2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Mikrobiologia_

**некротическая ткань на стенках глотки и гортани образует прилипшую серую плотную мембрану (псевдомембрана). Иногда псевдомембрана может отсоединиться и попасть в трахею и бронхи и закупорить дыхательные пути => в результате наступить смерть вследствие асфиксии

2)Прикрепятся к эпителию глотки => дойдет до кровотока => поразит сердце (вызывая миокардит) или почки (канальцевый некроз), или даже нервы (демиелинизация – разрушение миелиновой оболочки аксона, что приведет к полинейропатии (паралич глазодвигательных мышц, диафрагмального нерва – затруднение дыхания))

Клинические проявления: инкубационный период от 2 до 12 дней; инфекция проявляется след. образом:

небольшая лихорадка, общее недомогание и слабость

ФАРЕНГИАЛЬНАЯ ДИФТЕРИЯ – боли в горле, отек шеи (бычья шея), псевдомембранозная пленка в горле

КОЖНАЯ ФОРМА – незаживающие перфорированные язвы, иногда с сероватой пленкой

При миокардите – аритмия, сердечная недостаточность

Острый канальцевый некроз – олигурия

Паралич глазодвигательных мышц – диплопия (двоение), невозможность повернуть глаза (вверх, вниз, в стороны)

Микробиологическая диагностика:

Материал для БАК-исследования: мазок из горла или поражения кожи (если результат «+», то определяют токсигенность (см. БАК исследование))

Методы исследования:

1.Бактериологическое исследование: используют тест ЭЛЕКА: бактерии выращивают на чашке с агаром, где также находится пропитанная анатоксином фильтрованная бумага => если штамм образует ДТ, то происходит реакция и появляется полоса с осадком

2.Анализ ДНК с помощью ПЦР

3.Серодиагностика – РА, РПГА, ИФА.

4.Для ускоренного обнаружения дифтерийного токсина применяют РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом, ИФА.

Профилактика:

Вакцинопрофилактика – вакцинация АКДС с 3 месяцев жизни (3-кратно с интервалом 30–40 дней. Через 9–12 месяцев необходима ревакцинация. Для ревакцинации в 6, 7, 11, 16 лет – АДС–м)

Вакцина Тетракок – профилактика коклюша, дифтерии, столбняка, полиомиелита

Вакцина Д.Т. Вакс – содержит дифтерийный и столбнячный анатоксины

Д.Т. Адюльт – содержит дифтерийный и столбнячный анатоксины

Вакцина – содержит анатоксин (т.е. модифицированный ДТ, мобилизующий ИС и готовит организм к возможной настоящей инфекции, при этом сам анатоксин никакого вреда не оказывает.) Он обычно включен в комбинированную вакцину АКДС (защищает от коклюша, дифтерии и столбняка) и пентаксим (защищает от коклюша, столбняка, дифтерии, полиомиелита, гемофильной инфекции)

Лечение:

Лечение начинается при подозрении, до проведения анализов – изоляция пациента, дают в/м прокаин-пенициллин G (в случае аллергии на пенициллин – эритромицин)

Если токсигенность бактерии была доказана, для нейтрализации ДТ вводят дифтерийный анатоксин

Дифтерия — это токсинемическая инфекция. Поэтому в целях нейтрализации дифтерийного гистотоксина применяют специфическую противодифтерийную лошадиную сыворотку –

специфическое лечение начинают немедленно при клиническом подозрении на дифтерию, так как антитела не нейтрализуют токсин, проникший в ткани. Для предотвращения возможных аллергических реакций перед введением сыворотки обязательно ставят кожную пробу с лошадиной сывороткой в разведении 1:100 для определения чувствительности больного к белкам сыворотки лошади. Введение сыворотки после 3-го дня болезни считается поздним.

Помимо лошадиной сыворотки, для лечения применяют иммуноглобулин человека противодифтерийный для внутривенного введения. Разработана лечебная противодифтерийная вакцина «Кодивак». Она представляет собой дезинтеграт дифтерийных палочек.

