2.Стерильным шпателем соскоблить эпителий и распределить содержимое соскоба тонким слоем на предметном стекле.

3.До высыхания материала на предметное стекло нанести 1-2 капли гистологического красителя (ацетоорсеина) и накрыть соскоб покровным стеклом. Время окрашивания 5-6 секунд.

4.Чтобы удалить краситель, покровное стекло накрыть кусочком фильтровальной бумаги и двумя большими пальцами умеренно надавить на покровное стекло.

5.Центрировать препарат под малым увеличением. Изучить препарат с помощью иммерсионного объектива.

•При изучении препарата нужно учитывать следующее:

1.клетка должна иметь овальное или округлое, слегка окрашенное ядро;

2.ядерная мембрана должна быть четкой, ненарушенной;

3.ядра не должны перекрывать друг друга;

4.только темноокрашенные тельца, находящиеся в контакте с ядерной мембраной, нужно расценивать как половой хроматин, или тельце Бара;

5.исследуют примерно 100 окрашенных ядер. В норме половой хроматин встречается в 30—40% ядер.

•Записать ход работы в рабочей тетради. Зарисовать эпителиальные клетки слизистой оболочки щеки с половым хроматином и без полового хроматина. На рисунках отметить следующее:

1.эпителиальные клетки;

2.ядро;

3.половой хроматин (тельце Барра).

•Сформулировать выводы лабораторной работы и ответить на следующие вопросы:

1.Что представлено в виде глыбки женского полового хроматина?

2.Почему в клетках мужчин, как правило, тельце Барра отсутствует?

Вопросы для самоконтроля

1.Почему препарат кладётся покровным стеклом вверх, а не вниз?

2.Чему равно фокусное расстояние объективов 8х и 40х?

3.Для чего необходимо знать фокусное расстояние объективов?

4.Почему перед наводкой объектива на резкость, опуская объектив на некоторое расстояние от препарата, мы смотрим сбоку на него, а не в окуляр?

5.Когда и с какой целью можно использовать конденсор?

6.Для чего и с какой целью используется диафрагма?

7.Что такое иммерсионное масло и для чего оно используется?

8.Есть ли предел увеличения светооптических микроскопов?

9.Что такое фокусное «расстояние» объективов?

10.Существует ли зависимость фокусного «расстояния» от разрешающей способности объективов?

11.В чем удобство использования стереоскопических микроскопов?

12.Какое основное правило необходимо соблюдать при работе с микрометрическим винтом?

13.Какое правило необходимо соблюдать при работе с револьвером микроскопа при смене объективов?

14.Студент не зафиксировал объектив в гнезде револьвера. Как это отразится на поле зрения микроскопа?

15.С применения какого объектива необходимо начинать работу с микроскопом?

16.Что означает термин «центровка» препарата?

17.Что означает разрешающая способность объектива?

18.Что такое конфокальная микроскопия?

19.Какие преимущества имеет контрастная микроскопия?

18

Справочник терминов

Аберрация — оптический артефакт, погрешность изображения оптических систем, а. проявляется тем, что оптические изображения в ряде случаев не вполне отчётливы, неточно соответствуют объекту или оказываются окрашенными.

Аберрация сферическая - различие оптических свойств центральной и периферической частей сферической линзы — причина сферических аберраций. Их устраняют апохроматические объективы. Сферическая линза не позволяет одновременно фокусировать изображение по всему полю. Для устранения этого недостатка применяют специальные объективы — планахроматы и планапохроматы. Наилучшим объективом считают планапохромат с высокой числовой апертурой.

Аберрация хроматическая - фокусное расстояние линзы для лучей разной длины волны различно. Поэтому при использовании немонохроматического света формируемое линзой изображение предмета имеет окрашенные края. Хроматические аберрации устраняют ахроматические и апохроматические объективы.

Аденин — пуриновое основание; входит в состав РНК, ДНК нуклеотидов и играет важную роль в метаболизме

Азо́тистые основа́ния - гетероциклические органические соединения, производные пиримидина и пурина, входящие в состав нуклеиновых кислот.

Антипараллельность (antiparallel) цепей ДНК – противоположная направленность двух нитей двойной спирали ДНК; одна нить имеет направление от 5' к 3', другая - от 3' к 5'. Каждая цепь ДНК имеет определенную ориентацию. Один конец несет гидроксильную группу (- ОН), присоединенную к 3'-углероду в сахаре дезоксирибозе, на другом конце цепи находится остаток фосфорной кислоты в 5'-положении сахара. Две комплементарные цепи в молекуле ДНК расположены в противоположных направлениях - антипараллельно: одна нить имеет направление от 5' к 3', другая - от 3' к 5'. При параллельной ориентации напротив 3'-конца одной цепи находился бы З'-конец другой.

Белки гистоновые (гистоны) — небольшие, сильно основные белки, связывающиеся непосредственно с ДНК. Гистоны принимают участие в структурной организации хроматина, нейтрализуя за счет положительных зарядов аминокислотных остатков отрицательно заряженные фосфатные группы ДНК, что делает возможной плотную упаковку ДНК в ядре.

