microbiology_konspekt_lysak_2008

ɧɢɢ ɚɛɨɪɬɢɜɧɵɯ ɬɪɚɧɫɞɭɤɬɚɧɬɨɜ, ɞɟɥɚɸɬ ɜɵɜɨɞ, ɱɬɨ ɦɭɬɚɰɢɢ ɥɨɤɚɥɢɡɨɜɚɧɵ ɜ ɪɚɡɧɵɯ ɝɟɧɚɯ:

ɚb

ȾɇɄ ɞɨɧɨɪɚ

ȾɇɄ ɪɟɰɢɩɢɟɧɬɚ

ɚb

ȿɫɥɢ ɨɛɪɚɡɭɸɬɫɹ ɤɨɥɨɧɢɢ ɬɨɥɶɤɨ ɢɫɬɢɧɧɵɯ ɬɪɚɧɫɞɭɤɬɚɧɬɨɜ, ɞɟɥɚɸɬ ɜɵɜɨɞ, ɱɬɨ ɦɭɬɚɰɢɢ ɧɚɯɨɞɹɬɫɹ ɜ ɨɞɧɨɦ ɝɟɧɟ, ɧɨ ɜ ɪɚɡɧɵɯ ɟɝɨ ɫɚɣɬɚɯ:

ɚb

ȾɇɄ ɞɨɧɨɪɚ

ȾɇɄ ɪɟɰɢɩɢɟɧɬɚ

ɚb

ȿɫɥɢ ɨɛɪɚɡɨɜɚɧɢɟ ɬɪɚɧɫɞɭɤɬɚɧɬɨɜ ɜɨɨɛɳɟ ɧɟ ɩɪɨɢɫɯɨɞɢɬ, ɬɨ ɞɟɥɚɸɬ ɜɵɜɨɞ ɨɛ ɢɞɟɧɬɢɱɧɨɫɬɢ ɢɫɫɥɟɞɭɟɦɵɯ ɦɭɬɚɰɢɣ:

ɚb

ȾɇɄ ɞɨɧɨɪɚ

ȾɇɄ ɪɟɰɢɩɢɟɧɬɚ

ɚb

7.6.Ɋɟɩɚɪɚɰɢɹ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɢɣ ȾɇɄ ɭ ɛɚɤɬɟɪɢɣ

əɜɥɟɧɢɟ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ (ɜɨɫɫɬɚɧɨɜɥɟɧɢɹ) ɠɢɡɧɟɫɩɨɫɨɛɧɨɫɬɢ ɤɥɟɬɨɤ ɩɨɫɥɟ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɧɚ ɧɢɯ Ȗ- ɢ ɪɟɧɬɝɟɧɨɜɵɯ ɥɭɱɟɣ ɛɵɥɨ ɨɬɤɪɵɬɨ ɜ 1949 ɝ. ɜ ɨɩɵɬɚɯ ɧɚ ɞɪɨɠɠɚɯ, ɚ ɡɚɬɟɦ ɢ ɧɚ ɛɚɤɬɟɪɢɹɯ.

ȿɫɥɢ ɛɚɤɬɟɪɢɚɥɶɧɵɟ ɤɥɟɬɤɢ ɨɛɥɭɱɢɬɶ ɍɎ-ɫɜɟɬɨɦ, ɬɨ ɨɧɢ ɜ ɨɫɧɨɜɧɨɦ ɝɢɛɧɭɬ, ɬɚɤ ɤɚɤ ɍɎ-ɥɭɱɢ ɩɨɝɥɨɳɚɸɬɫɹ ȾɇɄ ɫ ɨɛɪɚɡɨɜɚɧɢɟɦ ɜ ɧɟɣ ɞɢɦɟɪɨɜ ɬɢɦɢɧɚ, ɱɬɨ ɩɪɢɜɨɞɢɬ ɤ ɱɚɫɬɢɱɧɨɦɭ ɢɥɢ ɩɨɥɧɨɦɭ ɛɥɨɤɢɪɨɜɚɧɢɸ ɪɟɩɥɢɤɚɰɢɢ. Ɍɟɦ ɧɟ ɦɟɧɟɟ ɜɵɹɜɥɟɧɵ ɬɪɢ ɨɫɧɨɜɧɵɯ ɦɟɯɚɧɢɡɦɚ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ ȾɇɄ ɩɨɫɥɟ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɢɣ ɬɚɤɨɝɨ ɬɢɩɚ: ɮɨɬɨɪɟɚɤɬɢɜɚɰɢɹ, ɷɤɫɰɢɡɢɨɧɧɚɹ ɪɟɩɚɪɚɰɢɹ ɢ ɩɨɫɬɪɟɩɥɢɤɚɰɢɨɧɧɚɹ, ɢɥɢ ɪɟɤɨɦɛɢɧɚɰɢɨɧɧɚɹ ɪɟɩɚɪɚɰɢɹ.

ɗɤɫɰɢɡɢɨɧɧɭɸ ɢ ɩɨɫɬɪɟɩɥɢɤɚɰɢɨɧɧɭɸ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ ɧɚɡɵɜɚɸɬ ɟɳɟ ɬɟɦɧɨɜɨɣ ɪɟɩɚɪɚɰɢɟɣ.

Ɏɨɬɨɪɟɚɤɬɢɜɚɰɢɹ – ɜɨɫɫɬɚɧɨɜɥɟɧɢɟ ɦɨɥɟɤɭɥ ȾɇɄ, ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɵɯ ɍɎ-ɥɭɱɚɦɢ, ɜ ɪɟɡɭɥɶɬɚɬɟ ɩɨɫɥɟɞɭɸɳɟɝɨ ɜɨɡɞɟɣɫɬɜɢɹ ɧɚ ɧɢɯ ɜɢɞɢɦɨɝɨ ɫɜɟɬɚ. Ȼɚɤɬɟɪɢɚɥɶɧɵɟ ɤɥɟɬɤɢ ɫɨɞɟɪɠɚɬ ɮɟɪɦɟɧɬ ɮɨɬɨɪɟɚɤɬɢɜɚɰɢɢ – ɞɟ-

238

ɡɨɤɫɢɩɢɪɢɞɢɧɮɨɬɨɥɢɚɡɭ, ɫɢɧɬɟɡ ɤɨɬɨɪɨɝɨ ɭ ɛɚɤɬɟɪɢɣ E. coli ɞɟɬɟɪɦɢɧɢɪɭɟɬɫɹ ɝɟɧɨɦ phr. ɋɭɛɫɬɪɚɬɨɦ ɞɥɹ ɷɬɨɝɨ ɮɟɪɦɟɧɬɚ ɫɥɭɠɚɬ ɞɢɦɟɪɵ ɬɢɦɢɧɚ. Ɏɟɪɦɟɧɬ ɧɚɯɨɞɢɬ ɜ ȾɇɄ ɨɛɪɚɡɨɜɚɜɲɢɣɫɹ ɩɨɞ ɞɟɣɫɬɜɢɟɦ ɍɎ-ɥɭɱɟɣ ɩɢɪɢɦɢɞɢɧɨɜɵɣ ɞɢɦɟɪ ɢ ɩɪɨɱɧɨ ɫɜɹɡɵɜɚɟɬɫɹ ɫ ɧɢɦ. ȿɫɥɢ ɤɥɟɬɤɢ ɩɟɪɟɧɟɫɬɢ ɧɚ ɜɢɞɢɦɵɣ ɫɜɟɬ, ɬɨ ɤɨɦɩɥɟɤɫ ɮɟɪɦɟɧɬɚ ɮɨɬɨɪɟɚɤɬɢɜɚɰɢɢ ɢ ɞɢɦɟɪɨɜ ɬɢɦɢɧɚ ɪɚɫɩɚɞɚɟɬɫɹ, ɩɪɢ ɷɬɨɦ ɩɪɨɢɫɯɨɞɢɬ ɜɨɫɫɬɚɧɨɜɥɟɧɢɟ ɧɨɪɦɚɥɶɧɨɣ ɫɬɪɭɤɬɭɪɵ ȾɇɄ, ɬ. ɟ. ɦɨɧɨɦɟɪɢɡɚɰɢɹ ɢɥɢ ɪɚɫɳɟɩɥɟɧɢɟ ɞɢɦɟɪɨɜ ɬɢɦɢɧɚ.

ɋɥɟɞɭɟɬ ɨɬɦɟɬɢɬɶ, ɱɬɨ ɮɨɬɨɪɟɚɤɬɢɜɚɰɢɹ ɦɨɠɟɬ ɪɚɛɨɬɚɬɶ ɤɚɤ ɧɚ ɞɜɭɧɢɬɟɜɵɯ, ɬɚɤ ɢ ɧɚ ɨɞɧɨɧɢɬɟɜɵɯ ȾɇɄ.

ɋɢɫɬɟɦɵ ɷɤɫɰɢɡɢɨɧɧɨɣ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ ɭɞɚɥɹɸɬ ɧɟɩɪɚɜɢɥɶɧɨ ɫɩɚɪɟɧɧɵɟ ɢɥɢ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɵɟ ɨɫɧɨɜɚɧɢɹ ɢɡ ȾɇɄ ɢ ɡɚɬɟɦ ɫɢɧɬɟɡɢɪɭɸɬ ɧɨɜɭɸ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɶ ȾɇɄ, ɡɚɦɟɳɚɸɳɭɸ ɢɯ.

