49. Гибридные клетки: получение, характеристика, использование для картирования.

Если в организм поместить кл-ки чел. и мыши, потом вирус туда (корь и гендаль). Клетки сливаются, образуются дикарионы. Лишние хр. человека выкидываются, остается 40 хр. мыши + 1 (мб больше) хр. человека.

50. Картирование генов с использованием морфологических нарушений хромосом (транслокаций и делеций).

Делец. картирование. Могут быть использованы сбалансированные транслокации. Это позволяет предполагать, что 1 из разрывов хромосомы, предшествующий возникновению транслокации, нарушил структуру гена, локализованного в месте разрыва. Миопатия Дюшенна. Ген миопатии Дюшенна локализован в хромосоме X и обычно проявляется тяжелой миопатией у мальчиков. Однако обнаружили несколько случаев типичной клинической картины миопатии у женщин. причем в хромосоме X разрыв всегда локализовался в районе Хр21. Это позволило резко сузить район поиска гена миопатии Дюшенна. Картирование гена иногда может быть достигнуто за счет использования эффекта дозы гена. В случае делеции следует ожидать уменьшение на 50 % продукта гена (это прежде всего может быть фермент). Именно таким способом был картирован ген кислой фосфатазы эритроцитов в хромосоме 2. При дупликации, наоборот, можно ожидать увеличение на 50 % активности ферментов, гены которых вовлечены в дупликацию. Самым известным примером картирования гена с помощью дупликации является супероксиддисмутаза, которая была картирована на хромосоме 21, так как ее уровень был постоянно повышен у больных с болезнью Дауна.

51. Картирование генов у человека: метод днк-зондов.

Готовят спец. метки (зонды), которые реаг. на облучение, потом берут кл-ки в культуре и готовят из них метафазные пластинки, впрыскивая колхицин, потом гипотония, через специальный целлюлозный фильтр, на котором находятся зонды. После этого нагревают фильтр, ДНК деспир-ся в 1цепочечную, потом резко остужают и зонды крепятся к своим генам, там получается двуцеп. ДНК. Затем при помощи эндонуклеаз расщ-т уч-ки ДНК 1цепочечные, на фильтре ост-ся только гены с зондами, кот. Видны, например, при УВ облучении, и смотрят в микроскоп, есть ли нужный ген.

52. Митотический цикл клетки. Характеристика его периодов.

Различают 3 типа: стабильная (ранний этап), растущая (долгоживущие), обновляющиеся (недифф и дифф). В жизненный цикл: интерфаза (G₀ – клетки выполняют функции, G₁ – приготовка к синтезу ДНК, 2n2c, S – синтез ДНК и АТФ 2n4c, G₂ – клетка готовится к митозу 2n4c, накапливается АТФ и тубулины и митоз).

53. Митоз и его биологическое значение. Проблемы клеточной пролиферации в медицине.

Флеминг 1882 – делящиеся клетки, ''митоз''. Во время деления главная цель поровну распределить ген. материал. 4 стадии: профаза хромосомы конд-ся и уменьш. в р-рах, гены блокируются. Центриоли движутся к разным полюсам, между ними натягивается нити тубулина. Ахр. нити бывают 2 типов: центриольные (др к др), хромосомные (кинетофор) 2n4c. Метафаза – звезда на экваторе 2n4c. Анафаза – центромера распадается и две половины хромосомы движутся к разным полюсам, динеин и киноизин. (самый короткий период) 2n2c Телофаза – отошедшие хромосомы формируют ядра Образуется клеточная оболочка. Цитотомия, цитокинез. 2n2c. Амитоз – ядро фрагментируется, число ДНК и хромосом неупорядоченно. Эндомитоз – не происходит растворение ядерной оболочки, полиплоид. Политения – гигантские хромосомы. Бесконечно S.