4 курс / Оториноларингология / Иммуноцитологические_исследования_в_оториноларингологии_Арефьева
.pdfв клетках у больных риносинуситом, выявлено увеличение индекса де-
струкции Нф (ПЗЛ – 0,84±0,03; ХГРС – 0,93±0,02, р<0,05; ПРС –
0,94±0,02, р<0,05) за счет увеличения числа клеток I – II степени деструкции.
Также отмечено снижение индекса цитолиза Нф и клеток ПЭ [ПЗЛ – ИЦКнф=0,19±0,03, ИЦКпэ=0,06±0,01; ОГРС – ИЦКпф=0,07±0,02 (р<0,01),
ИЦКпэ=0,02±0,01 (р<0,01); ХГРС – ИЦКнф=0,10±0,01 (р<0,01),
ИЦКпэ=0,03±0,01 (р<0,05)] за счет уменьшения числа клеток IV степени де-
струкции.
У больных риносинуситом Нф с поверхности лакун НМ представлены на 90 и более процентов деструктированными клетками (больше всего кле-
ток 1 степени деструкции). Эти показатели выше, чем в контрольной группе, особенно у больных ХГРС (р<0,05) и ПРС (р<0,01).
Таким образом, проведенные исследования показали, что в имму-
ноцитограммах с поверхности лакун небных миндалин во всех группах боль-
ных риносинуситом в сравнении с группой практически здоровых лиц име-
лись изменения, которые проявились снижением доли лимфоцитов у боль-
ных острой гнойной и полипозной формами заболевания и увеличе-
нием доли нейтрофилов у больных гнойно-полипозным риносинуситом.
Практически 90% нейтрофилов находились в стадии деструкции.
100
12. СОПОСТАВЛЕНИЕ КЛЕТОЧНОГО СОСТАВА С РАЗНЫХ
УЧАСТКОВ СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК ВЕРХНИХ
ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ
При сопоставлении клеточного состава с разных участков слизистых оболочек было отмечено, что в очаге воспаления (околоносовые пазухи) доля Нф самая высокая (80–90%) при всех формах риносинусита. У больных с гнойными формами заболевания в иммунориноцитограммах со слизистой оболочки носа Нф находится чуть меньше (60–70%), однако достоверно выше, чем в контрольной группе. На поверхности лакун НМ содержание Нф в 2–3 раза меньше, чем в очаге воспаления и на слизистой оболочке носа.
Таким образом, у больных с гнойными формами заболевания наблюда-
ется закономерность, проявляющаяся в снижении доли нейтрофилов на сли-
зистых верхних дыхательных путей в зависимости от отдаленности от очага воспаления.
Сопоставление коэффициентов деструкции нейтрофилов, находящихся на разных участках слизистых оболочек верхних дыхательных путей, пока-
зало, что средние значения показателей деструкции Нф в промывных жид-
костях были достоверно ниже аналогичных со слизистой оболочки носа и лакун небных миндалин. Это свидетельствует о преобладании клеток I и II
степени деструкции, снижении содержания клеток III и IV степени деструк-
ции в очаге воспаления.
Индекс деструкции Нф (ИДКнф – преобладание разрушенных клеток над целыми) был самым высоким у Нф лакун НМ при всех формах заболевания. Он отличался от ИДКнф промывных жидкостей и слизистой оболочки носа у больных ОГРС с достоверностью р<0,01 и р<0,05; у больных ХГРС – с достоверностью р<0,001 и р<0,001; у больных ПРС – с достоверностью р<0,01 и р<0,001; у больных ГПРС – с достоверностью р<0,01 и р<0,001, что свидетельствовало о наличии более выраженных процессов деструкции.
Индекс цитолиза Нф свидетельствовал о незначительных отличиях при
101
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
хронических формах заболевания и увеличения числа клеток с IV степенью деструкции у больных острой формой заболевания, что позволяет пред-
полагать наличие более неблагоприятных факторов, способствующих разви-
тию заболевания.
Таким образом, изучение клеточных факторов защиты слизистых обо-
лочек носа выявило активное участие в воспалительном процессе эф-
фекторных клеток – фагоцитов нейтрофилов. Характерными особенно-
стями воспалительного процесса явились преобладание клеток с начальной степенью деструкции и малое содержание полностью разрушенных клеток.
При остром и хроническом гнойном риносинуситах в воспалительной ре-
акции участвовали лимфоциты. Эозинофилы в небольшом количестве присутствовали у больных с хроническим гнойным процессом. У больных с полипозным риносинуситом иммуноцитограммы отличались эозинофилией.