Ɉɫɧɨɜɧɨɣ ɬɢɩ ɷɤɫɰɢɡɢɨɧɧɨɣ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ, ɫɨɫɬɨɹɳɟɣ ɢɡ ɧɟɫɤɨɥɶɤɢɯ ɷɬɚɩɨɜ, ɫɯɟɦɚɬɢɱɟɫɤɢ ɢɡɨɛɪɚɠɟɧ ɧɚ ɪɢɫ. 74. ɇɚ ɩɟɪɜɨɦ ɷɬɚɩɟ ɭɡɧɚɜɚɧɢɹ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɚɹ ɫɬɪɭɤɬɭɪɚ ɪɚɫɩɨɡɧɚɟɬɫɹ ɷɧɞɨɧɭɤɥɟɚɡɨɣ, ɤɨɬɨɪɚɹ ɪɚɡɪɟɡɚɟɬ ɰɟɩɶ ȾɇɄ ɧɚ ɪɚɫɫɬɨɹɧɢɢ ɜɨɫɶɦɢ ɮɨɫɮɨɞɢɷɮɢɪɧɵɯ ɫɜɹɡɟɣ ɫ 5ƍ-ɫɬɨɪɨɧɵ ɢ ɱɟɬɵɪɟɯ-ɩɹɬɢ ɫɜɹɡɟɣ ɫ 3ƍ-ɫɬɨɪɨɧɵ ɨɬ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɢɹ. ɇɚ ɫɬɚɞɢɢ ɜɵɪɟɡɚɧɢɹ 5ƍ–3ƍ-ɷɤɡɨɧɭɤɥɟɚɡɚ ɭɞɚɥɹɟɬ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɵɣ ɭɱɚɫɬɨɤ. Ɉɛɪɚɡɭɸɳɢɣɫɹ ɨɞɧɨɰɟɩɨɱɟɱɧɵɣ ɭɱɚɫɬɨɤ ɫɥɭɠɢɬ ɜ ɤɚɱɟɫɬɜɟ ɦɚɬɪɢɰɵ ɞɥɹ ȾɇɄ-ɩɨɥɢɦɟɪɚɡɵ I ɩɪɢ ɫɢɧɬɟɡɟ ɰɟɩɢ, ɡɚɦɟɳɚɸɳɟɣ ɜɵɪɟɡɚɧɧɭɸ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɶ. ɇɚɤɨɧɟɰ, ȾɇɄ-ɥɢɝɚɡɚ ɤɨɜɚɥɟɧɬɧɨ ɫɜɹɡɵɜɚɟɬ 3ƍ-ɤɨɧɟɰ ɧɨɜɨɝɨ ɦɚɬɟɪɢɚɥɚ ɫɨ ɫɬɚɪɵɦ ɦɚɬɟɪɢɚɥɨɦ.

ɋɢɫɬɟɦɵ ɷɤɫɰɢɡɢɨɧɧɨɣ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ ɜɤɥɸɱɚɸɬ ɭ ɛɚɤɬɟɪɢɣ E. coli ɬɪɢ ɝɟɧɚ: uvrA, uvrB, uvrC. ɗɬɢ ɝɟɧɵ ɤɨɞɢɪɭɸɬ ɤɨɦɩɨɧɟɧɬɵ ɪɟɩɚɪɚɰɢɨɧɧɨɣ ɷɧɞɨɧɭɤɥɟɚɡɵ (uvrABC-ɷɧɞɨɧɭɤɥɟɚɡɵ).

ȿɫɥɢ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɢɟ ɜ ȾɇɄ ɩɪɟɞɫɬɚɜɥɹɟɬ ɫɨɛɨɣ ɫɬɪɭɤɬɭɪɧɨɟ ɢɡɦɟɧɟɧɢɟ (ɧɚɩɪɢɦɟɪ, ɨɛɪɚɡɨɜɚɧɢɟ ɜ ɪɟɡɭɥɶɬɚɬɟ ɍɎ-ɨɛɥɭɱɟɧɢɹ ɞɢɦɟɪɚ ɬɢɦɢɧɚ), ɬɨ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɵɟ ɨɫɧɨɜɚɧɢɹ ɜ ɩɪɨɰɟɫɫɟ ɷɤɫɰɢɡɢɨɧɧɨɣ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ ɭɞɚɥɹɸɬɫɹ, ɱɬɨ ɜɟɞɟɬ ɤ ɜɨɫɫɬɚɧɨɜɥɟɧɢɸ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɢ ɧɭɤɥɟɨɬɢɞɨɜ, ɯɚɪɚɤɬɟɪɧɨɣ ɞɥɹ ȾɇɄ ɞɢɤɨɝɨ ɬɢɩɚ. Ɉɞɧɚɤɨ ɟɫɥɢ ɧɚɪɭɲɟɧɢɟ ɡɚɤɥɸɱɚɟɬɫɹ ɜ ɧɟɩɪɚɜɢɥɶɧɨɦ ɫɩɚɪɢɜɚɧɢɢ ɨɫɧɨɜɚɧɢɣ, ɜɨɡɧɢɤɚɸɳɟɦ ɜ ɪɟɡɭɥɶɬɚɬɟ ɦɭɬɢɪɨɜɚɧɢɹ ɨɞɧɨɝɨ ɢɡ ɧɢɯ, ɪɟɩɚɪɢɪɭɸɳɚɹ ɫɢɫɬɟɦɚ ɧɟ ɦɨɠɟɬ ɨɩɪɟɞɟɥɢɬɶ, ɤɚɤɨɟ ɢɦɟɧɧɨ ɨɫɧɨɜɚɧɢɟ ɩɪɟɞɫɬɚɜɥɹɟɬ ɞɢɤɢɣ ɬɢɩ, ɚ ɤɚɤɨɟ – ɦɭɬɚɧɬɧɵɣ. ȼɫɟ ɷɬɨ ɭɡɧɚɟɬɫɹ ɤɚɤ ɞɜɚ ɧɟɩɪɚɜɢɥɶɧɨ ɫɩɚɪɟɧɧɵɯ ɨɫɧɨɜɚɧɢɹ, ɤɚɠɞɨɟ ɢɡ ɤɨɬɨɪɵɯ ɦɨɠɟɬ ɫɥɭɠɢɬɶ ɨɛɴɟɤɬɨɦ ɞɥɹ ɷɤɫɰɢɡɢɨɧɧɨɣ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ. ȿɫɥɢ ɜɵɪɟɡɚɟɬɫɹ ɦɭɬɚɧɬɧɨɟ ɨɫɧɨɜɚɧɢɟ, ɬɨ ɜɨɫɫɬɚɧɚɜɥɢɜɚɟɬɫɹ ɞɢɤɢɣ ɬɢɩ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɢ. ȿɫɥɢ ɠɟ ɫɥɭɱɚɟɬɫɹ, ɱɬɨ ɜɵɪɟɡɚɟɬɫɹ ɢɫɯɨɞɧɨɟ ɨɫɧɨɜɚɧɢɟ (ɞɢɤɨɝɨ ɬɢɩɚ), ɬɨ ɧɨɜɚɹ (ɦɭɬɚɧɬɧɚɹ) ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɶ ɡɚɤɪɟɩɥɹɟɬɫɹ.

239

ɉɨɜɪɟɠɞɟɧɧɨɟ ɨɫɧɨɜɚɧɢɟ

ɗɤɫɰɢɡɢɹ

ȾɇɄ-ɩɨɥɢɦɟɪɚɡɚ

Ʌɢɝɚɡɚ

ȼɨɫɫɬɚɧɨɜɥɟɧɢɟ ɧɟɩɪɟɪɵɜɧɨɫɬɢ ɪɟɩɚɪɢɪɭɟɦɨɣ ɰɟɩɢ

Ɋɢɫ. 74. ɗɤɫɰɢɡɢɨɧɧɚɹ ɪɟɩɚɪɚɰɢɹ ȾɇɄ

Ʉɥɟɬɤɢ E. coli ɨɛɥɭɱɟɧɧɵɟ ɭɥɶɬɪɚɮɢɨɥɟɬɨɦ, ɦɨɝɭɬ ɜɵɠɢɬɶ ɫ ɨɛɪɚɡɨɜɚɧɢɟɦ ɠɢɡɧɟɫɩɨɫɨɛɧɨɝɨ ɩɨɬɨɦɫɬɜɚ ɞɚɠɟ ɜ ɬɨɦ ɫɥɭɱɚɟ, ɤɨɝɞɚ ɨɧɢ ɧɟ ɫɩɨɫɨɛɧɵ ɜɵɪɟɡɚɬɶ ɞɢɦɟɪɵ ɬɢɦɢɧɚ, ɬ. ɟ. ɤɨɝɞɚ ɭ ɧɢɯ ɧɟ ɮɭɧɤɰɢɨɧɢɪɭɟɬ ɦɟɯɚɧɢɡɦ ɷɤɫɰɢɡɢɨɧɧɨɣ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ ȾɇɄ. ɂɡ ɷɬɨɝɨ ɦɨɠɧɨ ɡɚɤɥɸɱɢɬɶ, ɱɬɨ ɤɪɨɦɟ ɦɟɯɚɧɢɡɦɚ «ɢɫɫɟɱɟɧɢɹ ɢ ɡɚɩɨɥɧɟɧɢɹ», ɜ ɤɥɟɬɤɚɯ ɞɨɥɠɟɧ ɫɭɳɟɫɬɜɨɜɚɬɶ ɞɪɭɝɨɣ ɦɟɯɚɧɢɡɦ, ɫɩɚɫɚɸɳɢɣ ɨɬ ɝɟɧɟɬɢɱɟɫɤɢɯ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɢɣ. Ʉɚɤ ɩɨɤɚɡɚɥ ɉ. Ƚɨɜɚɪɞ-Ɏɥɚɧɞɟɪɫ (1968), ɷɬɨɬ ɦɟɯɚɧɢɡɦ ɡɚɤɥɸɱɚɟɬɫɹ ɧɟ ɜ ɢɫɩɪɚɜɥɟɧɢɢ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɢɹ ɜ ɨɛɥɭɱɟɧɧɨɣ ȾɇɄ, ɚ ɜ ɢɫɩɪɚɜɥɟɧɢɢ ɞɟɮɟɤɬɧɨɣ ɞɨɱɟɪɧɟɣ ȾɇɄ, ɨɛɪɚɡɭɸɳɟɣɫɹ ɩɨɫɥɟ ɪɟɩɥɢɤɚɰɢɢ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɨɣ ɪɨɞɢɬɟɥɶɫɤɨɣ ȾɇɄ. ȼ ɪɟɡɭɥɶɬɚɬɟ ɪɟɩɥɢɤɚɰɢɢ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɨɣ ɧɢɬɢ ȾɇɄ ɨɛɪɚɡɭɟɬɫɹ ȾɇɄ-ɤɨɩɢɹ ɫ ɨɞɧɨɧɢɬɟɜɵɦɢ ɩɪɨɛɟɥɚɦɢ ɢɥɢ ɛɪɟɲɚɦɢ ɧɚɩɪɨɬɢɜ ɞɢɦɟɪɚ ɬɢɦɢɧɚ ɜ ɪɨɞɢɬɟɥɶɫɤɨɣ ɦɚɬɪɢɱɧɨɣ ɰɟɩɢ ȾɇɄ. ɗɬɨ ɝɨɜɨɪɢɬ ɨ ɬɨɦ, ɱɬɨ ɧɚɥɢɱɢɟ ɞɢɦɟɪɚ ɬɢɦɢɧɚ ɜ ɦɚɬɪɢɱɧɨɣ ɧɢɬɢ ȾɇɄ ɩɪɟɩɹɬɫɬɜɭɟɬ ɩɪɨɞɜɢɠɟɧɢɸ ȾɇɄ-ɩɨɥɢɦɟɪɚɡɵ. ɑɟɪɟɡ 1 ɱ ɩɨɫɥɟ ɫɢɧɬɟɡɚ ɬɚɤɢɯ ɪɚɡɨɪɜɚɧɧɵɯ ɞɨɱɟɪɧɢɯ ɰɟɩɟɣ ɷɬɢ ɛɪɟɲɢ ɩɪɟɜɪɚɳɚɸɬɫɹ ɜ ɧɟɩɪɟɪɵɜɧɵɟ ɰɟɩɢ ȾɇɄ ɧɨɪɦɚɥɶɧɨɣ ɞɥɢɧɵ. Ȼɪɟɲɢ ɜ ɞɨɱɟɪɧɢɯ ɧɢɬɹɯ ɡɚɩɨɥɧɹɸɬɫɹ ɡɚ ɫɱɟɬ ɩɨɫɬɪɟɩɥɢɤɚɰɢɨɧɧɨɣ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ. Ɍɚɤ ɤɚɤ ɷɬɨɬ ɬɢɩ ɪɟɩɚɪɚɰɢɢ ɧɟ ɩɪɨɢɫɯɨɞɢɬ ɜ ɤɥɟɬɤɚɯ, ɞɟɮɟɤɬɧɵɯ ɩɨ ɪɟɤɨɦɛɢɧɚɰɢɢ (recȺ-ɦɭɬɚɧɬɚɯ), ɟɟ ɧɚɡɵɜɚɸɬ ɬɚɤɠɟ ɪɟɤɨɦɛɢɧɚɰɢɨɧɧɨɣ ɪɟɩɚɪɚɰɢɟɣ.

