Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Культуральные_методы_диагностики_туберкулеза

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
2.4 Mб
Скачать

Приложение 1

Списки оборудования и расходных материалов для микробиологической лаборатории противотуберкулезной службы

Т а б л и ц а 1

Минимальный стандартный список оборудования, необходимого для выполнения микробиологических (микроскопических и культуральных) исследований

по диагностике и контролю химиотерапии туберкулеза

Наименование оборудования

Кол-

и его основные технические характеристики

во

 

 

 

 

 

Ламинарный шкаф для защиты персонала и окружающей среды I класса биологи-

 

1

ческой безопасности с вертикальным потоком воздуха и фильтром «HEPA» (для

1

проведения процесса пробоподготовки).

 

Рекомендуемая ширина рабочей поверхности шкафа – 1200–1500 мм,

 

 

2 электрические розетки, освещение, УФ-лампа

 

 

Ламинарный бокс (для защиты персонала, окружающей среды и продукта)

 

2

II класса биологической безопасности с вертикальным потоком воздуха и филь-

1

тром «HEPA» (для проведения посевов и приготовления мазков).

 

Рекомендуемая ширина рабочей поверхности бокса – 1500 мм,

 

 

2 электрические розетки, освещение, УФ-лампа

 

 

Ламинарный бокс (для защиты персонала, окружающей среды и продукта)

 

 

II класса биологической безопасности с вертикальным потоком воздуха и филь-

 

3

тром «HEPA» (для проведения тестов на лекарственную чувствительность и для

1

процессов с использованием жидких питательных сред и автоматизированных

 

или полуавтоматизированных систем).

 

 

Рекомендуемая ширина рабочей поверхности бокса – 1500–1800 мм,

 

 

2 электрические розетки, освещение, УФ-лампа

 

 

Вытяжной шкаф (для окраски мазков).

 

4

Рекомендуемая ширина рабочей поверхности шкафа – 1200 мм.

1

В шкафу должен быть подвод воды и отвод для канализационного стока; реко-

 

мендуется наличие встроенной в шкаф двухсекционной раковины для окраски

 

 

мазков, размер каждой из секций раковины приблизительно равен 400×400 мм

 

5

Микроскоп световой бинокулярный с иммерсионным объективом (×90–100) и

1

окулярами (×8 или ×10) и функционирующим предметным столиком

 

 

 

 

 

6

Микроскоп люминесцентный

1

 

 

 

 

Центрифуга антиаэрозольная рефрижераторная с ускорением 3000 g (рекоменду-

 

 

ется модель, имеющая максимально возможное количество гнезд для центрифу-

 

 

гирования пробирок объемом 50 мл).

 

 

Комплектование центрифуги:

 

7

бакет-ротором (с 4 подстаканниками) с адаптерами для каждого из стаканов

1

ротора, позволяющими разместить в каждом стакане по 4 пластиковые цент-

 

 

 

рифужные пробирки на 50 мл; крышками с зажимами для каждого стакана ро-

 

 

тора, или

 

 

угловым ротором на 14 гнезд для вышеуказанных центрифужных пробирок

 

 

на 50 мл

 

 

 

 

170 Культуральные методы диагностики туберкулеза

 

Аппарат для свертывания питательных сред типа «АСПС» (коагулятор), однока-

 

8

мерный или предпочтительнее двухкамерный (t до 90 °С, принудительная венти-

1

ляция, таймер 24 ч).

 

Рекомендуется заказывать в качестве комплектации к аппарату четыре кассеты,

 

 

каждая из которых предназначена только для пробирок диаметром 16 мм

 

 

Автоклав вертикальной (или горизонтальной) загрузки для автоклавирования

 

9

текучим паром на 75 л (или на 100 л).

2

Рекомендуется иметь отдельный автоклав (или автоклавы) для обеззараживания

 

инфицированных материалов и посуды и отдельный автоклав – для стерилиза-

 

 

ции солевых растворов и др.

