Общая микробиология

ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

ГЛАВА 1. ВВЕДЕНИЕ В МИКРОБИОЛОГИЮ И ИММУНОЛОГИЮ

1.1. Мир микробов и его роль в жизни человека Наша планета также, как, по-видимому, и вся Вселенная, состоит из неживой и

живой природы, которые находятся в единстве и многообразных формах существования. Живая природа, по Вернадскому, составляет биосферу (от «био» и «сфера»), включающей всех представителей растительного, животного мира и человека, а также результаты и продукты их жизнедеятельности.

По существу, биосфера — это оболочка Земли, состав, структура и энергетика которой обусловлены прошлой и современной деятельностью живых организмов; биосфера охватывает часть атмосферы, гидросферу и верхнюю часть литосферы.

Живые организмы оказывают существенное влияние на газовый состав атмосферы' (кислород, азот, углекислый газ), природные воды, известняки, некоторые полезные ископаемые (уголь, нефть), осуществляют круговорот органических и неорганических веществ, выполняют санитарные функции на планете, влияют на климатические условия и другие экологические параметры, в которых существует все живое, в том числе человек.

Все живые существа, обитающие на Земле, можно разделить условно на две большие группы: макромир и микромир. К макромиру относятся все живые существа (растения, животные, насекомые, человек и т. д.), видимые невооруженным глазом, а к микромиру — представители живого мира, находящиеся за пределами разрешающей способности нашего глаза, т. е. которые можно увидеть лишь с помощью оптических или других приборов. Иными словами, деление представителей живой природы на макро- и микромир чисто условно, так как основано на размерах, воспринимаемых или не воспринимаемых органом зрения человека. Размеры отдельных представителей микромира колеблются от 0,01 - 0,4 мкм или 10—400 нм (вирусы) до 10 мкм и более (бактерии, грибы, простейшие).

1.2. Представители мира микробов Микромир весьма многообразен и многочислен и включает представителей как

растительного, так и животного происхождения. К нему относятся бактерии, грибы, простейшие и вирусы. Всех их можно объединить единым термином — микробы. Этот термин ввел французский ученый Седдило в конце XIX в. Молекулярно-биологическая организация, структура, биологические свойства, экология, роль в живой и неживой природе отдельных представителей микробов, т.е. бактерий, грибов, вирусов и простейших, существенно различаются. Их классификация, таксономия будут представлены в гл. 2. Здесь же отметим, что к микробам относятся: одноклеточные и многоклеточные микроорганизмы, имеющие ядро (эукариоты — от греч. karyon — орех, ядро ореха); доядерные микроорганизмы, не имеющие оформленного ядра (прокариоты);

сложноустроенные частицы — вирусы, представляющие собой комплекс нуклеиновых кислот, белков, ферментов; инфекционные макромолекулы (дезоксирибонуклеиновая (ДНК) и рибонуклеиновая (РНК) кислоты, инфекционные белки — прионы). Таким образом, по молекулярно-биологической организации микробы существенно различаются: одни из них представляют собой молекулы (ДНК, РНК, прионы) или сложные частицы (вирусы), не способные к самостоятельному существованию, другие — сложноустроенные организмы, имеющие биологические системы, необходимые для проявления жизнедеятельности и обеспечивающие автономное существование (бактерии, грибы, простейшие).

Сложность молекулярно-биологической организации, биологические особенности представителей микромира обусловлены объемом, т. е. строением и составом, их генома. Так, геном бактерий и грибов включает до 5000 генов, вирусов — до 100 генов, а простейших — примерно 5000—10 000 генов.

1.3. Распространенность микробов Микробы чрезвычайно широко распространены. Они обитают в почве, воде,

атмосфере (даже в космосе), а также в организме человека, животных, растений. Видовой состав их очень разнообразен. Например, только бактерий насчитывается более 100 000 видов, грибов — до 250 000 видов. В организме каждого человека обитает до 1012-14 только бактерий, не считая грибов, вирусов и простейших, т. е. на каждую клетку организма человека приходится более чем одна бактерийная клетка. Если сложить число бактерий, обитающих в проживающей на Земле человеческой популяции, то мы получим огромную цифру — порядка 1025 бактерий. Микробы, населяющие организм каждого человека, составляют его микроэкологию, играющую большую роль как в обеспечении нормальной жизнедеятельности организма, так и в патологии человека (гл. 4). Огромное число микробов, обитающих в окружающей среде (почва, вода, атмосфера, жилые помещения, пищевые продукты и т. д.), а их количество огромно, составляют макроэкологию, которая также влияет на биологические и природные процессы на планете, прежде всего на санитарное благополучие той среды, в которой обитает человек. Подсчитано, что общая биомасса микробов даже превышает биомассу растений и животных.

