2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Mikrobiologia_

29. Риккетсии. Строение, биологические особенности; классификация. Взаимодействие с клеткой-мишенью

Риккетсии – это бактерии, отличительной биологической особенностью которых является облигатный внутриклеточный паразитизм.

Порядок Rickettsiales => класса Proteobacteria => сем. Ricketsiaceae (род Rickettsia и Orientia) и сем.

Anaplasmataceae (род Anaplasma, Echrlichia, Neorickettsia, Wolbachia)

Гр (-), облигатные внутриклеточные паразиты

Заболевания вызываемые - риккетсиоз

Не способны к росту на питательных средах

Требуют специальных риккетсиологических методов изучения

СЕМЕЙСТВО Ricketsiaceae

Морфология:

Форма – кокковидные, палочковидные, иногда нитевидные, чаще короткие палочки

Размер = 0,3-0,6 х 0,8-2,0 мкм

Жгутиков и капсул нет, Гр (-), плохо окрашиваются обычными анилиновыми красителями, удерживают основной фуксин, часто применяют модификацию окраски по П.Ф. Здродовскому (риккетсии – яркорозовый, цитоплазма – голубой цвет, ядра – синий цвет)

Культивирование:

Облигатный характер внутриклеточного паразитизма риккетсии требует для их развития компонентов клеток хозяина.

Метод культивирования – накопление в тканях желточного мешка развивающихся куриных эмбрионов по Коксу и культуры эукариотических клеток в условиях пониженного метаболизма.

Для экспериментального воспроизведения инфекции и выделения штаммов патогенных риккетсии применяют различные виды чувствительных к определенным видам риккетсии животных, чаще морских свинок самцов, хомячков, членистоногих.

Резистентность:

Малоустойчивы к нагреванию, быстро инактивируются даже при 56 С (не более 30 мин), при 80 С – в течение 1 мин, при кипячении – практически мгновенно

Нестабильны, когда отделены от компонентов клеток хозяина. Более стабильны в средах с белками молока, альбумином плазмы, сахарозой, фосфатом калия, глутаматом – для высушивания культур

Инактивируются различными дезинфицирующими средствами – 0,5% р-р фенола. Быстро погибают под действием жирорастворителей

Яичные культуры риккетсий в лиофилизированном состоянии мри I (! можно сохранять в течение нескольких лет, наиболее эффективно хранение при низких температурах. Риккетсий Провачека длительно сохраняются в экскрементах переносчика (платяных вшей) при комнатной температуре (до 233 дней)

Антигенная структура:

Основные АГ-комплексы риккетсий – группоспецифический термостабильный ЛПС комплекс и 2 протективных поверхностных белка – rOmpA и rOmpB (протеины наружных мембран риккетсий)

Наличие на них видовых, субвидовых и субгрупповых АГ-детерминант позволяет дифференцировать большинство риккетсий

Факторы патогенности:

Отличие от классических бактерий – эндобиоцитоз в эукариотических клетках позвоночных и членистоногих; отсутствие четких критериев патогенности и классических эндотоксинов

У риккетсий описана микрокапсула (связан с механизмом реактивации риккетсий – восстановления вирулентности штаммов)

Имеют субстанции, обладающие токсическими свойствами, в т.ч. ЛПС, фосфолипидные фракции, специфический набор ЖК.

Токсичность риккетсий и их пирогенное действие связаны преимущественно с поражением риккетсиями эндотелиальных клеток сосудистого русла

Риккетсии обладают гемолитическими свойствами в отношении эритроцитов кролика и барана, гемагглютинином

Риккетсии имеют аллергенные субстанции, входящие в состав растворимых АГ-фракций

Патогенез и клиника:

Источник инфекции – риккетсии группы КПЛ

Входные ворота – место присасывания клещей-переносчиков

Патогенез/клиника – первичный аффект (размножение возбудителя) => лимфогенное распространение (сопровождается лимфангитом и регионарным лимфаденитом) => гематогенное распространение (генерализованное поражение эндотелия сосудов, эндоваскулиты и тромбангииты) => патологический процесс (размножение риккетсий в клетках-мишенях и сосудорасширяющее действие токсичных субстанций – это вызывает значительные изменения ЦНС и расстройства кровообращения) => постепенная гибель инфицированных клеток и развитие инфекционно-токсического синдрома => персистенция риккетсий в организме и/или развитие СС-патологии после перенесенного риккетсиоза или возникновение рецидивов инфекции

Иммунитет:

У переболевших развивается стойкий антитоксический и антибактериальный иммунитет

При сыпном тифе может быть нестерильным

При риккетсиозах группы КПЛ после перенесенной инфекции – стойкий иммунитет не только к данному виду риккетсий, но и к другим возбудителям группы КПЛ

В развитии специфической невосприимчивости ведущее значение имеет клеточный иммунитет в виде ГЗТ (выявляется с помощью аллергических проб или методов аллергологической диагностики in vitro – реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) и реакции биотрансформации лимфоцитов (РБТЛ) на специфические риккетсиальные аллергены

Микробиологическая диагностика:

Серодиагностика – РСК, РНГ, непрямой РИФ и ИФА

Молекулярно-генетические методы – ПЦР, рестрикционный анализ, определение нуклеотидных последовательностей фрагментов генов

Снятие с человека переносчиков классическими (выделение возбудителя – в острый лихорадочный период до начала АБ-терапии) и экспресс-методами (МФА, ИФА, РНГА с ИГ-диагностикумами для выявления АГ риккетсий групп СТ и КПЛ)

Лечение:

АБ-терапия – тетрациклины, фторхинолоны

ПРЕДСТАВИТЕЛИ РОДА RICKETTSIA

ВОЗБУДИТЕЛЬ СЫПНОГО ТИФА

Возбудитель - Rickettsia prowazeki

Антропоноз (человек – резервуар, платяная вошь – переносчик)

Вошь -> организм человека -> эпителии кишечника (размножение и их гибель) -> сыпнотифозная лихорадка (вошь покидает организм больного) -> новый хозяин (здоровый человек)

Инкубационный период – 10-12 дней. Носит циклический характер

Клиника – длительная лихорадка, появление в разгар заболевания розеолезной -> розеолезнопетехиальной или розеолезно-папулезной сыпи, резкие изменения НС (до менингоэнцефалита) и ССС, тифозный статус, наличие осложнений. Рецидив – болезнь Брилла (картина аналогичная острой форме, но менее выражено)

Диагностика: преимущественно серодиагностика (РА, РСК, РНГА, РНИФ, ИФА), выделение возбудителя

производится только в специализированных риккетсиологических лабораториях (2 группа патогенности),

экспресс-методы для исследования переносчиков (МФА, РНГА с ИГ-диагностикумом для выявления риккетсий группы СТ), ПЦР (идентификация путем определения нуклеотидных последовательностей)

Профилактика: сыпнотифозная вакцина, но применительно к СТ – борьба с педикулезом, лаб. исследование на сыпной тиф длительно лихорадящих больных, особенно из категории риска (завшивленные, бездомные, беженцы и др.)

КЛЕЩЕВОЙ РИККЕТСИОЗ

Возбудитель – Rickettsia sibirica

Облигатно-трансмиссивная природно-очаговая инфекция, передается человеку клещами – трансмиссивно

Клиника – лихорадка, первичный аффект на месте присасывания клеща, регионарный лимфаденит, розеолозно-папулезная полиморфная сыпь, относительно доброкачественного течения

Отличия от сыпного тифа - поражаются сосуды кожи, а не ГМ, деструкция эндотелиальных клеток сосудов менее выражена

Лабораторная диагностика – серологические реакции (РСК, РНИФ, ИФА)

Профилактика – противоклещевая обработка территории, меры личной защиты от нападения и присасывания клещей, превентивно назначают АБ