В зависимости от формы риносинусита в лакунах небных миндалин клеточ-
ный состав менялся. У больных с острым гнойным процессом и полипозным процессом было меньше Лф, у больных с хроническим гнойным риноси-
нуситом возрастало число нейтрофилов.
Все изложенное свидетельствует об активном вовлечении клеточных факторов защиты в воспалительный процесс.
102
13. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ НЕЙТРОФИЛОВ
СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК ВЕРХНИХ ДЫХАТЕЛЬНЫХ
ПУТЕЙ ПО ДАННЫМ ИММУНОЦИТОГРАММ
В ходе исследования по данным иммуноцитограмм проводилось изуче-
ние фагоцитарной способности Нф по отношению к аутофлоре, находящейся на слизистых оболочках верхних дыхательных путей.
В сравнении с практически здоровыми лицами во всех группах боль-
ных отмечались снижение и тенденция к снижению показателей фагоци-
тоза аутофлоры на слизистых оболочках носа [ПЗЛ – (27,00±4,51)%; ОГРС –
(9,77±3,15)%, р<0,05; ХГРС – (16,41±2,39)%, р>0,05; ПРС – (15,25±7,74)%,
р>0,05; ГПРС – (9,88±2,33)%, р<0,05]. При этом показатели фагоцитоза аутофлоры нейтрофилами очага воспаления практически не отличались от соответствующего показателя на слизистой оболочке носа [ОГРС –
(12,50±3,07)%, р>0,05; ХГРС – (19,82±2,76)%, р>0,05; ПРС – (9,60±4,87)%,
р>0,05; ГПРС – (16,18±4,53)%, р>0,05].
Фагоцитарная активность Нф из лакун небных миндалин по отношению к аутофлоре практически не отличалась от данных здоровых лиц и значения показателей были значительно выше соответствующих показателей на сли-
зистых оболочках носа (ПЗЛ – (29,77±3,27)%; ОГРС – (31,16±2,71)%,
р>0,05; ХГРС – (20,80±8,25)%, р>0,05; ПРС – (35,53±6,55)%, р>0,05; ГПРС –
(33,05±4,51)%, р>0,05). Отличительной особенностью группы ХГРС явилась относительно невысокая фагоцитарная активность клеток на всех слизистых оболочках верхних дыхательных путей.
Таким образом, фагоцитарная активность Нф слизистой оболочки носа по отношению к аутофлоре у больных ОГРС и ГПРС резко снижена по сравнению с контрольной группой. Имелась тенденция к снижению этого показателя у Нф промывных жидкостей, в то время как фагоцитарная активность Нф с поверхности лакун НМ была в пределах нормы.
В ходе изучения цитограмм было отмечено, что микроорганизмы
103
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
(аутофлора) содержались не только в целых Нф, но и в деструктированных (I– IV степени деструкции). То есть в силу определенных причин не все Нф могли полноценно переваривать бактерии. Некоторые из них погибали, не завершив свою функцию, при этом микроорганизмы выходили из разрушенной клетки в межклеточное пространство. Изучение этого явления выразилось в виде опре-
деления процента деструктированных Нф, содержащих в себе целые микро-
организмы. Этот показатель (процент деструктированных нейтрофилов, со-
держащих в себе микроорганизмы) мы относим к числу косвенных при-
знаков нарушения переваривающей способности нейтрофилов. Данные, полу-
ченные в ходе его изучения, указаны в таблице 7.
Таблица 7
Уровень деструктированных нейтрофилов, содержащих в себе объект фагоцитоза, по данным иммуноцитограмм больных риносинуситом
Показа- |
Кон- |
|
Формы риносинусита |
|
|
тели |
троль- |
Острая |
Хроничес |
Полипозная |
Гнойно- |
|
ная |
гнойная с |
кая гнойная |
(п=11) |
полипозная |
|
группа |
затяжным |
(п=28) |
|
(п=15) |
|
|
течением |
|
|
|
|
|
(п=9) |
|
|
|
Деструкти- |
33,50±5,45 |
65,00±6,68** |
68,04±3,86*** |
67,18±7,56** |
67,80±4,90*** |
рованные |
|
|
|
|
|
Нф со сли- |
п=37 |
|
|
|
|
зистых |
|
|
|
|
|
оболочек |
|
|
|
|
|
носа, % |
|
|
|
|
|
Деструкти- |
19,14±4,88 |
58,25±2,91** |
58,46±3,08*** |
– |
56,27±5,41*** |
рованные |
|
* |
|
|
|
Нф про- |
п=10 |
|
|
|
|
мывных |
|
|
|
|
|
жидкостей |
|
|
|
|
|
из пазух, % |
|
|
|
|
|
Примечание. Достоверность отличия значений показателей от контрольной группы: **р<0,01, ***р<0,001;
Показатель деструктированных нейтрофилов, содержащих в себе целые микроорганизмы, со слизистой оболочки носа у больных риносинуситом сравнивали с одноименным показателем у практически здоровых лиц. В очаге воспаления (промывных жидкостях) сравнение исходных показателей
104
нейтрофилов проводилось с показателем в стадии клинического выздо-
ровления у лиц с отличным результатом лечения.
