5.4. Оценка чистоты реагентов

Все поступающие в продажу реактивы — красители, субстраты, проявляющие и цветообразующие вещества, меченые антитела — могут содержать примеси. Состав их может различаться от партии к партии. Если в качестве загрязняющей примеси содержится соль или сурфактант, то они будут влиять на реакцию косвенным образом. Кроме того, в реактиве могут быть примеси, сами по себе окрашивающие препарат, но иначе, чем требуется согласно реакции. В самом деле, этикетка на пузырьке с красителем не всегда отражает его содержимое — коммерческому контролю за качеством нельзя безоговорочно доверять. Более того, следует подчеркнуть, что гистохимические методы используются для изучения более сложных препаратов, чем те, которые исследуются методами препаративной биохимии. Таким образом, последствия недостаточной чистоты реагентов для гистохимии могут быть еще более серьезными, чем для биохимии.

Как же с учетом всего этого следует проверять чистоту реагентов? Химический анализ красителей и других реагентов — это специальное искусство, и если оно окажется для вас необходимым, то способы анализа данных веществ описаны в работе [12]. Но если вы пользуетесь стандартными гистохимическими методами, то лучше передоверить анализы другим; заказывайте красители с сертификатами Комиссии по биологическим красителям (Biological Stain Comission). Хотя это не гарантирует вам чистоты красок, но можете быть уверены, что они пригодны для проведения соответствующих гистохимических методик. Другая общая рекомендация состоит в том, чтобы хранить образец хорошей краски для проверки того, не являются ли возникающие у вас трудности следствием загрязненности новых партий красителя.

Кроме проблем загрязнения возникают еще и трудности, обусловленные запутанной номенклатурой, которая может послужить причиной неправильного применения красителей.

5.5. Номенклатура реагентов

Гистохимические красители обычно представляют собой сложные органические молекулы и их систематические (номенклатурные) названия так же сложны, из-за чего широкое распространение получили тривиальные названия, акронимы и сложносокращенные названия. Действительно, что легче произнести: «Дайте-ка мне 3,3-(4,4-диорто-анисилен)-2,2-ди(пара-нитрофенил)-бис-(5-фенил)-дитетразолийхлорид» или «передайте нитро-ВТ»? Кроме того, многие гистохимические реактивы имеют свои собственные названия в текстильнонй промышленности, где часто одному и тому же веществу разные фирмы присваивали разные торговые названия. Возникающей из-за этого путаницы часто можно избежать, если пользоваться стандартной номенклатурой Colour Index (CI); действительно, названия по CI употребляются параллельно с тривиальными названиями во многих книгах, журналах и каталогах. Для решения возникающих у вас проблем, связанных с номенклатурой, полезным источником может оказаться монография Конна (Conn) «Биологические красители»

[13].

В табл. 5.23 приведены варианты применяемых названий и наименования по системе CI для красителей, упоминающихся в настоящей главе.

Таблица 5.23. Наименования красителей и соответствующих реагентов, использованные в настоящей главе

114