ПРЕДСТАВИТЕЛИ РОДА ORIENTIA (возбудители лихорадки ориенция цуцугамуши)

Orientia (ориенция) – отдельный род семейства Rickettsiaceae

Морфология:

Плеоморфные Гр (-) МО

Форма – короткие палочки, часто диплобациллы

Отсутствие ЛПС и пептидогликана (определяет нестойкость и низкую механическую резистентность, также высокую устойчивость к пенициллину) и их основных компонентов

Антигенная структура:

Имеют видоспецифический и не менее 3 типоспецифических АГ

Протективный иммунитет формируется преимущественно к типоспецифическому АГ – нестойкий и непродолжительный, вследствие чего могут быть рецидивы

Ориенции не имеют АГ-связей с риккетсиями групп СТ и КПЛ

Имеются общие антигенные детерминанты с Proteus mirabilis ОХК, выявляемые 3 реакции Вейля-Феликса

Патогенез и клиника:

Передача – присасывание личинок краснотелковых клещей (вызывает лихорадку, есть и др. названия – тропический тиф, тиф джунглей, кустарниковый тиф)

Клиника – лихорадка, первичный аффект, регионарный лимфаденит, лимфаденопатии и макулопапулезная сыпь

Диагностика:

при постановке диагноза учитывают очаговость, эпидемиологический анализ, наличие некоторых клинических явлений (первичный аффект, регионарный лимфаденит/лимфаденопатия, обильная розеолезно-папулезная сыпь и результаты серологических исследований)

Методы:

выделение возбудителя в биопробах из крови больных или личинок краснотелковых клещей. Для культуры клеток – используют белых мышей, куриные эмбрионы, культуры клеток (лимфобласты, фибробласты, эпителиальные клетки почек)

специфическая серодиагностика затруднительна в связи со сложной АГ-структурой

Проводят РСК, РНИФ, ИФА с определением титров АТ в динамике инфекционного процесса с использованием АГ различных типов возбудителя

Лечение – АБ тетрациклинового ряда

СЕМЕЙСТВО Anaplasmataceae

Облигатные внутриклеточные альфа-2-протеобактерии

Размножаются в специализированных вакуолях эукариотических клеток и имеют общие генет./био/эко характеристики

В патологии особое значение имеют Anaplasma phagocytophila (возбудитель гранулоцитарного анаплазмоза человека) и Ehrlichia chaffeensis – (возбудитель моноцитарного эрлихиоза человека)

Морфология:

Гр (-), коккобацилярные бактерии небольшого размера (0,5-1,5 мкм)

Плеоморфные кокковидные или овоидной формы МО

При окраске по Романовскому: МО окрашиваются в темно-голубой/пурпурный цвет

Выделяют 2 морфологические формы эрлихий (аналогично хламидиям) – ретикулярные клетки (вегетативная форма) и элементарные (меньшего размера, стационарная стадия покоя)

АГ-структура:

Показана перекрестная реактивность белков теплового шока HSP60 у риккетсий и анаплазм

У анаплазмацеа имеются общие АГ-детерминанты, обуславливающие наибольшую перекрестную реактивность внутри геногрупп

Факторы патогенности:

Выявлены поверхностные белки, выполняющие функции адгезинов – они взаимодействуют с лектинсодержащими CD15-ассоциированными (для возбудителя ГАЧ) рецепторами клеток-хозяина.

Наличие факторов, препятствующих фагосомно-лизосомальному слиянию и обеспечивающих возможность внутрифагосомного цикла развития

Anaplasma phagocytophila обладает механизмом задержки спонтанного апоптоза нейтрофилов, что способствует их размножению в них

Патогенез и клиника:

Патогенез обусловлен внедрением возбудителя через кожу

Первичный аффект на месте внедрения отсутствует

Возбудитель распространяется лимфогенно и далее гематогенно

Заражение чувствительных клеток-мишеней происходит в 3 стадии:

Проникновение в клетку (инициация фагоцитоза)

