2. Бактериологический метод исследования:

1-й этап: обработанный материал в нативном состоянии засевают на питательные среды (Китт-Тароцци, обезжиренное молоко, Вильсон-Блера, агар Цейсслера). Жидкие среды регенерируют (кипятят) и заливают вазелиновым маслом. Чашки выращивают в анаэростате. Посевы просматривают ежедневно в течение 7 дней.

2-й этап - изучение роста на средах: наиболее характерны изменения сред при росте Cl.perfringens. Помутнение и образование пузырьков газа на среде Китт-Тароцци наступает через 6 часов, молоко свертывается через 2-3 часа. К этому же времени наступает почернение с разрывами среды Вильсон-Блера. Другие возбудители указанные среды изменяют позже и менее типично.

На среде Цейсслера Cl.perfringens образуют серые крупные дисковидные колонии с зоной гемолиза. На среде Вильсон-Блера - колонии черного цвета. Из отдельных колоний делают мазки по Граму и их отсевают на среду Китт-Тароцци (для накопления чистой культуры).

Можно выделять культуру и другими методами (метод Фортнера, Вейнберга, трубочки Вейона).

3-й этап - изучение выделенной культуры:

а) мазок по Граму;

б) мазок по Ожешко;

в) проба на подвижность;

г) определение ферментативных свойств (в том числе лецитиназной активности);

д) реакция нейтрализации на белых мышах для определения типа токсина; е) антибиотикограмма.

3. Биологический метод исследования: заражают подкожно морских свинок. Животные погибают при картине экспериментальной газовой гангрены (местный отек с газообразованием, расплавление подкожно-жировой клетчатки). Посевом органов можно выделить культуру.

4. Экспресс-метод диагностики проводится с использованием: а) данных микроскопии препаратов; б) реакции иммунофлюоресценции; в) учета роста на средах с посевом нативного материала через 3-6 часов (для определения Cl.perfringens); г) определения антигена в материале методом встречного иммуноэлектрофореза или иммуноферментным методом.

108. Возбудитель ботулизма.

1. Классификация: надцарство Procaryota, царство Bacteria, раздел Scotobacteria, класс Bacterias, порядок Eubacteriales, гр. V. Палочки, образующие эндоспоры, с. Bacillaceae, р. Clostridium, C. botulinum

2. Морфология: Гр+, палочки, есть перитрихии, образуют споры (вид теннисной ракетки), капсулы нет, подвижны

3. Тип питания: хемоорганотроф, ОАН

4. Биологические свойства:

а) обладает выраженными протеолитическими свойствами

б) размножаются на глюкозо-кровяном агаре, образуют зоны гемолиза

5. АГ структура: токсинный АГ (7 сероваров).

6. Факторы патогенности и патогенез:

1)специфический летальный нейротоксин: из двух субъединиц, одна отвечает за адсорбцию на рецепторах нейронов, другая – за проникновение в них путем эндоцитоза.

Нейротоксин попадает в организм вместе с пищей и вегетативными формами возбудителя  попадает в лимфу  в кровь  разносится по организму  прочно связывается нервными клетками  поражение нервных окончаний и мотонейронов  избирательно воздействует на холинэргические отделы НС прекращение выделения АХ в синаптическую щель  нарушается нервно-мышечной передачи возбуждения

7. Клинические проявления:

Поражение бульбарных нервных центров, нарушение походки, зрения, асфиксия.

8. Иммунитет: постинфекционный отсутствует.

9. Эпидемиология. Источник – кишечник травоядных, рыб, ракообразных. Споры могут быть в воде, почве. ОПЗ – алиментарный. Резистентны к высокой температуре.

10. Профилактика: вакцинопрофилактика не проводится.

11. Лечение: противоботулиническая сыворотка.

12. Диагностика:

Основную роль играют серовары А, В, Е.

Материал для исследования: кровь, рвотные массы, промывные воды желудка, моча, испражнения, подозрительные на заражение пищевые продукты.

Микробиологическая диагностика аналогично для других клостридиозов. Наиболее информативный метод - РН на белых мышах с использованием противоботулинических сывороток. Ставят ее непосредственно с исследуемым материалом, либо с выделенной культурой. Животные, не защищенные сыворотками, погибают при явлениях общей слабости, одышки, порезов и параличей конечностей, западения мышц живота ("осиная талия").

109. Неспорообразующие анаэробы.

Гр+:	Гр-:
1. Peptococcus 2. Bifidobacterium 3. Lactobacterium 4. Actinomyces 5. Propionobacterium	1. Bacteroides 2. Porphyromonas 3. Fusobacterium 4. Prevotella 5. Veilonella

Бактероиды и их роль в патологии человека.

1. Классификация: надцарство Procaryota, царство Bacteria, раздел Scotobacteria, класс Bacterias, порядок Eubacteriales, гр. IV. Облигатно-анаэробные палочки, с. Bacterioidaceae, р. Bacteroides, B. fragilis, B. melaninogenicus, B. gingivalis.

2. Морфология: Г-, палочка, биполярно окрашивается, иногда есть перитрихии и капсула, иногда подвижная

3. Тип питания: хемоорганотроф, ОАН

4. Биологические свойства:

1) обладает сахаролитическими и протеолитическими свойствами

2) размножение стимулируется гемином и витамином К

5. АГ структура: для идентификации не используются.

