17. Микробиологическая диагностика дифтерии. Дифференциация возбудителей дифтерии от дифтероидов, исследование на носительство.

Микробиологическая диагностика дифтерии. Основным является бактериологический ме­тод диагностики. Цель данного метода за­ключается в выделении чистой культуры С. diphtheriae и идентификации их на основании морфологических, культуральных, биохими­ческих и токсигенных свойств. При наличии клинических симптомов заболевания выделе­ние токсигенных штаммов С. diphtheriae явля­ется абсолютным подтверждением диагноза дифтерии, а при их отсутствии свидетельс­твует о бактерионосительстве. Материалом для исследования служат слизь и пленки из очагов воспаления, а также секрет из очагов патологического процесса. Сбор материала необходимо проводить в течение 3—4 ч (не позже 12 ч) с момента обращения больного. Для взятия материала используют сухие ват­ные тампоны, если посев будет проведен не позднее 2—3 ч после сбора материала. При транспортировке материала на дальние рас­стояния можно использовать тампоны, пред­варительно смоченные 5% раствором глице­рина. При исследовании на дифтерию во всех случаях, в том числе и при экстрафарингеальной локализации, материал для исследо­вания берут раздельными тампонами одно­временно из зева и носа, а при необходимости — из других мест локализации воспаления. Посев делают раздельно на поверхность од­ной из рекомендованных инструкцией сред. Бактериологическая лаборатория через 48 ч выдает ответ об отсутствии в анализах С. diph­theriae или, в случае наличия положительных результатов исследования на токсигенность (не более 6 колоний) и пробы на цистиназу, о выделении токсигенных штаммов С. diph­theriae. Экспресс-метод бактериологической диагностики — посев материала на жидкие питательные среды с последующей постанов­кой ИФА — позволяет определить токсинные штаммы за 18 часов.

Различают 3 вида показаний к проведению бактериологических исследований на дифте­рию:

• диагностическое обследование детей и взрослых с острыми воспалительными явле­ниями в носоглотке, особенно при подозре­нии на дифтерию;

• по эпидемическим показаниям обсле­дуют детей и взрослых, бывших в контакте с источником инфекции;

• с профилактической целью обследуют лиц, вновь поступающих в детские дома, шко­лы-интернаты, специальные учреждения.

Ввиду полиморфизма возбудителя (от мел­ких до крупных, сегментированных и бочко­образных форм), бактериоскопический метод диагностики дифтерии как самостоятельный диагностический метод не применяется, но может быть проведен по просьбе врача.

Для ускоренного обнаружения дифтерийного токсина, как в бактериальных культурах, так и в биологических жидкостях (сыворотка кро­ви), применяют: РНГА с антительным эритро­цитарным диагностикумом; реакцию нейтра­

лизации антител (о наличии токсина судят по эффекту предотвращения гемагглютинации); РИА и ИФА. Из молекулярно-генетических методов исследования применяют ПЦР.

Коринебактерии дифтерии ферментируют глюкозу, мальтозу. Отсутствие активности в отношении сахарозы и мочевины - важный дифференциальный признак среди дифтероидов. Обладают цистеназной активностью (расщепляют цистеин) - проба Пизу.