2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Микробиология от Насти

С любовью от А.Н.Лукановой 206 пед! Успехов!

Если хотите поддержать автора и обеспечить запасом корвалола: Сбер 40817810211002648925 Луканова Анастасия Николаевна Бик: 041806647

Микробиология экзамен по билетам 2023 Билет 1

1. Микробиология как наука. Цель и задачи медицинской микробиологии. Понятие об общей и частной, клинической и санитарной медицинской микробиологии. (1)

Микробиология — наука о микробах, точнее, наука о строении, жизнедеятельности и экологии микробов — мельчайших форм жизни, не видимых невооруженным глазом.

Медицинская микробиология — наука о патогенных и сингенных для человека микроорганизмах, их взаимодействии между собой и с окружающей средой. Она изучает роль микроорганизмов в развитии инфекционных заболеваний человека:

–морфологию, физиологию, экологию, молекулярногенетические и биологические свойства микроорганизмов;

–этиологию и патогенез инфекционных заболеваний;

–разрабатывает методы диагностики, а также средства и способы специфической терапии и профилактики инфекционных заболеваний.

Общая микробиология изучает закономерности строения и жизнедеятельности, генетику микроорганизмов, взаимоотношение их с окружающей средой.

Частная микробиология изучает отдельных представителей микромира.

Клиническая микробиология изучает роль УПМ в развитии заболеваний человека, разрабатывает методы их диагностики, методы контроля за нозокомиальными инфекциями, осуществляет мониторинг резистентности УПМ к антибиотикам, антисептикам, дезинфектантам.

Санитарная микробиология изучает микрофлору окружающей среды, влияние микрофлоры на здоровье человека, разрабатывает мероприятия по предупреждению неблагоприятного воздействия микроорганизмов на организм человека.

2. Механизмы и пути передачи инфекции. (41)

Источник инфекции —

инфицированный организм человека или животного, в котором возбудитель живет, размножается, накапливается и выделяется во внешнюю среду. При сапронозах источником инфекции может быть сама внешняя среда.

Механизм передачи — процесс перемещения возбудителя из зараженного организма в восприимчивый.

Фазы (стадии) механизма передачи:

–выделение возбудителя из организма хозяина во внешнюю среду;

–пребывание возбудителя на объектах внешней среды;

–внедрение возбудителя в восприимчивый организм.

1

Факторы передачи — элементы внешней среды, обеспечивающие перенос возбудителя из одного организма в другой (вода, пища, воздух, живые членистоногие, предметы окружающей обстановки). Пути передачи — элементы внешней среды, обеспечивающие попадание возбудителя из одного организма в другой в определенных внешних условиях.

3. Возбудители брюшного тифа и паратифов. Таксономия и биологическая характеристика. Эпидемиология и патогенез заболеваний. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. (99)

Брюшной тиф и паратиф А и В– тифопаратифозные заболевания.

Брюшной тиф - острое антропонозное инфекционное заболевание с фекальнооральным механизмом передачи. Поражает лимфатический аппарат кишечника с бактериемией. Клинически проявляется выраженной интоксикацией с лихорадкой.

Возбудителем брюшного тифа является S. Typhi - подвижная грамотрицательная палочка с множеством жгутиков.

Возбудителями паратифов являются S. Paratyphi А.

Характеристика:

1)Возбудители брюшного тифа (Salmonella typhi) и паратифов А и В (Salmonella paratyphi A et B) относятся к семейству кишечных бактерий ( Enterobacteriaceae ), роду Salmonella.

2)Спор и капсул не образуют.

3)Является факультативным анаэробом.

4)Хорошо растет на простых питательных средах, лучше – на содержащих желчь.

5)При разрушении выделяется сильный эндотоксин

6) В пищевых продуктах (молоко, сметана, творог, мясной фарш, заливные блюда, салаты) размножаются.

8)Бактерии хорошо переносят низкие температуры, при нагревании до 60 0 погибают через 30 мин., до 100 0 – почти мгновенно.

9)Дезинфицирующие средства в обычных концентрациях убивают возбудителя в течении нескольких минут

10)отсутствие газообразования при ферментации S. Typhi

11)неспособность S. Paratyphi A продуцировать сероводород

Эпидемиология. Брюшной тиф и паратиф А — антропонозные инфекции; источником заболевания являются больные люди и бактерионосители.

Источником паратифа В могут быть также сельскохозяйственные животные.

Механизм заражения фекально-оральный. Путь передачи - алиментарный, контактный и водный. Заболевание включает в себя пять фаз.

