Примеры контроля исходного уровня знаний

Вид 1. Для каждого вопроса выберите правильный ответ

А) Повышение антикоагулянтной активности крови вызывает:

1) плазмин 3) фактор XIIа

2) гепарин 4) фибриноген

Б) Метгемоглобинемию вызывает:

1) низкое парциальное давление кислорода во вдыхаемом воздухе;

2) отравление угарным газом;

3) отравление окислителями;

4) низкая активность карбоангидридразы.

Вид 2. Для каждого вопроса, пронумерованного цифрой, подберите соответствующий ответ, обозначенный буквенным индексом. Один и тот же ответ может быть использован несколько раз.

А) Нормальное содержание белка в сыворотке крови:

1) новорожденного А. 60-80 г/л

2) ребенка в возрасте 1 год Б. 47-65 г/л

3) взрослого человека В. 65-85 г/л

Б) транспортный белок плазмы крови	транспортирует
трансферрин	А. Гемоглобин
церулоплазмин	Б. Fe2+
альбумин	В. Cu+
транскортин	Г. Билирубин
гаптоглобин	Д. Кортизол

Вид 3. Для каждого вопроса выберите сочетание правильных ответов.

А) Выберите наиболее часто встречающиеся причины возникновения железодефицитных анемий:

1. Систематические кровопотери

2. Беременность

3. Врожденная недостаточность трансферрина

4. Операции на желудочно-кишечном тракте

5. Однообразное питание

Б) Какие ферменты участвуют в реакциях инактивации активных форм кислорода?

1. Глутатионпероксидаза

2. Каталаза

3. Супероксиддисмутаза

4. Глутаматдегидрогеназа

5. Цитохромоксидаза

Вид 4. Для каждого вопроса определите: 1) верно или неверно каждое из приведенных утверждений; 2) если верны оба утверждения, имеется ли между ними причинная связь.

А) Фактор II (протромбин) действует лишь в присутствии Са²⁺, потому что его посттрансляционная модификация в гепатоците осуществляется с участием витамина К.

Б) Креатинкиназа сыворотки крови относится к секреторным ферментам крови, потому что креатинкиназа секретируется в кровь из печени.

Примеры ситуационных задач

Задача 1. В крови больного обнаружены патологические белки, не существующие в нормальных условиях. Как называется это состояние? О каком заболевании свидетельствует появление миеломных белков?

Задача 2.Дикумарол и варфарин являются структурными аналогами витамина К и применяются в клинике как антикоагулянты для профилактики тромбозов. Почему эти лекарства не влияют на свертывание крови in vitro (в пробирке)? При ответе: а) укажите, коферментом какого фермента является витамин К; б) перечислите плазменные факторы свертывания крови, в посттрансляционной модификации которых принимает участие витамин К.

Подготовьте к предстоящему занятию протокол лабораторных работ: выпишите кратко принципы методов и техники их выполнения, показатели нормы, оставляя место для расчетов и выводов.

Самостоятельная работа студентов

Работа № 1. Количественное определение билирубина в сыворотке крови по методу Иендрашека.

Принцип метода. В основе метода Иендрашека лежит реакция Ван ден Берга, описавшего способность билирубина давать розово-фиолетовое окрашивание с диазореактивом Эрлиха. Интенсивность образующейся окраски прямо пропорциональна концентрации билирубина в растворе. Разрушение билирубин-альбуминового комплекса (свободный, или непрямой билирубин) осуществляется кофеиновым реактивом, который одновременно переводит билирубин в растворимое диссоциированное состояние. Интенсивность образующейся окраски измеряется на ФЭКе при зеленом светофильтре (563 нм), а количество билирубина определяется по калибровочному графику.

Ход работы. В 3 пробирки отмерить указанные в таблице реактивы и колориметрировать через 5 - 10 мин. на ФЭКе в кювете 10 мм против контроля при зеленом светофильтре.

По калибровочному графику определить содержание общего и связанного билирубина. Вычитая из уровня общего билирубина количество прямого, рассчитать содержание непрямого (свободного) билирубина. Сопоставить с нормой содержания у здоровых людей и сделать вывод.

Реактивы	Пробирки
	1-я	2-я	3-я
Сыворотка крови	1 мл	1 мл	1 мл
Кофеиновый реактив	3,5 мл	3,5 мл	-
Диазореактив	0,5 мл	-	0,5 мл
Физиологический раствор	-	0,5 мл	3,5 мл
Типы билирубина	общий	контроль	прямой (связанный)

Нормальное содержание билирубина в крови – 8,5 – 20,5 мкмоль/л; 75% общего билирубина составляет непрямой (свободный), 25% - прямой (связанный) билирубин.