 

10

Сушильно-стерилизационный (сухожаровой) шкаф для фиксации мазков. Тем-

1

пературный диапазон – максимум до 200 °С, рекомендуемый объем – 40 л

 

Сушильно-стерилизационный (сухожаровой) шкаф для стерилизации посуды

 

11

(в комплекте с напольной подставкой).

1

Температура до 200 °С минимум, вентиляция, рекомендуемый объем – не менее

 

160 л

 

12

Аквадистиллятор.

1

Рекомендуемая производительность – 25 л/ч

13

Весы лабораторные электронные, 500 г / 0,01 г

1

 

 

 

14

Весы аналитические электронные, 50 г / 0,1 мг; класс точности 2

1

 

 

 

15

Миксер (с контейнером для миксера объемом 2 л) или турбомешалка для переме-

1

шивания яичной массы при приготовлении питательных сред

16

Лабораторный холодильник большого размера для хранения питательных сред

1

(рекомендуемый объем – 800–1000 л, температура 0ѕ+4°С), со стеклянной или

 

металлической дверью

 

17

Двухкамерный бытовой холодильник (0ѕ+8 °С) с морозильной камерой (на –20 °С)

1

для хранения инфицированных материалов и культур. Рекомендуемый объем хо-

 

лодильной камеры – 200–300 л, морозильной камеры – не более 100 л

 

 

Оборудование для термальной комнаты или термостаты на 35–37 °С для культи-

 

18

вирования МБ (рекомендуемый объем термостатов – 500 л, микропроцессорное

 

управление, принудительная вентиляция). Количество термостатов определяется

 

 

в зависимости от их объема и нагрузки лаборатории

 

19

Термостат электрический суховоздушный в комплекте с напольной подставкой

2

для видовой идентификации МБ: один – для температуры 22 °С и второй – для

 

45 °С. Рекомендуемый объем термостатов – 80 л

 

 

Встряхиватель для гомогенизации проб диагностического материала. Рекомен-

 

20

дуемая модель – скоростной платформенный встряхиватель с возвратно-посту-

1

пательным движением и адаптерами для встряхивания контейнеров с мокротой

 

(примерное число колебаний – 100–400 двойных ходов в минуту, амплитуда ко-

 

 

лебаний – 20 мм)

 

21

Машина для изготовления ватных пробок (рекомендуемая модель – «Тампон-1»)

1

 

 

 

22

Горелка Бунзена или спиртовка

3

 

 

 

23

Таймер 0–60 мин или набор песочных часов на 5, 3 и 1 мин

1

 

 

 

24

Облучатель бактерицидный переносной (рекомендуемая модель – с 6 лампами

1

«Филипс»)

25

Облучатель бактерицидный настенный (рекомендуемая модель – с двумя лампа-

 

ми «Филипс»). Минимальное количество облучателей должно соответствовать

 

 

количеству имеющихся в лаборатории помещений

 

 

 

 

Учебное пособие для проведения базового курса обучения

 

 

 

 

 

 

 

171

 

 

 

 

 

 

специалистов бактериологических лабораторий учреждений противотуберкулезной службы

 

 

 

 

 

 

 

 

Т а б л и ц а 2

 

 

Рекомендуемый список дополнительного оборудования, желательного

 

 

для выполнения микробиологических (микроскопических и культуральных)

 

 

исследований по диагностике и контролю химиотерапии туберкулеза

 

 

 

 

 

 

 

Наименование оборудования

 

Кол-

 

и его основные технические характеристики

 

во

 

 

 

 

 

 

 

 

1

 

Автоматическая система регистрации роста микобактерий (для процессов с ис-

 

1

 

пользованием жидких питательных сред и автоматизированных систем).

 

 

 

Рекомендуемая модель – BACTEC MGIT 960

 

 

2

 

Система регистрации флуоресценции (для процессов с использованием жидких

 

1

 

питательных сред и полуавтоматизированных систем).

