1.2. Обнаружение формальдегида
В наружную камеру(4) прибора для микродиффузии вносят 3 мл крови или мочи, или 1г гомогената тканей. Затем в ту же камеру вносят 3-4 капли 10% раствора серной кислоты. Во внутреннюю камеру прибора(3) вносят 3,3 мл 0,15 м раствора гидросульфита или сульфита натрия. Прибор плотно закрывают крышкой (5) и оставляют на 4 ч при комнатной температуре. После этого жидкость, находящуюся во внутренней камере прибора, исследуют на наличие формальдегида.
Из внутренней камеры прибора берут 1 мл жидкости, вносят в пробирку, и прибавляют 9 мл воды. Пробирку охлаждают ледяной водой, прибавляют 0,2 мл свежеприготовленного 0,5% раствора хромотроповой кислоты и 4 мл концентрированной серной кислоты. Жидкость хорошо взбалтывают и нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин. А затем охлаждают. О наличии формальдегида в исследуемой пробе свидетельствует появление розовой или фиолетовой окраски.
1.3. Обнаружение ацетона
В наружную камеру прибора для микродиффузии вносят 3 мл
крови или мочи, или 1г гомогената тканей. Затем в ту же камеру вносят 3-4 капли 10% раствора серной кислоты. Во внутреннюю камеру прибора вносят 3,3 мл 0,15 м раствора гидросульфита или сульфита натрия. Прибор плотно закрывают крышкой и оставляют на 4 ч при комнатной температуре.
После окончания микродиффузии из внутренней камеры прибора берут 1 мл жидкости и переносят её в пробирку, в которую прибавляют 9мл воды,4мл 40% раствора гидроксида натрия,1мл 20% свежеприготовленного раствора салицилового альдегида в этиловом спирте. Пробирку в течение трёх минут нагревают на водяной бане (при 50-60 о С), а затем охлаждают до комнатной температуры. При наличии ацетона в пробе появляется красная окраска.
1.4. Обнаружение фенолов
В наружную камеру прибора для микродиффузии вносят 2-4 мл крови или мочи, или же 1г гомогената ткани. Затем в ту же камеру вносят 3-4 капли 10% раствора серной кислоты. Во внутреннюю камеру прибора вносят 3,3 мл 0,1 н. раствора гидроксида натрия. Прибор плотно закрывают крышкой и оставляют на 3-4 часа при комнатной температуре. Затем из внутренней камеры берут 1 мл жидкости, к которой прибавляют 2-3 мл 10% раствора гидроксида натрия и 0,5 мл фенолового реактива Фолина –Чиокальто, разбавленного водой (1:3).При наличии фенолов появляется синяя окраска.
Раздел 2. Изолирование «летучих» ядов дистилляцией с водяным паром
1. Проводят наружный осмотр исследуемого объекта: внешний вид, запах, цвет, вес, проверка рН по универсальному индикатору, проверяют целостность упаковки.
2. Навеску исследуемого объекта (20,0) измельчают, смешивают с дистиллированной водой до густоты кашицы и помещают в круглодонную колбу (2) с таким расчетом, чтобы колба была заполнена не более чем на 1/3 ее объема. Колбу с объектом закрепляют в штативе, предварительно обернув полоской бумаги ее горло, глубоко погружают в холодную водяную баню (3) и закрывают пробкой так, чтобы конец стеклянной трубки, вводящей пар, доходил почти до дна колбы. Когда прибор подготовлен (все его части, за исключением парообразователя, соединены), парообразователь (1) нагревают, доводя воду почти до кипения. Затем объект подкисляют щавелевой кислотой до рН=2-2,5 по универсальному индикатору и быстро закрывают пробкой. После этого парообразователь присоединяют к колбе с объектом и продолжают нагревать сначала парообразователь, а затем и водяную баню, в которой находится колба с объектом исследования. Дистилляция проводится по возможности медленно, так, чтобы можно было считать капли в приемнике. Это достигается регулированием пламени горелок.
Первую порцию дистиллята собирают в количестве 3 мл в 2 мл 5% раствор едкой щелочи, для чего конец форштосса холодильника (4) вводят в приемник (5) таким образом, чтобы он был погружен в щелочь, находящуюся в нем. Второй и третий дистилляты собирают в приемник без щелочи в количестве 25 мл каждый.
По окончании перегонки весь первый дистиллят исследуют на наличие синильной кислоты, остальные дистилляты на другие токсикологически важные «летучие» яды. В процессе исследования дистилляты хранят в закрытых пробками колбах.
При необходимости проведения количественного определения «летучего» яда отгонку дистиллята ведут до полного его изолирования из биологического материала, что узнается по получению отрицательного результата качественных реакций на это вещество (при исследовании последней порции дистиллята).