2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Mikrobiologia_

CD8 Т-клеток памяти, которые сами по себе лишены цитотоксической активности, но быстро приобретают ее при повторной встрече аналогичного антигена. Это долгоживущие и не до конца дифференцированные Т- лимфоциты, которые при повторном контакте с антигеном обуславливают развития вторичного иммунного ответа. В отличие от первичного (который возникал в ответ на первый контакт с антигеном), вторичный ИО развивается значительно быстрее, т.к. начинается не с одного клона недифференцированных клеток, а со сравнительно многочисленного пула клеток, уже прошедших первые стадии дифференцировки.

• Воспалительный (в фаголизосомах) – эта форма иммунного ответа предназначена для защиты от внутриклеточных патогенов, локализующихся в цитоплазматических гранулах — фаголизосомах… Когда процесс фагоцитоза остается незавершенным.

Типичные представители таких патогенов — различные виды микобактерий, а также многие простейшие (например, лейшмании, плазмодии), риккетсии, хламидии, грибы (кандиды) и др. За реализацию этой формы защиты отвечают (Т-хелперы) Th1клетки (Т -лимфоциты CD4) и макрофаги.

Отличительные черты клеточного иммунного ответа воспалительного типа:

Начальный этап связан с презентацией антигена дендритными клетками

Макрофаги выступают в качестве и антигенпредставляющих и эффекторных клеток

Макрофаги представляют антиген в составе молекулы MHC-II

В качестве хелперных клеток выступают Th1 – лимфоциты, ранее получившие антигенный сигнал от дендритных клеток.

Эффекторные механизмы осуществляют макрофаги и цитотоксические Т-лимфоцитыCD8

Клеточный иммунный ответ воспалительного типа осуществляется в 4 этапа:

I. Презентация дендритными клетками антигена Тh0 – лимфоцитам CD4, приводящая к их двойной активации за счет ко-стимуляции

II. Дифференцировка Тh0 -лимфоцитов в лимфоциты типа Тh1.

III. Распознавание антигена (с участием макрофагов) Тh1-лимфоцитами, их активация и выделение цитокинов, приводящая к активации макрофагов, цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8).

IV. Цитолиз антигена цитотоксическими лимфоцитами и макрофагами.

Разбор каждого этапа!!!

Дендритные клетки процессируют и презентируют АГ аналогичным образом, как и в цитотоксическом ИО.

Попадая в лимфатические узлы, они презентируют антиген Th0 (Т-хелперам 0) CD4 Т-лимфоцитам, которые активизируются, пролиферируют и дифференцируются в Th1, последние мигрируют в очаг инфицирования. Оказавшись в очагах инфицирования, Th1 взаимодействуют с тканевыми макрофагами, захватившими патоген, но при этом процесс фагоцитоза оказался не завершенным. Эти макрофаги презентируют на своей поверхности антиген в составе молекулы MHC-II. В результате взаимодействия генерируются активационные сигналы от комплекса (АГ + рецептор, АГ + ко-рецептор), которые направленны как в Тh1-клетку, так и в макрофаг. Эти сигналы усиливаются за счет молекулы ко-стимуляции - CD28. Кроме того, генерируются активационные сигналы, вызывающие активацию Т-лимфоцитов CD8 и приводящие к их дифференцировке в ЦТЛ.

Т.о. в эффекторной стадии клеточного иммунного ответа воспалительного типа принимают участие:

цитотоксические Т-лимфоциты, которые осуществляют цитолиз клеток-мишеней

активированные макрофаги, что приводит к развитию в зоне нахождения антигена воспалительной реакции

Активированные макрофаги выделяют весь спектр провоспалительных и бактерицидных факторов. Такой вариант воспаления, реализуемый с участием клеток иммунной системы, называют иммунным воспалением.

Эта форма иммунного ответа результативна с точки зрения защиты от внутриклеточных патогенов, но деструктивна для окружающих нормальных клеток организма.

77. Гуморальный ИО. Этапы. Клетки, участвующие в его реализации

Информация взята из микробного романа!!

Гуморальный иммунный ответ (ГИО) – это комплексная кооперативная многокомпонентная реакция организма, которая индуцируется антигеном и реализуется В-лимфоцитами.

В конечном счете, ГИО направлен на элиминацию антигена путем его связывания специфическими антителами.

Индукторами ГИО являются антигены широкого круга: растворимые антигены микроорганизмов (полисахариды, ЛПС, белки), экзотоксины, антигены внеклеточных паразитов.