Одновременно с введением антитоксической противодифтерийной сыворотки больным

необходимо назначать этиотропную антибиотикотерапию. При лечении бактерионосителей необходимо проводить стимуляцию антибактериального иммунитета.

49.Туберкулез и микобактериозы. Характеристика возбудителей. МБД. СП

ТУБЕРКУЛЕЗ

Возбудитель туберкулеза относится к семейству Mycobacteriaceae, роду Mycobacterium.

Микобактерии туберкулеза - это

Длинные, тонкие, могут быть слегка изогнуты, Гр (+) палочки, располагающиеся одиночно или группами

Аэробы, спор и капсул не образуют, неподвижны

В цитоплазме при окраске обнаруживаются зернистость («зерна Муха»).

Высокое содержание в клеточной стенке липидов, что придает этим бактериям устойчивость к кислотам, щелочам и спирту

По этой же причине они плохо воспринимают анилиновые красители

Но по Граму окрашиваются с трудом. Для их окраски пользуются методом Циля-Нильсена

Требовательны к питательным средам. Оптимальной средой для их культивирования является яичная среда с добавлением глицерина. Могут использоваться также синтетическим среды.

Микобактерии туберкулеза растут медленно; через 28-35 дней на плотных средах формируются морщинистые, сухие, с неровными краями, изолированные, не сливающиеся друг с другом колонии. На жидких средах растут в виде морщинистой пленки.

Для дифференциации видов микобактерий используют различия в их биохимических свойствах

(ниациновый тест, редукция нитратов, расщепление мочевины, никотинамида).

Антигенная структура микобактерий довольно сложна. Их антигенами являются белки и фосфотиды клеточной стенки, корд-фактор и эндотоксин.

Факторами вирулентности возбудителей туберкулеза являются токсические компоненты клеточной стенки

-высшие жирные кислоты (миколовая, туберкулостеариновая, фтионовая), эндотоксин - туберкулин и корд-фактор (димиколат трегалозы).

Основной источник заражения - больной человек; эпидемиологическую опасность представляют только больные с открытой формой туберкулеза, которые выделяют возбудителя в окружающую среду.

Основной путь заражения - воздушно-капельный, но возможен и контактно-бытовой.

Источником заражения могут быть и больные туберкулезом домашние животные.

Туберкулез - хроническое инфекционное заболевание, характеризующееся образованием в различных органах, чаще в легких, специфических воспалительных изменений.

По локализации различают ряд клинических форм туберкулеза: туберкулез легких, туберкулез почек, костно-суставный туберкулез, туберкулез половых органов, туберкулезный менингит.

При первичном инфицировании в раннем детском возрасте с обычной локализацией в легких формируется первичный туберкулезный комплекс, который включает воспалительный очаг в паренхиме легкого, лимфангоит и регионарный лимфаденит. Первичный комплекс в легких со временем может инкапсулироваться и кальцинироваться с образованием петрификата. Однако этот процесс не завершается освобождением организма от микобактерий. Они сохраняются в организме на протяжении многих лет, поддерживая состояние инфицированности.

Вторичный туберкулез развивается в более позднем возрасте при повторном инфицировании или активации эндогенной инфекции.

Иммунитет при туберкулезе имеет свои особенности.

Во-первых, он нестерильный, т.е. поддерживается бактериями, персистирующими в организме и обеспечивающими состояние инфицированности.

Во-вторых, он неустойчивый, т.е. те самые бактерии, которые обеспечивают инфицированность, могут явиться причиной эндогенной инфекции.

В-третьих, антитела не играют существенной роли в противотуберкулезном иммунитете. Антитела являются лишь “свидетелями” иммунитета и не оказывают ингибирующего действия на возбудителя.

В-четвертых, основной механизм противотуберкулезного иммунитета клеточный, реализуемый через гиперчувствительность замедленного типа. Определенное значение имеют и механизмы неспецифической защиты.