6. Факторы патогенности и патогенез:

1) антифагоцитарный (капсульный полисахарид)

2) адгезины (пили, белки наружной мембраны)

3) инвазины (нейраминидаза, фибринолизин, гепариназа)

4) -лактамазы - разрушают пенициллин

5) короткоцепочечные ЖК, биогенные амины – нарушают активность макрофагов, лейкоцитов

7. Клинические проявления: перитониты, абсцесс брюшной полости, легких, гнойно-воспалительные процессы другой локализации.

8. Эпидемиология. Обитатели толстой кишки человека.

9. Лечение: АБ широкого спектра действия (производные имидазола)

Принципы диагностики неклостридиальных анаэробных инфекций.

1. Исследуемый материал: отделяемое ран, содержимое абсцессов, трахеобронхиальный аспират и др.

2. Транспортировка в лабораторию в киприце, в специальной транспортной среде. Материал помещают в среду немедленно.

3. Бактериоскопический: микроскопия материала с окраской по Гр.

4. Бактериологический метод: среды кровяные с неомицином и налидиксовой кислотой, Кита-Тароцци, тиогликолевая. Культивируют в анаэростатах, анаэробных камерах при повышенном содержании CO₂.

5. Критерии идентификация:

а) Окраска по Гр и Ожешко для выявления спор

б) Морфология колоний

в) Связь типа колонии с кислородом

г) Предварительная дифференциация по чувствительности к АБ

д) Биохимические тесты

6. Определение чувствительности к АБ (метод разведения в агаре или бульоне и метод бумажных дисков)

110. Кампилобактерии.

1. Классификация: извитые и гибкие кл, порядок Spirochaetales, с. Leptospiraceae, p. Campylobacter, C. jejuni, C. laridis, C. coli, C. fetus.

2. Морфология: Гр-, палочка, спиральная, жгутик на одном или двух полюсах, споронеобразующая, подвижная.

3. Тип питания: хемоорганотроф

4. Биологические свойства:

а) хорошо растет на простых питательных средах

б) не сбраживает углеводы, источник энергии – АК.

5. АГ структура: О-, К- и Н-АГ.

6. Факторы патогенности и патогенез:

а) поверхностные специфические адгезины

б) инвазины (жгутики и муциназа)

в) энтеротоксины (функциональные блокаторы) – нарушает водно-солевой обмен

г) эндотоксин, цитотоксины

Адгезия на энтероцитах  при помощи жгутика повреждает клеточную мембрану  инвазия в кл  бактериемия  высвобождение токсина общая интоксикация  гематогенное обсеменение органов.

7. Клинические проявления: заболевание начинается остро. Появляется лихорадка, симптомы общей интоксикации и синдром гастроэнтерита(тошноту, боли в эпигастральной области, нередко рвота). Стул обильный, жидкий, пенистый, примеси слизи и крови у взрослых обычно не отмечается. Могут развиться симптомы обезвоживания.

8. Иммунитет: ГИО, АТ выраженными протективными свойствами не обладают.

9. Эпидемиология. Источник – больные животные и люди. ОПЗ – алиментарно, возможен контактно-бытовой. Быстро инактивируются при нагревании.

10. Профилактика: вакцинопрофилактики нет

11. Лечение: эритромицин и гентамицин

Хеликобактер.

1. Классификация: извитые и гибкие кл, порядок Spirochaetales, с. Leptospiraceae, p. Campylobacter, C. pyloridis (Helicobacter pylori).

2. Морфология: Гр-, палочка, лофотрихи, споронеобразующая, подвижная.

3. Тип питания: хемоорганотроф.

4. Биологические свойства:

а) растут на сложных питательных средах

б) продуцируют каталазу и оксидазу

в) микроаэрофил, капнофил.

5. АГ структура: О-, К- и Н-АГ.

6. Факторы патогенности и патогенез:

а) уреаза – образование газовой оболочки, защищающей от кишечного сока

б) фосфолипаза – разрушает фосфолипиды

в) цитотоксин – действует на эпителиальные клетки

г) токсин, нарушающий межклеточные контакты

ж) эндотоксин (ЛПС)

з) белки теплового шока – приводит к аутоиммунному воспалению и образованию язв.

Адгезия  пенетрация через слизистую  разрушение слоя слизи и облегчение доступа к слизистой HCl с образованием эрозий  инвазия, разрушение эритроцитов с высвобождением гемина – хемоаттрактанта МБ  выделение уреазы и др. ферментов. Гибель МБ  высвобождение эндотоксина.

7. Клинические проявления: язвы, гастриты, предраковые состояния.

8. Эпидемиология. Представитель нормальной микрофлоры животных. ОПЗ –алиментарно.

9. Профилактика: вакцинопрофилактики нет

10. Классические	Ускоренные
    	Индикация				Идентификация
    	возбудителя	его АГ
    	а) микроскопия (Гр, капсула, подвижность) б) ПЦР в) РА г) РИФ д) проба с бактериофагом е) биопроба на животном со сниженным искусственно иммунитетом		а) РОПГА б) реакция коаглютинации со стафилококковым АТ диагностикумом в) ИФА	Проводится по ускоренному плану, определение МБ – до уровня вида.

    Лечение: полусинтетические пенициллины, аминогликозиды, фторхинолоны.