ГИО реализуется в несколько этапов:

I.Распознавание и связывание антигена В-лимфоцитами:

осуществляется при помощи В-клеточного рецептора;

запускает каскад реакций, который может привести к активации В-лимфоцита.

II.Активация В-лимфоцитов:

а) Т-независимая:

характерна для ответа на полисахаридные и липополисахаридные антигены (они имеют повторяющиеся структуры);

пролиферация В-лимфоцитов и их дифференцировка в плазматические клетки;

может происходить поликлональная активация (то есть активация множества разных клонов В- лимфоцитов), что чревато аутоиммунными реакциями;

иммунные В-клетки памяти не образуются;

б) Т-зависимая:

характерна для ответа на белковые антигены;

происходит при участии Т-хелперов 2-го типа (Th2), в которые дифференцируются наивные Т- хелперы (Th0) после презентации им антигена;

параллельно с антиген-презентирующими клетками В-лимфоциты также распознают антиген при помощи В-клеточного рецептора, процессируют его и также экспрессируют вместе с молекулами ГКГС II класса;

Th2 распознают этот комплекс антигена с ГКГС II при помощи Т-клеточного рецептора и корецептора CD4;

обязательным условием активации является одновременная ко-стимуляция – лигандрецепторное взаимодействие молекул CD40 с CD40L и CD80/86 с CD28;

вместе с В-лимфоцитом активируется и Т-хелпер, который начинает продуцировать ИЛ4, ИЛ5, ИЛ6, ИЛ10, способствующие пролиферации и дифференцировке В-лимфоцитов;

В-лимфоциты дифференцируются в плазматические клетки, а также в В-клетки памяти

III. Синтез антител и элиминация антигена: • при Т-зависимом ГИО плазматические клетки вырабатывают иммуноглобулины различных классов (M, G, A, E), причем при помощи разных интерлейкинов клетки могут «переключаться» между различными классами; • при Т-независимом ГИО плазматические клетки вырабатывают только IgM; • антитела образуют с антигеном комплекс антиген-антитело, который может подвергаться комплемент-зависимому лизису или фагоцитозу. Общая схема гуморального иммунного ответа представлена ниже.

НЕ ЗАКОНЧЕНО

78. Механизмы супрессии ИО. Иммунологическая толерантность

79. Цитокины. Их классификация, значение в развитии ИО

Информация взята из микробного романа!!!

Цитокины – это гликопротеины и пептиды, секретируемые активированными клетками иммунной системы (и

некоторыми другими клетками) и осуществляющие регуляцию взаимодействий и активацию всех звеньев иммунной системы, а также влияющие на другие органы и ткани.

Цитокины имеют следующие особенности:

большинство не синтезируется в отсутствие иммунного ответа;

активны в очень низких концентрациях (благодаря системам вторичных посредников);

могут вызывать рост, пролиферацию, дифференцировку, активацию или апоптоз;

зачастую выделяются в ходе цепных цитокиновых реакций (цитокиновые каскады);

могут действовать по интракринному (воздействие внутри клетки), аутокринному (на мембранные рецепторы этой же клетки), паракринному (на близлежащие клетки) и эндокринному (дистантно на клети любых органов и тканей) механизмам;

разные цитокины могут оказывать одинаковое действие на одну клетку (перекрываемость), а один цитокин может оказывать разное действие на разные клетки (плейотропность).

Косновным группам цитокинов относят:

интерлейкины – опосредуют межлейкоцитарные взаимодействия;

интерфероны – противовирусная, противоопухолевая и иммуномодулирующая активность;

факторы некроза опухолей (ФНО) – провоспалительная активность, индукция апоптоза;

трансформирующие ростовые факторы – регуляция воспаления и ангиогенеза;

хемокины – хемотаксис и активация клеток иммунной системы;

колониестимулирующие факторы – пролиферация кроветворных клеток

Интерлейкины (ИЛ) – п.с. гликопротеиды, которые синтезируются активированными (стимулированными АГ) клетками иммунной системы (ИС). Они обеспечивают разнообразные взаимодействия между клетками ИС.

В настоящее время выделяют 36 интерлейкинов. Основные эффекты отдельных интерлейкинов:

Факторы некроза опухолей (ФНО) – это провоспалительные цитокины, рецепторы к которым имеются на большинстве клеток.

Они выделены в отдельную группу цитокинов, так как могу вызывать апоптоз клеток.