Для микробиологической диагностики туберкулеза используют разные методы.

Можно применять микроскопическое исследование (микроскопия мазков, окрашенных по ЦилюНильсену или люминисцентная микроскопия мазков, обработанных флюорохромами).

Основным методом диагностики является бактериологический; материал для исследования определяется клинической формой болезни. При туберкулезе легких - это мокрота.

Возможно применение методов иммуноиндикации, серодиагностики, а также молекулярногенетических.

При массовых обследованиях населения используется аллергический метод диагностики (постановка аллергической диагностической пробы Манту). Эта же проба применяется для оценки напряженности противотуберкулезного иммунитета.

Для лечения туберкулеза используют противотуберкулезные средства:

препараты первого ряда - изониазид, тубазид, фтивазид, стрептомицин, ПАСК, ГИНК;

препараты второго ряда - этионамид, циклосерин, канамицин, рифампицин, виомицин.

Специфическая профилактика осуществляется живой вакциной БЦЖ.

Первичная вакцинация проводится всем детям на 3-5 день после рождения. Ревакцинация - в определенных возрастных группах лицам с отрицательной пробой Манту.

 МИКОБАКТЕРИОЗЫ

Микоплазмы выделены в класс Mollicutes, порядок Mycoplasmatalеs, который включает ряд семейств, в том числе семейство Mycoplasmatataceae; последнее делится на 6 родов, из них в патологии человека играют роль представители родов Mycoplasma и Ureaplasma.

Микоплазмы - это бактерии.

Отличительной биологической особенностью представителей этого семейства является отсутствие у них ригидной клеточной стенки, вместо которой они покрыты трехслойной “объединяющей” мембраной, т.е. они имеют только одну липопротеиновую мембрану, выполняющую функции собственно ЦПМ и КС.

Микоплазмы резистентны к АБ – ингибиторам синтеза клеточной стенки.

Культура микоплазм состоит из “зрелых” (400-1400 нм) клеток и “элементарных” телец (100-250 нм). Последние могут находиться как внутри, так и вне “зрелых” клеток.

Микоплазмы отличаются выраженным полиморфизмом, морфология клеток не зависит от вида микоплазм, а определяется условиями культивирования. При выращивании на жидких питательных средах образуется большое количество различных форм, при выращивании на плотных - формируются сгустки протоплазмы неопределенной формы в виде дисков или шариков.

Неподвижны. Спор и капсул не имеют. Окрашиваются грамотрицательно. Аэробы и анаэробы.

Микоплазмы требовательны к питательным средам: для их культивирования используют сложные питательные среды (сердечно-мозговой агар или бульон с добавлением 30% сыворотки крупного рогатого скота). Температура культивирования 370С в течении 48-96 часов.

На плотной питательной среде микоплазмы образуют характерные колонии, напоминающие “яичницуглазунью”: колонии круглые с зернистой поверхностью и втянутым темным центром; плотно спаяны со средой.

Колонии различных видов микоплазм не отличаются. На жидких питательных средах растут, образуя легкое помутнение.

Видовая дифференциация микоплазм проводится на основании изучения их антигенной структуры.

Род Mycoplasma насчитывает более 100 видов. Человек является естественным носителем не менее 13 видов микоплазм, которые вегетируют на слизистых оболочках глаза, дыхательных, пищеварительных и мочеполовых путей.

В патологии человека наибольшую роль играют M.pneumoniae, M.hominis и представитель рода Ureaplasma

- U.urealyticum.

Представители рода Ureaplasma дают мелкие колонии на твердых сложных средах, важной особенностью для них является потребность в мочевине.

Патогенные для человека микоплазмы вызывают у него заболевания (микоплазмозы) дыхательных, мочеполовых путей и суставов с разнообразными клиническими проявлениями.

 Респираторный микоплазмоз.

Возбудителем заболевания является M.pneumoniae - единственный вид этого рода, патогенность которого для человека доказана.