Как на слизистых оболочках носа, так и в промывных жидкостях у больных риносинуситом показатель был достоверно выше, чем в контроль-
ной группе.
Таким образом, оценка показателя, характеризующего перевариваю-
щую способность нейтрофилов предложенным нами методом, показала сни-
жение переваривающей способности фагоцитов. Значения фагоцитарной ак-
тивности нейтрофилов по отношению к микроорганизмам и показатели неза-
вершенного фагоцитоза у больных риносинуситом свидетельствовали о сни-
жении функциональных возможностей нейтрофилов.
Предлагаются данные иммунориноцитограмм, полученные авторами при обследовании практически здоровых лиц (п=60), проживающих в Баш-
кортостане, в возрасте от 20 до 60 лет с расчетом доверительных границ сред-
ней величины в генеральной совокупности (табл. 8, 9). Доверительные гра-
ницы средних величин в генеральной совокупности вычисляли по формуле Мген.= Мвыб .± m • t, где t=3 (вероятность р=99,7%).
Таблица 8
Состояние функциональной активности нейтрофилов по данным иммунориноцитограмм
Показатели |
М±m |
Нормы |
|
|
|
Фагоцитоз аутофлоры на слизистых |
19,73±2,33 |
13 – 27 |
оболочках носа, % |
|
|
|
|
|
Показатель незавершенного фагоцитоза, % |
33,50±5,45 |
17 – 50 |
|
|
|
Показатель незавершенного фагоцитоза |
19,14±4,88 |
4 – 34 |
промывных жидкостей у больных риносинуси- |
|
|
том в стадии клинического выздоровления, % |
|
|
|
|
|
105
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
Таблица 9
Показатели иммунориноцитограмм практически здоровых лиц, проживающих в Башкортостане (п=60)
Показатели |
М±м |
Нормы |
|
Нейтрофилы, % |
51,4±2,91 |
46 |
– 57 |
Нейтрофилы, абс. ч. |
58,46±6,90 |
45 |
– 72 |
Лимфоциты, % |
0,54±0,10 |
0 |
– 1 |
Лимфоциты, абс. ч. |
0,76±0,16 |
0 |
– 1 |
Макрофаги, % |
0,28±0,07 |
0 |
– 1 |
Макрофаги, абс. ч. |
0,38±0,09 |
0 |
– 1 |
Эозинофилы, % |
0,14±0,05 |
0 |
– 1 |
Эозинофилы, абс. ч. |
0,18±0,06 |
0 |
– 1 |
Цилиндрический эпителий, % |
27,51±2,60 |
22 |
– 33 |
Цилиндрический эпителий, абс. ч. |
26,62±3,22 |
20 |
– 33 |
Плоский эпителий, % |
4,09±0,50 |
3 |
– 5 |
Плоский эпителий, абс. ч. |
4,10±0,70 |
3 |
– 6 |
Цитоплазма плоского эпителия, % |
10,80±1,83 |
7 – 15 |
|
Цитоплазма плоского эпителия, абс. ч |
7,95±1,45 |
5 – 11 |
|
СПД нейтрофилов |
2,29±0,103 |
1,98 |
– 2,60 |
ИДК нейтрофилов |
0,81 ±0,02 |
0,77 |
– 0,85 |
ИЦК нейтрофилов |
0,24±0,02 |
0,20 |
– 0,28 |
СПД цилиндрического эпителия |
1,53±0,05 |
1,43 |
– 1,63 |
ИДК цилиндрического эпителия |
0,92±0,01 |
0,90 |
– 0,94 |
ИЦК цилиндрического эпителия |
0,06±0,01 |
0,04 |
– 0,08 |
Процент метаплазии |
30,28±2,61 |
25,06 |
– 35,50 |
Индекс кератинизации |
0,23±0,03 |
0,17 |
– 0,29 |
Индекс модуляции |
0,05±0,01 |
0,027 |
– 0,067 |
Фагоцитоз микроорганизмов, % |
19,73±2,33 |
15 |
– 25 |
Цил. эпителий с ресничками, % |
3,24±0,92 |
1,40 |
– 5,08 |
Цитоз мазка |
116,50±8,69 |
до 150 |
|
|
|
|
|
106
14. ИММУНОРИНОЦИТОГРАММА У НОВОРОЖДЕННЫХ
Известно, что ребенок при рождении встречается с повышенной ан-
тигенной респираторной нагрузкой. Одной из первых на воздействие фак-
торов окружающей среды реагирует слизистая оболочка носа (СОН), кото-
рая осуществляет защитно-барьерную функцию. Начинает меняться струк-
тура слизистой оболочки носа и, соответственно, её защитные функции,
поэтому изучение показателей местного иммунитета является весьма пер-
спективным для оценки адаптационного реагирования иммунной системы СОН у новорожденных.