Выделяют два типа ФНО:

ФНО-α (кахексин):

продуцируется Т-лимфоцитами, В-лимфоцитами и макрофагами;

вызывает лихорадку, синдром септического шока, апоптоз клеток (в т.ч. опухолевых), увеличение продукции ИЛ-1 и ИЛ-6, а в больших концентрациях – кахексию;

ФНО-β (лимфотоксин):

продуцируется Т-лимфоцитами и В-лимфоцитами;

вызывает апоптоз клеток.

Трансформирующий ростовой фактор β (TGF-β) синтезируется Т-лимфоцитами, В-лимфоцитами и макрофагами и подавляет пролиферацию и активацию лейкоцитов и макрофагов, то есть обладает иммуносупрессивным действием.

Хемокины – это большая группа полипептидных цитокинов, которые продуцируются широким рядом клеток: гранулоцитами, моноцитами, лимфоцитами, тромбоцитами, фибробластами и эпителиоцитами.

Их синтез в перечисленных клетках начинается либо при повреждении, либо при стимуляции отдельными цитокинами (ИЛ-1, ИЛ-6).

Хемокины опосредуют хемотаксис – направленное движение иммунокомпетентных клеток к очагу воспаления по градиенту их концентрации. Они способствуют как выходу иммунных клеток из сосудистого русла, так и их движению во внеклеточном матриксе.

Колониестимулирующие факторы (КСФ) синтезируются Т-лимфоцитами, В-лимфоцитами, моноцитами и стромальными клетками кроветворных и лимфоидных органов.

Они стимулируют образование колоний клеток миелоидного ряда и моноцитов в красном костном мозге, их дифференцировку и активацию. Соответственно, выделяют:

КСФ-Г (гранулоцитов);

КСФ-М (моноцитов);

КСФ-ГМ (гранулоцитов и моноцитов).

Среди интерлейкинов схожее действие оказывает ИЛ-3.

80. Понятие «иммунопрофилактика». Иммунобиологические препараты, используемые для иммунопрофилактики

Иммунопрофилактика инфекционных болезней (далее - иммунопрофилактика) – система мероприятий,

осуществляемых в целях предупреждения, ограничения распространения и ликвидации инфекционных болезней путем проведения профилактических прививок для создания или поддержания искусственного иммунитета.

Для профилактики и лечения заболеваний большое значение имеет создание профилактических и лечебных препаратов, объединяемых в группу «иммунобиологических препаратов» (ИБП)

ИБП включают:

Антигенные ИБП

ИБП на основе АТ

Иммуномодуляторы

Адаптогены – сложные химические вещества растительного происхождения, обладающие широким спектром биологической активности, действующие на иммунную систему

Диагностические препараты и системы для выявления АГ и АТ

АГ-содержащие ИБП применяют для создания активного искусственного приобретенного иммунитета с профилактической и лечебной целью.

В процессе активной иммунизации организма человека антигенами, входящих в состав ИБП, формируется первичный ИО или вакцинальный процесс, в течение которого происходит: (созревание, размножение, дифференцировка АГ-специфических, АТ-продуцирующих клеток, вырабатывающих иммуноглобулины, ИКК (иммунокомпетентных клеток) и клеток иммунологической памяти – надолго остаются циркулировать, храня …)

Повторный контакт иммунной системы с тем же АГ ведет к формированию вторичного ИО, результатом которого является интенсивная динамика прироста, высокие титры специфических АТ и ИКК.

Т.о., обеспечивается высокая готовность макроорганизма к встрече с АГ возбудителя заболевания.

В качестве антигенных средств используются, например, вакцины (см. вопрос 81)

81. Вакцины. Классификация вакцин. Применение вакцин.

ВАКЦИНАЦИЯ – самая массовая форма медицинского вмешательства (термин ввел Луи Пастер) => Дженнер применил коровью оспу для иммунизации людей против оспы человека.

Вакцины используют для профилактики и лечения инфекционных заболеваний

Главный компонент вакцины – иммунизирующий АГ (живые и убитые вирусы, бактерии или их отдельные АГ (Полисахаридный комплекс, ослабленный токсин или др. фрагмент возбудителя, кодирующий выработку специфических тех или иных ИКК))

Вакцины индуцируют развитие ИО!!!

