Пищевая Биохимия / Дроздова Е.А. Микрофлора продовольственного сырья и продуктов его переработки
.pdf6.1.1 Источники первичной микрофлоры молока
Микрофлора вымени. Вымя коровы защищается от внешней среды сосковым каналом, особые вещества в котором оказывают на микробы бактерицидное действие. При нарушении защитных функций соскового канала микробы попадают в вымя и размножаются в сосковой цистерне в период между доениями. Они сдаиваются с первыми струйками молока, которые не должны попадать в общую массу продукта. Проникновение микроорганизма в вымя может происходить через отверстие соска, через раны при поражении кожи вымени или соска, путем протекания через вымя инфицированных крови и лимфы. При скрытой инфекции вымени в 1 мл молока содержится от 300 до 4000 микробов, при заболевании маститом в 1 мл молока может быть до 500 000 микроорганизмов.
Кожа вымени соприкасается с поверхностью стойла и пастбища, остатками навоза, подстилкой, кормушками, руками доярок. На коже также остается после доения молочная пленка. Благодаря высокой температуре (на 1 °С или 2 °С ниже температуры тела животного) на коже создаются благоприятные условия для развития микробов. При недостаточно тщательном уходе и дезинфекции на 1 см² кожи вымени обнаруживается свыше 105 микроорганизмов. Во время доения количество микроорганизмов снижается до 10³ в 1 мл молока.
Навоз. В 1 г свежего коровьего навоза содержится от 104 до 105
микроорганизмов, в 1 г старого навоза – от 106 до 107 бактерий. Навоз может содержать патогенные и нежелательные для производства микроорганизмы
(возбудители болезней). В нем часто обнаруживаются сальмонеллы.
Корм. Корм может оказать косвенное влияние на загрязнение молока микроорганизмами: корм низкого качества может вызвать у животных понос, что увеличивает опасность попадания частиц навоза в молоко.
Воздух. Из воздуха микроорганизмы могут попадать в молоко во время ручного доения. Их количество в 1 мл сырого молока может составить от 100 до
1500. В основном воздух является источником обсеменения молока микрококками и
181
спорообразующими бактериями. Остальные группы микроорганизмов существенно не влияют на состав микрофлоры молока.
Оборудование. Если оборудование для первичной обработки молока находится в неудовлетворительном состоянии, оно может содержать от 5000 до
500 000 микроорганизмов. В основном в молоке после доения обнаруживаются те же микроорганизмы, что и на доильных установках (таблица 6.1).
Таблица 6.1 – Содержание микроорганизмов в сыром молоке после прохождения через коммуникации и оборудование
Микроорганизмы |
Источник попадания |
Среднее содержание |
|
|
|
в 1 мл молока |
|
Психротрофные |
Вода, остатки молока |
102 |
– 106 |
микроорганизмы |
|
|
|
Бактерии группы |
Остатки молока |
102 и выше |
|
кишечной палочки |
|
|
|
Стафилококки |
Зараженное молоко |
5 × 103 |
|
Микрококки и |
Молоко, воздух |
5 × 104 |
|
коринебактерии |
|
|
|
Энтерококки |
Молоко |
4 (103 ÷ 104) |
|
Молочнокислые |
Остатки молока |
103 |
– 106 |
стрептококки |
|
|
|
Молочно кислые палочки |
Молоко |
102 |
– 104 |
Спорообразующие |
Молоко (летом) |
10 |
– 20 |
бактерии |
Молоко (зимой) |
100 – 200 |
При машинном доении в зависимости от чистоты доильного оборудования в
молоко может попадать от 500 до 15 000 микроорганизмов. Для того чтобы
получить молоко высокого качества, необходимо учитывать следующее:
1)молоко соприкасается с большими поверхностями установок и при их загрязнении существенно обсеменяется;
2)обсеменение происходит за счет остатков молока и промывных вод в установках, где микрофлора приспосабливается к развитию в молоке;
3)получение большого количества молока создает предпосылки для смешивания молока с низким содержанием микроорганизмов с молоком,
содержащим значительное их количество;
182
4)промывка и дезинфекция доильных установок часто проводится недостаточно тщательно;
5)при неправильном использовании доильного оборудования кожа сосков травмируется, и создаются условия, благоприятные для возникновения маститов;
6)может происходить перенос инфекции из одной коровы к другой через доильные стаканы.