 

 

 

Рекомендуемая модель – MGIT (manual)

 

 

3

 

Ламинарный шкаф для защиты продукта при приготовлении питательных сред

 

1

 

(с горизонтальным или вертикальным ламинарным потоком воздуха и с УФ-лам-

 

 

 

пой), рекомендуемая ширина рабочей поверхности шкафа – 1200 мм

 

 

4

 

Шкаф сушильно-стерилизационный (сухожаровой) для стерилизации неболь-

 

1

 

ших объемов посуды (в комплекте с напольной подставкой). Объем шкафа – 80 л,

 

 

 

t – до 200 °С

 

 

5

 

Шкаф сушильно-стерилизационный для подсушивания посуды в комплекте с на-

 

1

 

польной подставкой. Рекомендуемый объем – 160 л

 

 

 

 

 

6

 

Термостат электрический суховоздушный на 35–37 °С для инкубации образцов в

 

1

 

процессе предобработки диагностического материала (в комплекте с напольной

 

 

 

подставкой)

 

 

7

 

Уравновешиватель центрифужных стаканов (центрифужные весы механические)

 

1

8

 

Печка для обжига микробиологической петли (Bacti-Cinerator)

 

1

9

 

Встряхиватель Vortex-Genie-2 (с регулировкой оборотов)

 

1

10

 

рН-метр, класс 2

 

1

11

 

Плита электрическая (одна – для кипячения посуды и стекол, вторая – для вар-

 

2

 

ки сред)

 

12

 

Электрическая водяная баня с терморегулятором

 

1

13

 

Магнитная мешалка с подогревом, с комплектом магнитов

 

1

14

 

Лабораторная морозильная камера, от –20 до –40 °С. Рекомендуемый объем – 100 л

 

1

15

 

Тележка лабораторная, нержавеющая сталь, 2 полки, грузоподъемность 50 кг

 

2

 

 

Настольный бутылочный дозатор для розлива среды в пробирки (в комплекта-

 

 

16

 

ции с бутылями).

 

1

 

Рекомендуемая модель: флакон-диспенсер переменного объема (диапазон дози-

 

 

 

рования 5–25 мл) с бутылями на 1 л и на 2,5 л

 

 

17

 

Автоматическая пипетка, одноканальная, с переменным объемом до 200 мкл,

 

1

 

со сбрасывателем, с комплектом наконечников (5000 шт.)

 

18

 

Автоматическая пипетка, одноканальная, с переменным объемом от 200

 

1

 

до 1000 мкл, со сбрасывателем, с наконечниками (5000 шт.)

 

19

 

Автоматическая пипетка, одноканальная, с переменным объемом от 1 до 5 мл, со

 

1

 

сбрасывателем, с наконечниками (5000 шт.)

 

20

 

Автоматическая пипетка, одноканальная, с переменным объемом от 1 до

 

1

 

10 мл, со сбрасывателем, с наконечниками (5000 шт.)

 

 

 

Пипеточный дозатор (ручной мини-насос для работы с любыми стеклянны-

 

 

21

 

ми или пластиковыми пипетками объемом от 1 до 50 мл, диапазон дозирования

 

1

 

от 0,1 до 50 мл) с набором пластиковых одноразовых пипеток на 25 и 50 мл

 

 

 

(по 100 шт.)