Вакцинальный процесс – изменение гомеостаза, возникающий в организме после введения вакцинного препарата

Вакцинация осуществляется:

В плановом порядке (в обязательном порядке) – направлен на создание коллективного иммунитета к наиболее значимым инфекционным заболевания. Путем коллективной иммунизации создается иммунная прослойка, которая препятствует распространению инфекционных состояний в человеческом сообществе

По эпидемическим показателям – при угрозе вспышки инфекций в данной местности, при наличии эндемических очагов, по профессиональному признаку и по другим показаниям

Вакцины – это …

ИБП, предназначенные для формирования иммунологической памяти к АГ возбудителя, минуя стадию инфекционного заболевания

сложный ИБП, содержащий стабилизаторы, консерванты адъюванты, повышающие иммуногенность АГ

Разновидность вакцин:

живые

инактивированные

субъединичные

химические

синтетические

рекомбинантные

ДНК-вакцины

Конъюгированные

антиидиотипические

комбинированные

молекулярные

1. ЖИВЫЕ ВАКЦИНЫ

Вкачестве живых вакцин используют:

Аттенуированные штаммы – препараты, в которых действующим началом являются штаммы патогенных МО, ослабленные тем или иным способом (потерявшие вирулентность), но сохранившие иммуногенность

*вакцины против кори, эпидемического паротита, краснухи, полиомиелита, гриппа

Аттенуация (ослабление) достигается путем длительного воздействия на штамм химических, физических факторов, или путем длительного пассирования через организм невосприимчивых к возбудителю животных и других биологических объектов

Дивергентные штаммы – непатогенные для человека МО, имеющие общие протективные АГ с возбудителями инфекций

*вакцины против натуральной оспы (содержит коровью оспу), БЦЖ - туберкулезная (содержит микобактерии бычьего типа)

Преимущества: создают стойкий длительный иммунитет (приближается по напряженности к постинфекционному)

Для формирования стойкого иммунитета такие вакцины можно вводить однократно простыми методами (скарификационно (накожно) – наносят на наружную поверхность плеча, перорально – дозу вакцины закапывают в рот)

Однако всегда существует опасность реверсии с восстановлением патогенности и вирулентности вакцинных штаммов. Кроме того, у иммунокомпроментированных лиц даже ослабленные патогены могут вызвать инфекционный процесс

2. ИНАКТИВИРОВАННЫЕ ЦЕЛЬНОКЛЕТОЧНЫЕ ВАКЦИНЫ (УБИТЫЕ)

Действующее начало – МО (убитые), не вызывающие инфекционных заболеваний

Для инактивации используют:

Формальдегиды, спирты

Воздействие температуры, УФ или ионизирующего облучения и др. физические/химические методы, не приводящие к денатурации, т.е. инактивации протективных АГ

Убитые вакцины не могут вызвать инфекционных осложнений, они безопасны

*Примеры – вакцины против гриппа, полиомиелита, бешенства, брюшного тифа.

Убитые вакцины более безвредны, но, как правило, менее эффективны, чем ослабленные.

Однако, при повторном введении создают достаточно стойкий иммунитет. Поэтому применяют в виде нескольких инъекций на один курс вакцинации.

ПРОДОЛЖЕНИЕ ПОСМОТРИТЕ В ДОКУМЕНТЕ ПО 3 МОДУЛЮ (С 39-41)

https://vk.com/doc559196226_606259786?hash=37b23b03c61b7bcdd 3&dl=f7e12babed0e617c31

Лечебные вакцины применяются при длительном торпидном течении инфекции, при бактерио- и вирусоносительстве, в случаях безуспешной антибиотикотерапии.

К лечебным вакцинам относятся:

1.Моновакцины, содержащие патогенные микроорганизмы

2.Вакцины из условно-патогенных микроорганизмов.

3.Препараты из лизатов микроорганизмов

4.Инфекционные аллергены

ПРИМЕНЕНИЕ ВАКЦИН

Вакцины применяют парентерально: в/м, п/к, интраназально; перорально согласно календарю прививок или по определенным для каждой вакцины показаниям.

По своему составу вакцины могут быть:

1) моновакцинами, т. е. содержать патологические факторы одного микроорганизма; 2) ассоциированные, т. е. вакцины, в составе которых имеется несколько антигенных компонентов.

Применение пробиотиков в качестве лечебных и иммунопрофилактических средств основано на их способности оказывать иммуностимулирующее действие, конкурировать с патогенными микроорганизмами, синтезировать вещества антибиотического характера, способствовать витаминообразованию.