6.1.2 Вторичная микрофлора
Сразу после получения молока размножение микробов в нем часто приостанавливается, этот промежуток времени называют бактерицидной фазой. Это явление объясняется наличием в молоке собственно молочных ингибиторов – агглютининов (иммуноглобулинов), системы «лактопероксидаза – тиоционат – пероксид водорода», адаптацией к молоку попавших в него микроорганизмов, не приспособленных к развитию в молоке (попавших из окружающей среды, а не с оборудования). Длительность бактерицидной фазы зависит в основном от исходного обсеменения молока микроорганизмами и температуры его хранения (таблица 6.2).
Если исходное обсеменение молока невысокое, то бактерицидная фаза при температуре от 3 °С до 5 °С составляет 24 часа и более. При высоком же бактериальном обсеменении ее продолжительность всего от 3 до 5 часов при низкой температуре, а при высокой она вообще отсутствует.
После доения молоко должно быть быстро охлаждено до возможно более низких температур. Если молоко не позднее чем через 2 ч после получения охлаждено до 8 °С, можно поддерживать первоначальный уровень обсеменения примерно в течении 8 часов. При медленном охлаждении или недостаточно низкой температуре конечного охлаждения микроорганизмы молока активно размножаются уже в течении первых 12 часов.
183
Таблица 6.2 – Содержание микроорганизмов (в тыс.) в 1 мл молока при различных температурах и продолжительности хранения
Продолжительность |
|
|
|
Температура, °С |
|
|
|
хранения молока, ч |
|
|
3 – 5 |
|
8 – 10 |
|
13 – 15 |
|
|
I |
II |
I |
II |
I |
II |
Сразу после доения |
|
44 |
1200 |
44 |
1200 |
44 |
1200 |
3 |
|
45 |
1700 |
32 |
1700 |
73 |
1900 |
6 |
|
55 |
2300 |
35 |
2300 |
64 |
2900 |
9 |
|
25 |
2100 |
56 |
4300 |
1500 |
4100 |
12 |
|
37 |
2500 |
47 |
5600 |
1600 |
6000 |
15 |
|
67 |
4400 |
45 |
6000 |
3200 |
10000 |
18 |
|
62 |
6200 |
290 |
10000 |
4600 |
Молоко |
|
|
|
|
|
|
|
свернулось |
21 |
|
66 |
10000 |
1300 |
Молоко |
– |
– |
|
|
|
|
|
свернулось |
|
|
24 |
|
45 |
Молоко |
1650 |
– |
– |
– |
|
|
|
свернулось |
|
|
|
|
Примечание. I – молоко с невысоким содержанием бактерий; II – молоко с высоким |
|||||||
содержанием бактерий. |
|
|
|
|
|
|
Молоко, полученное на фермах с хорошими гигиеническими условиями может сохранять первоначальное количество микроорганизмов на протяжении
48 часов при температуре 10 °С. Однако при температуре 15 °С через 48 часов оно становится нестандартным по микробиологическим показателям. Молоко,
полученное на фермах со средним гигиеническим уровнем, может сохранять свое микробиологическое качество на уровне I класса по редуктазной пробе на протяжении 48 часов только при температуре 4,4 °С. В молоке, полученном на фермах с плохими гигиеническими условиями, быстро накапливаются микроорганизмы (в том числе патогенные) при всех температурах хранения на протяжении 48 часов.
