделяют две основные стадии – доклинические и клинические исследования. Как важнейшая составляющая, стадия доклинических испытаний включает в себя следующие этапы:
выявление мишени для лекарственного средства;
поиск соединения-лидера;
оптимизацию соединения лидера;
доклиническую оценку фармакологических свойств.
Соединением-лидером считается вещество, обладающее сродством к определенному рецептору и проявляющее фармакологическую активность.
Все базовые соединения подвергаются тестированию на наличие определенного типа активности. Данный процесс достаточно длительный и трудоемкий. Эффективность тотального скрининга невелика, несмотря на его возможность анализировать большое количество соединений с высокой надежностью.
После нахождения соединения-лидера проводится его оптимизация с целью усиления активности и избирательности действия, а также минимизации нежелательных побочных эффектов. Важную роль в выборе метода оптимизации играет наличие сведений о пространственной структуре рецептора. Дизайн лигандов, корректировка структуры комплекса вещество-рецептор приводят в дальнейшем к получению новых соединений-лидеров с заданными свойствами.
Развитие компьютерных технологий, несомненно, внесло колоссальный вклад в создание инновационных лекарственных препаратов, однако, компьютерное моделирование не всегда гарантирует создание лекарственного средства.
9. Особенности содержания животных в лаборатории при подготовке, проведении экспериментах. Основные принципы проведения исследования на животных.
1. Условия содержания животного в виварии должны обеспечивать
для него нормальный биологический фон.
2. Важнейшим условием этого является:
а) содержание животного в вентилируемом, освещенном, отапливаемом помещении;
б) обеспечение его водой для питья и нормальным питанием;
в) своевременная уборка помещения.
В виварии недопустимы громкие разговоры, шум.
3. Размер клеток для экспериментальных животных должен обеспечивать свободное передвижение, перенаселенность клеток ведет к стрессу, снижению размножения и гибели животных.
Подготовка животного к эксперименту
1. В период введения в эксперимент животное должно адаптироваться к обстановке лаборатории и привыкнуть к экспериментатору.
2. Мелких животных (грызунов и пр.) следует брать осторожно, применять корнцанги только с резиновыми насадками, не сжимать животных сильно руками, что причиняет животным травмы и боль. Запрещается оставлять животных в ожидании эксперимента больше, чем это необходимо для проведения премедикации.
II. Премедикация. Фиксация животного
1. Премедикация проводится ответственным за работу с животным лицом или под его наблюдением.
2. Если животное испугано или состояние наркоза наступает не сразу, экспериментатор должен ждать, пока животное не успокоится или не заснет.
3. Животное можно фиксировать только после того, как подействует наркоз.
III. Обезболивание
1. После дачи животному наркоза необходим постоянный контроль со стороны экспериментатора (или анестезиолога) за уровнем наркоза. При использовании миорелаксантов рекомендуется систематическое выведение животного из состояния обездвижения для проверки уровня наркоза. При первых признаках ослабления наркоза он должен быть углублен. Запрещается применение средств, препятствующих контролю за уровнем наркоза.
2. Все эксперименты с нанесением животному болезненных ощущений, включая эксперименты по изучению шока, должны проводиться с отключением сознания у животного. Допускается нанесение пороговой боли при изучении механизма боли и влияния на организм анальгетиков и анестетиков. Порог боли определяется индивидуально для каждого животного; критерием возникновения порогового болевого ощущения следует считать реакцию избегания: отдергивание конечности, перемену места, прыжок. Нанесение болевых раздражений, вызывающих голосовую и активную двигательную (оборонительную) реакции запрещается. Пороговые болевые раздражения наносятся в условиях свободного поведения животного. Наносимая пороговая боль должна быть непродолжительной. Развитие стрессовых состояний у животного в результате болевых раздражений и других мучительных состояний недопустимо.
3. При биологическом тестировании и производстве медико-биологических препаратов все процедуры проводятся в условиях щажения животного; болезненные процедуры при маркировке животных (отрезание ногтевых фаланг и др.), при взятии крови, при воздействии на слизистую глаза и т. д. должны проводиться под местной анестезией или другого рода обезболиванием.
4. Дозы и время введения препаратов должны фиксироваться в соответствующих документах (протокол эксперимента).
IV. Уход за животными в послеоперационном периоде
1. Грызуны, получившие травмы, например, при взятии крови из хвоста, отсаживаются в отдельную клетку во избежание покусов.
2. Животное в хроническом опыте должно быть помещено в удобную клетку, облегчающую также условия наблюдения и ухода за животным. С момента появления у животного болей, оно должно получать седативные и обезболивающие препараты. Животное должно получать квалифицированный уход под контролем экспериментатора.
3. Состояние животного и назначения препаратов должны отмечаться в протоколе эксперимента.