6 курс / Эндокринология / Микроэлементы_и_патология_щитовидной_железы_в_Томской_области_Денисова

Микроэлементыипатологиящитовиднойжелезы...

уровнем тиреопатий, до настоящего времени не проводились исследования сопряженности микроэлементного состава внешней среды и патологии щитовидной железы. Кроме того, остается малоизученной связь редкоземельных элементов с развитием патологии щитовидной железы.

62

Глава 3

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Популяционно<статистическое исследование тиреоидной патологии

Для изучения заболеваемости населения Томской области тиреоидной патологией проанализирована предоставленная Томским областным эндокринологическим диспансером (ТОЭД) база данных о больных с тиреоидной патологией, находившихся на учете с 2001 по 2005 гг., включающая в себя 18500 больных (заболеваемость по обращаемости). С целью получения репрезентативных выборок заболевания были объединены в группы:

1)диффузный нетоксический зоб;

2)узловой зоб;

3)хронический аутоиммунный тиреоидит;

4)диффузный токсический зоб;

5)злокачественные новообразования щитовидной железы;

6)приобретенный гипотиреоз;

7)врожденный гипотиреоз;

8)прочие заболевания (острые, подострые тиреоидиты и др.).

Обработка данных осуществлялась в редакторе баз данных Microsoft Access 2000. Были вычислены и оценены интенсивные (количество заболевших на 1000 населения по каждому району области и среднеобластное значение) и структурные (возраст, пол, структура заболеваемости) показатели, а также динамика по годам. Данные о числе жителей районов области за изучаемый период времени получены в территориальном органе федеральной службы государственной статистики по Томской области.

63

Микроэлементыипатологиящитовиднойжелезы...

3.2. Исследование пациентов с патологией щитовидной железы

В исследование по определению химических элементов в ткани щитовидной железы были включены пациенты, оперированные в ОГУЗ Томская ОКБ, ГУ НИИ онкологии СО РАМН г. Томска с 2002 по 2005 гг. по поводу узлового зоба. Критерии включения в исследование:постоянное проживание на территории Томской области (с рождения или приезжие, в течение не менее 20 лет). Критерии исключения из исследования: трудовая деятельность, связанная с профессиональными вредностями химической природы, предшествующее проживание в местах экологического неблагополучия, наличие сопутствующей патологии, длительный прием лекарственных препаратов, не связанных с патологией щитовидной железы. Было исследовано 97 больных. Возраст пациентов колебался от 20 до 75 лет (50±12,1 лет). По полу выборка распределилась следующим образом: 91 (93%) женщин и 6 (7%) мужчин.

Диагностика нозологической формы (узловой коллоидный зоб, аутоиммунный тиреоидит, аденомы, рак) осуществлялась на основании клинико-лабораторных, инструментальных и морфологических критериев. Для постановки диагноза пациентам проводилось ультразвуковое исследование ЩЖ при помощи аппарата "Aloka-1100" с линейным датчиком 7,5 МГц. Объем щитовидной железы определяли по формуле J. Brunn (1981).

Тиреоидный объем = [(Т1 х Ш1 х Д1)+[(Т2 х Ш2 х Д2)] х 0,479. Объем каждой доли щитовидной железы подсчитывали путем умножения толщины (Т), ширины (Ш) и длины (Д) каждой доли с коэффициентом коррекции на эллипсоидное строение доли 0,479. Объем всей щитовидной железы складывали из объемов долей. Он считался увеличенным в том случае, если превышал 18 мл для женщин и 25 мл – для муж-

чин (ВОЗ, 1994).

Лабораторное исследование включало в себя измерение уровня ТТГ (норма 0,3–3,4 мЕД/л), свободного Т4 (норма 10,2–23,2 пмоль/л) и АТ-ТПО (норма до 30 МЕ/мл) в сыво-

64

Материалиметодыисследования

ротке крови иммуноферментным анализом (тест-система "Алькор Био", г. Санкт-Петербург).

3.3. Определение содержания микроэлементов в ткани щитовидной железы

Определение химических элементов проводилось в фрагментах щитовидной железы, представляющих собой послеоперационный материал, пациенты были из разных населенных пунктов Томской области (103 фрагмента). Для контроля использовался трупный материал, взятый у жителей Томской области, погибших от случайных причин, щитовидная железа которых была нормального объема и нормальной структуры. Исследовано 11 желез, полученных в патологоанатомическом отделении ОКБ г. Томска. Гистологическое исследование материала проводилось в патологоанатомических отделениях ОКБ г. Томска и НИИ онкологии СО РАМН.

Фрагменты щитовидной железы, включающие патологические образования, помещались в чистые флаконы, фиксировались в формалине. Регистрировались анкетные данные. Пробы высушивались в муфельной печи при температуре 50 °С до твердого состояния, измельчались до порошка, упаковывались в фольгу навески по 100 мг, которые направлялась для проведения анализа на содержание МЭ.

