2.3. Техніка визначення групи крові перехресним методом (за допомогою стандартних сироваток і стандартних еритроцитів)

• 2.3.1. Визначення групи крові перехресним методом базується на паралельному визначенні наявності або відсутності групових антигенів на еритроцитах і наявності або відсутності групових ізоаглютинінів у сироватці обстежуваної крові. Паралельне визначення ізоаглютинінів у сироватці з стандартними еритроцитами A та B обов'язкове у донорів і реципієнтів.

• 2.3.2. Для визначення групи крові використовують стандартні сироватки груп 0a(альфа)b(бета)(I), Ab(бета)(II) і Ba(альфа)(III) двох серій кожної групи, сироватку групи AB0(IV) і стандартні еритроцити груп 0(I), A(II) і B(III).

• 2.3.3. Під відповідними позначками груп крові на пластинку наносять по одній великій краплі (0,1 мл) стандартних сироваток груп 0(I), A(II) і B(III) послідовно зліва направо.

• 2.3.4. На нижню частину пластинки (третій ряд) під відповідними написами наносять по одній маленькій (0,01 мл) краплі стандартних еритроцитів у такій послідовності зліва направо: 0(I), A(II) і B(III) (табл. 2).

Таблиця 2. Схема розташування реагентів на площині під час визначення групи крові за системою AB0 перехресним методом

------------------------------------------------------------------------------------------------

| N | Реагенти, що наносять на площину | 0a(альфа)b(бета) | Ab(бета)--- | Ba(альфа)---|

| п/п | | | --- | ---|

|-----+-----------------------------------------+------------------+-------------+-------------|

| 1 | Стандартна алоімунна сироватка, серія 1 | a(альфа)b(бета) | b(бета)--- | a(альфа)---|

| | | | --- | ---|

|-----+-----------------------------------------+------------------+-------------+-------------|

| 2 | Стандартна алоімунна сироватка, серія 2 | a(альфа)b(бета) | b(бета)--- | a(альфа)---|

| | | | --- | ---|

|-----+-----------------------------------------+------------------+-------------+-------------|

| 3 | Стандартні еритроцити | 0 | A | B |

------------------------------------------------------------------------------------------------

• 2.3.5. З пробірки, що містить кров хворого, піпеткою знімають сироватку і наносять її по одній великій краплі (0,1 мл) на підготовлені стандартні еритроцити (третій ряд). Після цього тією ж піпеткою набирають з дна пробірки еритроцити обстежуваної крові і наносять їх по маленькій краплі (0,01 мл) в 6 точок (другий і перший ряд) - по одній краплі поряд з кожною краплею підготовленої стандартної сироватки.

• 2.3.6. У всіх краплях сироватку старанно перемішують з еритроцитами сухою скляною паличкою, ретельно промиваючи її 0,9% розчином натрію хлориду і витираючи ватою після кожного перемішування. Пластинку періодично погойдують, проводячи спостереження за ходом реакції протягом 5 хв.

• 2.3.7. У процесі аглютинації, але не раніше ніж через 3 хв., в ті краплі, в яких вона з'явилася, додають по одній краплі (0,05 мл) 0,9% розчину натрію хлориду і продовжують спостереження при погойдуванні пластинки до 5 хв.