Препараты пробиотики готовят из живых представителей нормальной микрофлоры кишечника человека. Они разделяются на 4 поколения:

I поколение - классические монокомпонентные препараты,

II поколение - самоэлиминирующиеся антагонисты:

III поколение - комбинированные препараты, состоящие из нескольких штаммов бактерий (поликомпонентные) или включающие добавки, усиливающие их действие.

IV – поколение - иммобилизованные на сорбенте живые бактерии, представители нормофлоры.

Бруцеллезная вакцина (жидкая) – взвесь убитых нагреванием бруцелл овечьего и бычьего видов. Применяется для лечения больных в стадии ремиссии.

Гонококковая вакцина – взвесь убитых свежевыделенных 12 штаммов гонококков, полученных от больных с различными клиническими формами гонореи. Вакцину применяют для лечения хронической, торпидно протекающей гонореи и ее осложнений; для диагностики как метод "провокаций". Вводят в/м.

Вакцина стафилококковая – взвесь инактивированных нагреванием коагулазоположительных штаммов стафилококков, выделенных 1от больных. Применяют для лечения взрослых при заболеваниях кожи стафилококковой этиологии. Вводят п/к или в/м.

Вакцина стафилококковая сухая – комплекс антигенов, извлеченных из Staphylococcus aureus методом водной экстракции. Предназначена для лечения взрослых больных хроническими заболеваниями кожи стафилококковой и смешанной этиологии. Вводят п/к.

Вакцина стафилококковая лечебная жидкая (стафилококковый антифагин) – комплекс растворимых термолабильных антигенов, извлеченных из микробных клеток. Применяется для лечения пиодермии, фурункулов и других гнойничковых заболеваний кожи с 6-месячного возраста. Вводят п/к.

Поликомпонентная вакцина из антигенов условно-патогенных микроорганизмов (сухая) – белково-

липополисахаридный комплекс из антигенов Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli. Благодаря наличию перекрестных антигенов с другими возбудителями (пневмококк, гемофильная палочка) вакцина может быть использована для лечения заболеваний, вызванных широким спектром возбудителей. Применяется для иммунотерапии воспалительных хронических заболеваний органов дыхания (хронический бронхит, хроническая пневмония, инфекционно-аллергическая и смешанная формы бронхиальной астмы). Вакцина предназначена для лечения детей, начиная с 3-летнего возраста, и взрослых

(16-60 лет). Водится назально-подкожным и назально-оральным методами.

82. Реакции иммунитета с мечеными компонентами. РИФ, ИФА, ИХА

Для повышения чувствительности иммунологических методов диагностики разработаны реакции иммунитета с использованием меченых сывороток.

Сущность этих методов состоит в том, что комплекс АГ+АТ, образовавшийся при положительном результате реакции, выявляют с помощью меченой сыворотки. В случае серодиагностических реакций используется антиглобулиновая сыворотка, которую получают при иммунизации животных иммуноглобулинами человека. Любое антитело в комплексе АГ+АТ является иммуноглобулином и будет являться антигеном по отношению к антиглобулиновой сыворотке.

В реакциях, применяемых с целью иммуноиндикации используются меченые сыворотки, содержащие антитела к искомому антигену. В качестве меток могут быть использованы:

Флюоресцентные красители (флюорохромы) – РИФ (реакция иммунофлюоресценции)

Радиоактивные изотопы – РИА (радиоиммунный анализ)

Фермент – РИФА (реакция иммуноферментного анализа) или ИФА (иммуноферментный анализ)

Красители – ИХА (иммунохроматографический анализ)

РИФ

1. Реакция непрямой иммунофлюоресценции

*Применяется для серодиагностики

Компоненты реакции:

Эталонный штамм (АГ)

Исследуемая сыворотка (хАТ)

Меченая антиглобулиновая сыворотка

Механизм реакции: на рисунке схема положительной серодиагностической непрямой РИФ

Из эталонного штамма возбудителя на предметном стекле готовят мазки как для обычной микроскопии. Препарат фиксируют метиловым спиртом или другим химическим фиксатором. На поверхность фиксированного мазка наносят исследуемую сыворотку от больного в разных разведениях. Если в сыворотке присутствуют искомые антитела, то образуется комплекс АГ+АТ, прочно связанный с предметным стеклом. При промывании буферным раствором антитела остаются в образовавшемся комплексе. Затем препарат обрабатывают меченой сывороткой против иммуноглобулинов человека, содержащей антитела к антителам человека, меченные флюоресцеина изотиоцианатом (ФИТЦ). Меченное флюорохромом антитело образует с