Для определения содержания химических элементов в ткани щитовидной железы использовался современный высокочувствительный вид анализа – инструментальный нейт- ронно-активационный (ИНАА). Инструментальный нейт- ронно-активационный анализ с облучением тепловыми нейтронами проводился на Томском исследовательском ядерном реакторе ИРТ Т в лаборатории ядерно-геохимических методов исследования кафедры геоэкологии и геохимии Томского политехнического университета (аналитики – с.н.с. Судыко А.Ф., Богутская Л.Ф.). Измерения производились на гамма-спектрометре с германий-литиевым детектором.

Метод ИНАА, реализуемый в лаборатории, используется также для аттестации стандартных образцов состава (СОС)

65

Микроэлементыипатологиящитовиднойжелезы...

Рис. 3.3.1. Сопоставление результатов ИНАА (стандарт МАГАТЭ "Сухое молоко") (мг/кг)

как отечественных, так и зарубежных (МАГАТЭ, Германия, Япония, Индия и др.). ИНАА обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами. В данном методе отсутствует химическая подготовка пробы, что исключает погрешности за счет привноса или удаления элементов вместе с реактивами. В этом методе анализа сигнал снимается с ядер химических элементов, поэтому физическое состояние пробы не влияет на результат. Это позволяет определить широкий спектр элементов в разнообразных биообъектах, в том числе в ткани щитовидной железы. Влияние изменения состава матрицы пробы определяется лишь интерфирирующими и нейтронно-поглощающими элементами. Поэтому в методах нейтронно-активационного анализа с успехом применяется один СОС для различных объектов исследования (Арнаутов Н.В., 1990). Это позволяет одним методом в различных пробах определять в широком диапазоне (от n х 1% до n х 10–5%) содержания химических элементов (табл. 3.3.1).

Преимущества его использования для биологических объектов представлены в работах различных авторов (Кист А.А., 1969, 1987; Бояркина А.П. и др., 1980; Дубинская и др., 1980;Tjoe P.S., 1977; Жук Л.И. и др., 1990; и др.). Он является весьма эффективным для определения в биоматериале редких, редкоземельных и радиоактивных элементов. Достовер-

68

Материалиметодыисследования

Рис. 3.3.2. Сопоставление результатов ИНАА (мг/кг) (стандарт и листья березы)

ность анализа подтверждается многочисленными контрольными определениями на разных средах (например, почва, уголь, сухое молоко (рис. 3.3.1), листья березы (рис. 3.3.2) и др.)

3.4. Сопоставление данных по заболеваемости и микроэлементному составу щитовидной железы с ранее полученными данными других природных сред Томской области

Данные по содержанию химических элементов в волосах

икрови детей взяты из работы Н.В. Барановской (2003). Данные по содержанию йода в почвах районов Томской области

ипоказатели медианы йодурии взяты из работы А.Т. Елизаровой (2005).

Данные по литогеохимическим исследованиям в 11 районах Томской области (Асиновском, Бакчарском, Зырянском, Кожевниковском, Кривошеинском, Чаинском, Молчановском, Колпашевском, Первомайском, Томском, Шегарском)

иисследованию накипи питьевой воды в Томском районе были проведены кафедрой геоэкологии и геохимии ТПУ. Исследо-

69

Микроэлементыипатологиящитовиднойжелезы...

вания почв были проведены как спектральным анализом, так

иметодом ИНАА, для исследования накипи использовался метод ИНАА. Исследования осуществлялись с учетом инструкций, требований к геохимическим и геолого-экологичес- ким исследованиям и ГОСТам ("Принципы... ", 1979; "Инструкция... ", 1983; "Требования... ", 1990; "Методические... ", 1982; ГОСТ 17.4.3.01-83), а также методических наработок коллектива ИМГРЭ, В.А. Алексеенко (Алексеенко В.А., 2000)

идругих.

3.5. Методика обработки информации

Статистическая обработка результатов проводилась методами параметрической и непараметрической статистики. Использовались статистическое сравнение групп по качественным признакам и анализ связи признаков. Непараметрические методы использовались в случаях, если данные не соответствовали нормальному распределению или были порядковыми. Обработка полученных результатов проводилась с помощью пакета программ Statistica 6,0. Диаграммы и графики строились в программе Microsoft Excel, Corel DRAW X3. Данные представлены в виде средней величины и ошибки средней (M±m), минимальных и максимальных значений (min и max) (СергиенкойВ.И., 2001; Вуколов В.А., 2004).

Одной из главных характеристик геохимической антропогенной аномалии является ее интенсивность, которая определяется степенью накопления элемента-загрязнителя по сравнению с природным фоном. Согласно методике, изложенной Ю.Е. Саетом (1990), рассчитывались некоторые количественные характеристики природных сред. Показателем уровня аномальности содержаний элементов является коэффициент концентрации (Кс), который рассчитывался как отношение содержания элемента в природной среде (С) к его фоновому содержанию (Кф). В качестве фона использовались уровни накопления химических элементов в контроле.

После рассчета коэффициента концентрации каждая выборка представлялась в виде набора относительных характе-

70