 

 

22

 

Моечная машина для лабораторной стеклянной посуды

 

1

172 Культуральные методы диагностики туберкулеза

Т а б л и ц а 3

Список лабораторной посуды, инструментов и расходных материалов, необходимых для исследования 10 000 образцов в год

Наименование

Коли-

чество

 

 

 

 

 

 

Лабораторная посуда и инструменты

 

 

 

 

1

Пробирка биологическая ПБ-16, диаметром 16 мм (16×150 мм) с неразверну-

12 000

 

тым краем, толстостенная

 

2

Пробка силиконовая двухконусная ПС 14,5 (для пробирок см. п. 1)

6 000

 

Колбы стеклянные (желательно из боросиликатного стекла), конические, гра-

 

3

дуированные, термостойкие (Эрленмейера), с узким горлом:

 

на 250 мл

30

 

на 500 мл

20

 

на 1000 мл

10

4

Колбы круглые плоскодонные:

2

на 250 мл

 

на 500 мл

2

 

Стаканы стеклянные мерные, градуированные, термостойкие (желательно из

 

 

боросиликатного стекла):

5

5

на 100 мл

на 250–300 мл

5

 

 

на 500–600 мл

5

 

на 1000 мл

5

 

Цилиндры мерные, стекло или автоклавируемый пластик:

2

 

на 25 мл

6

на 100 мл

2

на 250 мл

2

 

 

на 500 мл

2

 

на 1000 мл

2

 

Воронки химические (лабораторные), конические, стеклянные, с узким но-

 

7

сиком:

2

диаметром 75–110 мм

 

 

диаметром 100–150 мм

4

 

Бутыль, коричневое стекло, с завинчивающейся крышкой:

3

8

на 200 мл

на 500 мл

5

 

 

на 1000 мл

5

 

Флаконы для реагентов:

10

 

на 50 мл

9

на 100 мл

10

на 250 мл

5

 

 

на 500 мл

5

 

на 1000 мл

2

 

Пипетки стеклянные, измерительные, градуированные, на полный слив:

300

 

на 1 мл

10

на 2 мл

200

 

на 5 мл

100

 

на 10 мл

100

11

Промывочная бутыль Nalgene, пластиковая, автоклавируемая, на 500 мл

5

(возможна замена российским аналогом)

12

Промывочная бутыль LDPE, пластиковая, на 250 мл (возможна замена

10

российским аналогом)

Учебное пособие для проведения базового курса обучения

 

 

 

 

 

 

 

173

 

 

 

 

 

 

специалистов бактериологических лабораторий учреждений противотуберкулезной службы

 

 

 

 

 

 

13

Дозировочная бутыль, пластиковая, на 100 мл

5

14

Капельница пластиковая, 10 мл

5

 

Кружки пластиковые:

2

15

на 500 мл

на 1000 мл

2

 

на 2000 мл

2

16

Штативы пластиковые, автоклавируемые, на 24 гнезда, для центрифужных

8

пробирок объемом 50 мл, диаметром 30 мм

17

Штативы пластиковые на 72 гнезда, автоклавируемые, для пробирок диамет-

10

ром 16 мм

18

Груша силиконовая для пипеток

5

19

Стандарт мутности № 5 (ГИСК им. Л.А. Тарасевича)

1

20

Жестяные пеналы для стерилизации пипеток

4

21

Термометр, стекло, 20–110°

2

22

Стеклянные палочки, 250 мм

100

23

Лопаточка бактериологическая из нихрома с держателем

50

24

Петля микробиологическая из нихрома с держателем (диаметром 3 мм)

10

25

Пинцет, 15–20 см (анатомический, без лапок)

2

26

Ножницы, нержавеющая сталь, 25 см

4

27

Штатив (салазки) для окраски мазков

2

28

Штатив для сушки мазков на 12–25 мазков

6

29

Коробка для хранения мазков на 25–100 мазков

20

30

Эмалированный поддон

2

31

Контейнер для жидких отходов, термостойкий

2

32

Поддон для твердых отходов из нержавеющей стали или пластиковый

2

33

Шпатели для взвешивания навесок, из нержавеющей стали:

2

с лопаточкой на 15 см

 

с двумя микролопаточками

2

34

Контейнер стеклянный широкогорлый для сбора диагностического мате-

3000

риала из прозрачного (предпочтительно) или темного стекла объемом 100–

 

125 мл

 

 

Биксы для транспортировки и обеззараживания инфекционного материала

 

35

(коробки стерилизационные без фильтров – КСК):

10

объемом 6 л

 

объемом 9 л

10

 

объемом 12 л

5

36

Пластиковая канистра для дистиллированной воды, 50 л

1

37

Увеличительное стекло ×10

1

38

Маркеры водостойкие

10

39

Пробирки боросиликатные на 30 мл с крышкой – винт (для постановки тес-

500

тов на ЛЧ МБТ)

40

Бусы – шарики стеклянные, боросиликатные, диаметром 3 мм (для постанов-

1 кг

ки тестов на ЛЧ МБТ)

(2 уп.)