Между микробами и остальной живой и неживой природой существует взаимосвязь — биоциноз (от bio и греч. koinos — общий), который означает совокупность растений, животных, микробов, населяющих определенный участок суши или водоема. В таких биоцинозах обычно обитают виды микробов, которые адаптировались к существующим условиям, определяемым конкретным составом и свойствами растительного и животного мира. Так, одни микробы (бактерии, грибы) находят оптимальные условия для жизнедеятельности в почве (почвенные микроорганизмы), другие — в водоемах (микроорганизмы морей, океанов, рек и озер), третьи — в атмосфере и в космосе.

Биоцинотические взаимоотношения существуют и для тех микробов, которые местом своего обитания избрали организм человека, те или иные

виды животных и растений. Так, вирусы могут существовать только в клетках человека, животных, растений или в клетках бактерий. Поэтому все вирусы подразделяют на вирусы человека, вирусы животных, растений или вирусы бактерий.

Такое же подразделение применимо и к бактериям, грибам и простейшим, так как одни из них обитают преимущественно в организме человека, другие — в организме животных, третьи — в растениях.

1.4.Роль микробов в патологии человека

Взаимоотношение между организмом и микробами может иметь различный характер, т. е. носить форму паразитизма, когда микроб, существуя за счет организма, наносит ему ущерб; или форму симбиоза, выгодного как для организма, так и микроба, т.е. комменсализма. В соответствии с этим, это сожительство может носить положительный или отрицательный характер. Поэтому все микробы подразделяют на патогенные (от греч. patos — болезнь), или болезнетворные, т. е. способные вызвать инфекционное заболевание; условно-патогенные, т. е. которые могут вызвать болезни при определенных условиях; сапрофиты (от греч. sapros — гнилой и phyton — растение), т. е. неболезнетворные (непатогенные) микробы, не вызывающие заболеваний у человека.

Среди огромного числа микробов, патогенных для человека, т. е. вызывающих инфекционные болезни, насчитывается порядка 3500 видов, из которых около 1000 видов являются вирусами. Если учесть, что человек подвержен примерно 10 000 болезней, т. е. самостоятельным нозологическим формам, то на долю инфекционных болезней приходится около одной трети всех заболеваний, которыми страдает человек. Однако на эту одну треть нозоформ приходится примерно 70 % всех случаев болезней, регистрируемых у человека.

1.5.Микробиология — наука о микробах

Существование мира микробов явилось причиной появления специальной науки микробиологии, основная цель которой — изучение микробов. Разнообразие мира микробов обусловило дифференциацию микробиологии

Так, выделились медицинская микробиология, изучающая микробов (бактерий, грибов, вирусов, простейших), патогенных для человека; ветеринарная микробиология, изучающая соответственно микробов, патогенных для животных; сельскохозяйственная микробиология, изучающая микробов — вредителей растений; морская микробиология, изучающая микробов — обитателей морей, океанов и других водоемов; наконец, в последнее время выделилась космическая микробиология, изучающая представителей микромира, населяющих космическое пространство. Оформилась также техническая микробиология, которая явилась основой биотехнологии, использующей микробов для получения разнообразных продуктов, необходимых для жизни людей (вакцины, диагностикумы, ферменты, сахара, нуклеиновые кислоты и т. д.).

Каждое из этих направлений микробиологии дифференцируется в соответствии с целями, задачами и особенностями изучаемого микромира.

Вмедицинских вузах преподается медицинская микробиология, которая, как и всякая наука, делится на общую (по методам и уровню исследования)

ина частную (по объекту исследования). Общая медицинская микробиология подразделяется на анатомию строение), физиологию, биохимию, генетику, экологию и эволюцию микробов, а частная — на бактериологию, вирусологию, микологию, протозоологию.

Впоследнее время в качестве самостоятельных дисциплин выделились экологическая

микробиология, изучающая роль микробов в жизни человека и взаимодействие их с человеком, и клиническая микробиология, разрабатывающая и внедряющая методы и способы микробиологической диагностики, профилактики и специфического лечения в клиниках инфекционных и неинфекционных болезней.