Основные биологические и морфологические свойства типичны для рода Mycoplasma.

В антигенном отношении вид однороден, типоспецифических антигенов не обнаружено.

M.pneumoniae обладает тропизмом к эпителиальным клеткам дыхательных путей.

Вирулентность их связана с наличием гемолитической активности и способностью оказывать цитотоксическое действие.

Источником инфекции является больной человек, а также носители.

Заражение – воздушно-капельным путем. Возбудитель адсорбируется на слизистой оболочке верхних дыхательных путей, размножается и активно распространяется по слизистой оболочке трахеи и бронхов, достигая альвеолоцитов. В результате повреждения клеток развивается пневмония.

Постинфекционный иммунитет сохраняется в течение 5-10 лет. Он обусловлен как секреторными, так и гуморальными антителами.

 Урогенитальный микоплазмоз.

Возбудителями заболевания являются M.hominis и U.urealyticum. Этими видами микоплазм инфицировано не менее 50% здоровых мужчин и женщин в возрасте 30-50 лет.

Основные биологические и морфологические свойства типичны для семейства Mycoplasmataceae.

M.hominis в антигенном отношении гетерогенны: различают 8 сероваров. U.urealyticum также неоднородны в антигенном отношении: выделяют 8 сероваров человеческого и 8 – животного происхождения.

M.hominis и U.urealyticum в организме человека чаще всего паразитируют на слизистых оболочках нижних отделов мочеполовых путей.

Источник инфекции - инфицированный человек, в том числе, и очень часто, бессимптомный носитель микоплазм.

Заражение происходит путем полового контакта.

Клиническая картина микоплазменной инфекции не имеет патогномоничных только для нее симптомов.

Этиологическая роль микоплазм и уреаплазм в возникновении сальпингитов, оофоритов, кольпитов, эндоцервицитов, уретритов, простатитов. Эти микоплазмы выделены при сепсисе, абсцессах мозга; доказана их роль в развитии гломерулонефритов, циститов. Микоплазменная и уреаплазменная инфекции могут быть причиной бесплодия, различной патологии беременности (выкидыши, преждевременные роды, мертворождение плода) и новорожденных.

Для микробиологической диагностики применяют бактериологическое исследование, методы серодиагностики, иммуноиндикации, молекулярногенетические.

Этиотропная терапия проводится антибиотиками (тетрациклины, макролиды) и фторхинолонами.

Для специфической профилактики пневмонии, вызванной микоплазмами, разработана вакцина.

Трихофития

Микроспория

Фавус

эпидермофития

Лабораторная диагностика:

микроскопия

микологический – посев на питательные среды

Лечение:

низорал (кетоконазол);

клотримазол.

III. Подкожные или субкутанные микозы

o Возбудители этих микозов находятся в почве, древесине, на гниющих растениях.

o Внедряются в местах микротравм. Вовлекают глубокие слои кожи, подкожные ткани – мышцы, фасции.

Заболевания:

Споротрихоз;

Хромобластомикоз;

Мадуромикоз.

IV. Глубокие или системные микозы (особо опасные инфекции)

o Распространены на Американском континенте.

o Находятся в почве, путь передачи – воздушно-капельный.

o При висцеральных микозах поражаются различные органы, вплоть до летального исхода.

Заболевания:

гистоплазмоз;

бластомикоз;

кокцидиом;

криптококкоз.

Лечение: амфотерицин Б.

V. Оппортунистические микозы.

oВозбудители - условно-патогенные грибы родов Оппорту:

-Aspergileus, Мucor;

-Penicillium;

-Fusarium;

-Pneumocystis carinii;

-Candida spp.

Род Candida

o Дрожжеподобные грибы, крупные, овальной формы, одноклеточные. o Это Гр (+), аэробы.

o По биохимическим свойствам делятся на 200 видов.

oКлиническое значение, в основном, принадлежит:

-C. albicans;

-C. krusei;

-C. tropicalis.