Размножение ограниченных мембраной цитоплазматических вакуолях (фагосомах)

Выход из клетки

Поражаются макрофаги селезенки, печени, ЛУ, КМ и др. органов

При тяжелых поражениях развивается геморрагический синдром с кровоизлияниями внутренних органов, желудочно-кишечными кровотечениями, геморрагическими высыпаниями на кожных покровах

Клиническая картина напоминает ОРВИ. Сыпь – у 10% больных ГАЧ

Диагностика:

Серологическая диагностика – для подтверждения диагноза ГАЧ и МЭЧ: РНИФ, ИФА, иммуноблотгинг, основанный на рекомбинантных белках (ИФА/иммуноблотгинг) – методы высокочувствительны и специфичны

Сероконверсия – лучший метод подтверждения на 1 нед. (25% больных) – 2 нед. (75%) заболевания

Микроскопическое исследование тонких мазков периферической крови - на наличие скоплений небольших бактерий (морулы) внутри нейтрофилов

ПЦР – позволяет выявлять E. Phagocytophila в крови в острую фазу до применения АБ

Выделение на культуре клеток HL-60

Профилактика и лечение:

Доксициклин – 100 мг2 р/день в течение 10-21 дня

Как и при др. клещевых инфекциях – меры неспецифической профилактики и противоклещевые мероприятия

30. Спирохеты. Строение. Патогенные спирохеты

Морфология:

бактерии с длинными (3—500 мкм) и тонкими (0,1—1,5 мкм) спирально закрученными клетками.

Гр (-), хемоорганогетеротрофы. Подвижны, размножаются поперечным делением.

Эндоспор не образуют.

Встречаются как аэробные виды, так и анаэробные, и факультативно-анаэробные.

Встречаются в почве, воде, других организмах. Сифилис - одна из классических венерических болезней.

Возбудитель - Treponema pallidum (бледная трепонема).

Она имеет форму правильной спирали размером до 15 мкм, с 8-12 крутыми глубокими равномерными завитками, концы заострены.

Из многих антигенов возбудителя наиболее изучены три: липополисахаридный кардиолипин, белковый и нуклеопротеиновый.

Культивирование:

Treponema pallidum очень требовательны к питательным средам и на обычных средах не растут

Для их культивирования используют сложные среды, содержащие почечную и мозговую ткань

инкубационный период – с момента проникновения микробного агента до появления первых симптомов. Больной не представляет собой опасности, т.к. возбудитель не выделяется в окр. среду

продромальный – появление первых НЕСПЕЦИФИЧЕСКИХ СИМПТОМОВ. При большинстве заболеваний возбудители так же не выделяются в окр. среду

разгар заболевания – проявление СПЕЦИФИЧЕСКИХ СИМПТОМОВ. Возбудитель выделяется в окр. Среду

период исходов – в этот период может наступить

рецидив – возврат клинических проявлений без повторного заражения (за счет оставшихся возбудителей)

суперинфекция – инфицирование организма тем же возбудителем до выздоровления

реинфекция – инфицирование тем же возбудителем после выздоровления

микробоносительство (бактерионосительство)

полное выздоровление (реконвалесценция) – возбудители также выделяются в больших количествах, пути выделения зависят от локализации инфекционного процесса

летальный исход – трупы представляют собой эпидемиологическую опасность из-за высокого содержания микробного агента, поэтому их необходимо подвергать дезинфекции!!!

КЛАССИФИКАЦИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

1.В соответствии с преобладанием того или иного пути передачи − по эпидемиологическому принципу: − кишечные; − воздушно-капельные, или респираторные;

− трансмиссивные; − инфекции кожных покровов

2.По биологической природе возбудителя все инфекционные заболевания:

–бактериальные инфекции;

–вирусные инфекции;

–грибковые инфекции;

–протозойные инфекции.

3.По числу возбудителей, вызывающих инфекционное заболевание:

– моноинфекции;

– смешанные (ассоциированные)

– микст инфекции.