240

ɉɨɫɬɪɟɩɥɢɤɚɰɢɨɧɧɚɹ ɪɟɩɚɪɚɰɢɹ ɩɪɨɢɫɯɨɞɢɬ ɫɥɟɞɭɸɳɢɦ ɨɛɪɚɡɨɦ. ɉɪɢ ɪɟɩɥɢɤɚɰɢɢ ɞɟɮɟɤɬɧɨɣ (ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɨɣ) ȾɇɄ ɮɟɪɦɟɧɬ ȾɇɄ-ɩɨɥɢ- ɦɟɪɚɡɚ ɨɫɬɚɧɚɜɥɢɜɚɟɬɫɹ ɩɟɪɟɞ ɞɢɦɟɪɨɦ ɬɢɦɢɧɚ, ɚ ɡɚɬɟɦ «ɩɟɪɟɫɤɚɤɢɜɚɟɬ» ɱɟɪɟɡ ɷɬɨɬ ɞɢɦɟɪ ɢ ɩɪɨɞɨɥɠɚɟɬ ɪɟɩɥɢɤɚɰɢɸ, ɨɫɬɚɜɢɜ ɡɚ ɫɨɛɨɣ ɩɪɨɛɟɥ (ɛɪɟɲɶ) ɜ ɞɨɱɟɪɧɟɣ ɰɟɩɢ. ɗɬɨɬ ɩɪɨɛɟɥ ɡɚɩɨɥɧɹɟɬɫɹ ɜ ɪɟɡɭɥɶɬɚɬɟ ɪɟɤɨɦɛɢɧɚɰɢɢ ɫɨ ɜɬɨɪɨɣ ɞɨɱɟɪɧɟɣ ɦɨɥɟɤɭɥɨɣ ȾɇɄ, ɨɛɪɚɡɭɸɳɟɣɫɹ ɩɪɢ ɪɟɩɥɢɤɚɰɢɢ. Ɉɛɦɟɧ ɰɟɩɹɦɢ ɦɟɠɞɭ ɦɨɥɟɤɭɥɚɦɢ ȾɇɄ ɨɫɭɳɟɫɬɜɥɹɟɬ ɛɟɥɨɤ RecA. ȼɨɡɧɢɤɚɸɳɢɣ ɩɪɨɛɟɥ ɧɚ ɜɬɨɪɨɣ ɦɨɥɟɤɭɥɟ ɡɚɩɨɥɧɹɟɬɫɹ ȾɇɄ-ɩɨɥɢ- ɦɟɪɚɡɨɣ, ɫɱɢɬɵɜɚɸɳɟɣ ɤɨɦɩɥɟɦɟɧɬɚɪɧɭɸ ɧɢɬɶ ɫ ɦɚɬɪɢɱɧɨɣ ɧɟɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɨɣ ɧɢɬɢ. Ʌɢɝɚɡɚ ɨɤɨɧɱɚɬɟɥɶɧɨ ɜɨɫɫɬɚɧɚɜɥɢɜɚɟɬ ɧɟɩɪɟɪɵɜɧɨɫɬɶ ɰɟɩɢ

(ɪɢɫ. 75).

ɉɨɜɪɟɠɞɟɧɧɨɟ ɨɫɧɨɜɚɧɢɟ

Ɋɟɩɥɢɤɚɰɢɹ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɨɣ ȾɇɄ

Ⱦɨɱɟɪɧɹɹ ɦɨɥɟɤɭɥɚ ȾɇɄ ɫ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɢɟɦ ɜ ɨɞɧɨɣ ɰɟɩɢ ɢ ɛɪɟɲɶɸ ɜ ɞɪɭɝɨɣ

ɇɨɪɦɚɥɶɧɚɹ ɞɨɱɟɪɧɹɹ ɦɨɥɟɤɭɥɚ ȾɇɄ

Ɉɛɦɟɧ ɦɟɠɞɭ ɰɟɩɶɸ ɫ ɛɪɟɲɶɸ ɢ ɧɨɪɦɚɥɶɧɨɣ ɰɟɩɶɸ ɜ ɞɪɭɝɨɣ ɞɨɱɟɪɧɟɣ ɦɨɥɟɤɭɥɟ

Ɋɟɩɚɪɚɰɢɹ ɨɛɪɚɡɨɜɚɜɲɟɣɫɹ ɛɪɟɲɢ ɫ ɩɨɦɨɳɶɸ ȾɇɄ-ɩɨɥɢ- ɦɟɪɚɡɵ ɢ ɥɢɝɚɡɵ

Ɋɢɫ. 75. Ɋɟɤɨɦɛɢɧɚɰɢɨɧɧɚɹ ɪɟɩɚɪɚɰɢɹ ȾɇɄ

241

Ɇɧɨɝɢɟ ɜɨɡɞɟɣɫɬɜɢɹ, ɤɨɬɨɪɵɟ ɩɨɜɪɟɠɞɚɸɬ ȾɇɄ ɢɥɢ ɢɧɝɢɛɢɪɭɸɬ ɟɟ ɪɟɩɥɢɤɚɰɢɸ ɭ ɛɚɤɬɟɪɢɣ E. coli, ɢɧɞɭɰɢɪɭɸɬ ɫɟɪɢɸ ɮɟɧɨɬɢɩɢɱɟɫɤɢɯ ɢɡɦɟɧɟɧɢɣ, ɩɨɥɭɱɢɜɲɢɯ ɧɚɡɜɚɧɢɟ SOS-ɨɬɜɟɬɚ. ɇɚɱɚɥɨ ɬɚɤɨɝɨ ɨɬɜɟɬɚ ɨɩɪɟɞɟɥɹɟɬɫɹ ɜɡɚɢɦɨɞɟɣɫɬɜɢɟɦ ɛɟɥɤɚ RecA ɫ ɛɟɥɤɨɦ ɪɟɩɪɟɫɫɨɪɨɦ LexA. Ɉɬɜɟɬ ɤɥɟɬɤɢ ɧɚ ɩɨɜɪɟɠɞɚɸɳɟɟ ɜɨɡɞɟɣɫɬɜɢɟ ɧɚɱɢɧɚɟɬɫɹ ɫ ɚɤɬɢɜɚɰɢɢ ɩɪɨɬɟɚɡɧɨɣ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ ɛɟɥɤɚ RecA. Ⱥɤɬɢɜɢɪɭɸɳɢɦ ɫɢɝɧɚɥɨɦ ɦɨɠɟɬ ɛɵɬɶ ɩɪɢɫɭɬɫɬɜɢɟ ɨɞɧɨɰɟɩɨɱɟɱɧɨɣ ɨɛɥɚɫɬɢ ɜ ɫɚɣɬɟ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɢɹ. Ⱥɤɬɢɜɢɪɭɹɫɶ, RecA-ɩɪɨ-ɬɟɚɡɚ ɪɚɡɪɟɡɚɟɬ ɛɟɥɨɤ-ɪɟɩɪɟɫɫɨɪ LexA. Ȼɟɥɨɤ LexA ɨɬɧɨɫɢɬɟɥɶɧɨ ɫɬɚɛɢɥɟɧ ɜ ɧɟɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɵɯ ɤɥɟɬɤɚɯ, ɝɞɟ ɨɧ ɮɭɧɤɰɢɨɧɢɪɭɟɬ ɤɚɤ ɪɟɩɪɟɫɫɨɪ ɦɧɨɝɢɯ ɨɩɟɪɨɧɨɜ, ɝɟɧɵ ɤɨɬɨɪɵɯ ɨɬɜɟɱɚɸɬ ɡɚ ɪɚɡɥɢɱɧɵɟ ɪɟɩɚɪɚɰɢɨɧɧɵɟ ɮɭɧɤɰɢɢ. ɉɪɨɬɟɨɥɢɬɢɱɟɫɤɨɟ ɪɚɡɪɟɡɚɧɢɟ ɪɟɩɪɟɫɫɨɪɚ ɤɨɨɪɞɢɧɢɪɨɜɚɧɧɨ ɢɧɞɭɰɢɪɭɟɬ ɜɫɟ ɷɬɢ ɨɩɟɪɨɧɵ. ȼ ɧɚɫɬɨɹɳɟɟ ɜɪɟɦɹ ɢɞɟɧɬɢɮɢɰɢɪɨɜɚɧɨ 11 ɝɟɧɨɜ, ɤɨɬɨɪɵɟ ɭɱɚɫɬɜɭɸɬ ɜ SOS-ɨɬɜɟɬɟ ɜ ɪɟɡɭɥɶɬɚɬɟ ɚɤɬɢɜɚɰɢɢ ɢɯ ɩɪɨɞɭɤɬɨɜ. ɗɬɨ ɩɹɬɶ ɝɟɧɨɜ din (ɨɬ ɚɧɝɥ. damage inducible),