Большое значение имеет точное и всеобъемлющее определение микробиологии как науки. Л. Пастер в свое время науку о микробах предлагал назвать «микробией», однако современное название «микробиология» было предложено французским ученым Дюкло. Сущность микробиологии исторически менялась. Так, В. Л. Омелянский (1915) микробиологию определил как «науку о мельчайших существах — микробах, видимых и изучаемых при помощи микроскопа», В. М. Аристовский и соавт. (1948) — как «самостоятельную биологическую дисциплину, предметом изучения которой является мир мельчайших живых организмов.... доступных исследованию только при помощи микроскопа». В учебнике М. Н. Лебедевой (1960) микробиология определяется как «наука, изучающая жизнь и развитие мельчайших организмов — микроорганизмов в их единстве со средой обитания». В учебнике К. Д. Пяткина (1971) микробиология формулируется как «наука о мельчайших невидимых невооруженным глазом организмах, названных микробами».

Общим недостатком приведенных выше определений является то, что в них представители мира микробов квалифицируются как организмы, в то время как вирусы, которые изучает микробиология, не являются орга-

низмами; далее сказано, что микробы изучаются только при помощи микроскопа, тогда как для их изучения применяются самые разнообразные методы молекулярной биологии, биохимии, генетики, иммунологии и других наук. В определениях также не отражена проблема экологии микробов.

Нами (А.А. Воробьев и др., 1994; 1998) микробиология формулируется как «наука о строении, жизнедеятельности и экологии микробов — мельчайших форм жизни растительного и животного происхождения, не видимых невооруженным глазом».

Медицинская микробиология изучает биологические свойства возбудителей инфекционных болезней, т. е. строение (анатомию), их физиологию (условия роста и размножения, обмен веществ, потребности в питании и т. д.), генетику (строение генома, наследственность и изменчивость, генетические факторы, определяющие свойства микробов, и т. д.), этиологию и патогенез вызываемых микробами инфекционных болезней; экологические взаимоотношения, складывающиеся между миром микробов и человеком. В практическом плане микробиология изучает и разрабатывает методы специфической диагностики, профилактики и лечения инфекционных болезней как в инфекционных, так и неинфекционных клиниках. С помощью микробиологических методов проводятся эпидемиологические и санитарно-гигиенические наблюдения и исследования.

Микробиология, как это видно из таблицы, является весьма разветвленной наукой, имеющей связи со многими другими биологическими и медицинскими науками, прежде всего клиническими дисциплинами (инфекционные болезни, хирургия, внутренние болезни, акушерство и гинекология, заболевания мочеполовой системы и др.), медико-профилактическими дисциплинами (эпидемиология, гигиена, экология), а также фундаментальным науками (молекулярная биология, генетика, иммунология, биохимия).

Особенно тесно микробиология связана с иммунологией, которая зародилась в недрах микробиологии.

1.6. Иммунология — сущность и задачи

Иммунология относится к числу важнейших общебиологических и медицинских дисциплин, решающих проблемы диагностики, профилактики и лечения как инфекционных, так и неинфекционных болезней, в основе которых лежат нарушения иммунной системы. Сущность иммунологии заключается в изучении механизмов и способов защиты организма от генетически чужеродных веществ — антигенов (от греч. anti — против, genes

— род) с целью поддержания и сохранения гомеостаза, структурной и функциональной целостности организма, а также антигенной индивидуальности каждого организма и вида в целом. Функции иммунной системы, т. е. защиту организма от генетически чужеродных веществ, выполняет лимфатическая система, ее клетки — Т- и В-лимфоциты и фагоцитирующие

клетки, а также ряд факторов специфического и неспецифического иммунитета (антитела, комплемент, интерферон — ИФН и др.), которые работают в тесном содружестве, кооперативном взаимодействии. Основной механизм действия иммунной системы сводится к распознаванию «чужого» и «своего» и уничтожении, нейтрализации деструкции и т. д. «чужого». Этим «чужим», т. е. генетически чужеродным веществом, могут быть как экзогенно поступающие в организм антигены (микробного, растительного, животного происхождения, химически синтезированные вещества), так и эндогенно образующиеся антигены (аутоантигены, антигены опухолей, продукты молекулярных и клеточных мутаций и т. д.). Следовательно, иммунная система защищает организм не только от бактерий, вирусов и других микробов, не только от антигенов растительного и животного происхождения, но и от своих собственных антигенов. Детально о механизмах, реакциях, факторах и процессах в иммунной системе рассказывается в гл. 10. Здесь лишь отметим, что без иммунологии в наши дни невозможно решение многих важных медицинских проблем, таких как борьба с инфекционными болезнями, аллергией, пересадка органов и тканей, диагностика и лечение онкологических болезней, иммунологических конфликтов между матерью и плодом, профилактика и лечение врожденных и приобретенных иммунодефицитов, генотерапия и генопрофилактика многих болезней, связанных с поражением иммунной системы.

