27.Близнецовый и биохимический методы изучения наследственности. Сущность этих методов, их этапы и назначение.

БЛИЗНЕЦОВЫЙ МЕТОД:

Уже не используется

C медико-биологич. точки зрения – патология: монозиготные – 1яйцевые, из 1 зиготы, разделивш на 2 или более бластомера, бластомер самостоят эмбрион, коэф родства = 1 КОНКОРДАНТНЫЕ

Дизиготные – 2яйцевые, из 2 яйцеклеток, оплодотворены разными сперматозоидами, коэф родства = 0,5

Частота встречаемости близнецов -1-2% (1/3 - монозиготные)

Этапы:

• Подбор близнецовых пар по изучаемому признаку или заболеванию

• Разделение общей выборки на 2 группы – моно и дизиготы по МАРКЁРАМ: пол, особенности плаценты, антигены в сист АВ0 и Rh, лейкоцитарные антигены, сывороточные белки, особенности дерматоглифики, полиморфизм ДНК, разрез глаз, форма ушной раковины

• Метод полисимптомного сходства по признакам, не зависящих от внешн среды

• Внутрипарное сравнение моно и дизигот

• Если сходство признаков примерно совпадает – пара конкордантна, есть различия – нет

• ФОРМУЛА ХОЛЬЦИНГЕРА – соотносит роль наследственности и среды в развитии какого-либо признака

ОТНОГЕНЕТИЧЕСКИЙ (БХ МЕТОД):

• Определение ферментопатий

• Определение в биол жидк нач, конечных и побочных продуктов обмена вв

• Качественные и количественные реакции

• Диагностика наследственных болезней обмена вв, изучение молекулярно-механич взаимодействия генов

• Установление времени проявления признака в онтогенезе

• Изучение полиморфизма и гетерогенности наследственных молекулярных болезней

Объекты: кровь, плазма, моча, пот, культуры клеток (лимфоциты, фибробласты).

Методики:

- качественный тест (реакция Фелинга) – наличие продуктов

- количественный тест (определение концентрации продукта)

- жидкостная и плоскостная хроматография (аминокислоты, олигосахариды, мукополисахариды)

- газовая хроматография (органические кислоты)

- электрофорез (гемоглобинопатия)

- спектроскопия.

28.Цитогенетический метод: суть, этапы, назначение.

Цитогенетический метод.Применяют с 1956 г.

Развитие современной цитогенетики человека связано с именами цитологов Д.Тио и А.Левана. В 1956 г. они первыми установили, что у человека 46 (а не 48, как думали раньше) хромосом, что положило начало широкому изучению митотических и мейотических хромосом человека.

Суть: микроскопическое изучение хромосомных комплексов в клетках человека; материалом для кариотипирования служат клетки крови, амниотической жидкости и т.д.

Кроме того, этот метод применяют при исследовании мутагенного действия различных химических веществ, пестицидов, инсектицидов,лекарственных препаратов и др.

В период деления клеток на стадии метафазы хромосомы имеют более четкую структуру и доступны для изучения. 

Обычно исследуют лейкоциты периферической крови человека, которые помещают в специальную питательную среду, где они делятся. Затем готовят препараты и анализируют число и строение хромосом. Разработка специальных методов окраски значительно упростила распознавание всех хромосом человека, а в совокупности с генеалогическим методом и методами клеточной и генной инженерии дала возможность соотносить гены с конкретными участками хромосом. Комплексное применение этих методов лежит в основе составления карт хромосом человека.

Цитологический контроль необходим для диагностики хромосомных болезней, связанных с анеуплоидией и хромосомными мутациями. Наиболее часто встречаются болезнь Дауна (трисомия по 21-й хромосоме), синдром Клайнфелтера (47 XXY), синдром Шерешевского — Тернера (45 ХО) и др. Потеря участка одной из гомологичных хромосом 21-й пары приводит к заболеванию крови — хроническому миелолейкозу.

При цитологических исследованиях интерфазных ядер соматических клеток можно обнаружить так называемое тельце Барри,илиполовой хроматин. Оказалось, что половой хроматин в норме есть у женщин и отсутствует у мужчин. Он представляет собой результат гетерохроматизацииодной из двух Х-хромосом у женщин. Зная эту особенность, можно идентифицировать половую принадлежность и выявлять аномальное количество Х-хромосом.

Метод пренатальной диагностикизаключается в получении околоплодной жидкости, где находятся клетки плода, и в последующем   биохимическом   и цитологическом определении возможных наследственных аномалий. Это позволяет поставить диагноз на ранних  сроках   беременности  и принять решение о се продолжении или прерывании.