ɝɟɧɵ recA, lexA, uvrA, uvrB, umuC ɢ himA. ɇɟɤɨɬɨɪɵɟ ɢɡ sos-ɝɟɧɨɜ ɚɤɬɢɜ-

ɧɵ ɬɨɥɶɤɨ ɜ ɩɨɜɪɟɠɞɟɧɧɵɯ ɤɥɟɬɤɚɯ; ɞɪɭɝɢɟ ɚɤɬɢɜɧɵ ɜ ɧɟɨɛɪɚɛɨɬɚɧɧɵɯ, ɧɨ ɭɪɨɜɟɧɶ ɢɯ ɷɤɫɩɪɟɫɫɢɢ ɭɜɟɥɢɱɢɜɚɟɬɫɹ ɩɪɢ ɪɚɡɪɟɡɚɧɢɢ ɛɟɥɤɚ LexA. ɍɫɬɚɧɨɜɥɟɧɨ, ɱɬɨ ɛɟɥɨɤ LexA ɪɟɩɪɟɫɫɢɪɭɟɬ ɝɟɧɵ-ɦɢɲɟɧɢ, ɫɜɹɡɵɜɚɹɫɶ ɫ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɶɸ ȾɇɄ ɞɥɢɧɨɣ ɨɤɨɥɨ 20 ɩɚɪ ɨɫɧɨɜɚɧɢɣ, ɧɚɡɜɚɧɧɨɣ SOS-ɛɥɨɤɨɦ. ɗɬɚ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɶ ɫɢɦɦɟɬɪɢɱɧɚ, ɢ ɟɟ ɤɨɩɢɹ ɩɪɟɞɫɬɚɜɥɟɧɚ ɜ ɤɚɠɞɨɦ ɥɨɤɭɫɟ-ɦɢɲɟɧɢ. ɉɨɞɨɛɧɨ ɞɪɭɝɢɦ ɨɩɟɪɚɬɨɪɚɦ, SOSɛɥɨɤɢ ɩɟɪɟɤɪɵɜɚɸɬɫɹ ɫ ɫɨɨɬɜɟɬɫɬɜɭɸɳɢɦɢ ɩɪɨɦɨɬɨɪɚɦɢ.

Ȼɟɥɤɢ RecA ɢ LexA ɹɜɥɹɸɬɫɹ ɜɡɚɢɦɧɵɦɢ ɦɢɲɟɧɹɦɢ ɜ SOS-ɰɢɤɥɟ. RecA ɪɚɡɪɟɡɚɟɬ LexA, ɤɨɬɨɪɵɣ ɜ ɫɜɨɸ ɨɱɟɪɟɞɶ ɪɟɩɪɟɫɫɢɪɭɟɬ RecA. SOSɨɬɜɟɬ ɜɵɡɵɜɚɟɬ ɚɦɩɥɢɮɢɤɚɰɢɸ ɨɛɨɢɯ ɛɟɥɤɨɜ.

ɉɪɢ ɩɪɟɤɪɚɳɟɧɢɢ ɢɧɞɭɰɢɪɭɸɳɟɝɨ ɫɢɝɧɚɥɚ ɛɟɥɨɤ RecA ɬɟɪɹɟɬ ɫɜɨɸ ɩɪɨɬɟɚɡɧɭɸ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ. ȼ ɷɬɨɬ ɦɨɦɟɧɬ ɝɟɧ lexA ɢɦɟɟɬ ɜɵɫɨɤɢɣ ɭɪɨɜɟɧɶ ɷɤɫɩɪɟɫɫɢɢ; ɜ ɨɬɫɭɬɫɬɜɢɟ RecA-ɩɪɨɬɟɚɡɵ ɛɟɥɤɢ LexA ɛɵɫɬɪɨ ɧɚɤɚɩɥɢɜɚɸɬɫɹ ɜ ɧɟɪɚɡɪɟɡɚɧɧɨɣ ɮɨɪɦɟ ɢ ɜɵɤɥɸɱɚɸɬ sos-ɝɟɧɵ. ɗɬɢɦ ɦɨɠɧɨ ɨɛɴɹɫɧɢɬɶ ɨɛɪɚɬɢɦɨɫɬɶ SOS-ɨɬɜɟɬɚ.

7.7. ɋɢɫɬɟɦɚ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɢ ɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɢ ɛɚɤɬɟɪɢɚɥɶɧɨɣ ɤɥɟɬɤɢ

əɜɥɟɧɢɟ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɢ ɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɢ ɛɵɥɨ ɩɨɞɪɨɛɧɨ ɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɨ ȼ. Ⱥɪɛɟɪɨɦ ɜ ɤɨɧɰɟ 1960-ɯ ɝɨɞɨɜ ɩɪɢ ɢɡɭɱɟɧɢɢ ɪɚɡɜɢɬɢɹ ɛɚɤɬɟɪɢɨɮɚɝɚ Ȝ ɜ ɪɚɡɥɢɱɧɵɯ ɲɬɚɦɦɚɯ ɤɢɲɟɱɧɨɣ ɩɚɥɨɱɤɢ.

ɂɡɜɟɫɬɧɨ, ɱɬɨ ɛɚɤɬɟɪɢɨɮɚɝɢ, ɤɚɤ ɩɪɚɜɢɥɨ, ɩɪɨɹɜɥɹɸɬ ɫɩɟɰɢɮɢɱɧɨɫɬɶ ɜ ɨɬɧɨɲɟɧɢɢ ɯɨɡɹɟɜ, ɬ. ɟ. ɨɧɢ ɢɧɮɢɰɢɪɭɸɬ ɨɝɪɚɧɢɱɟɧɧɨɟ ɱɢɫɥɨ ɪɨɞɫɬɜɟɧɧɵɯ ɲɬɚɦɦɨɜ, ɜɢɞɨɜ ɢɥɢ ɪɨɞɨɜ ɛɚɤɬɟɪɢɣ. ɗɬɨ ɜ ɩɟɪɜɭɸ ɨɱɟɪɟɞɶ ɡɚɜɢ-

242

ɫɢɬ ɨɬ ɬɨɝɨ, ɢɦɟɸɬɫɹ ɢɥɢ ɧɟɬ ɧɚ ɛɚɤɬɟɪɢɚɥɶɧɵɯ ɤɥɟɬɤɚɯ ɪɟɰɟɩɬɨɪɵ ɞɥɹ ɚɞɫɨɪɛɰɢɢ ɛɚɤɬɟɪɢɨɮɚɝɚ. Ʉɪɨɦɟ ɬɨɝɨ, ɭ ɛɚɤɬɟɪɢɣ ɟɫɬɶ ɢ ɞɪɭɝɢɟ ɦɟɯɚɧɢɡɦɵ, ɨɛɭɫɥɨɜɥɢɜɚɸɳɢɟ ɫɩɟɰɢɮɢɱɧɨɫɬɶ ɜɡɚɢɦɨɨɬɧɨɲɟɧɢɣ ɫ ɮɚɝɚɦɢ. Ʉ ɧɢɦ ɨɬɧɨɫɹɬɫɹ ɫɢɫɬɟɦɵ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɢ ɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɢ.

Ɋɚɫɫɦɨɬɪɢɦ ɮɭɧɤɰɢɨɧɢɪɨɜɚɧɢɟ ɷɬɨɣ ɫɢɫɬɟɦɵ ɧɚ ɩɪɢɦɟɪɟ ɛɚɤɬɟɪɢɨɮɚɝɚ Ȝ ɢ ɤɥɟɬɨɤ ɲɬɚɦɦɚ E. coli K-12. Ɋɚɡɜɢɬɢɟ ɮɚɝɚ ɩɪɢɜɨɞɢɬ ɤ ɷɮɮɟɤɬɢɜɧɨɫɬɢ ɩɨɫɟɜɚ, ɪɚɜɧɨɣ ɟɞɢɧɢɰɟ: ɤɚɠɞɚɹ ɱɚɫɬɢɰɚ ɛɚɤɬɟɪɢɨɮɚɝɚ ɡɚɪɚɠɚɟɬ ɛɚɤɬɟɪɢɚɥɶɧɭɸ ɤɥɟɬɤɭ, ɪɟɩɪɨɞɭɰɢɪɭɟɬɫɹ ɜ ɧɟɣ ɢ ɞɚɟɬ ɩɨɬɨɦɫɬɜɨ, ɮɢɤɫɢɪɭɟɦɨɟ ɜɢɡɭɚɥɶɧɨ ɩɨ ɧɚɥɢɱɢɸ ɧɚ ɝɚɡɨɧɟ ɱɭɜɫɬɜɢɬɟɥɶɧɵɯ ɛɚɤɬɟɪɢɣ ɡɨɧ ɥɢɡɢɫɚ ɢɥɢ ɛɥɹɲɟɤ. ȿɫɥɢ ɮɚɝɨɥɢɡɚɬɨɦ, ɩɨɥɭɱɟɧɧɵɦ ɩɨɫɥɟ ɰɢɤɥɚ ɪɚɡɜɢɬɢɹ ɮɚɝɚ Ȝ ɧɚ ɛɚɤɬɟɪɢɹɯ E. coli K-12, ɢɧɮɢɰɢɪɨɜɚɬɶ ɛɚɤɬɟɪɢɢ E. coli ɲɬɚɦɦɚ C, ɬɨ ɷɮɮɟɤɬɢɜɧɨɫɬɶ ɩɨɫɟɜɚ ɛɭɞɟɬ ɡɧɚɱɢɬɟɥɶɧɨ ɧɢɠɟ (10–4–10–5). ɋɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨ, ɧɟ ɤɚɠɞɚɹ ɮɚɝɨɜɚɹ ɱɚɫɬɢɰɚ ɩɨ ɤɚɤɢɦ-ɬɨ ɩɪɢɱɢɧɚɦ ɫɩɨɫɨɛɧɚ ɪɚɡɦɧɨɠɚɬɶɫɹ ɜ ɤɥɟɬɤɚɯ ɧɨɜɨɝɨ ɯɨɡɹɢɧɚ. ȿɫɥɢ ɠɟ ɮɚɝɨɜɵɟ ɱɚɫɬɢɰɵ, ɨɛɪɚɡɨɜɚɜɲɢɟɫɹ ɩɨɫɥɟ ɰɢɤɥɚ ɪɟɩɪɨɞɭɤɰɢɢ ɧɚ ɤɥɟɬɤɚɯ E. coli C, ɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɬɶ ɞɥɹ ɡɚɪɚɠɟɧɢɹ ɬɚɤɨɣ ɠɟ ɤɭɥɶɬɭɪɵ (E. coli C), ɬɨ ɪɚɡɦɧɨɠɟɧɢɟ ɛɚɤɬɟɪɢɨɮɚɝɚ Ȝ ɜɧɨɜɶ ɛɭɞɟɬ ɩɪɨɯɨɞɢɬɶ ɧɨɪɦɚɥɶɧɨ ɢ ɷɮɮɟɤɬɢɜɧɨɫɬɶ ɩɨɫɟɜɚ ɫɨɫɬɚɜɢɬ ɟɞɢɧɢɰɭ. Ɉɞɧɚɤɨ ɟɫɥɢ ɩɟɪɟɞ ɡɚɪɚɠɟɧɢɟɦ ɛɚɤɬɟɪɢɣ E. coli C ɮɚɝ ɩɪɨɩɚɫɫɢɪɨɜɚɬɶ ɧɚ ɤɥɟɬɤɚɯ E. coli K-12, ɬɨ ɧɚ ɲɬɚɦɦɟ E. coli C ɨɧ ɛɭɞɟɬ ɪɚɡɜɢɜɚɬɶɫɹ ɫ ɧɢɡɤɨɣ ɷɮɮɟɤɬɢɜɧɨɫɬɶɸ.