4.По длительности течения инфекционные заболевания:

–острые;

–хронические;

5. По происхождению возбудителя инфекционные заболевания:

−экзогенные;

−эндогенные, включая аутоинфекцию

*Экзогенная инфекция – это инфекция, возбудителями которой являются микроорганизмы, поступающие из окружающей среды с пищей, водой, воздухом, почвой, выделениями больного человека или микробоносителя

*Эндогенная инфекция − инфекция, возбудителями которой являются микроорганизмы − представители собственной нормальной микрофлоры человека. Она часто возникает на фоне иммунодефицитного состояния человека.

*Аутоинфекция − разновидность эндогенной инфекции, которая возникает в результате самозаражения путем переноса возбудителя из одного биотопа в другой. Например, из полости рта или носа руками самого больного на раневую поверхность.

6. В зависимости от источника, т.е. резервуара возбудителя:

– Сапронозные инфекции − заболевания, основным местом обитания и размножения возбудителей которых являются объекты окружающей среды, откуда они и попадают в организм человека.

*К таким инфекциям можно отнести заболевания, вызванные легионеллами, синегнойной палочкой и др.

–Антропонозные инфекции − заболевания, при которых единственным источником возбудителя является человек.

*К ним относятся менингококковая инфекция, дизентерия, холера, дифтерия, гонорея, сифилис, гепатит B, эпидемический сыпной тиф, эпидемический возвратный тиф и др.

–Зоонозные инфекции − заболевания, при которых единственным источником возбудителя являются животные *К ним относятся туляремия, бруцеллез, бешенство.

–Зооантропонозные инфекции − заболевания, при которых источником являются животное и больной человек (в том числе и трупы умерших).

*К ним относятся чума, сибирская язва, туберкулез, риккетсиозы.

7. По распространенности различают

– эндемические заболевания (регистрируются на строго определенных территориях)

– эпидемические заболевания, распространенные на различных территориях.

8. По тяжести течения инфекционного заболевания

– легкие

– средней тяжести

– тяжелые

9. По локализации возбудителя в макроорганизме:

–очаговые – микроорганизмы локализуются в местном очаге и не распространяются по организму (например, ангина, фурункулез);

–генерализованные – возбудитель распространяется по организму лимфогенным или гематогенным путем (например, сепсис)

Наиболее тяжелой формой генерализованной инфекции является СЕПСИС, который характеризуется размножением возбудителя в крови, и как правило, тяжелым течением заболевания, т.к. почти всегда развивается на фоне резкого угнетения основных механизмов защиты. Сепсис отличается от бактериемии, тем, что при бактериемии кровь выполняет только транспортную роль, а размножения в ней возбудителя, как при сепсисе, не происходит. При сепсисе, как правило, происходит возникновение вторичных очагов гнойного воспаления в органах. Это состояние часто называют септикопиемия.

 ИСМП – инфекции, связанные с оказанием медицинской помощи

В период госпитализации пациента (ВБИ)

В амбулаторно-поликлинических учреждениях

В других организациях, осуществляющих медицинскую деятельность, в т.ч. на дому, СМП

Инфекции у медперсонала, связанные с проф. деятельностью

Возникает только при наличии 3 звеньев инфекционного процесса:

Источник – пациенты, персонал, инструментарий, аппаратура, предметы ухода, медикаменты

Пути передачи – контактный, фекально-оральный, воздушно-капельный, воздушно-пылевой. Входные ворота инфекции – дыхательные пути, пищеварительный тракт, мочеполовые пути, кожа и слизистые, кровь

Восприимчивый хозяин – организм, имеющий слабую сопротивляемость

Причины возникновения ИСМП:

Недостаток стерилизационного оборудования

Дефицит моющих и дезинфицирующих средств

Не соблюдение правил асептики и антисептики

Не соблюдение гигиены рук

Нарушение правил дезинфекции и стерилизации

Несвоевременная изоляция больных и долечивание в стационаре