 

Расходные материалы

 

 

 

 

 

Центрифужная пробирка пластиковая, объемом 50 мл, коническая, стериль-

 

1

ная, с завинчивающейся крышкой, размер пробирок 114×28 мм (по размерам

12 000

должны быть совместимы с закупаемой центрифугой). Пробирки упакованы

 

по 25–50 штук в полиэтиленовые пакеты (без штативов)

 

 

 

 

2

Контейнеры для мокроты пластиковые, одноразовые

12 000

 

 

 

174 Культуральные методы диагностики туберкулеза

3

Пастеровские пипетки для посевов, пластиковые, одноразовые, стерильные

12 000

на 3–3,5 мл, градуированные, 0,25 мл (уп./10 шт.)

 

 

 

4

Стекла предметные для микроскопа (25×75×1,2 мм)

15 000

5

Фильтровальная бумага или фильтры диаметром 15 см № 1

15 кор.

6

Салфетки для протирания линз микроскопа

8

кор.

 

Бумага для взвешивания, пергаментная:

 

 

7

размер 150×150 мм, 500 листов в упаковке

1

уп.

 

размер 75×75 мм, 500 листов в упаковке

1

уп.

8

Лента для автоклава индикаторная

2

уп.

(12 шт.)

 

 

9

рН-бумага или лента

2

рулона

10

Парафильм

1

 

11

Восковые карандаши

10

12

Ручка шариковая, черная или синяя

24

13

Ручка шариковая, красная

12

14

Вата хлопковая

4

кг

15

Марля

10 м

16

Перчатки латекс, одноразовые, medium, размер № 7

2

000

17

Халаты одноразовые

250/

человека

 

 

18

Шапочки одноразовые

250/

человека

 

 

19

Бахилы одноразовые

250/

человека

 

 

20

Маски защитные (противоаэрозольные респираторы) одноразовые марки

300

3M 9332

Учебное пособие для проведения базового курса обучения

 

 

 

 

 

 

 

175

 

 

 

 

 

 

специалистов бактериологических лабораторий учреждений противотуберкулезной службы

 

 

 

 

 

 

Приложение 2

Прописи дополнительных сред для культивирования микобактерий

Среда Попеску

Состав среды

 

 

1) Раствор минеральных солей

 

 

Квасцы железоаммонийные

0,05г

Магний сернокислый

0,5 г

 

Натрий лимоннокислый однозамещенный

1,0 г

 

Калий фосфорнокислый однозамещенный

15,0

г

Глутаминовая кислота

10,0

г

Глицерин

20,0

мл

Вода дистиллированная

до 1000 мл

Вышеперечисленные ингредиенты растворяют в дистиллированной воде в указанной последовательности при слабом подогревании (не доводя до кипения) на водяной бане. Доводят рН до 6,8–7,2 с помощью 40% NaOH. Затем солевую основу разливают в колбы по 600 мл и стерилизуют в автоклаве при 0,5 атм. в течение 30 минут.

2) Раствор малахитового зеленого

 

Малахитовый зеленый

2 г

Стерильная дистиллированная вода

100 мл

Раствор малахитового зеленого готовится так же, как и для среды Левенштейна– Йенсена (см. аналогичный раздел в описании среды Левенштейна–Йенсена).