Взависимости от формы и структурной организации фаги подразделяют на несколько морфологических типов:

нитевидные

кубические

сперматозоидные.

Наиболее изучены бактериофаги, имеющие форму сперматозоида и сокращающийся чехол отростка.

o Они состоят из головки и хвостового отростка

o Хвостовой отросток имеет внутри полый цилиндрический стержень, который сообщается с головкой, а снаружи – чехол, способный к сокращению

o На дистальном конце отростка имеется базальная пластинка с шипами, от которых отходят фибриллы

Бактериофаги содержат или ДНК или РНК, чаще замкнутую в кольцо

Содержат группоспецифические и типоспецифические антигены. По типоспецифическим антигенам фаги делят на серотипы.

Взаимодействие бактериофага с клеткой происходит в соответствии с основными типами взаимодействия, характерными для вирусов:

при продуктивном типе взаимодействия образуется фаговое потомство, бактерии лизируются;

при абортивном типе – фаговое потомство не образуется и бактерии сохраняют свою жизнедеятельность;

латентная

при интегративном типе – геном фага встраивается в хромосому бактерии и сосуществует с ней.

Взависимости от типа взаимодействия различают:

вирулентные (литические) фаги, вызывающие продуктивную инфекцию и лизис бактериальной клетки;

умеренные фаги – вызывающие латентную инфекцию и ассоциацию генома вируса с бактериальной хромосомой.

Умеренные фаги в отличие от вирулентных, не вызывают гибель бактериальной клетки и при взаимодействии с ней переходят в неинфекционную форму фага – ПРОФАГ – это геном фага, ассоциированный с бактериальной хромосомой. Профаг, ставший частью хромосомы клетки, при ее размножении реплицируется синхронно с геномом бактерий и передается по наследству от клетки к клетке.

Бактериальные клетки, содержащие в своей хромосоме профаг, называются лизогенными. Профаг в лизогенных клетках самопроизвольно или под влиянием различных индуцирующих агентов может переходить в вегетативный фаг. В результате такого превращения бактериальная клетка лизируется и продуцирует фаговые частицы. В ходе лизирования бактериальные клетки приобретают новые признаки, детерминируемые геномом вируса. Такое явление - изменение свойств микроорганизмов под влиянием профага – называется фаговой или лизогенной конверсией.

Некоторые умеренные фаги называются трансдуцирующими, так как с их помощью осуществляется один из механизмов генетической рекомбинации бактерий – трансдукция.

По признаку специфичности выделяют:

поливалентные бактериофаги – лизируют культуры одного семейства или рода бактерий;

моновалентные – лизируют культуры только одного вида;

типовые – способные вызывать лизис только определенного типа (варианта) бактериальной культуры внутри вида.

Практическое использование явления бактериофагии:

1.Фаготипирование – определение фаготипов бактерий и сравнение фаготипов выделенных от больного и от окружающих его лиц. С помощью этого метода можно установить источник и путь передачи инфекционного заболевания.

2.Применения бактериофагов в качестве диагностических препаратов для установления рода и вида бактерий, выделенных в ходе бактериологического исследования.

3.Лечебное и профилактическое действие фагов. Отличительной чертой бактериофагов как терапевтических средств является почти полное отсутствие у них побочного действия.

4.Бактериофаги широко применяются в генной инженерии в качестве векторов для получения рекомбинантных ДНК.

53.Вирусы, их особенности, строение вириона. Принципы классификации вирусов. Мимивирусы.

Вирусы - неклеточные формы.

Основные черты, объединяющие представителей этого царства:

неклеточная форма существования;

очень малые размеры;

лишены собственного белоксинтезирующего и энергетического аппаратов;

абсолютные внутриклеточные паразиты на генетическом уровне;

имеют одну нуклеиновую кислоту (геном);

вирусы имеют необычный тип размножения – дизъюнктивная репродукция – разобщенность процессов репродукции во времени и пространстве;

возможность интеграции в геном клетки хозяина и синхронной с ним репликации;

вирусы существуют в двух формах: внутриклеточной и внеклеточной. Вирусы не способны размножаться на искусственной питательной среде.