1.Первая фаза: происходит внедрение возбудителя в организм, прикрепление его к рецепторам мембран энтероцитов и проникает внутрь клеток.

2.Вторая фаза – первичной локализации: сальмонеллы проникновение в лимфатический аппарат тонкого кишечника, размножаются в макрофагах; это сопровождается гибелью микроорганизмов и выделением эндотоксина, который попадает в кровь и вызывает эндотоксинемию.

3.Третья фаза – бактериемии: возбудитель прорывает лимфатический барьер и попадает в кровь, распространяясь по всем паренхиматозным органам (начало болезни).

4.Четвертая фаза: в паренхиматозных органах возникают брюшнотифозные гранулемы.

5.Пятая фаза : образуются язвы на слизистой оболочке.

Патогенез. Возбудители попадают в организм через рот, достигают тонкой кишки, где в ее лимфатических образованиях размножаются и затем попадают в кровь (стадия бактериемии). С током крови они разносятся по всему организму, внедряясь в паренхиматозные органы (селезенку, печень, почки, костный мозг). При гибели бактерий освобождается эндотоксин, вызывающий интоксикацию. Из желчного пузыря, где С. могут длительно сохраняться, они вновь попадают в те же лимфатические образования тонкой кишки. В результате повторного поступления С. может развиться аллергическая реакция, проявляющаяся в виде воспаления, а затем некроза лимфатических образований. Сальмонеллы выводятся из организма с мочой и калом.

Клиника. Клиническая картина брюшного тифа и паратифов характеризуется циклическим течением и проявляется лихорадкой, интоксикацией, появления слабости, утомляемости. Инкубационный период составляет 12 дней. Очень тяжелыми осложнениями являются прободение стенки кишки, перитонит, кишечное кровотечение, возникающие в результате некроза лимфатических образований тонкой кишки.

2

Методы лабораторной диагностики брюшного тифа и паратифов А и В.

Диагностика тифопаратифозных заболеваний:

1)в фазу бактериемии – кровь на гемокультуру (РПГА), если есть сыпь – соскоб с розеол;

2)в фазу реконвалесценции – бактериологическое исследование фекалий, мочи, желчи;

3)для выявления носительства – серологическое исследование.

Забор крови для получения гемокультуры

1. Кровь исследуют в начале озноба. 5-10 мл.

2. Посев в соотношении 1:10 в желчный бульон или (Эндо, Плоскирева, Мак-Конки).

3. Выделенную культуру возбудителя идентифицируют по биохимическим свойствам и антигенной структуре, а выделенную культуру S. Typhi типируют Vi-фагами для определения источника инфекции.

Для получения копрокультуры у больных забирают испражнения:

1.Посев из жидкой части испражнений.

2.Посев фекалий на среды обогащения и плотные. Одну каплю материала, которую засевают на дифференциально диагностические среды для выделения сальмонелл (агар Плоскирева, висмутсульфитный агар).

Серологическая диагностика брюшного тифа и паратифов

*Реакция Видаля (развернутая РА с О- и Н-антигенами);

*РНГА с эритроцитарными О-, Н-, Vi-диагностикумами;

*ИФА;

*РИФ С 8-го дня заболевания в крови у больных брюшным тифом можно обнаружить агглютинины. Для постановки реакции агглютинации необходимо иметь сыворотку больного и диагностикумы – взвеси убитых бактерий брюшного тифа, паратифы А и В (реакция Видаля).

1) У больного из вены берут в пробирку 1-2 мл крови.

2) Готовят три ряда разведений: 1:100, 1:200, 1:400, 1:600 каждое в объеме 1 мл.

3) Затем в пробирки с разведенной сывороткой добавляют по 1-2 капле диагностикумов тифа и паратифа А и В. Для контроля реакции в конце каждого ряда помещают пробирку, в которой смешивают по 1 мл физиологического раствора и по 1-2 капле соответствующих диагностикумов. 4) Пробирки ставят на 2 часа в термостат.

Реакция считается положительной при наличии 46 агглютинации в разведении сыворотки не менее чем

1:200.

Лечение: Антибиотики, химиотерапевтические препараты.

Специфическая профилактика. Брюшнотифозную сорбированную и брюшнотифозную спиртовую, обогащенную Vi-антигеном вакцины. Проводят этиотропную антибиотикотерапию. Неспецифическая профилактика: ранняя диагностика и изоляция больных, дезинфекция в очаге инфекции, выявление бактерионосителей, соблюдение санитарного режима в детских учреждениях, предприятиях питания, санитарно-бактериологический контроль за работой систем централизованного и нецентрализованного водоснабжения.