Белки негистоновые - группа высоко гетерогенных белков, включает структурные ядерные белки, множество ферментов и факторов транскрипции, связанных с определенными участками ДНК и осуществляющих регуляцию генной экспрессии и других процессов.

Гетерохроматин – участки хроматина, находящиеся в течение клеточного цикла в конденсированном (компактном) состоянии. Особенностью гетерохроматиновой ДНК является низкая транскрибируемость.

Гуани́н — азотистое основание, аминопроизводное пурина, является составной частью нуклеиновых кислот. В ДНК, при репликациии транскрипции образует три водородных связи с цитозином.

Диафрагма ирисовая - деталь микроскопа, расположенная между зеркалом и конденсором. Она служит для изменения диаметра светового потока, направляемого зеркалом через конденсор на объект, в соответствии с диаметром фронтальной линзы объектива и состоит из тонких металлических пластинок. С помощью рычажка их можно то соединить, полностью закрывая нижнюю линзу конденсора, то развести, увеличивая поток света.

Иммерсионный микроскоп - специальный микроскоп, позволяющий просматривать объекты в иммерсионной жидкости.

20

Теломера – концевая часть плеча хромосомы . Теломеры представляют собой повторяющиеся последовательности ДНК . Повторы теломер состоят из G-богатых единиц длиной 6-8 п.о. Эти последовательности играют важную роль в защите концов хромосом от деградации.

Теломераза — фермент, добавляющий особые повторяющиеся последовательности ДНК к 3'-концу цепи ДНК на участках теломер, которые располагаются на концах хромосом в эукариотических клетках. Теломеры содержат уплотненную ДНК и стабилизируют хромосомы. При каждом делении клетки теломерные участки укорачиваются. Теломераза является обратной транскриптазой, причем с ней связана особая молекула РНК, которая используется в качестве матрицы для обратной транскрипции во время удлинения теломер.

Тимин (5-метилурацил) — производное пиримидина, одно из четырёх азотистых оснований. Входит в состав ДНК, комплементарно связывается с аденином, образует две водородные связи.

Транскрипция — синтез РНК на ДНК-матрице; осуществляется РНК-полимеразой. Трансляция — синтез полипептидной цепи белков, осуществляемый в рибосомах.

Тубус микроскопа - узел, служащий для установки объективов и окуляров на определенном расстоянии друг от друга. Он представляет собой трубку, в верхней части которой находится окуляр или окуляры, а в нижней - устройство для крепления и смены объективов. Обычно это револьвер с несколькими гнездами для быстрой смены объективов различного увеличения. Механическая длина тубуса биологических микроскопов обычно составляет 160мм. В тубусе между объективом и окуляром могут располагаться призмы, изменяющие направление хода лучей и промежуточные линзы, изменяющие окулярное увеличение и оптическую длину тубуса.

состав нуклеотида. В составе нуклеиновых кислот может комплементарно связываться с аденином, образуя две водородных связи.

Фокусное расстояние – это расстояние между линзой объектива и препаратом при котором можно четко видеть изображение предмета.

Хроматин — генетический материал в ядре, образован дезоксирибонуклеопротеином; в фазе между митотическими делениями — гетерохроматин (хорошо различимые конденсированные глыбки) или как эухроматин — диспергированный, плохо или совсем не окрашивающийся материал.

Хромосома – структурный элемент клеточного ядра, содержащий ДНК и белки, различимый в виде образования определенного размера и формы только во время деления клетки. Самоудвоение и закономерное распределение хромосом по дочерним клеткам обеспечивает передачу наследственной информации.

Хромосомы гомологичные – парные хромосомы из диплоидного набор хромосом, одинаковые по структуре и набору генов. Одна из них имеет материнское происхождение, другая – отцовское.

Хромосомы не гомологичные – хромосомы из диплоидного набор хромосом, которые отличаются друг от друга по структуре и набору генов.

Центромера – участок хромосомы, удерживающий вместе две ее нити (хроматиды). Во время деления центромеры направляютдвижение хромосом к полюсам клетки.

Цитозин (2-окси-4-аминопиримидин) – пиримидиновое основание. Присутствует во всех живых клетках в составе нуклеиновых кислот (ДНК и РНК). Входит в состав некоторых коферментов, антибиотиков. Цитозиновые нуклеотиды.— доноры энергии на определенных стадиях биосинтеза липидов. Комплементарно взаимодействует с гуанином, образуются три водородные связи.

Эухроматин – участки хромосом, сохраняющие деспирализованное состояние в покоящемся ядре (в интерфазе) и спирализующиеся при делении клеток (в профазе); содержат большинство генов и потенциально способны к транскрипции. Эухроматин отличается от гетерохроматина меньшим содержанием метилированных оснований и блоков повторяющихся последовательностей ДНК, большим количеством негистоновых белков и ацетилированных молекул гистонов, менее плотной упаковкой хромосомного материала, что, как полагают, особенно важно для активности эухроматина и делает его

22