Клинико-диагностическое значение определения содержания билирубина в сыворотке крови: определение общего билирубина и его фракций используется для диагностики и дифференциальной диагностики желтух различной этиологии – гемолитической (надпеченочной), паренхиматозной (гепатоцеллюлярной, печеночной) и обтурационной (механической, подпеченочной). При гемолитической желтухе гипербилирубинемия развивается в основном за счет непрямого (свободного) билирубина. При паренхиматозной желтухе происходит деструкция гепатоцитов и нарушается экскреция прямого билирубина в желчные ходы, он попадает в кровь. Кроме того из-за функциональной несостоятельности гепатоциты не способны эффективно захватывать из крови непрямой билирубин и конъюгировать его. При паренхиматзной желтухе наблюдается гипербилирубинемия смешанного типа. При обтурационной желтухе нарушается эвакуация желчи в двенадцатиперстную кишку, что приводит к повышению в крови прямого, а в более поздние сроки болезни и непрямого билирубина.

Работа № 2. Определение щелочного резерва крови титрометрическим методом

Резервная щелочность крови – это количество оснований крови, связанных с углекислотой. По данной методике определяется запас щелочных валентностей в цельной крови, включая и эритроциты.

Принцип метода заключается в связывании щелочей цельной крови соляной кислотой, избыток которой затем оттитровывается до появления в растворе мути, что соответствует изоэлектрической точке белков крови.

Ход работы. К 10 мл 0,01 н раствора соляной кислоты в стаканчике или колбочке для титрования добавить 0,2 мл крови, тщательно перемешать и прозрачную бурого цвета жидкость оттитровать из микробюретки 0,1 м раствором NaOH до помутнения и выпадения хлопьев. Обычно конец реакции наступает резко, от одной капли щелочи при рН 5,0.

Расчет произвести по формуле:

(1 - А)×0,1×1000

щелочной запас крови (мэкв/л) = ――――――――;

0,2

где 1 – это количество мл раствора соляной кислоты, взятого для анализа; А - количество щелочи, израсходованное на титрование; 0,1 – нормальность щелочи; 0,2 - количество мл крови, взятой для анализа.

У здоровых людей нормальное значение рН крови 7,36–7,44. Значения рН, вышедшие за пределы 6,8 и 7,8, несовместимы с жизнью.

Показатели нормы щелочного резерва крови у грудных детей составляет 20 - 24 мэкв/л, у старших детей – 21 - 27 мэкв/л, у взрослого человека – 22 - 29 мэкв/л.

Клинико-диагностическое значение определение щелочного резерва крови: истощение резерва наблюдается при респираторном (нарушение дыхания при заболеваниях дыхательной системы) и метаболическом ацидозе (диабетический, почечный, при кишечных инфекциях, алкогольный ацидоз).

Работа № 3. Определение времени свертывания крови (метод Мас и Магро)

Ход работы. На часовое стекло, покрытое тонким слоем парафина, налить большую каплю вазелинового масла. Произвести укол в мякоть пальца, набрать каплю крови в капиллярную пипетку Сали (20 мм³) и тотчас выдуть её в каплю масла на часовом стекле. Этот момент считается началом исследования. Каждые 2 минуты кровь вновь высасывают в пипетку Сали. Пока кровь не свернулась, она может быть набрана в пипетку. Определение производится при температуре 15-20^о С.

При применении этого метода свертывание крови здорового человека происходит в течение 6-10 минут.

Клинико-диагностическое значение определения времени свертывания крови: удлинение времени свёртывания наблюдается при значительном дефиците плазменных факторов (IX,VIII,XII, II факторов, входящих в протромбиновый компл,кс); наследственных коагулопатиях, заболеваниях печени, лечении гепарином; укорочение – после массивных кровотечений, в послеоперационном и послеродовом периодах, первой стадии (стадии гиперкоагуляции) ДВС-синдрома.

Работа № 4. Определение времени рекальцификации плазмы крови

Для диагностики нарушений свертывания крови широко используется определение времени рекальцификации плазмы, т.е. время образования фибрина в оксалатной или цитратной плазме после добавления к ней хлористого кальция.

Ход работы. К 0,2 мл хлористого кальция в пробирке добавить 0,1 мл физиологического раствора. Смесь выдержить в течение 60 секунд на водяной бане (или термостате) при 37^о С, а затем добавить к ней 0,1 мл испытуемой оксалатной или цитратной плазмы (1 часть консерванта на 4 части крови). Время появления хлопьев фибрина, или сгустка, является временем рекальцификации.

В норме время рекальцификации составляет 1 – 2 мин. Время рекальцификации по своему значению эквивалентно времени свертывания крови.

Эталоны ответов на тесты контроля исходного уровня знаний

Вид 1. А) 2; Б) 3

Вид 2. А) - 1Б, 2А, 3Б; Б) – 1Б, 2В, 3Г, 4Д, 5А

Вид 3. А) 1, 2, 3, 4, 5; Б) 1, 2, 3

Вид 4. А) В (верно, верно, неверно); Б) Е (неверно, неверно, неверно)