Ɍɚɤɢɦ ɨɛɪɚɡɨɦ, ɩɪɢ ɫɦɟɧɟ ɯɨɡɹɢɧɚ ɧɚɛɥɸɞɚɟɬɫɹ ɡɧɚɱɢɬɟɥɶɧɨɟ ɨɝɪɚɧɢɱɟɧɢɟ ɪɚɡɦɧɨɠɟɧɢɹ ɮɚɝɚ Ȝ, ɤɨɬɨɪɨɟ ɩɨɥɭɱɢɥɨ ɧɚɡɜɚɧɢɟ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ. Ɋɟɫɬɪɢɤɰɢɹ ɨɛɭɫɥɨɜɥɟɧɚ ɪɚɫɳɟɩɥɟɧɢɟɦ ɢɧɮɢɰɢɪɭɸɳɟɣ ȾɇɄ ɮɚɝɚ ɩɨɞ ɞɟɣɫɬɜɢɟɦ ɮɟɪɦɟɧɬɚ, ɫɩɟɰɢɮɢɱɧɨɝɨ ɞɥɹ ɲɬɚɦɦɚ-ɯɨɡɹɢɧɚ. Ɏɟɪɦɟɧɬɵ ɷɬɢ ɩɨɥɭɱɢɥɢ ɧɚɡɜɚɧɢɟ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɨɧɧɵɯ ɷɧɞɨɧɭɤɥɟɚɡ ɢɥɢ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡ. Ȼɥɚ-

ɝɨɞɚɪɹ ɫɜɨɟɦɭ ɧɭɤɥɟɚɡɧɨɦɭ ɞɟɣɫɬɜɢɸ ɨɧɢ ɩɪɟɩɹɬɫɬɜɭɸɬ ɩɨɞɞɟɪɠɚɧɢɸ ɱɭɠɟɪɨɞɧɨɣ ȾɇɄ ɜ ɛɚɤɬɟɪɢɚɥɶɧɨɣ ɤɥɟɬɤɟ.

ȿɫɥɢ ɮɚɝ ɩɪɨɞɟɥɚɥ ɩɨɥɧɵɣ ɰɢɤɥ ɪɟɩɪɨɞɭɤɰɢɢ ɜ ɧɨɜɨɦ ɯɨɡɹɢɧɟ (ɜ ɧɚɲɟɦ ɩɪɢɦɟɪɟ ɲɬɚɦɦ E. coli C), ɬɨ ɜ ɞɚɥɶɧɟɣɲɟɦ ɜ ɷɬɨɦ ɠɟ ɯɨɡɹɢɧɟ ɨɧ ɧɟ ɩɨɞɜɟɪɝɚɟɬɫɹ ɨɝɪɚɧɢɱɟɧɢɸ, ɢɥɢ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ. Ɉɛɴɹɫɧɢɬɶ ɩɨɞɨɛɧɵɟ ɮɚɤɬɵ ɦɨɠɧɨ ɫɥɟɞɭɸɳɢɦ ɨɛɪɚɡɨɦ. ȼ ɛɚɤɬɟɪɢɚɥɶɧɨɣ ɤɥɟɬɤɟ, ɤɪɨɦɟ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡ, ɫɢɧɬɟɡɢɪɭɸɬɫɹ ɞɪɭɝɢɟ ɮɟɪɦɟɧɬɵ – ɦɟɬɢɥɚɡɵ, ɤɨɬɨɪɵɟ ɩɪɢɡɜɚɧɵ ɡɚɳɢɳɚɬɶ ɫɨɛɫɬɜɟɧɧɭɸ ȾɇɄ ɨɬ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɤɥɟɬɨɱɧɵɯ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡ. Ɇɟɬɢɥɚɡɵ ɢɡɦɟɧɹɸɬ ɢɥɢ ɦɨɞɢɮɢɰɢɪɭɸɬ ɫɨɛɫɬɜɟɧɧɭɸ ȾɇɄ ɩɭɬɟɦ ɦɟɬɢɥɢɪɨɜɚɧɢɹ ɢɥɢ ɝɥɢɤɨɡɢɥɢɪɨɜɚɧɢɹ ɚɞɟɧɢɧɚ ɥɢɛɨ ɰɢɬɨɡɢɧɚ. ɗɬɨɬ ɩɪɨɰɟɫɫ ɢɡɜɟɫɬɟɧ ɩɨɞ ɧɚɡɜɚɧɢɟɦ ɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɢ. ȾɇɄ ɛɚɤɬɟɪɢɨɮɚɝɚ, ɩɪɨɲɟɞɲɟɝɨ ɩɨɥɧɵɣ ɰɢɤɥ ɪɚɡɜɢɬɢɹ ɜ ɧɨɜɨɦ ɯɨɡɹɢɧɟ, ɩɨɞ ɞɟɣɫɬɜɢɟɦ ɦɟɬɢɥɚɡ ɦɨɞɢɮɢɰɢɪɭɟɬɫɹ ɬɚɤɢɦ ɠɟ ɨɛɪɚɡɨɦ, ɤɚɤ ɢ ȾɇɄ ɤɥɟɬɤɢ-ɯɨɡɹɢɧɚ. Ɉɧɚ ɦɟɬɢɥɢɪɭɟɬɫɹ ɢ ɩɪɢɨɛɪɟɬɚɟɬ ɫɜɨɣɫɬɜɚ, ɡɚɳɢɳɚɸɳɢɟ ɟɟ ɨɬ ɜɨɡɞɟɣɫɬɜɢɹ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɨɧɧɵɯ ɮɟɪɦɟɧɬɨɜ ɞɚɧɧɨɝɨ ɲɬɚɦɦɚ ɛɚɤɬɟɪɢɣ (ɪɢɫ. 76).

243

Ȝ + E. coli Ʉ-12

ɗɮɮɟɤɬɢɜɧɨɫɬɶ ɩɨɫɟɜɚ – 1

Ɏɚɝɨɥɢɡɚɬ + E. coli C

ɗɮɮɟɤɬɢɜɧɨɫɬɶ ɩɨ- ɫɟɜɚ – 10–4–10–5 Ɏɚɝɨɥɢɡɚɬ

++

Ɏɚɝɨɥɢɡɚɬ Ɏɚɝɨɥɢɡɚɬ

Ɋɢɫ. 76. ɗɤɫɩɟɪɢɦɟɧɬ ɩɨ ɜɵɹɜɥɟɧɢɸ ɫɢɫɬɟɦɵ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɢ ɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɢ ɭ ɛɚɤɬɟɪɢɣ E. coli

ɋɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨ, ɪɚɛɨɬɚɸɳɚɹ ɜ ɤɥɟɬɤɚɯ ɛɚɤɬɟɪɢɣ ɫɢɫɬɟɦɚ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɢ (ɫɢɫɬɟɦɚ R-M) ɨɛɪɚɡɨɜɚɧɚ ɞɜɭɦɹ ɫɩɟɰɢɮɢɱɟɫɤɢɦɢ ɞɥɹ ɨɩɪɟɞɟɥɟɧɧɨɝɨ ɲɬɚɦɦɚ ɦɢɤɪɨɨɪɝɚɧɢɡɦɚ ɮɟɪɦɟɧɬɚɦɢ – ȾɇɄ-ɦɨɞɢɮɢɰɢ- ɪɭɸɳɢɦ (ɚɞɟɧɢɧɢɥɢ ɰɢɬɨɡɢɧɦɟɬɢɥɚɡɚ) ɢ ɪɚɫɳɟɩɥɹɸɳɢɦ (ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɚ). ɗɬɢ ɮɟɪɦɟɧɬɵ ɭɡɧɚɸɬ ɜ ȾɇɄ ɨɞɧɢ ɢ ɬɟ ɠɟ ɨɩɪɟɞɟɥɟɧɧɵɟ ɤɨɪɨɬɤɢɟ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɢ ɧɭɤɥɟɨɬɢɞɨɜ – ɫɚɣɬɵ. Ɇɟɬɢɥɚɡɚ, ɦɨɞɢɮɢɰɢɪɭɹ ɨɩɪɟɞɟɥɟɧɧɵɟ ɨɫɧɨɜɚɧɢɹ ɜɧɭɬɪɢɤɥɟɬɨɱɧɨɣ ȾɇɄ, ɡɚɳɢɳɚɟɬ ɟɟ ɨɬ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ, ɭɡɧɚɸɳɟɣ ɬɭ ɠɟ ɧɭɤɥɟɨɬɢɞɧɭɸ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɶ.