Установлено, что для обеспечения сохранности качества молока содержание бактерий в сыром молоке сразу после доения не должно превышать 105 в 1 мл;
температуру охлаждения молока следует выбирать в зависимости от длительности хранения: от 8 °С до 10 °С при продолжительности до 24 часов, от 3 °С до 5 °С при продолжительности свыше 24 часов.
184
В таблицах 6.3 и 6.4 приведены данные о размножении микроорганимов в
сыром молоке при разных температурах и длительности хранения.
Таблица 6.3 – Содержание бактерий группы кишечной палочки, энтерококков, коагулазоположительных стафилококков и термостойких бактерий (в тыс.) в 1 мл сырого молока
Температура |
|
Исходное количество |
Продолжительность выдержки, ч |
||
хранения, °С |
|
|
|
|
|
|
|
24 |
48 |
||
Бактерии группы кишечной палочки |
|
|
|||
2 |
– 4 |
|
40 |
160 |
200 |
8 – 10 |
|
40 |
320 |
440 |
|
13 |
– 15 |
|
40 |
520 |
8000 |
Энтерококки |
|
|
|
||
2 |
– 4 |
|
4,8 |
4,8 |
9,6 |
8 – 10 |
|
4,8 |
9,6 |
19,2 |
|
13 |
– 15 |
|
4,8 |
19,2 |
52,8 |
Коагулазоположительные стафилококки |
|
|
|||
2 |
– 4 |
|
30 |
73 |
76 |
8 – 10 |
|
30 |
Нет данных |
190 |
|
13 |
– 15 |
|
30 |
То же |
920 |
Термостойкие бактерии |
|
|
|
||
2 |
– 4 |
|
40 |
47 |
Нет данных |
8 – 10 |
|
40 |
Нет данных |
200 |
|
13 |
– 15 |
|
40 |
То же |
200 |
Таблица 6.4 – Содержание психротрофных микроорганизмов, плесневых грибов и дрожжей (в тыс.) при температуре хранения 4,3 °С в 1 мл сырого молока
Продолжительность |
Психротрофные |
Плесневые грибы |
Дрожжи |
выдержки, ч |
бактерии |
|
|
0 |
14,7 |
6,7 |
29,2 |
5 |
15,5 |
11,3 |
28,3 |
10,7 |
15,6 |
12,0 |
26,7 |
18,5 |
15,2 |
12,0 |
23,0 |
Количество психротрофных бактерий, дрожжей и плесневых грибов при температуре 4,3 °С на протяжении хранения в течении 18,5 часов остается почти на первоначальном уровне. Психротрофные микроорганизмы свободно размножаются при температурах 7 °С и ниже при длительных сроках хранения. При повышении температуры их развитие подавляется размножением другой сапрофитной микрофлоры, в основном молочнокислой. Однако при подавлении конкурирующей микрофлоры в условиях повышенных температур они активно развиваются. Так, в
185
молоке с исходным содержанием психтротрофных бактерий 102 после хранения в течение 24 часов при 17 °С может накопиться до 106 клеток этих микроорганизмов в
1 мл.
За рубежом считается, что содержание психротрофных бактерий в молоке,
определяемое через 10 дней инкубации при температуре 7 °С, может служить показателем уровня санитарно-гигиенических условий получения молока на ферме.
При охлаждении его от 0 °С до 3 °С: до 104 в 1 мл – удовлетворительные условия на ферме; от 104 до 105 в 1 мл – необходимо улучшение условий получения молока или мойки и дезинфекции оборудования; более 105 в 1 мл – показатель неудовлетворительных условий получения или неэффективного охлаждения.
При охлаждении сырого молока от 0 °С до 3 °С и его длительном хранении в нем преобладают психротрофные бактерии (до 25 % общей микрофлоры),
отличающиеся невысокой термостойкостью. Соответственно эффективность пастеризации такого молока достаточно высока (до 99,9 %). Если молоко охлаждают до температуры от 0 °С до 3 °С сразу после доения и хранят при этой температуре до переработки, в нем развивается преимущественно психротрофная микрофлора.