Важным показателем иммуноцитограмм является цитоз, характери-
зующий абсолютное число клеток в мазке. При сравнении со взрослыми
(93,07±9,09 клеток) в группе новорожденных детей в первые дни жизни наблюдается тенденция к повышению содержания клеточных элементов на поверхности СОН (до 197,57±40,49 клеток, р>0,05), количество которых значимо увеличивается в возрасте один месяц (262,11±46,67, р>0,05) и ста-
новится значительно выше, чем у взрослых лиц (р<0,05).
Клеточный состав, как и у взрослых, представлен лейкоцитами
(нейтрофилами, лимфоцитами, эозинофилами, лимфоцитами) и эпителио-
цитами (клетками цилиндрического эпителия, плоского эпителия, цито-
плазмой плоского эпителия – чешуйками), однако их процентное соотно-
шение отличается.
Если у практически здоровых взрослых лиц клетки представлены в большей степени нейтрофилами – 46,86±3,86%, цилиндрическим эпите-
лием – 33,14±3,89% и цитоплазмой плоского эпителия – 15,03±2,92%. То у новорожденных детей в первые дни жизни основные популяции клеток представлены в большей степени цитоплазмой плоского эпителия –
44,05±7,28% (р<0,01), нейтрофилами – 34,62±7,02% и клетками цилиндри-
ческого (11,86±2,45%, р<0,001) и плоского (9,10±1,69%, р<0,01) эпителия.
107
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
У детей в возрасте одного месяца цитологические показатели харак-
теризуются уменьшением доли нейтрофилов до 6,11±3,76% (р<0,01) и кле-
ток цилиндрического эпителия до 3,28±0,915% (р<0,01), увеличением доли клеток плоского эпителия (16,56±3,90%, р>0,05) и значительное нараста-
ние доли цитоплазмы плоского эпителия до 73,33±5,31% (р<0,01), что сви-
детельствует о выраженной десквамации малофункциональных клеток эпителия с последующим формированием мерцательного эпителия (Зноби-
щева М.И. с соавт., 2004; 2005).
При изучении функциональной активности нейтрофилов СОН пока-
зано, что у новорожденных первых дней жизни клетки, несмотря на их по-
вышенное количество, функционально менее активны, чем у взрослых.
Так, фагоцитоз нейтрофилами аутофлоры у новорожденных составляет всего 13,78±3,99%, тогда как у взрослых – 27,00±4,51% (р<0,05), показа-
тель незавершенного фагоцитоза у детей с формированием внеклеточных нейтрофильных ловушек составляет 55,85±6,92% по сравнению со взрос-
лыми – 33,50±5,45% (р>0,05). Однако уже к концу первого месяца жизни функциональная активность нейтрофилов, как поглотительная, так и пере-
варивающая, возрастает: фагоцитарная активность увеличивается до
43,40±11,35% (р<0,05), показатель незавершенного фагоцитоза имеет вы-
раженную тенденцию к снижению до 37,5±10,01% (р>0,05) (Кильсенба-
ева Ф.А. с соавт., 2004; 2005). Полученные данные представлены на рис.79.
108
Рис. 79. Динамика формирования клеточного (НФ) звена местного иммунитета слизистой оболочки носа у новорожденных
Таким образом, вышесказанное свидетельствует о наличии особен-
ностей адаптационных механизмов местного иммунного ответа СОН, обу-
словленного возрастными периодами. Для новорожденных характерно по-
вышение цитоза, за счет активного слущивания со слизистой оболочки носа нефункциональных эпителиальных клеток (плоских и чешуек) и акти-
вацией факторов, направленных на элиминацию микробных агентов (вы-
сокой функциональной активности нейтрофилов, не уступающих взрос-
лым).
109
Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/