3) Яичная масса

Яичная масса для среды Попеску готовится так же, как и для среды Левенштейна– Йенсена (см. аналогичный раздел в описании среды Левенштейна–Йенсена).

Приготовление среды

В большую стерильную емкость, соблюдая правила стерильности, помещают сле-

дующие растворы:

 

раствор минеральных солей

600 мл

гомогенизированная яичная масса

1000 мл

Смесь тщательно перемешивают и фильтруют через 4-слойный стерильный марлевый фильтр. Добавляют 20 мл раствора малахитового зеленого, тщательно перемешивают, избегая образования пены, и в течение не более 15 минут разливают в пробирки приблизительно по 5 мл, следя за тем, чтобы в растворе не сформировался осадок. Не допускайте попадания пены в пробирки!

Свертывание среды

Свертывание среды проводят в аппаратах-свертывателях «АСПС» при 85 °С в течение 20 минут.

176 Культуральные методы диагностики туберкулеза

Среда «Новая»

Реактивы

Магний сернокислый MgSO4 × 7H2O – ГОСТ 4523-77;

Натрий лимоннокислый C6H5O7Na3 × 5,5H2O – ГОСТ 22280-86;

Калий фосфорнокислый однозамещенный KH2PO4 – ТУ 6-09-5324-87;

Натрий пировинограднокислый – ТУ 6-09-08-990-83;

Глицерин C3H8O3 – ГОСТ 6259-75;

Малахитовый зеленый C52H54O12N4 – ТУ 6-09-1557-77;

Вода дистиллированная – ГОСТ 6709-77.

В

состав питательной среды «Новая» входят следующие компоненты (в весо-

вых %):

 

Калий фосфорнокислый одноосновной

0,05

Натрий лимоннокислый

0,05

Магний сернокислый

0,05

Натрий пировинограднокислый (гликокол)

0,2

Глицерин

3,6

Малахитовая зелень

0,036

Желтки

50,0

Дистиллированная вода

до 100,0

Способ получения концентрированной питательной среды заключается в смешивании сухих навесок ингредиентов солей (кроме бактерицидного красителя) с желточной массой, стерилизации ингредиентов 70° этиловым спиртом, растворении бактерицидного красителя в глицерине и соединении всех компонентов среды.

Получение 1 литра концентрированной питательной среды

1)Сделать навески: однозамещенного фосфорнокислого калия – 1 г, лимоннокислого натрия – 1 г, сернокислой магнезии – 1 г, натрий пировинограднокислого (гликокола) – 4 г; каждую навеску поместить в стерильную фарфоровую ступку.

2)Простерилизовать навески путем смачивания каждой навески 1 мл 70° этилового спирта. Затем поместить ступки с навесками в термостат при температуре 37 °С и высушить при периодическом помешивании в течение 45 минут.

3)Приготовить 1 литр желточной массы. 50 штук куриных яиц обработать с целью обеззараживания 70°спиртом. Затем отделить белок от желтка. Перенести желточную массу в мерную колбу и тщательно гомогенизировать вручную.

4)Приготовить желточно-солевую смесь. К 1 литру желточной массы (по п. 3)

добавить стерильные навески (по п. 2) и перемешать.

5)Приготовить раствор бактерицидного красителя. Навеску 700 мг малахито-

вой зелени смочить 1 мл 70° спирта и соединить с 70 мл глицерина (это соответствует 1% раствору малахитового зеленого в глицерине).

6)Получение концентрированной питательной смеси. Производят соединение

1 л желточно-солевой смеси с 70 мл 1% раствора малахитового зеленого в глицерине (по п. 5) и тщательно гомогенизируют.

7)Выдерживание смеси. Полученную концентрированную питательную смесь выдерживают в течение суток при комнатной температуре.

8)Разлив концентрированной питательной среды. Разливают среду во флаконы емкостью 250 мл, которые герметично упаковывают и маркируют.

