Таблица 1-3. Возможные проблемы и способы их решения при микроскопировании
Проблема |
при |
Причина |
|
|
|
|
Способ устранения |
|
||
микроскопировании |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Все поле зрения затемнено |
Недостаточен |
световой |
Максимально |
открыть |
||||||
|
|
поток, |
поступающий |
в |
диафрагму, |
|
поднять |
|||
|
|
объектив |
|
|
|
|
конденсор, |
|
развернуть |
|
|
|
|
|
|
|
|
зеркало |
|
вогнутой |
|
|
|
|
|
|
|
|
поверхностью |
к источнику |
||
|
|
|
|
|
|
|
света и, глядя в окуляр, |
|||
|
|
|
|
|
|
|
поворачивать |
зеркало |
до |
|
|
|
|
|
|
|
|
появления |
наиболее яркого |
||
|
|
|
|
|
|
|
освещения |
|
|
|
Часть поля зрения освещена |
Объектив |
|
не |
занял |
Повернуть |
|
револьвер |
с |
||
ярко, часть затемнена |
|
фиксированного положения |
нужным |
объективом |
до |
|||||
|
|
|
|
|
|
|
упора; |
|
фиксирование |
|
|
|
|
|
|
|
|
положения |
сопровождается |
||
|
|
|
|
|
|
|
щелчком |
|
|
|
Микропрепарат виден |
при |
Микропрепарат |
лежит |
Поместить |
микропрепарат |
|||||
малом увеличении, но не |
покровным стеклом |
вниз. |
покровным стеклом вверх |
|||||||
фокусируется при большом |
Толщина |
|
предметного |
|
|
|
|
|||
увеличении |
|
стекла |
не |
позволяет |
|
|
|
|
||
|
|
опустить |
объектив |
|
до |
|
|
|
|
|
|
|
необходимого |
фокусного |
|
|
|
|
|||
|
|
расстояния |
|
|
|
|
|
|
|
|
Микропрепарат виден |
при |
Объект |
или |
его участок |
Центрировать |
препарат: |
||||
малом увеличении, а |
при |
поставлен не в центре поля |
изучаемый |
объект или |
его |
|||||
наведении на резкость |
при |
зрения |
|
|
|
|
участок передвинуть в центр |
|||
большом увеличении объект |
|
|
|
|
|
поля зрения |
|
|
||
исчезает |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
2. Микропрепараты. Особенности строения ядер и ядерных структур в разных клеточных типах
1. Клеточная культура фибробластов
Название клетки произошло от лат. fibra — волокно и греч. blastos — зародыш; т.е. клетка, образующая волокна. При изучении микропрепарата под малым увеличением видны плоские отростчатые клетки различной формы (от веретеновидной до звёздчатой) (рис. 1-6). Ядро крупное, овальное, имеет базофильное (синее) окрашивание. Базофильный краситель синего цвета связывается с кислотами (ДНК и РНК ядра), окрашивая его. При большем увеличении на фоне преимущественно диспергированного хроматина (эухроматин) хорошо заметны 1–2 ядрышка. Строение ядра фибробласта характерно для клетки с интенсивной синтетической активностью, на что указывает присутствие и других органелл. Цитоплазма содержит в большом количестве цистерны гранулярной эндоплазматической сети, хорошо выраженный комплекс Гольджи, многочисленные секреторные гранулы и митохондрии. Фибробласт активно синтезирует белки межклеточного матрикса, например, коллаген для образования коллагеновых волокон.
15
Рис. 1-6. Строение фибробласта (А) и фиброцита (Б). Фибробласт (активная форма клетки) содержит хорошо выраженные органеллы: гранулярную эндоплазматическую сеть, комплекс Гольджи, митохондрии. Крупное овальное ядро занимает центральное положение вдоль продольной оси клетки. Фибробласт образует длинные, ветвящиеся отростки. В фиброците тех же органелл значительно меньше, клетка имеет веретеновидную форму; отростков нет [из: Junqueira L.C., Carneiro J., 1991].
2. Мазок крови человека
В мазке крови хорошо различимы: эритроциты (безъядерные клетки, имеющие форму двояковогнутого диска), ядерные шарообразные лейкоциты (лимфоциты, моноциты, нейтрофилы, эозинофилы, базофилы) и тромбоциты (двояковыпуклые пластинки). При малом увеличении всё поле зрения занимают эритроциты, среди которых встречаются единичные лейкоциты. Для детального изучения клеток крови применяют большое увеличение (рис. 1-7).
Эритроцит. Из-за высокого содержания щелочного белка гемоглобина (Hb) клетка окрашена в розовый цвет кислым красителем (эозинофилия/ацидофилия). Слабое окрашивание центральной части клетки обусловлено формой эритроцита (двояковогнутый диск). Ядро отсутствует.
Лейкоциты
•Лимфоцит. Базофильное ядро сферическое или с небольшой боковой выемкой; преимущественно содержит плотно сконденсированный хроматин. Ядро лимфоцита занимает почти весь объём клетки, так что цитоплазма окружает клетку в виде узкого кольца.
•Нейтрофил. Ядро имеет дольчатое (сегментированное) ядро — 3–5 сегментов, соединённых перемычкой. Базофильные сегменты содержат конденсированный хроматин, расположенный вдоль внутренней ядерной мембраны и эухроматин, занимающий центральную область дольки.
•Моноцит — самая крупная клетка крови. Базофильное ядро подковообразной (бобовидной) формы расположено эксцентрично, имеет пятнистый вид из-за неравномерно распределённого конденсированного и неконденсированного хроматина.
16