ɋɢɫɬɟɦɵ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɢ ɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɢ ɲɢɪɨɤɨ ɪɚɫɩɪɨɫɬɪɚɧɟɧɵ ɫɪɟɞɢ ɛɚɤɬɟɪɢɣ ɢ ɧɚɣɞɟɧɵ ɩɪɚɤɬɢɱɟɫɤɢ ɭ ɜɫɟɯ ɢɫɫɥɟɞɨɜɚɧɧɵɯ ɜɢɞɨɜ. ɇɟɞɚɜɧɨ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ ɨɛɧɚɪɭɠɟɧɵ ɢ ɭ ɧɟɤɨɬɨɪɵɯ ɜɢɞɨɜ ɞɪɨɠɠɟɣ. ɂɡ ɪɚɡɧɵɯ ɲɬɚɦɦɨɜ ɦɢɤɪɨɨɪɝɚɧɢɡɦɨɜ ɜɵɞɟɥɹɸɬ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ, ɪɚɡɥɢɱɚɸɳɢɟɫɹ ɦɟɠɞɭ ɫɨɛɨɣ ɯɚɪɚɤɬɟɪɨɦ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɧɚ ȾɇɄ.

ȼ ɧɚɭɱɧɨɣ ɥɢɬɟɪɚɬɭɪɟ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ ɨɛɨɡɧɚɱɚɸɬɫɹ ɛɭɤɜɨɣ R. ɇɚɡɜɚɧɢɟ ɮɟɪɦɟɧɬɚ ɫɤɥɚɞɵɜɚɟɬɫɹ ɢɡ ɩɟɪɜɨɣ ɛɭɤɜɵ ɪɨɞɚ ɢ ɞɜɭɯ ɩɟɪɜɵɯ ɛɭɤɜ ɜɢɞɚ ɛɚɤɬɟɪɢɣ, ɢɡ ɤɨɬɨɪɨɝɨ ɛɵɥ ɜɵɞɟɥɟɧ ɮɟɪɦɟɧɬ, ɧɚɩɪɢɦɟɪ Bacillus subtilis – Bsu, Escherichia coli – Eco. ȿɫɥɢ ɠɟ ɜ ɨɩɪɟɞɟɥɟɧɧɨɦ ɲɬɚɦɦɟ ɢɦɟɟɬɫɹ ɧɟɫɤɨɥɶɤɨ ɫɢɫɬɟɦ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɢ ɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɢ, ɬɨ ɜɜɨɞɢɬɫɹ ɞɨɩɨɥɧɢɬɟɥɶɧɨɟ ɱɢɫɥɨɜɨɟ ɨɛɨɡɧɚɱɟɧɢɟ. Ɏɟɪɦɟɧɬɵ ɫɢɫɬɟɦ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɢ ɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɢ ɦɨɝɭɬ ɤɨɞɢɪɨɜɚɬɶɫɹ ɩɥɚɡɦɢɞɧɵɦɢ ɢ ɮɚɝɨɜɵɦɢ ɝɟɧɚɦɢ, ɢ ɬɨɝɞɚ ɤ ɧɚɡɜɚɧɢɸ ɮɟɪɦɟɧɬɚ ɞɨɛɚɜɥɹɟɬɫɹ ɧɚɡɜɚɧɢɟ ɜɧɟɯɪɨɦɨɫɨɦɧɨɝɨ ɷɥɟɦɟɧɬɚ. ɇɚɩɪɢɦɟɪ,

244

ɧɚɡɜɚɧɢɟ EcoR1 ɨɬɧɨɫɢɬɫɹ ɤ ɮɟɪɦɟɧɬɭ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɟ, ɞɟɬɟɪɦɢɧɢɪɭɟɦɨɦɭ ɩɥɚɡɦɢɞɨɣ R1; ɧɚɡɜɚɧɢɟ EcoP1 – ɤ ɮɟɪɦɟɧɬɭ, ɤɨɞɢɪɭɟɦɨɦɭ ɮɚɝɨɦ Ɋ1. ȼ ɧɚɫɬɨɹɳɟɟ ɜɪɟɦɹ ɜɫɟ ɢɡɜɟɫɬɧɵɟ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ ɜ ɡɚɜɢɫɢɦɨɫɬɢ ɨɬ ɩɨɬɪɟɛɧɨɫɬɢ ɜ ɤɨɮɚɤɬɨɪɚɯ ɢ ɯɚɪɚɤɬɟɪɚ ɪɚɫɳɟɩɥɟɧɢɹ ɧɭɤɥɟɨɬɢɞɧɵɯ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɟɣ ȾɇɄ ɪɚɡɞɟɥɹɸɬ ɧɚ ɬɪɢ ɬɢɩɚ: I, II ɢ III.

Ɋɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ I ɬɢɩɚ ɹɜɥɹɸɬɫɹ ɫɥɨɠɧɵɦɢ ɛɟɥɤɚɦɢ ɫ ɬɪɟɦɹ ɪɚɡɥɢɱɧɵɦɢ ɬɢɩɚɦɢ ɫɭɛɴɟɞɢɧɢɰ (ɷɧɞɨɧɭɤɥɟɚɡɚ, ɦɟɬɢɥɚɡɚ, ɮɟɪɦɟɧɬ ɭɡɧɚɜɚɧɢɹ). Ⱦɥɹ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɷɬɢɯ ɮɟɪɦɟɧɬɨɜ ɜ ɤɚɱɟɫɬɜɟ ɤɨɮɚɤɬɨɪɨɜ ɬɪɟɛɭɸɬɫɹ ȺɌɎ, S-ɚɞɟɧɨɡɢɧɦɨɧɨɮɨɫɮɚɬ ɢ ɢɨɧɵ Mg2+. Ɋɚɫɳɟɩɥɟɧɢɟ ȾɇɄ ɫɨɜɦɟɳɟɧɨ ɫ ɝɢɞɪɨɥɢɡɨɦ ȺɌɎ. Ɋɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ I ɬɢɩɚ ɭɡɧɚɸɬ ɫɚɣɬ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ, ɧɨ ɪɚɫɳɟɩɥɹɸɬ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɶ ȾɇɄ ɧɚ ɩɪɨɢɡɜɨɥɶɧɨɦ ɪɚɫɫɬɨɹɧɢɢ ɨɬ ɫɚɣɬɚ ɭɡɧɚɜɚɧɢɹ (ɨɬ ɧɟɫɤɨɥɶɤɢɯ ɞɟɫɹɬɤɨɜ ɞɨ ɧɟɫɤɨɥɶɤɢɯ ɬɵɫɹɱ ɩɚɪ ɧɭɤɥɟɨɬɢɞɨɜ). ȼ ɪɟɡɭɥɶɬɚɬɟ ɨɛɪɚɡɭɸɬɫɹ ɫɚɦɵɟ ɪɚɡɧɨɨɛɪɚɡɧɵɟ ɮɪɚɝɦɟɧɬɵ ȾɇɄ, ɢɥɢ ɪɟɫɬɪɢɤɬɵ. Ɍɚɤɢɟ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ ɧɟɜɨɡɦɨɠɧɨ ɢɫɩɨɥɶɡɨɜɚɬɶ ɞɥɹ ɪɟɲɟɧɢɹ ɝɟɧɧɨ-ɢɧɠɟɧɟɪɧɵɯ ɡɚɞɚɱ.

ɋɢɫɬɟɦɵ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɢ ɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɢ II ɬɢɩɚ ɩɪɟɞɫɬɚɜɥɟɧɵ ɞɜɭɦɹ ɨɬɞɟɥɶɧɵɦɢ ɛɟɥɤɚɦɢ (ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɨɧɧɚɹ ɷɧɞɨɧɭɤɥɟɚɡɚ, ɦɨɞɢɮɢɤɚɰɢɨɧɧɚɹ ɦɟɬɢɥɚɡɚ). Ɋɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ II ɬɢɩɚ – ɨɬɧɨɫɢɬɟɥɶɧɨ ɩɪɨɫɬɨ ɨɪɝɚɧɢɡɨɜɚɧɧɵɟ ɛɟɥɤɢ, ɫɨɫɬɨɹɳɢɟ ɢɡ ɞɜɭɯ ɫɭɛɴɟɞɢɧɢɰ ɨɞɧɨɝɨ ɬɢɩɚ ɫɨ ɫɪɚɜɧɢɬɟɥɶɧɨ ɧɟɛɨɥɶɲɨɣ ɦɨɥɟɤɭɥɹɪɧɨɣ ɦɚɫɫɨɣ. Ⱦɥɹ ɫɩɟɰɢɮɢɱɟɫɤɨɝɨ ɞɟɣɫɬɜɢɹ ɷɬɢɯ ɮɟɪɦɟɧɬɨɜ ɧɭɠɧɵ ɬɨɥɶɤɨ ɢɨɧɵ Mg2+. Ɋɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ II ɬɢɩɚ ɯɚɪɚɤɬɟɪɢɡɭɸɬɫɹ ɬɟɦ, ɱɬɨ ɭ ɧɢɯ ɫɚɣɬɵ ɭɡɧɚɜɚɧɢɹ ɢ ɦɟɫɬɚ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɫɨɜɩɚɞɚɸɬ. Ɉɛɵɱɧɨ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɚ II ɬɢɩɚ ɭɡɧɚɟɬ ɨɩɪɟɞɟɥɟɧɧɭɸ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɶ ȾɇɄ ɢ ɜɵɡɵɜɚɟɬ ɟɟ ɪɚɡɪɵɜ ɜɧɭɬɪɢ ɷɬɨɣ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɢ. ɋɚɣɬɵ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡ II ɬɢɩɚ ɩɪɟɞɫɬɚɜɥɟɧɵ ɫɢɦɦɟɬɪɢɱɧɵɦɢ ɩɪɢ ɩɨɜɨɪɨɬɟ ɧɚ 180º ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɹɦɢ – ɩɚɥɢɧɞɪɨɦɚɦɢ:

Ɋɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ II ɬɢɩɚ ɞɟɥɹɬɫɹ ɧɚ ɧɟɫɤɨɥɶɤɨ ɤɥɚɫɫɨɜ ɜ ɡɚɜɢɫɢɦɨɫɬɢ ɨɬ ɪɚɡɦɟɪɚ ɫɚɣɬɚ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɢ ɞɥɢɧɵ ɩɨɥɭɱɚɟɦɵɯ ɮɪɚɝɦɟɧɬɨɜ ȾɇɄ:

1)ɦɟɥɤɨɳɟɩɹɳɢɟ – ɫɚɣɬ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɩɪɟɞɫɬɚɜɥɟɧ 4 ɩ.ɧ.;

2)ɫɪɟɞɧɟɳɟɩɹɳɢɟ – ɫɚɣɬ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ – 6–8 ɩ.ɧ.;

3)ɤɪɭɩɧɨɳɟɩɹɳɢɟ – ɫɚɣɬ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ – 10–14 ɩ.ɧ.

Ɋɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ II ɬɢɩɚ ɞɟɥɹɬɫɹ ɧɚ ɞɜɟ ɝɪɭɩɩɵ ɜ ɡɚɜɢɫɢɦɨɫɬɢ ɨɬ ɬɨɝɨ, ɤɚɤɢɦ ɨɛɪɚɡɨɦ ɨɧɢ ɪɚɫɳɟɩɥɹɸɬ ɩɨɫɥɟɞɨɜɚɬɟɥɶɧɨɫɬɶ ȾɇɄ. Ɉɞɧɢ ɢɡ ɧɢɯ ɨɫɭɳɟɫɬɜɥɹɸɬ ɩɪɹɦɨɣ ɪɚɡɪɟɡ ȾɇɄ (ɩɨ ɨɫɢ ɫɢɦɦɟɬɪɢɢ). ȼ ɪɟɡɭɥɶɬɚɬɟ ɨɛɪɚɡɭɸɬɫɹ ɮɪɚɝɦɟɧɬɵ ȾɇɄ ɫ ɬɭɩɵɦɢ ɢɥɢ ɪɨɜɧɵɦɢ ɤɨɧɰɚɦɢ. ɉɪɢɦɟɪɨɦ ɬɚɤɢɯ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡ ɹɜɥɹɟɬɫɹ ɷɧɞɨɧɭɤɥɟɚɡɚ BalI:

245

Ɋɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ, ɨɬɧɨɫɹɳɢɟɫɹ ɤɨ ɜɬɨɪɨɣ ɝɪɭɩɩɟ, ɨɫɭɳɟɫɬɜɥɹɸɬ ɫɬɭɩɟɧɱɚɬɵɣ ɪɚɡɪɟɡ (ɧɚ ɧɟɤɨɬɨɪɨɦ ɪɚɫɫɬɨɹɧɢɢ ɨɬ ɨɫɢ ɫɢɦɦɟɬɪɢɢ). ȼ ɪɟɡɭɥɶɬɚɬɟ ɷɬɨɝɨ ɜ ɦɟɫɬɟ ɪɚɡɪɟɡɚ ɨɛɪɚɡɭɸɬɫɹ ɧɟɪɨɜɧɵɟ, ɢɥɢ ɥɢɩɤɢɟ, ɤɨɧɰɵ, ɬ. ɟ. ɪɟɫɬɪɢɤɬɵ ɢɦɟɸɬ ɧɚ ɫɜɨɢɯ ɤɨɧɰɚɯ ɨɞɧɨɧɢɬɟɜɵɟ ɜɡɚɢɦɧɨ ɤɨɦɩɥɟɦɟɧɬɚɪɧɵɟ ɭɱɚɫɬɤɢ. ɉɪɢɦɟɪɨɦ ɬɚɤɢɯ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡ ɹɜɥɹɟɬɫɹ ɮɟɪɦɟɧɬ EcoR1:

Ʌɢɩɤɢɣ ɤɨɧɟɰ

EcoR1

Ɋɟɫɬɪɢɤɬɵ, ɩɨɥɭɱɟɧɧɵɟ ɩɨɫɥɟ ɜɨɡɞɟɣɫɬɜɢɹ ɧɚ ɪɚɡɧɵɟ ɦɨɥɟɤɭɥɵ ȾɇɄ ɨɩɪɟɞɟɥɟɧɧɨɣ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ, ɢɦɟɸɬ ɨɞɢɧɚɤɨɜɵɟ ɥɢɩɤɢɟ ɤɨɧɰɵ. Ɍɚɤɢɟ ɪɟɫɬɪɢɤɬɵ ɦɨɝɭɬ ɨɛɴɟɞɢɧɹɬɶɫɹ ɞɪɭɝ ɫ ɞɪɭɝɨɦ ɫ ɨɛɪɚɡɨɜɚɧɢɟɦ ɪɟɤɨɦɛɢɧɚɧɬɧɵɯ ɦɨɥɟɤɭɥ ȾɇɄ, ɱɬɨ ɲɢɪɨɤɨ ɢɫɩɨɥɶɡɭɟɬɫɹ ɜ ɝɟɧɟɬɢɱɟɫɤɨɣ ɢɧɠɟɧɟɪɢɢ.

Ɋɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ III ɬɢɩɚ ɢɦɟɸɬ ɧɟɤɨɬɨɪɨɟ ɫɯɨɞɫɬɜɨ ɫ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɚɦɢ I ɬɢɩɚ. Ɏɟɪɦɟɧɬ ɫɨɫɬɨɢɬ ɢɡ ɞɜɭɯ ɪɚɡɥɢɱɧɵɯ ɫɭɛɴɟɞɢɧɢɰ (ɷɧɞɨɧɭɤɥɟɚɡɚ, ɦɟɬɢɥɚɡɚ), ɢ ɩɨɷɬɨɦɭ ɛɢɮɭɧɤɰɢɨɧɚɥɟɧ, ɬ. ɟ. ɨɛɥɚɞɚɟɬ ɤɚɤ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɧɨɣ, ɬɚɤ ɢ ɦɟɬɢɥɚɡɧɨɣ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶɸ. Ⱦɥɹ ɩɪɨɹɜɥɟɧɢɹ ɷɧɞɨɧɭɤɥɟɚɡɧɨɣ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ ɬɪɟɛɭɸɬɫɹ ɬɨɥɶɤɨ ȺɌɎ ɢ ɢɨɧɵ Mg2+. Ɋɚɫɳɟɩɥɟɧɢɟ ȾɇɄ ɧɟ ɫɨɩɪɨɜɨɠɞɚɟɬɫɹ ɝɢɞɪɨɥɢɡɨɦ ȺɌɎ. Ɋɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ III ɬɢɩɚ ɝɢɞɪɨɥɢɡɭɸɬ ȾɇɄ ɧɚ ɪɚɫɫɬɨɹɧɢɢ 20–39 ɩ.ɧ. ɨɬ ɫɚɣɬɨɜ ɭɡɧɚɜɚɧɢɹ ɢ ɩɨɷɬɨɦɭ ɬɚɤɠɟ ɞɨɜɨɥɶɧɨ ɪɟɞɤɨ ɢɫɩɨɥɶɡɭɸɬɫɹ ɞɥɹ ɩɪɚɤɬɢɱɟɫɤɢɯ ɰɟɥɟɣ.

Ɏɟɪɦɟɧɬɚɬɢɜɧɚɹ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɶ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡ ɢɡɦɟɪɹɟɬɫɹ ɜ ɟɞɢɧɢɰɚɯ ɚɤɬɢɜɧɨɫɬɢ. ɗɬɨ ɬɚɤɨɟ ɤɨɥɢɱɟɫɬɜɨ ɮɟɪɦɟɧɬɚ, ɤɨɬɨɪɨɟ ɧɟɨɛɯɨɞɢɦɨ ɞɥɹ ɩɨɥɧɨɝɨ ɝɢɞɪɨɥɢɡɚ ɡɚ ɨɞɢɧ ɱɚɫ 1 ɦɤɝ ȾɇɄ ɮɚɝɚ Ȝ ɩɪɢ ɨɩɬɢɦɚɥɶɧɵɯ ɭɫɥɨɜɢɹɯ. Ɉɩɬɢɦɚɥɶɧɵɟ ɭɫɥɨɜɢɹ ɪɟɫɬɪɢɤɰɢɢ ɞɥɹ ɤɚɠɞɨɣ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɵ ɹɜɥɹɸɬɫɹ ɢɧɞɢɜɢɞɭɚɥɶɧɵɦɢ ɢ ɡɚɜɢɫɹɬ ɨɬ ɪɇ, ɢɨɧɧɨɣ ɫɢɥɵ ɪɚɫɬɜɨɪɚ, ɩɪɢɫɭɬɫɬɜɢɹ ɨɩɪɟɞɟɥɟɧɧɵɯ ɢɨɧɨɜ, ɬɟɦɩɟɪɚɬɭɪɵ ɩɪɨɜɟɞɟɧɢɹ ɪɟɚɤɰɢɢ.

7.8. Ƚɟɧɟɬɢɱɟɫɤɚɹ ɢɧɠɟɧɟɪɢɹ. Ʉɥɨɧɢɪɨɜɚɧɢɟ ɝɟɧɨɜ ɜ ɤɥɟɬɤɚɯ ɛɚɤɬɟɪɢɣ

Ƚɟɧɟɬɢɱɟɫɤɚɹ ɢɧɠɟɧɟɪɢɹ – ɫɨɜɨɤɭɩɧɨɫɬɶ ɦɟɬɨɞɨɜ, ɩɨɡɜɨɥɹɸɳɢɯ ɫɨɡɞɚɜɚɬɶ in vitro ɪɟɤɨɦɛɢɧɚɧɬɧɵɟ ɦɨɥɟɤɭɥɵ ȾɇɄ, ɫ ɩɨɫɥɟɞɭɸɳɢɦ ɜɜɟɞɟɧɢɟɦ ɷɬɢɯ ɧɨɜɵɯ ɝɟɧɟɬɢɱɟɫɤɢɯ ɫɬɪɭɤɬɭɪ ɜ ɠɢɜɭɸ ɤɥɟɬɤɭ.