Важные задачи, стоящие перед иммунологией, являются стимулом для быстрого развития этой науки.

1.7. Связь микробиологии с иммунологией

С открытием микробов и установлением их этиологической роли в возникновении инфекционных болезней исследователи начали искать пути предупреждения и лечения болезней, вызываемых микробами. Изучались способы уничтожения микробов в окружающей среде (дезинфекция), пресечение путей передачи инфекционного начала, ранней диагностики инфекций, установление роли факторов патогенности и вирулентности бактерий и вирусов в развитии заболевания, патогенеза инфекционного процесса, средств антимикробной терапии и профилактики, проблемы иммунопрофилактики инфекционных болезней. Фундаментальные исследования патогенности, антигенных свойств, изменчивости, штаммовых различий, чувствительности к химиопрепаратам и антибиотикам возбудителей инфекционных болезней позволили разработать эффективные противомикробные препараты (химиопрепараты, антибиотики, дезинфектанты), создать многочисленные профилактические и терапевтические иммунобиологические препараты (вакцины, сывороточные препараты, иммуномодуляторы), которые являются основными и довольно эффективными средствами, позволившими снизить инфекционную заболеваемость людей, и даже ликвидировать некоторые инфекции.

1.8. История развития микробиологии и иммунологии

Микробы появились на нашей планете раньше, чем животные и человек. Доказано, что патогенные микробы, вызывавшие инфекционные болезни

человека, существовали и в древние времена. Об этом свидетельствует обнаружение антигенов болезнетворных бактерий, например возбудителя чумы, а также следы специфических поражений (туберкулез костей) в останках древних захоронений (мумиях). Уже до открытия микробов люди догадывались о существовании каких-то внешних специфических факторов, вызывающих болезни. Следовательно, можно сказать, что микробиология возникла еще до нашей эры и прошла длительный путь развития. В соответствии с уровнем знаний о микробах, с появлением новых принципиальных открытий и методов, а также формированием новых направлений историю микробиологии можно разбить на пять периодов: 1) эвристический; 2) морфологический; 3) физиологический; 4) иммунологический; 5) молекулярно-генетический.

1.8.1.Эвристический период

Этот период начинается с момента, когда Гиппократ (III—IV в. до н. э.) высказал догадку, предположение (эвристика—догадка, домысел) о том, что болезни, передающиеся от человека к человеку, вызываются какими-то невидимыми, неживыми веществами, образующимися в гнилых болотистых местах. Эти вещества он назвал «миазмами». Нужно сказать, что в древности, еще до открытия микробов, не зная об их существовании, люди пользовались плодами деятельности микробов — виноделием, пивоварением, сыроделием, выпечкой хлеба и т. д.

Только в XV—XVI вв. итальянский врач и поэт Джералимо Фракасторо (1476—1553) обосновал мнение о том, что вызывают болезни «живые контагии», которые передают болезни через воздух или через предметы, что эти невидимые существа живут в окружающей среде и что для борьбы с болезнями, вызываемыми «живыми контагиями», необходима изоляция больного, уничтожение контагий, окуривание можжевельником и т. д. Кстати, Фракасторо за эти его работы считают основоположником эпидемиологии.

Таким образом, примерно за два тысячелетия ученые прошли путь от догадок и предположений к убеждению, что болезни человека вызываются какими-то невидимыми живыми существами.

1.8.2.Морфологический период

Этот период начинается с конца XVII — начала XVIII в., когда голландский естествоиспытатель Антоний ван Левенгук (1632—1723) открыл бактерии. А. Левенгук родился и умер в маленьком голландском городке Делфте. Продавец сукна, он в свободное от работы время увлекался модной тогда в Голландии шлифовкой стекол и конструированием линз для микроскопов. Созданный им микроскоп увеличивал предметы в 150—300 раз. Рассматривая все подряд (воду, налет с зубов, испражнения, кровь, сперму и др.), Левенгук обнаружил множество живых «зверюшек», которых он назвал «анималькулюсы». Систематически делая зарисовки и описания «анималькулюсов», он направлял длинные письма с результатами своих наблюдений в Лондонское королевское научное общество. Эти письма сначала печатались в научных журналах, а потом, в 1695 г., были изданы на латинском языке отдельной большой книгой