Учебное пособие для проведения базового курса обучения

 

 

 

 

 

 

 

177

 

 

 

 

 

 

специалистов бактериологических лабораторий учреждений противотуберкулезной службы

 

 

 

 

 

 

9)Хранение. Укупоренные флаконы с концентрированной питательной средой хранят в холодильнике при 3–5 °С.

10)Приготовление рабочей плотной питательной среды. К концентрирован-

ной питательной среде добавляют равный объем стерильной дистиллированной воды (1:1), гомогенизируют, разливают по 5 мл в пробирки. Для образования скоса питательной среды пробирки укладывают в наклонном положении в свертыватель, предварительно нагретый до 90 °С. Среду коагулируют 20 минут при температуре 82–83 °С.

11)Хранение пробирок с питательной средой. Пробирки с питательной средой могут храниться в холодильнике при температуре 5 °С в течение 4 недель. При длительном хранении необходимо пробирки герметично укупорить и поместить в полиэтиленовые пакеты, чтобы предотвратить высыхание среды.

178 Культуральные методы диагностики туберкулеза

Приложение 3

Приготовление питательных сред с противотуберкулезными препаратами

Примеры расчета чистоты и активности противотуберкулезных препаратов

Изониазид.Химическая формула C6H7N3O, М.В. 137,14. Обычно продается чистая, сухая субстанция (чистота >99%). В этом случае нет необходимости вводить дополнительные коэффициенты для расчета навески.

Рифампицин. Химическая формула C43H58N4O12, М.В. 822.94. Обычно продается сухая субстанция темно-красного цвета (чистота варьирует от лота к лоту и в зависимости от производителя 95–97%). Соответственно, поправочный коэффициент может варьировать. Для определения величины навески разделите рассчитанную величину для чистого вещества со 100% активностью на 0,95 или 0,97 или умножьте на 1,052 или 1,031 соответственно.

Этамбутол. Химическая формула C10H24N2O2 · 2HCl, М.В. 277,23.

Чистота субстанции составляет >99% сухого порошка. Химическая субстанция может адсорбировать влагу из воздуха.

Активный компонент в молекуле – C10H24N2O2. М.В. активного компонента состав-

ляет 204,30.

Молекулярныйвеснеактивногокомпонента2HClсоставляет:2×1,008+2×35,457 = = 72,93.

Общий М.В. составляет 277,3. Активность субстанции составляет: Fакт = = 204,3/277,23 = 0,737.

При содержании активного вещества более 95% введения дополнительного коэффициента на чистоту не требуется. Для определения требуемой навески разделите рассчитанную величину для чистого вещества со 100% активностью на 0,737 или умножьте на 1,357.

Дигидрострептомицин сульфат. Химическая формула C21H41N7O12 · 3/2 H2SO4, или

(эквивалентно) 2 C21H41N7O12 · 3 H2SO4, М.В. 730,71. Продаваемая субстанция представляет собой белый порошок с чистотой обычно 95–98%.

Активный компонент в молекуле C21H41N7O12, М.В. акт. = 583,37.

Неактивный компонент в молекуле – 3/2 H2SO4, М.В. неактивного компонента

1,5 × (2 × 1,008 + 32,066 + 4 × 16) = 147,36.

Молекулярный вес всей молекулы М.В. = 730,71.

Активность вещества Fакт. = 583,37 / 730,71 = 0,798, или поправочный коэффици-

ент 1,25.

В случае этого препарата необходимо учитывать также чистоту и долю адсорбированной воды. Обычно доля загрязнений и воды составляет 4–7%, соответственно, чистота вещества – 96–93%. Коэффициент коррекции, с учетом активности, в этом случае рассчитывается по формуле 1/(Fакт. × Fчист.)и составляет 1/0742 = 1,35 или

1/0,766 = 1,3.

Учебное пособие для проведения базового курса обучения

 

 

 

 

 

 

 

179

 

 

 

 

 

 

специалистов бактериологических лабораторий учреждений противотуберкулезной службы