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Ɍɚɤ ɤɚɤ ɫ ɯɢɦɢɱɟɫɤɨɣ ɬɨɱɤɢ ɡɪɟɧɢɹ ȾɇɄ ɜɫɟɯ ɨɪɝɚɧɢɡɦɨɜ ɨɞɧɨɬɢɩɧɚ, ɬɨ in vitro ɜɨɡɦɨɠɧɨ ɜɨɫɫɨɟɞɢɧɟɧɢɟ ɮɪɚɝɦɟɧɬɨɜ ȾɇɄ ɢɡ ɥɸɛɵɯ ɨɪɝɚɧɢɡɦɨɜ. ȼ ɷɬɨɦ ɫɦɵɫɥɟ ɪɟɤɨɦɛɢɧɚɰɢɹ in vitro ɨɬɥɢɱɚɟɬɫɹ ɨɬ ɨɛɵɱɧɨɣ ɝɟɧɟɬɢɱɟɫɤɨɣ ɪɟɤɨɦɛɢɧɚɰɢɢ, ɤɨɬɨɪɚɹ ɬɪɟɛɭɟɬ ɝɨɦɨɥɨɝɢɢ ȾɇɄ ɢ, ɤɚɤ ɩɪɚɜɢɥɨ, ɨɫɭɳɟɫɬɜɥɹɟɬɫɹ ɜ ɩɪɟɞɟɥɚɯ ɨɞɧɨɝɨ ɢɥɢ ɛɥɢɡɤɨɪɨɞɫɬɜɟɧɧɵɯ ɜɢɞɨɜ. Ⱦɪɭɝɢɦɢ ɫɥɨɜɚɦɢ, ɨɛɵɱɧɵɟ ɦɟɬɨɞɵ ɨɛɦɟɧɚ ɝɟɧɟɬɢɱɟɫɤɨɣ ɢɧɮɨɪɦɚɰɢɟɣ (ɤɨɧɴɸɝɚɰɢɹ, ɬɪɚɧɫɞɭɤɰɢɹ, ɬɪɚɧɫɮɨɪɦɚɰɢɹ) ɩɨɡɜɨɥɹɸɬ ɩɪɨɜɟɫɬɢ ɨɛɦɟɧ ɝɟɧɚɦɢ ɜɧɭɬɪɢ ɨɞɧɨɝɨ ɜɢɞɚ, ɬɨɝɞɚ ɤɚɤ ɝɟɧɟɬɢɱɟɫɤɚɹ ɢɧɠɟɧɟɪɢɹ, ɜ ɩɪɢɧɰɢɩɟ, ɨɬɤɪɵɜɚɟɬ ɜɨɡɦɨɠɧɨɫɬɶ, ɞɥɹ ɩɟɪɟɦɟɳɟɧɢɹ ɝɟɧɨɜ ɜ ɩɪɟɞɟɥɚɯ ɜɫɟɯ ɠɢɜɵɯ ɨɪɝɚɧɢɡɦɨɜ.

Ⱦɥɹ ɬɨɝɨ ɱɬɨɛɵ ɨɫɭɳɟɫɬɜɢɬɶ ɝɟɧɧɨ-ɢɧɠɟɧɟɪɧɵɣ ɷɤɫɩɟɪɢɦɟɧɬ, ɬ. ɟ. ɫɨɡɞɚɬɶ ɪɟɤɨɦɛɢɧɚɧɬɧɭɸ ȾɇɄ ɢ ɜɜɟɫɬɢ ɟɟ ɜ ɤɥɟɬɤɭ ɞɪɭɝɨɝɨ ɨɪɝɚɧɢɡɦɚ, ɧɟɨɛɯɨɞɢɦɨ ɫɨɛɥɸɫɬɢ ɫɥɟɞɭɸɳɢɟ ɭɫɥɨɜɢɹ:

xɢɦɟɬɶ ɢɧɫɬɪɭɦɟɧɬɵ ɞɥɹ ɪɚɡɪɟɡɚɧɢɹ ɦɨɥɟɤɭɥ ȾɇɄ ɧɚ ɮɪɚɝɦɟɧɬɵ;

xɢɦɟɬɶ ɢɧɫɬɪɭɦɟɧɬɵ ɞɥɹ ɫɨɟɞɢɧɟɧɢɹ ɮɪɚɝɦɟɧɬɨɜ ȾɇɄ, ɜɵɞɟɥɟɧɧɵɯ ɢɡ ɪɚɡɥɢɱɧɵɯ ɢɫɬɨɱɧɢɤɨɜ;

xɩɨɞɨɛɪɚɬɶ ɩɟɪɟɧɨɫɱɢɤ, ɢɥɢ ɜɟɤɬɨɪ ɝɟɧɨɜ, ɩɪɟɞɧɚɡɧɚɱɟɧɧɵɯ ɤ ɜɜɟɞɟɧɢɸ ɜ ɤɥɟɬɤɭ ɞɪɭɝɨɝɨ ɨɪɝɚɧɢɡɦɚ. ɗɬɨɬ ɜɟɤɬɨɪ ɞɨɥɠɟɧ ɫɚɦɨɫɬɨɹɬɟɥɶɧɨ ɪɟɩɥɢɰɢɪɨɜɚɬɶɫɹ ɜ ɤɥɟɬɤɟ ɢ ɨɛɟɫɩɟɱɢɜɚɬɶ ɪɟɩɥɢɤɚɰɢɸ ɜɜɟɞɟɧɧɨɝɨ ɮɪɚɝɦɟɧɬɚ ȾɇɄ;

xɪɚɡɪɚɛɨɬɚɬɶ ɫɩɨɫɨɛ ɜɜɟɞɟɧɢɹ ɝɢɛɪɢɞɧɵɯ ɢɥɢ ɪɟɤɨɦɛɢɧɚɧɬɧɵɯ ɦɨɥɟɤɭɥ ȾɇɄ ɜ ɠɢɜɭɸ ɤɥɟɬɤɭ;

xɨɩɪɟɞɟɥɢɬɶ ɦɟɬɨɞ ɨɬɛɨɪɚ (ɫɟɥɟɤɰɢɢ) ɤɥɨɧɚ ɪɟɰɢɩɢɟɧɬɧɨɣ ɤɥɟɬɤɢ, ɜɨɫɩɪɢɧɹɜɲɟɣ ɝɢɛɪɢɞɧɭɸ ɦɨɥɟɤɭɥɭ ȾɇɄ.

ɋɚɦɵɦɢ ɭɞɨɛɧɵɦɢ ɜɟɤɬɨɪɚɦɢ ɹɜɥɹɸɬɫɹ ɩɥɚɡɦɢɞɵ, ɬɚɤ ɤɚɤ ɨɧɢ, ɜɨɩɟɪɜɵɯ, ɫɩɨɫɨɛɧɵ ɪɟɩɥɢɰɢɪɨɜɚɬɶɫɹ ɧɟɡɚɜɢɫɢɦɨ ɨɬ ɯɪɨɦɨɫɨɦɧɨɣ ȾɇɄ ɛɚɤɬɟɪɢɣ. ȼɨ-ɜɬɨɪɵɯ, ɩɥɚɡɦɢɞɵ ɫɨɞɟɪɠɚɬ ɝɟɧɵ, ɛɥɚɝɨɞɚɪɹ ɤɨɬɨɪɵɦ ɩɨ ɮɟɧɨɬɢɩɭ ɦɨɠɧɨ ɨɬɞɟɥɢɬɶ ɛɚɤɬɟɪɢɢ, ɫɨɞɟɪɠɚɳɢɟ ɩɥɚɡɦɢɞɵ, ɨɬ ɛɚɤɬɟɪɢɣ, ɥɢɲɟɧɧɵɯ ɩɥɚɡɦɢɞ. ɇɚɩɪɢɦɟɪ, R-ɩɥɚɡɦɢɞɵ ɫɨɞɟɪɠɚɬ ɫɬɪɭɤɬɭɪɧɵɟ ɝɟɧɵ, ɨɬɜɟɬɫɬɜɟɧɧɵɟ ɡɚ ɭɫɬɨɣɱɢɜɨɫɬɶ ɤ ɚɧɬɢɛɢɨɬɢɤɚɦ. ɉɪɢ ɜɵɫɟɜɟ ɛɚɤɬɟɪɢɣ, ɫɨɞɟɪɠɚɳɢɯ ɬɚɤɢɟ R-ɩɥɚɡɦɢɞɵ, ɧɚ ɫɪɟɞɭ ɫ ɚɧɬɢɛɢɨɬɢɤɨɦ ɨɧɢ ɛɭɞɭɬ ɪɚɫɬɢ ɢ ɮɨɪɦɢɪɨɜɚɬɶ ɤɨɥɨɧɢɢ, ɛɚɤɬɟɪɢɢ, ɥɢɲɟɧɧɵɟ ɢɯ, ɧɚ ɫɪɟɞɟ ɫ ɚɧɬɢɛɢɨɬɢɤɨɦ ɧɟ ɜɵɪɚɫɬɭɬ.

Ɋɟɡɚɬɶ ɦɨɥɟɤɭɥɵ ȾɇɄ ɧɚ ɮɪɚɝɦɟɧɬɵ ɦɨɠɧɨ ɫ ɩɨɦɨɳɶɸ ɮɟɪɦɟɧɬɨɜ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡ. ɇɟɨɛɯɨɞɢɦɨ ɩɨɞɨɛɪɚɬɶ ɫɩɟɰɢɮɢɱɟɫɤɭɸ ɪɟɫɬɪɢɤɬɚɡɭ, ɤɨɬɨɪɚɹ ɢɦɟɥɚ ɛɵ ɫɚɣɬɵ ɭɡɧɚɜɚɧɢɹ ɧɚ ɞɜɭɯ ɦɨɥɟɤɭɥɚɯ ȾɇɄ (ɩɥɚɡɦɢɞɟ ɢ ȾɇɄ, ɢɡ ɤɨɬɨɪɨɣ ɜɵɪɟɡɚɸɬɫɹ ɩɟɪɟɧɨɫɢɦɵɟ ɝɟɧɵ) ɢ ɪɟɡɚɥɚ ɛɵ ɢɯ ɫ ɨɛɪɚɡɨɜɚɧɢɟɦ ɥɢɩɤɢɯ ɤɨɧɰɨɜ. Ɋɟɫɬɪɢɤɬɚɡɚ ɧɟ ɞɨɥɠɧɚ ɪɟɡɚɬɶ ȾɇɄ ɩɥɚɡɦɢɞɵ ɜ ɨɛɥɚɫɬɢ, ɨɬɜɟɬɫɬɜɟɧɧɨɣ ɡɚ ɪɟɩɥɢɤɚɰɢɸ, ɢ ɜ ɨɛɥɚɫɬɢ ɫɬɪɭɤɬɭɪɧɵɯ ɝɟɧɨɜ, ɞɟɬɟɪɦɢɧɢɪɭɸɳɢɯ ɮɟɧɨɬɢɩ ɩɥɚɡɦɢɞɵ.

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