16. Подготовка материала к оздоровлению от вирусных инфекций.

В фазу активного роста отбирают внешне здоровые раст., зимой проращивают клубни, луковицы. 1 вариант: термообработка раст., вычленение меристем и введение в культуру in vitro. 2 вариант: снятие ростков с клубней, вычленение меристем или ростков. 3 вар.: вычленение меристем из верхушек побегов. 4 вар.: термообраб. раст., клубней и вычленение меристем из ростков.

17. Использование термо- и химиотерапии при оздоровлении от вирусных болезней.

Термо-: применяется критическая для растений температура, которая снижает конц. вирусов и увелич. безвирусную зону в верхушечной меристеме. Это позволяет увеличить размер экспланта, и увел. % приживаемости in vitro. Режимы: 1) для клубней, 37-38 град., круглосут., освещ. 1-1,5 кЛюкса, влаж. 80-90%. Продолж. 10-20 сут. 2) Растения в горшках, 37-38 град, 4-6 кЛюксов, вл: 90-95%, 15-25 сут. 3) Растения in vitro, темпер. вверху проб. 40-41 град, внизу 37-38 град. (поставить низ в воду), 10-20 сут. Свободная от вирусов зона увел. в апексе до 0,25-0,5 мм. Химиотерапия – основывается на доб. в пит. среду в-в ингибиторов вирусов. Для раст. безвредна. Применяют РНК-азу (панкреатич. рибонуклеаза). Доб. на поверх. среды 0,01 % р-р, после стериализуют. Увел-ся на 30-40%, приживаемость на 10-35%, выход здор-х раст. в 2 раза. Антибиотики.

18. Биотехнология оздоровления картофеля от вирусных инфекций и других, патогенов.

Этапы: 1) подготовка клубней, хемотерапия, проращивание (1-2 см. ростки), проверка на вирусы методом ИФА. 2) взятие эксплантов: верх. ростки, их стерилизуют и вычленяют меристемы. 3) размножение меристем, потомство проверяют на отсутствие вирусов электр. микроскопом или ИФА. Здоровые размн. микрочеренкованием, а больные выбраковывают. 4) при накоплении in vitro их пересаживают в почву, подращивают и высаживают в теплицы. Проверка ИФА. 5) ускоренное размн. всеми доступными способами ( черенкование побегов, деление клубней). 6) размножение тепличных клонов в полевых условиях. 7) поддержание коллекции сортов in vitro.

Уборка: за 10 дней скашивают ботву (кожура будет плотней), копают, закладывают клубни каждого мешка в отдельный мешочек. Хранят при 1-3 град., влаж.: 85%. Весной клубни просматривают, в случае обнаружения больных клубней, бракуют весь мешок. Остальные высаживают в поле (питомник размножения).

19. Схема оздоровления древесно-кустарниковых растений.

(Роза). Древ.-куст. породы имеют большое значение в озеленении. Перспективные методы размн. новых сортов, гибридов, устойчивых к болезням, эстетичны, солее- и газоустойчивы. Древ. культур более 200 видов. Этапы: 1) введение в культуру in vitro. 2) индукция морфогенеза. 3) ризогенез. 4) пересадка регенератов в субстрат. Для клонирования экспланты брать у молодых деревьев. У 100-летней сосны приживаемость – 2 экспланта, у 5-летней – 98. Финны восст. леса из in vitro.

Роз – 25 тыс. сортов и форм. В пит. Дельбарда берут маточные раст. из теплицы, срезают молодые побеги, разрезают на части, стерилизуют в 70% этаноле 1 мин, 20 мин. в 7% гипохлорите кальция. Промывают в 3 порциях стерильной воды и из почек вычленяют меристемы, купол., высаживают в среду. Через 20 дней высаж. в свежую среду. Через 5 пересадок образуются конгломераты с 5 веточками, укореняют. Высаживают в контейнер 7-8 см. Высаживают под пленку. Через 8-9 мес. получают посад. материал. Особенности: среда Мурасига-Скуга, почку лучше срезать клином. 25-28 град., длин. день (16 ч.). Перед укоренением выдержать неделю при темп. 5 град.

Можжевельник – берут отрезки побегов, стерилизуют 3 мин. в спирте, 5 мин. в р-ре сулемы. Промыть стерильной водой. Остальное также.