4. Методы микроскопии. (73)

1)Световая микроскопия

2)Иммерсионная микроскопия повышение разрешения светового микроскопа.

3)Темнопольная микроскопия основана на способности микроорганизмов сильно рассеивать свет. В объектив попадают только те лучи, которые отклоняются частицами препарата. Поэтому в темнопольном микроскопе микроорганизмы видны бесцветными на темном фоне. Метод темнопольной микроскопии используется для изучения живых бактерий и их подвижности.

С помощью темнопольной микроскопии "раздавленной" или "висячей капли".

4)Фазово-контрастная микроскопия позволяет изучать живые и неокрашенные объекты за счет повышения их контрастности. Фазово-контрастная микроскопия применяется также для изучения клеток культуры ткани, действия вирусов на клетки.

5)Люминесцентная микроскопия основана на способности многих веществ биологического происхождения и красителей светиться под действием падающего на них света. Свечение объектов возникает в результате поглощения ими лучистой энергии. Объект, не дающий явления люминесценции, окрашивают специальными красителями - флюорохромами.

В медицинской микробиологии применяют два метода люминесцентной микроскопии: флюорохромирование (окрашивание флюорохромами) и флюоресцирующих антител (реакция иммунофлюоресценции - РИФ). Люминесцентная микроскопия увеличивает контрастность изображения, дает возможность различить отдельные клеточные структуры.

3

Люминесцентная микроскопия применяется для бактериоскопии инфекционных возбудителей. В РИФ с помощью антител, меченных флюорохромами, выявляются антигены микроорганизмов или антитела в сыворотке больных. РИФ используется для экспресс-диагностики инфекционных заболеваний.

Электронная микроскопия.

Билет 2

1. Понятие о систематике и таксономии, таксоне, таксономических категориях, бинарной номенклатуре. Определение вида. Понятие о смешанной и чистой культуре, штамме, клоне. (4)

Систематика занимается описанием видов организмов, выяснением степени родственных отношений между ними и объединением в классификационные единицы (таксоны).

Таксон (таксономическая единица) — классификационная единица, группа организмов, объединенных по определенным однородным свойствам в рамках той или иной таксономической категории.

1.Домен (Domain) — группа рангом выше царства, объединяющая разные организмы, обладающие определенным набором общих черт.

2.Царство (Kindom) — совокупность типов бактерий.

3.Тип (Phylum) — совокупность классов бактерий.

4.Класс (Class) — совокупность порядков бактерий.

5.Порядок (Order) — совокупность семейств бактерий.

6.Семейство (Family) — совокупность взаимосвязанных родов бактерий, базируется на основе типового рода.

7.Род (genus) — совокупность близкородственных видов, базируется на основе типового вида.

8.Вид (species) — основной таксон в классификации бактерий — эволюционно сложившаяся совокупность особей, имеющих экологическое единство и близкий генотип, с сходными морфологическими, физиологическими, биохимическими признаками и антигенной структурой. Подвиды (внутривидовые категории) — совокупность популяций определенного вида, отличающихся рядом признаков, не препятствующих объединению в вид.

Ряд признаков и свойств используют для их классификации:

1.Морфологические признаки.

2.Тинкториальные свойстваспособность окрашиваться различными красителями. Важный признак отношение к окраске по Граму, которое зависит от структуры и химического состава клеточной стенки. При разрушении клеточной стенки или утрате (в случае L- трансформации) они становятся грамотрицательные.

3.Культуральные свойстваособенности роста бактерий на жидких и плотных питательных средах. Колония– видимая простым глазом группа микрообганизмов. Пересевом из изолированной колонии может быть получена чистая культура возбудителя.

Чистая культура возбудителяодин вид бактерий выросших на плотной питательной среде. Смешанная культура - культура микроорганизмов, состоящая из представителей разных видов. Штамм. Чистая культура микроорганизмов, выделенных из определенного источника и отличающихся от других представителей вида, называется штаммом.

4

Клон. Клон представляет собой совокупность потомков, выращенных из единственной микробной клетки.

4.Подвижность бактерий – различают подвижные и неподвижные.

5. Спорообразование.

6.Физиологические свойства – способы питания , тип дыхания, рост и размножение.

7. Биохимические свойства – способность ферментировать (расщеплять) углеводы, протеолитическая активность, образование индола, сероводорода.

8.Геносистематика.

Ряд таксономических систем.

1.Нумерическая таксономия.

2.Серотаксономия. Изучает антигены.

