14. Методы микробиологической диагностики раневой анаэробной инфекции. Иммунобиологические препараты, используемые для лечения и профилактики.

Микробиологическая диагностика газовой гангрены. Исследуемый материал — поражен­ные и некротизированные ткани, взятые на границе со здоровыми, экссудат, гной, раневое отделяемое, кровь. От трупов берут кусочки мышц, печени, селезенки; кровь из сердца, раневое отделяемое. При пищевых токсикоинфекциях исследуют рвотные массы, фекалии, кровь, остатки пищевых продуктов.

Для диагностики используют бактериоскопический, бактериологический и биологический методы.

Готовят мазки из исследуемого материала, окрашивают по Граму и Бурри-Гинсу (для выявления капсулы), микроскопируют, об­ращая внимание на наличие грубых грампо- ложительных палочек или отдельных спор. Определяют подвижность в препарате «вися­чей капли». Ставят РИФ.

Сеют на казеиновые или мясные жид­кие и плотные среды (кровяной агар, среда Вильсона—Блера); посевы инкубируют в ана- эростате при 37 °С. Выделяют и идентифи­цируют чистую культуру по общепринятой схеме. Фильтраты культур или центрифугаты проверяют на наличие токсина в опытах на мышах либо морских свинках или использу­ют для проведения реакции нейтрализации с диагностическими сыворотками С. perfrin­gens, С. septicum, С. sordellii, С. oedematiens А и В. Необходимо четко идентифицировать роль С. perfringens в развитии тех или иных клинических состояний, так как микроб час­то входит в состав нормальной микрофлоры кишечника и его содержание может достигать 10³ микробных тел или 10 спор в 1 г фекалий здорового человека.

Для ускоренной диагностики исследуемый материал центрифугируют и с центрифугатом проводят реакцию нейтрализации со специ­фическими антитоксическими сыворотками.

К быстрым методам диагностики относится выявление лецитиназы в фильтратах и ней­трализация ее специфическими сыворотка­ми; ГЖХ.

При пищевых токсикоинфекциях проводят бактериологическое исследование с целью выделения и идентификации возбудителя, определения массивности обсеменения ис­следуемого материала данным микробом и типа выделяемого им токсина.

Лечение. Направлено на нейтрализацию гангренозных токсинов антитоксином; хи­рургическое удаление некротизированных тканей. Применяют антитоксические сыво­ротки, антибиотики и гипербарическую оксигенацию.

14. Эпидемиология, патогенез и микробиологическая диагностика столбняка. Иммунобиологические препараты.

Эпидемиология. Естественный резервуар и источник возбудителя инфекции — почва; хотя многие исследователи склонны считать резервуаром инфекции толстый кишечник сельскохозяйственных и диких животных. Повышенную заболеваемость отмечают в регионах с теплым климатом, создающим условия не только для длительного сохране­ния спор в почве, но и для их прорастания и размножения вегетативных форм. Механизм передачи — контактный, путь — раневой (бытовая травма, огнестрельные ранения и др.). Восприимчивость — высокая; заболе­ваемость значительно возрастает среди ра­неных во время военных действий; основная группа риска в мирное время — работники сельского хозяйства, жители сельских райо­нов (80—86 % заболевших), дорожные и стро­ительные рабочие, шахтеры и т. д. Ежегодная смертность от столбняка превышает 1,2 млн человек. Столбняк часто поражает новорож­денных при родах в антисанитарных услови­ях. У них развивается «пупочный столбняк», от которого ежегодно гибнет более 1 млн новорожденных.

Патогенез. Входные ворота инфекции — бытовые и производственные травмы, причем наиболее часто поверхностные или колотые, когда больной не обращается за медицинс­кой помощью. Столбняк — токсинемическая инфекция, основным патогенетическим фак­тором которой является столбнячный токсин. Возбудитель остается в ткани на месте вход­ных ворот; продуцирует экзотоксин, кото­рый поступает в кровь и распространяется по организму по кровеносным и лимфатическим сосудам, а также по нервным стволам, и до­стигает спинного и продолговатого мозга. Токсин фиксируется на поверхности отрост­ков нейронов, проникает в них за счет лиганд- опосредованного эндоцитоза и посредством ретроградного аксонного транспорта попада­ет в ЦНС. Механизм действия токсина свя­зан с подавлением высвобождения тормозных нейромедиаторов, в частности глицина и у- аминомасляной кислоты, в синапсах (токсин связывается с синаптическими белками сина- птобревином и целлюбревином), в результате чего нарушается проведение импульсов по нервным волокнам. Первоначально токсин действует на периферические нервы, вызы­вая местные тетанические сокращения мышц. При столбняке поражается не только нервная система — в патологический процесс вовле­каются все системы организма.

Микробиологическая диагностика. Микро­биологические исследования лишь подтвержда­ют клинический диагноз. Возбудитель обычно обнаруживают в месте его проникновения в ор­ганизм больного. Поэтому наиболее рациональ­но исследование различного материала, взятого в месте ранения. В тех случаях, когда входные ворота неизвестны, следует тщательно осмот­реть больного для выявления ссадин, царапин, катаральных и воспалительных процессов; не­обходимо обратить внимание на старые рубцы после ранений, так как возбудитель может долго в них сохраняться; в некоторых случаях исследу­ют слизь из носа, бронхов, глотки, налет с мин­далин, а также выделения из влагалища и матки (при послеродовом столбняке или аборте). При бактериологическом исследовании трупов также

принимают во внимание возможность генера­лизации инфекции. Для анализа забирают кровь (10 мл) и кусочки печени и селезенки (20-30 г).

Для диагностики применяют бактериоскопический, бактериологический и биологический методы.

Обнаружение в мазках из материала, взя­того от больного или трупа, тонких длинных грамположительных палочек с круглыми тер­минальными спорами «барабанные палочки» вызывает подозрение на наличие Clostridium tetani, однако на основании бактериоскопии нельзя делать заключение о присутствии воз­будителя, так как в материале могут находиться морфологически сходные с ним клостридии.

Выделение возбудителя проводят по обыч­ной схеме. Исследованию подлежат материал от больного или трупа, перевязочный и шов­ный хирургический материал, а также почва, пыль и воздух. Исследуемый материал засева­ют на среду Китта—Тароцци, инкубируют в термостате 3-4 суток, после чего пересевают на плотные среды для получения колоний. Выделенную культуру идентифицируют и оп­ределяют ее токсигенность на белых мышах или в РП в геле.

При исследовании материала от больного или трупа параллельно бактериологическому анализу проводят обнаружение столбнячно­го токсина в РПГА с иммуноглобулиновым столбнячным диагностинумом или в биоло­гической пробе на мышах. Для этого материал измельчают, добавляют двойной объем фи­зиологического раствора, фильтруют; часть фильтрата смешивают с противостолбнячной сывороткой из расчета 0,5 мл (200 АЕ/мл) сы­воротки на 1 мл экстракта и инкубируют в те­чение 40 мин. Затем одной группе животных вводят экстракт без предварительной инку­бации с сывороткой, а другой группе — про­инкубированную смесь; при наличии столб­нячного токсина у животных первой группы развиваются симптомы столбняка.

Лечение направлено на нейтрализацию стол­бнячного токсина антитоксином. Применяют противостолбнячную лошадиную сыворотку в дозе 50—100 тыс. ME (курс — 2 инъекции, в тяжелых случаях — 3 инъекции дробно) или донорский противостолбнячный иммуногло­булин в дозе 900 ME.