Психротрофы обладают низкой термоустойчивостью, поэтому эффективность пастеризации глубоко охлажденного молока высокая (до 99,9 %). Развиваясь в сыром молоке, психротрофы могут вырабатывать термостойкие липазы и протеазы,
не разрушающиеся при термической обработке, которые могут оказывать отрицательное влияние на качество стерилизованного молока и молочных консервов.
Если молоко хранится при температурах выше 8 °С или 10 °С, в нем преобладают термостойкие бактерии (энтерококки, термофильные стрептококки и др.), достигающие 50 % и выше от общего количества микроорганизмов. В
результате эффективность пастеризации молока бывает ниже 98 %.
186
6.2 Гигиеническое качество сырого молока
Гигиеническое качество сырого молока определяется следующими показателями: содержанием патогенных микроорганизмов; содержанием сапрофитных микроорганизмов и интенсивностью их обмена веществ; содержанием соматических клеток; наличием ингибирующих веществ.
6.2.1 Содержание патогенных микроорганизмов
В сырое молоко патогенные микроорганизмы могут попадать из различных источников (таблица 6.5).
Таблица 6.5 – Характеристика патогенных микроорганизмов сырого молока
Микроорганизмы |
Источник попадания |
Вызываемое |
Максимальное |
|
|
|
|
заболевание |
содержание в 1 мл |
|
|
|
|
молока |
Микобактерии |
Кровь |
больных |
Туберкулез кишечника |
До 5 млн |
туберкулеза |
животных, |
от |
|
|
|
человека |
|
|
|
Бруцеллы |
Кровь |
больных |
Бруцеллез |
До 200 тыс. |
|
животных |
|
|
|
Ящур |
Кровь |
больных |
Эпизоотии крупного |
Нет данных |
|
животных, |
из |
рогатого скота и др. |
|
|
окружающей среды |
|
|
|
Сальмонеллы |
Кал животных |
Сальмонеллезы |
До 10 млн |
|
Энтеропатогенные |
Кал животных |
Пищевые |
До 10 млн |
|
кишечные палочки |
|
|
интоксикации |
|
Шигеллы Зонне |
Руки доярок |
|
Пищевые |
До 20 млн |
|
|
|
интоксикации |
|
Коагулазоположительные |
Вымя, пораженное |
Пищевые |
До 2 млн |
|
стафилококки |
маститом |
|
интоксикации |
|
Примечание. Максимальное содержание патогенных микроорганизмов в сыром молоке, на которое ориентируются при установлении эффективности пастеризации, обычно в сборном молоке бывает значительно ниже величины от 104 до 102 в 1 мл.
187
6.2.2 Содержание сапрофитных микроорганизмов и интенсивность их
обмена веществ
В результате развития микроорганизмов и их обмена веществ в молоке появляются биохимические изменения. Установлено, что улавливаемые современными методами биохимические изменения в среде наступают тогда, когда количество микроорганизмов в ней достигает в среднем 106 в 1 мл. В таблице 6.6
приведены изменения качества молока под действием микроорганизмов.
Таблица 6.6 – Изменения, наблюдаемые в молоке, при различном содержании бактерий в 1 мл
Микроорганизмы |
105 – 106 |
106 – 107 |
107 – 108 |
Общее количество |
Быстрый рост |
– |
– |
|
пируватов |
|
|
Молочнокислые |
– |
Повышение |
Появление кислого |
|
|
кислотности |
вкуса |
Протеолитические и |
Изменения белка и |
Появление пороков |
– |
липолитические |
жира (выявляются |
вкуса |
|
|
хроматографическими |
|
|
|
методами) |
|
|
При развитии большинства видов микроорганизмов образуется пируват,
который занимает центральное место в обмене веществ микроорганизмов. В
зависимости от вида микроорганизмов и условий культивирования быстрый рост пируватов начинается на уровне от 105 до 106 микроорганизмов в 1 мл.