3.Хемотакcономия. Применяются физико-химические методы.

4.Генная систематика.

2. Понятие о патогенности и вирулентности. Факторы патогенности микроорганизмов.

(43)

Патогенность — потенциальная способность микроорганизма вызывать инфекционный процесс у хозяина.

Патогенность характеризуют следующие признаки:

1.Может реализоваться при: – наличии восприимчивого макроорганизма; – определенном влиянии факторов внешней среды.

2.Проявляется в отношении особей одного вида.

3. Специфичность — способность вызывать типичные для данного вида возбудителя патоморфологические и патофизиологические изменения в определенных тканях и органах при естественных для него способах заражения.

4. Динамичность — патогенность может приобретаться, изменяться и утрачиваться.

Выделяют:

а) облигатно-патогенные — способны преодолевать защитные механизмы макроорганизма и вызывать инфекционные заболевания у восприимчивых людей.

б) условно-патогенные — обнаруживают как в окружающей среде, так и в составе нормальной микрофлоры разных биотопов организма человека. УП представители нормальной микрофлоры. Однако в определенных условиях они могут вызывать эндогенные инфекции; в) непатогенные — сапрофиты— питаются органическими веществами от отмерших организмов,

являются симбионтами человека: живут в кишечнике, на коже, на слизистых, где обеспечивают защиту либо участвуют в переваривании пищи и синтезе витаминов.

Вирулентность — степень фенотипического проявления патогенности в момент исследования.

Характеристика вирулентности:

1.Индивидуальный (штаммовый) признак микроорганизма.

2.Вариабельность. а) высоковирулентные —тяжелые заболевания и быстрее распространяться; б) умеренновирулентные — вызывают заболевания у здоровых людей в более

высоких инфицирующих дозах; в) слабовирулентные — вызывают заболевания у людей со сниженной функцией иммунной системы; г) авирулентные — не вызывают заболеваний.

3.Динамичность.

Варианты микроорганизмов, искусственно стойко лишенные вирулентности (аттенуированные штаммы) используют для изготовления живых вакцин (против туляремии, сибирской язвы, чумы, полиомиелита).

Повышение вирулентности, в свою очередь, бывает: а) генотипическое.

б) фенотипическое.

Количественными характеристиками вирулентности являются:

1.DLM (минимальная летальная доза) – это количество бактерий, при введении которых соответствующим путем в организм лабораторных животных получают 95%-98% случаев гибели животных в эксперименте;

2.LD 50– это количество бактерий, вызывающее гибель 50% животных в эксперименте;

3.DCL (смертельная доза) – вызывает 100% гибель животных в эксперименте.

зывает 100% гибель животных в эксперименте.

5

Факторы патогенности:

1.Адгезия – способность бактерий прикрепляться к эпителиальным клеткам. Факторами адгезии являются реснички адгезии, адгезивные белки, липополисахариды у грамотрицательных бактерий, тейхоевые кислоты у грамположительных бактерий, у вирусов – специфические структуры белковой или полисахаридной природы; Адгезия является пусковым механизмом инфекционного процесса. Под адгезией понимают

способность микроорганизма адсорбироваться на чувствительных клетках с последующей колонизацией. Структуры, ответственные за связывание микроорганизма с клеткой называются адгезинами и располагаются они на его поверхности. Адгезины очень разнообразны по строению и обусловливают высокую специфичность - способность одних микроорганизмов прикрепляться к клеткам эпителия дыхательных путей, других - кишечного тракта или мочеполовой системы и т.д. На процесс адгезии могут влиять физико-химические механизмы, связанные с гидрофобностью микробных клеток, суммой энергии притяжения и отталкивания.

У грамотрицательных бактерий адгезия происходит за счет пилей I и общего типов.

У грамположительных бактерий адгезины представляют собой белки и тейхоевые кислоты клеточной стенки. У других микроорганизмов эту функцию выполняют различные структуры клеточной системы: поверхностные белки, липополисахариды, и др.

2.Колонизация – способность размножаться на поверхности клеток, что ведет к накоплению бактерий;

3.Пенетрация – способность проникать в клетки;

4.Инвазия – способность проникать в подлежащие ткани, которая связана с продукцией таких ферментов, как гиалуронидаза и нейраминидаза; Под инвазивностью понимают способность микробов проникать через слизистые, кожу,

соединительно-тканные барьеры во внутреннюю среду организма и распространятся по его тканям и органам. Проникновение микроорганизма в клетку связывается с продукцией ферментов, а также с факторами подавляющими клеточную защиту. Так фермент гиалуронидаза расщепляет гиалуроновую кислоту, входящую в состав межклеточного вещества, и, таким образом, повышает проницаемость слизистых оболочек и соединительной ткани. Нейраминидаза расщепляет нейраминовую кислоту, которая входит в состав поверхностных рецепторов клеток слизистых оболочек, что способствует проникновению возбудителя в ткани.