под названием «Тайны природы, открытые Антони ван Левенгуком при помощи микроскопов». Конечно, наблюдения Левенгука были наивны и примитивны, однако зарисованные им формы микроорганизмов были удивительно правдивы. Таким образом, Левенгук открыл и увидел мир микробов; и это положило начало так называемому морфологическому периоду в развитии микробиологии, который продолжается и до наших дней. Первым из россиян, кто увидел микробов, был Петр Великий, посетивший Левенгука в Голландии; он же впервые привез микроскоп в Россию, а первым исследователем микробов был врач М. М. Тереховский (1740-1796). Кстати, он отвергал теорию о самозарождении жизни.

После открытия Левенгука началось победное шествие микробиологии. Открывались все новые бактерии, грибы, простейшие, а в конце XIX в. были открыты вирусы. Однако длительное время не ясна была роль микробов в природе и в патологии человека. Чтобы доказать этиологическую роль микробов в патологии человека, велись исследования на животных, а также героические опыты по самозаражению. Следует отметить смелые опыты русского эпидемиолога Данилы Самойловича (1724-1810), который заразил себя отделяемым бубона больного человека чумой, в результате чего заболел, но, к счастью, остался жив. Исторически известен ряд таких же героических опытов по самозаражению материалами или культурами соответствующих возбудителей, взятыми от больного холерой (Петенкофер, И. И. Мечников, Д. К Заболотный, И. В. Савченко, Н.Ф.Гамалея), сыпным тифом (Г.Н. Минх, О. О. Мочутковский), чумой (В. П. Смирнов), вирусом полиомиелита (М. Н. Чумаков), вирусом гепатита А (М. С. Балоян) и др.

Таким образом, уже в XVIII в. в микробиологии зародилась деонтология (наука о долге врача) которую исповедовали и исповедуют многие выдающиеся микробиологи. Можно было бы привести еще много примеров и имен самоотверженности и самопожертвования во имя установления достоверных фактов о патогенности бактерий и вирусов, путей и условий инфицирования, безопасности вакцинных препаратов и т. д.

Открытие все новых возбудителей инфекционных болезней продолжалось в течение XVIII—XX столетий и продолжается в наше время. Конец XIX в. ознаменовался открытием вирусов. В 1892 г русский ботаник Д. И. Ивановский (1864—1920) открыл новый мир микробов — царство вирусов (от лат. virus — яд). Наличие мельчайших частиц, проходящих через бактериальные фильтры и вызывающих специфические поражения, Д. И. Ивановский обнаружил при изучении мозаичной болезни табака. Затем были открыты многие вирусы, поражающие человека, животных, растения и бактерий. В первой половине XX в. оформилась самостоятельная дисциплина — вирусология, занимающаяся изучением вирусов.

Весь мир в 1992 г. отметил 100-летие со дня открытия вирусов Д. И. Ивановским. Этот микробиолог-исследователь закончил жизнь в безвестности и нищете, а в 1920 г., в период врангелевщины в Крыму, умер при неизвестных обстоятельствах.

Открытие и появление новых видов бактерий, вирусов, грибов, простейших, а

также изменение патогенных свойств уже известных микробов вполне закономерно, так как, с одной стороны, совершенствуются методы микробиологии по их выявлению, индикации и идентификации, а с другой — представители микромира эволюционируют в соответствии с общими законами биологии и генетики. Только за последние 20—30 лет открыто новых или выявлено измененных вариантов известных уже микробов порядка трех десятков. Все они объединены в группу эмерджентных, т. е. опасных непредсказуемых инфекций. Так, открыты вирусы иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусы геморрагических лихорадок (Марбург, Ласса, Эбола и др.), патогенные бактерии, вызывающие болезнь легионеров, лихорадку Лайма, Корона-вирусы, вызывающие атипичную пневмонию и др. Многие бактерии и вирусы в результате генетических трансформаций приобрели иные свойства, стали патогенными для человека (вирус оспы обезьян, хеликобактер пилори, вызывающий язвы желудка и двенадцатиперстной кишки и др.). Получили эпидемическое распространение парентеральные гепатиты, туберкулез, хламидиоз. Некоторые представители микробов вообще исчезли с нашей планеты. Так, благодаря глобальной массовой вакцинации полностью исчезла натуральная оспа, исчезла, свирепствовавшая среди людей в средние века, болезнь потница, ставится задача ликвидации полиомиелита и других инфекций.