Среди микроорганизмов, находящихся в молоке в небольшом количестве,
особое место занимают спорообразующие бактерии. Уровень их содержания в молоке незначителен, но они могут вызвать пороки продуктов, вырабатываемых при высокотемпературной обработке молока (стерилизованное молоко и т. д.).
Неизбежное даже при хороших санитарно-гигиенических условиях получения и первичной обработки молока содержание микробов в нем находится на уровне
5 (105 ÷ 104) в 1 мл. В дальнейшем в процессе хранения оно увеличивается в зависимости от условий, прежде всего температуры хранения.
188
С учетом вышеизложенного в мировой практике установлены границы риска,
определяющие минимальное количество микробов, при котором могут возникать пороки молока и вырабатываемых из него продуктов. Так, при охлаждении не ниже
8 °С количество бактерий не должно превышать 107, количество психротрофных молочнокислых бактерий при этой температуре не лимитируется. При охлаждении ниже 8 °С количество психротрофных бактерий не должно превышать 106
(молочнокислые бактерии не учитываются).
В зависимости от количества микроорганизмов в 1 мл сырого молока судят о пригодности для переработки его на различные продукты. Для переработки в питьевое молоко в 1 мл сырого молока обшее количество микроорганизмов должно составлять не более 106 клеток, термостойких бактерий – 3 × 107. Для переработки на продукты в 1 мл сырого молока должно содержаться 3 × 105 микроорганизмов, 102
бактерий группы кишечной палочки.
6.2.3 Содержание соматических клеток
При воспалительных заболеваниях молочной железы в молоке появляется большое количество соматических клеток. В молоке здоровых животных преобладают эпителиальные клетки, образующиеся в вымени в процессе естественного старения и обновления тканей. Эти клетки являются постоянной составной частью молока. Повышенное содержание в молоке соматических клеток,
особенно лейкоцитов, свидетельствует о том, что молоко получено от больного животного. Одновременно в молоке обнаруживается и большое количество микробов – возбудителей маститов – патогенных стафилококков, гемолитических стрептококков и др.
В молоке, полученном от коров, больных маститом, отмечаются серьезные химические изменения, которые влияют на качество вырабатываемых из него продуктов, в основном за счет снижения сухих веществ, жира, казеина.
189
Наиболее серьезные последствия вызывает применение маститного молока в
сыроделии. Однако имеются данные и о влиянии его на качество питьевого молока,
заквасок, и консервов (таблица 6.7).
Таблица 6.7 – Пороки продуктов, возникающие при переработке молока с различным содержанием соматических клеток в 1 мл
Продукт, закваски |
5×105 |
5×106 |
Молоко питьевое |
Отклонений нет |
Изменения вкуса после 7 дней |
|
|
хранения при температуре от 3 °С |
|
|
до 4 °С |
Сгущенное молоко |
Ухудшение стабильности при нагревании |
|
Стерилизованное молоко |
Выпадение в осадок альбумина |
|
Закваски S. lactis и |
Отклонений нет |
В некоторых случаях торможение |
S. cremoris |
|
размножения |
В основном переработка молока с высоким содержанием соматических клеток может привести к сокращению сроков хранения питьевого молока при низких температурах, появлению осадка в стерилизованном молоке и снижению стабильности сгущенного молока.
6.2.4 Содержание ингибирующих веществ в молоке
Ингибирующие вещества, содержащиеся в молоке, могут попадать в него из
различных источников:
-естественные – собственно молочные ингибиторы, которые обусловливают бактерицидные свойства молока, вводимые при лечении животного (антибиотики и сульфаниламиды);
-попадающие с кормами (антибиотики, пестициды, гербициды и др.);
-попадающие в молоко извне (остатки моюще-дезинфицирующих средств,
продукты обмена микроорганизмов и др.).
Собственно молочные ингибиторы оказывают подавляющее действие на бактерии только в первые часы хранения молока после доения (бактерицидная фаза)
и, таким образом, играют положительную роль в сохранении качества молока.
190