5.Агрессия – способность противостоять факторам неспецифической и иммунной защиты

организма.

Кфакторам агрессии относят: а) вещества разной природы, входящие в состав поверхностных структур клетки: капсулы, поверхностные белки; б) ферменты (протеаза, коагулаза, фибринолизин, лецитиназа); в) токсины (экзо- и эндотоксины).

Под агрессивностью понимают способность возбудителя противостоять защитным факторам макроорганизма.

Кфакторам агрессии относятся: протеазы - ферменты, разрушающие иммуноглобулины; коагулаза - фермент, свертывающий плазму крови; фибринолизин – растворяющий сгусток фибрина; лецитиназа - фермент, действующий на фосфолипиды мембран мышечных волокон, эритроцитов и других клеток. Эндотоксический шок (терапевтический). Это явление, которое возникает при лечении инфекций, вызванных грамотрицательными бактериями. Введение антибиотиков вызывает гибель и разрушение клеток и высвобождение больших количеств эндотоксина.

Экзотоксины продуцируют как грамположительные, так и грамотрицательные бактерии. Различают несколько типов: цитотоксины, мембранотоксины, функциональные блокаторы, эксфолианты и эритрогемины.

Механизм действия белковых токсинов сводится к повреждению жизненно важных процессов в клетке: повышение проницаемости мембран, блокады синтеза белка и других биохимических процессов в клетке или нарушении взаимодействия и взаимокоординации между клетками. Экзотоксины являются сильными антигенами, которые и продуцируют образование в организме антитоксинов.

Экзотоксины обладают высокой токсичностью. Под воздействием формалина и температуры экзотоксины утрачивают свою токсичность, но сохраняют иммуногенное свойство. Такие токсины получили название анатоксины и применяются для профилактики заболевания столбняка, гангрены,

6

ботулизма, дифтерии, а также используются в виде антигенов для иммунизации животных с целью получения анатоксических сывороток.

Эндотоксины по своей химической структуре являются липополисахаридами, которые содержатся в клеточной стенке грамотрицательных бактерий и выделяются в окружающую среду при лизисе бактерий. Эндотоксины не обладают специфичностью, термостабильны, менее токсичны, обладают слабой иммуногенностью. При поступлении в организм больших доз эндотоксины угнетают фагоцитоз, гранулоцитоз, моноцитоз, увеличивают проницаемость капилляров, оказывают разрушающее действие на клетки.

Микробные липополисахариды разрушают лейкоциты крови, вызывают дегрануляцию тучных клеток с выделением вазодилататоров, активируют фактор Хагемана, что приводит к лейкопении, гипертермии, гипотонии, ацидозу, дессиминированной внутрисосудистой коагуляции (ДВК).

Эндотоксины стимулируют синтез интерферонов, активируют систему комплемента по классическому пути, обладают аллергическими свойствами.

3. Возбудители кишечного иерсиниоза. Таксономия и биологическая характеристика. Эпидемиология и патогенез заболеваний. Микробиологическая диагностика. Лечение.

(101)

Кишечный иерсиниоз — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением ЖКТ, тенденцией к генерализации с различных органов и систем. Возбудитель кишечного иерсиниоза

Yersinia enterocolitica.

Таксономия. Y.enterocolitica относится к отделу Gracilicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду

Yersinia.

Морфологические и тинкториальные свойства. Возбудитель полиморфен: он может иметь форму либо палочки с закругленными концами, либо овоидную с биполярным окрашиванием. Спор не имеет, иногда образует капсулу. Перитрих есть. Некоторые штаммы имеют пили. Грамотрицателен. Культуральные свойства.Y.enterocolitica — факультативный анаэроб. Возбудитель неприхотлив и растет на простых питательных средах.

Биохимическая активность. Расщепление мочевины, ферментация сахарозы, отсутствие ферментации рамнозы, продукция орнитиндекарбоксилазы.

Антигенная структура. О- и Н-антигены, у некоторых штаммов обнаружен К-антиген. Факторы патогенности. Образует термостабильный эндотоксин. У иерсиний обнаружены также

инвазивный белок и белки, препятствующие фагоцитозу. Адгезивная активность иерсиний связана с пилями и белками наружной мембраны.