В будущем человека также ожидает появление новых или измененных возбудителей инфекционных болезней. Примером может служить все возрастающая роль в патологии человека вирусов Т-клеточного лейкоза (HTLV-I, HTLV-II), вирусов гепатита, хламидий, прионов и др.

1.8.3. Физиологический период С момента обнаружения микробов, естественно, возник вопрос не только

об их роли в патологии человека, но и об их устройстве, биологических свойствах, процессах жизнедеятельности, экологии и т. д.

Поэтому с середины XIX в. началось интенсивное изучение физиологии бактерий. Этот период, который начинался с XIX в. и продолжается до наших дней, условно был назван физиологическим периодом в развитии микробиологии.

Большую роль в этот период сыграли работы выдающегося французского ученого Луи Пастера (1822—1895). Будучи химиком по образованию, обладая широкой эрудицией, талантом экспериментатора, целеустремленностью и мудростью организатора науки, Л. Пастер сделал ряд принципиальных основополагающих открытий во многих областях науки, что позволило ему стать основоположником ряда наук: микробиологии, биотехнологии, дезинфектологии, стереохимии.

Л. Пастер открыл: 1) природу брожения; анаэробиоз; 3) опроверг бытовавшую в его времена теорию самозарождения; 4) обосновал принцип стерилизации; 5) разработал принцип вакцинации и способы получения вакцин.

В 26-летнем возрасте Л. Пастер защитил докторскую диссертацию «О мышьяковистых соединениях калия, натрия и аммиака», в которой он доказал, что при выращивании грибов усваиваются лишь определенные

стереоизомеры. Таким образом, Л. Пастер стал основоположником стереохимии.

До Пастера господствовала химическая теория брожения Либиха. Пастер сделал замечательное открытие, доказав, что брожение (молочнокислое, спиртовое, уксусное) — это биологическое явление, которое вызывается микробами, их ферментами, т. е. Пастер стал основоположником биотехнологии.

До Пастера господствовала теория самозарождения всего живого, т. е. считалось, что животные не только происходили друг от друга, но и возникают самопроизвольно (лягушки рождаются из ила, тараканы — из грязи и т.д.). Таким же образом, считалось, самозарождались и микробы. Пастер изящными опытами опроверг это положение. Он доказал, что если стерильный бульон оставить в открытой колбе, то он прорастет, но если стерильный бульон поместить в колбу, которая сообщается с воздухом через спиралью изогнутую стеклянную трубку, то бульон не прорастет, так как бактерии с частицами пыли из воздуха будут осаждаться на изогнутых частях спиральной трубки и не попадут в бульон.

Пастер доказал также, что некоторые бактерии не просто не переносят кислорода, но живут и размножаются именно только в бескислородной среде. Таким образом, было открыто явление анаэробиоза, а группа микробов получила название анаэробов.

Доказательство роли микробов в ферментативных процессах брожения, гниения, разложения белков и Сахаров привело Пастера к решению ряда практических задач, в частности к разработке способа борьбы с болезнями вина путем прогревания его при 50—60 °С с целью уничтожения бактерий, вызывавших брожение. Этот способ, названный затем пастеризацией, широко используется в наши дни в пищевой промышленности, а также послужил основанием для разработки принципов асептики и дезинфекции.

Наконец, Пастер разработал принцип вакцинации и способ получения вакцин, о чем будет сказано ниже.

Значительный вклад в развитие микробиологии в этот период внес немецкий бактериолог Роберт Кох (1843-1910), который предложил окраску бактерий, микрофотосъемку, способ получения чистых культур, а также знаменитую триаду, получившую название триада Генле—Коха, по установлению этиологической роли микробов в инфекционном заболевании. Согласно этой триаде, для доказательства роли микроба в возникновении специфической болезни необходимо три условия: 1) чтобы микроб обнаруживался только у больного и не обнаруживался у здоровых людей и больных другими болезнями; 2) должна быть получена чистая культура микроба; 3) микроб должен вызвать аналогичное заболевание при заражении животных. Этот принцип до Коха выдвигал Генле; Кох его сформулировал и развил. В наше время триада Генле—Коха имеет относительное значение, так как установление этиологической роли микробов в инфекции не всегда укладывается в рамки триады: иногда трудно воспроизвести болезнь у животных, так как нет модели (например, ВИЧ-инфекция); нередко возбудитель обнаруживается у здоровых