29Молекулярно — генетический метод : суть и назначение. Основные этапы пцр.

Более 500 заболеваний

Предрасположенность к вирусам, использование любых тканей и клеток c ДНК

Проведение анализа на любой стадии онтогенеза

ПРЯМАЯ: использ для уже известных заболеваний; наследст заболевания, имеющие клонированные гены c известной последовательностью нуклеотидов

Мутации в гене

Высокая точность, нед надобности в анализе всей семьи

КОСВЕННАЯ: если мутации в гене не выявлены, использование маркеров, находящихс рядом c изучаемым геном, точная!

В основе всей диагностики – ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ (ПЦР) – селективная амплиификация (клонирование) фрагмента ДНК ин витро.

Полимеразная цепная реакция . 1993 г. Кэрри Мюмме.

Модель репликации ДНК: выделение ДНК Денатурация ДНКотжиг, гибридизация праймеров c матричной ДНК, амплификация – получение множест копий участков ДНКдостраивание (удлинение, элонгация), электрофорез ДНК – распределение ДНК в спец геле.

МЕТОДИКИ:

• Гибридизация ДНК с использованием ДНК-зондов.

• Секвенирование – точная последовательность генов (точковые мутации, делеции и инверсии)

Значение:

• определение моногенных мультифакториальных заболеваний.

• восприимчивость человека к инфекционным заболеваням.

• диагностика онкопатологий.

• установление отцовства

• криминалистика.

• применение ферментов-рестриктаз для изучения фрагментов ДНК.

30.Медико-генетическое консультирование, его цели и задачи. Методы генетики, применяемые в мгк.

В борьбе с наследственной патологией основная роль отводится профилактике рождения аномального потомства. В последние десятилетия распространенным и эффективным способом профилактики является медико-генетическое консультирование.

МГК – один из видов специализированной помощи населению, направленной на предупреждение появления в семье детей с наследственной патологией. С этой целью составляют прогноз рождения в данной семье ребенка с наследственной болезнью, родителям объясняют вероятность этого события и оказывают помощь в принятии решения. В случае большой вероятности рождения больного ребенка родителям рекомендуют либо воздержаться от деторождения, либо провести пренатальную диагностику, если она возможна при данном виде патологии.

Этапы:

• Уточнение диагноза. Используют генеалогический, цитогенетический, биохимический и другие требуемые методы. Точный клинический и генетический диагноз заболевания позволяет установить степень генетического риска и выбор эффективных методов пренатальной диагностики и профилактического лечения.

• Прогноз потомства. Проспективное консультирование – риск рождения больного ребенка определяют до наступления беременности или в ранние ее сроки. Ретроспективное – после рождения больного ребенка относительно здоровья будущих детей.

Риск до 5% - низкий

до 10% - повышенный в легкой степени

до 20% - средний (противопоказания к зачатию или показания к прерыванию уже имеющейся беременности).

• Принятие решения. Широкое использование МГК, разработка способов пренатальной диагностики наследственных заболеваний позволяет существенно снизить вероятность появления потомства с наследственной патологией в отдельных семьях.