Резистентность. Чувствителен к высокой температуре, солнечным лучам, дезинфицирующим веществам, но очень устойчив к действию низких температур.

Эпидемиология. Источники болезни для человека - крысы, мыши, животные и птицы,. Механизм заражения фекально-оральный, основным путем передачи является алиментарный. Но возможны также контактный и водный пути передачи.

Патогенез. Возбудитель попадает в организм через рот, в нижних отделах тонкой кишки прикрепляется к эпителию слизистой оболочки, внедряется в клетки эпителия, вызывая воспаление. Под действием токсинов усиливается перистальтика кишечника и возникает диарея. Иногда в патологический процесс вовлекается аппендикс, развивается аппендицит. У людей со сниженным иммунитетом могут развиться сепсис.

Клиника. Различают гастроэнтероколитическую, аппендикулярную и септическую формы. Инкубационный период составляет от 1 до 4 дней. Болезнь начинается остро с повышения температуры тела до 39С, общей интоксикации, рвоты, болей в животе, поноса. Течение продолжительное. Микробиологическая диагностика. Используют бактериологический и серологический методы исследования. Цель бактериологического метода являются идентификация возбудителя, определение антибиотикограммы, внутривидовая идентификация (установление серовара, биохимического варианта, фаговара).

Материалом для бактериологического метода исследования служат испражнения, ликвор, кровь, моча, иногда червеобразный отросток. Материал для исследования помешают в фосфатный буфер и подвергают холодовому обогащению.

Серологическая диагностика проводится постановкой РНГА, с диагностическим титром 1:160. Важное диагностическое значение имеет наблюдение за нарастанием титра антител в динамике.

Лечение. Этиотропная антибиотикотерапия

7

4. Понятие о серодиагностике и сероидентификации. (78)

Серологические реакции - реакции между антигенами и антителами in vitro или серологические реакции широко используются в микробиологических и серологических (иммунологических) лабораториях с самыми разнообразными целями:

·серодиагностики бактериальных, вирусных, реже других инфекционных заболеваний,

·сероидентификации выделенных бактериальных, вирусных и других культур различных микроорганизмов Серодиагностику проводят с помощью набора специфических антигенов, выпускаемых коммерческими

фирмами. По результатам серодиагностических реакций судят о динамике накопления антител в процессе заболевания, о напряженности постинфекционного либо поствакцинального иммунитета. Сероидентификацию микробных культур проводят для определения их вида, серовара с помощью наборов специфических антисывороток, также выпускаемых коммерческими фирмами.

Каждая серологическая реакция характеризуется специфичностью и чувствительностью. Под специфичностью понимают способность антигенов или антител реагировать только с

гомологичными антителами, содержащимися в сыворотке крови, либо с гомологичными антигенами соответственно. Чем выше специфичность, тем меньше ложноположительных и ложноотрицательных результатов. В серологических реакциях участвуют антитела, принадлежащие главным образом к иммуноглобулинам классов IgG и IgM.

Сероиндикация – качестве АГ используется не чистая культура микроба, а исследуемый материал от больного, в котором и определяют АГ.

Билет 3 1. Основные этапы развития микробиологии и иммунологии. Вклад отечественных и

зарубежных ученых (А. Ван Левенгук, Д.С. Самойлович, Л. Пастер, Р. Кох, Д. И. Ивановский, И.И. Мечников, П. Эрлих и др.). (3)

Пастер, доказал, что брожение (молочнокислое, спиртовое, уксуснокислое) не является химическим процессом, а его вызывают микроорганизмы; Опроверг теорию самозарождения; Открыл явление анаэробиоза, т.е. возможность жизни микроорганизмов в отсутствие кислорода; Заложил основы дезинфекции, асептики и антисептики; Открыл способ предохранения от инфекционных болезней с помощью вакцинации.

Л. Пастер получил вакцины против бешенства, сибирской язвы, куриной холеры. Л. Пастер является основоположником научной иммунологии,.

Роберта Коха, которому принадлежит разработка методов получения чистых культур бактерий, окраски бактерий при микроскопии, микрофотографии.

И. И. Мечникова и П. Эрлиха. Исследования И. И. Мечникова (1845—1916) показали, что большую роль в формировании иммунитета играют особые клетки — макро- и микрофаги. Что помимо гуморального, существует клеточный иммунитет.

Д.И.Ивановский (1864— 1920) открыл вирусы — представителей царства vira. Один из основоположников вирусологии.

