- •Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •060101- «Лечебное дело»
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Шкала гемолиза
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Методические указания к практической работе
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Возможные ошибки при проведении лимфоцитотоксического теста
- •8. Решить ситуационную задачу:
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Ртга с типоспецифической сывороткой
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •1. Изучить механизм развития III –типа гиперчувствительности по схеме (зарисовать)
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •5. Изучить постоянные противопоказания к препаратам календаря прививок (записать в терадь, табл.19)
- •Определение титра токсина
- •8. Изучить список вакцин и сформировать по видам:
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Определение титра антитоксической сыворотки в реакции флоккуляции
- •4. Изучить список препаратов и разделить их на антитоксические сыворотки и иммуноглобулины:
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Цитокины – более узкое понятие, гуморальная составляющая межклеточных взаимодействий в иммунной системе. Гормоны тимуса
- •Биологические эффекты основных цитокинов (л.В. Ковальчук)
- •Системные проявления (синдромы) токсического действия цитокинов (а.А.Ярилин)
- •Провоспалительные цитокины (а.А. Тотолян, и.С. Фрейдлин)
- •Противовоспалителдьные цитокины (а.А. Тотолян, и.С. Фрейдлин)
- •На иммуноглобулины класса g (IgG)
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •Характеристика некоторых этапов диагностического анализа
- •Характеристика терминов и критериев статистических методов, используемых при проведении иммунологических исследований
- •Некоторые процедуры иммунологических исследований и критерии их стандартизации
- •Характеристика наиболее часто встречающихся причин аналитических ошибок при проведении рид и ифа
- •Оглавление
На иммуноглобулины класса g (IgG)
Примечание:
1 – носитель (поверхность лунки планшета);
2 – антиген;
3 – специфические IgG сыворотки крови;
4 – моноклональные анти-IgG-антитела, меченые пероксидазой хрена (конъюгат).
Принцип метода. Иммуноферментный метод сменил иммунора-диометрический и имеет ряд преимуществ:
1) отсутствие контакта с радиоактивными веществами;
2) меньшие затраты на оборудование (высокая стоимость счетчиков);
3) устойчивость меченых соединений при хранении (не менее 6 мес.);
4) возможность автоматизации процесса.
К недостаткам следует отнести:
1) канцерогенность и нестойкость некоторых ферментных субстратов (индикаторные смеси);
2) неспецифические помехи за счет ряда эндогенных ферментов, присутствующих в биоматериале или окружающей среде.
В силу чрезвычайно мощной каталитической активности фер-менты наиболее чувствительны и универсальны в качестве метки. В качестве ферментов-маркеров используются щелочная фосфатаза, ацетилхолинэстераза, бета-галактозидаза, пероксидаза хрена и т.д. Каталитическая активность ферментов различна и зависит от его конформационных свойств. Большинство используемых ферментов за 1 мин. при обычной температуре способны превращать в компоненты 106 молекул субстрата в расчете на одну молекулу фермента. Из сказанного следует, что чувствительность реакции значительно зависит от каталитической эффективности фермента-маркера.
Иммунопероксидазные методы наиболее просты и эффективны при анализе срезов тканей, обнаружении антигенов после электрофоретического разделения. При ИФА, очень важным является этап отмывки несвязавшихся реагентов. Введение в систему МкАт повышает специфичность ИФА.
Существует множество модификаций метода ИФА, но наиболее известным и используемым в практике является гетерогенный ИФА. В качестве «твердой фазы» используют полистирол, полиэтилен, сефадекс, акриламид, целлюлозу, бумажный диск и др.
Среди гетерогенных методов различают конкурентный, неконкурентный, «сэндвич» (англ. sandwich – бутерброд), ингибиторный прямой и непрямой. В лабораторной иммунологии в ручном варианте наиболее популярен неконкурентный сандвич метод. В последнее время выпускаются тест-системы, где в качестве твердой фазы используются различные материалы: бумажные диски, бусинки, парамагнитные частицы и др. Обязательным условием проведения ИФА является постановка контрольных материалов и калибраторов. Контрольные материалы ставятся в каждой серии опытов.
Чувствительность ИФА высокая. Специфичность определяется чистотой антител, используемых в системе. Автоматизация методов позволяет их стандартизировать и увеличить объем исследований.
Методы широко используются в лабораторной клинической иммунологии для диагностики инфекционной патологии, включая ВИЧ-инфекцию, дефектов гуморального и клеточного звеньев иммунной системы, в аутоиммунной патологии и в массовых эпидемиологических исследованиях .
5. Подведение итогов занятия – 5 мин
Практическое занятие 17
ТЕМА. Иммунный статус. Иммунодиагностика. Иммунодиагностические методы 1-го уровня. Иммунодиагностические методы 2-го уровня. Лаборатория клинической иммунологии многопрофильного ЛПУ. Задачи. Структура. Правила работы в лаборатории. Этапы лабораторных иммунологических исследований. Принципы лабораторных методов. Контроль качества лабораторных иммунологических методов исследования
Цель занятия. Ознакомить студентов с лабораторией клинической иммунологии ЛПУ, правилами работы в лаборатории. Дать представление об этапах лабораторных иммунологических исследований. Ознакомить с контролем качества лабораторных иммунологических методов исследования