Здровский (1890-1976 года), российский микробиолог, иммунолог и эпидемиолог, академик АМН. Исследования по проблемам тропических болезней, бруцеллеза и др.

Смородинцев, российский вирусолог и иммунолог. Труды по этиологии и профилактике гриппа, энцефалитов и др. вирусных инфекций.

Совместно с М. П. Чумаковым разработал и внедрил вакцину против полиомиелита. Ермольева, российский микробиолог. Получила первые отечественные образцы антибиотиков - пенициллина, стрептомицина и др.; интерферона.

2. Токсины бактерий, их природа и свойства. Эндотоксический шок. (44)

Токсины бактерий — продукты метаболизма, оказывающие токсическое воздействие на клетки макроорганизма либо вызывающие развитие симптомов интоксикации в результате индукции ими образования биологически активных веществ.

По биологическим свойствам бактериальные токсины делятся на экзотоксины и эндотоксины. Экзотоксины продуцируют как грамположительные, так и грамотрицательные бактерии. По своей химической структуре это белки. По механизму действия экзотоксина на клетку различают несколько типов: цитотоксины, мембранотоксины, функциональные блокаторы, эксфолианты и эритрогемины.

8

Механизм действия белковых токсинов сводится к повреждению жизненно важных процессов в клетке: повышение проницаемости мембран, блокады синтеза белка и других биохимических процессов в клетке или нарушении взаимодействия и взаимокоординации между клетками. Экзотоксины являются сильными антигенами, которые и продуцируют образование в организме антитоксинов.

По молекулярной организации экзотоксины делятся на две группы:

•экзотоксины состоящие из двух фрагментов;

•экзотоксины, составляющие единую полипептидную цепь.

По степени связи с бактериальной клетки экзотоксины делятся условно на три класса.

•Класс А - токсины, секретируемые во внешнюю среду;

•Класс В - токсины частично секретируемые и частично связанные с микробной клеткой;

•Класс С - токсины, связанные и с микробной клеткой и попадающие в окружающую среду при разрушении клетки.

Экзотоксины обладают высокой токсичностью. Под воздействием формалина и температуры экзотоксины утрачивают свою токсичность, но сохраняют иммуногенное свойство. Такие токсины получили название анатоксины и применяются для профилактики заболевания столбняка, гангрены, ботулизма, дифтерии, а также используются в виде антигенов для иммунизации животных с целью получения анатоксических сывороток.

Эндотоксины по своей химической структуре являются липополисахаридами, которые содержатся в клеточной стенке грамотрицательных бактерий и выделяются в окружающую среду при лизисе бактерий. Эндотоксины не обладают специфичностью, термостабильны, менее токсичны, обладают слабой иммуногенностью.

При поступлении в организм больших доз эндотоксины угнетают фагоцитоз, гранулоцитоз, моноцитоз, увеличивают проницаемость капилляров, оказывают разрушающее действие на клетки. Микробные липополисахариды разрушают лейкоциты крови, вызывают дегрануляцию тучных клеток с выделением вазодилататоров, активируют фактор Хагемана, что приводит к лейкопении, гипертермии, гипотонии, ацидозу, дессиминированной внутрисосудистой коагуляции (ДВК). Эндотоксины стимулируют синтез интерферонов, активируют систему комплемента по классическому пути, обладают аллергическими свойствами. При введении небольших доз эндотоксина повышается резистентность организма, усиливается фагоцитоз, стимулируются Влимфоциты.

Сыворотка животного иммунизированного эндотоксином обладает слабой антитоксической активностью и не нейтрализует эндотоксин. Патогенность бактерий контролируется тремя типами генов: гены - собственной хромосомами, гены привнесенные плазмидами умеренными фагами.

3. Возбудители шигеллеза (дизентерии). Таксономия и биологическая характеристика. Эпидемиология и патогенез заболеваний. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. (102)

Род Shigellaвключает 4 вида: S. dysenteriae — 12 сероваров, S.flexneri— 9 сероваров, S. boydii— 18

сероваров, S. sonnei — 1 серовар.

Морфология. Шигеллы представлены неподвижными палочками. Спор и капсул не образуют. Культуральные свойства. Хорошо культивируются на простых питательных средах. На плотных средах образуют мелкие гладкие, блестящие, полупрозрачные колонии; на жидких — диффузное помутнение. Жидкой средой обогащения является селенитовый бульон. У S. sonneiотмечена при росте на плотных средах SR-диссоциация.

Биохимическая активность:слабая; отсутствие газообразования при ферментации глюкозы, отсутствие продукции сероводорода, отсутствие ферментации лактозы. Резистентность.Наиболее неустойчив во внешней среде вид S. dysenteriae. Шигеллы переносят

высушивание, низкие температуры, быстро погибают при нагревании. S. sonneiв молоке способны не только длительно переживать, но и размножаться. У S. dysenteriaeотмечен переход в некультивируемую форму.

Антигенная структура.Соматический О-антиген, в зависимости от строения которого происходит их подразделение на серовары, aS. flexneriвнутри сероваров подразделяется на подсеровары. S. sonneiобладает антигеном 1-й фазы, который является К-антигеном.

Факторы патогенности.Способность вызывать инвазию с последующим межклеточным распространением и размножением в эпителии слизистой толстого кишечника. Функционирование крупной плазмиды инвазии, которая имеется у всех 4 видов шигелл. Плазмида инвазии детерминирует

9

синтез белков, входящих в состав наружной мембраны, которые обеспечивают процесс инвазии слизистой. Продуцируют шига и шигаподобные белковые токсины.

Эндотоксин защищает шигеллы от действия низких значений рН и желчи.

Эпидемиология: Заболевания - шигеллезы, антропонозы с фекально-оральным механизмом передачи. Заболевание, вызываемое S. dysenteriae, имеет контактно-бытовой путь передачи. S. flexneri— водный, aS. sonnei— алиментарный.

Патогенез и клиника:Инфекционные заболевания, характеризующиеся поражением толстого кишечника, с развитием колита и интоксикацией. Шигеллы взаимодействуют с эпителием слизистой толстой кишки. Прикрепляясь инвазинами к М-клеткам, шигеллы поглощаются макрофагами. Взаимодействие шигелл с макрофагами приводит к их гибели, следствием чего является выделение ИЛ- 1, который инициирует воспаление в подслизистой. При гибели шигелл происходит выделение шига токсинов, действие которых приводит к появлению крови в испражнениях.

Иммунитет. Секреторные IgA, предотвращающие адгезию, и цитотоксическая антителозависимая активность лимфоцитов.

Микробиологическая диагностика.

Бактериологический: материалом для исследования - испражнения. Для посева отбираются гнойнокровяные образования из кала, которые при диагностике заболевания высеваются на лактозосодержащие дифференциальные питательные плотные среды. В случае выявления бактерионосителей посев испражнений проводится в селенитовый бульон с выделением возбудителя на плотных лактозосодержащих дифференциальных питательных средах.

Среди выросших на этих средах отбирают лактозонегативные колонии, которые идентифицируют до вида и серовара, а выделенные культуры S. flexneri— до подсероваров, S. sonnei — до хемоваров.

В качестве вспомогательного используют серологический метод с постановкой РНГА.

Лечение и профилактика: Для лечения - бактериофаг орального применения, антибиотики после определения антибиотикограммы; в случае возникновения дисбактериоза — препараты пробиотиков для коррекции микрофлоры. Не специфическая профилактика.

4. Реакция агглютинации. Компоненты, цель и методы постановки, учет. (79)

Реакция агглютинации — простая по постановке реакция, при которой происходит связывание антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов или других клеток, нерастворимых частиц с адсорбированными на них антигенами, а также макромолекулярных агрегатов). Она протекает при наличии электролитов, например при добавлении изотонического раствора натрия хлорида.

Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная,

непрямая и др. Реакция агглютинации проявляется образованием хлопьев или осадка.

РА используют для:

1)определения антител в сыворотке крови больных, например, при бруцеллезе (реакции Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля) и других инфекционных болезнях;

2)определения возбудителя, выделенного от больного;

3)определения групп крови с использованием моноклональных антител против аллоантигенов эритроцитов.

Для определения у больного антител ставят развернутую реакцию агглютинации: к разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов,) и через несколько часов инкубации при 37 ˚С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация, т. е. образовался осадок.

Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител. Примером являются особенности взаимодействия диагностикумов (О- и H-антигенов) со специфическими антителами. Реакция агглютинации с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие термостабильный О-антиген) происходит в виде мелкозернистой агглютинации.

Реакция агглютинации с Н-диагностикумом (бактерии, убитые формалином, сохранившие термолабильный жгутиковый Н-антиген) — крупнохлопчатая и протекает быстрее.

Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную реакцию агглютинации, применяя диагностические антитела (агглютинирующую сыворотку), т. е. проводят серотипирование возбудителя.

Ориентировочную реакцию проводят на предметном стекле. К капле диагностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя,

10