Их выделяют: в организме восприимчивого животного;

культивирование в курином эмбрионе, в культуре ткани.

Структурная организация вирусов:

Представители царства Vira имеют разную форму и размеры (от 20нм до 400 нм).

Различают простые безоболочечные вирусы и сложно устроенные оболочечные вирусы. У тех и у других в центре находится молекула нуклеиновой кислоты (РНК или ДНК), окруженная белковой оболочкой капсидом. Такая структура называется НУКЛЕОКАПСИД. У сложных вирусов нуклеокапсид является сердцевиной вириона, поверх расположен суперкапсид.

В липидный слой мембраны встроены белки-гликопротеины, расположенные трансмембранно и выступающие наружу в виде шипиков. Это гликопротеины – гемагглютинин и нейраминидаза, белки слияния и другие, ответственные за прикрепление вириона к рецепторам клетки и проникновение в клетку.

У сложных вирусов к суперкапсиду изнутри прилегает слой матриксного белка (М-слой).

Капсиды вирусов построены по спиральному, кубическому и смешанному типу симметрии в зависимости от расположения белковых субъединиц.

Вирусные ДНК обычно бывают двунитевыми, редко однонитевыми. Двунитевые ДНК бывают: линейными с замкнутыми концами, линейные с незамкнутыми концами, циркулярно-замкнутые (кольцевидные), циркулярнозамкнутые с одной неполной нитью ДНК.

Вирусные РНК, как правило, однонитевые, но имеются и двунитевые РНК с фрагментированным геномом. Различают РНК с положительным геномом (плюс РНК) и отрицательным геномом (минус РНК). Плюс РНК одновременно выполняет функции генома и информационной РНК, служит матрицей для синтеза дочерних геномов. Минус РНК свойственна только геномная функции, т.е. она служит матрицей для синтеза как геномной, так и и- РНК. Функции НК: хранитель генетической информации (независимо от типа НК); функция и РНК у РНК + нитей.

Вирусные белки подразделяются на структурные и неструктурные. Структурные белки входят в состав вириона, это: капсидные белки; внутренние белки - геномные белки и ферменты; матриксные белки сложных вирусов, образующие М–слой; суперкапсидные поверхностные белки – гликопротеины. Неструктурные белки синтезируются в инфицированной клетке для обеспечения процесса репродукции и в состав вирионов не входят, к ним относятся: вирусиндуцированные ферменты; регуляторные белки;

нестабильные белки –из них формируются структурные белки вириона; ферменты, модифицирующие вирусные белки (протеазы, протеинкиназы).

МИМИВИРУС

Название «мимивирус» было дано этому вирусу как сокращение от «мимикрирующий под микроб». Это связано с тем, что некоторое время этот вирус считали микроорганизмом, а не вирусом, на основании таких признаков, как крупный размер, наличие белковых нитей, похожих на жгутики, и способность окрашиваться по методу Грама.

54. Типы взаимодействия вируса с клеткой. Продуктивная вирусная инфекция.

Выделяют несколько механизмов взаимодействия вируса и клетки:

1.Продуктивная инфекция – происходит репродукция вируса, а клетка погибает, лежит в основе большинства острых вирусных инфекций.

2.Латентная вирусная инфекция – клетка, инфицированная вирусом, не погибает. Происходит синтез и вирусных и клеточных компонентов. Клетка не погибает, синтез ее нуклеиновых кислот и белков преобладает над синтезом вирусных НК.

Различают условную и безусловную латентную инфекцию.

В основе условной латентной вирусной инфекции лежит механизм продуктивного типа взаимодействия вируса с клеткой, но происходит поражение не всех клеток органа, а остальные неповрежденные клетки компенсируют их функции. Поэтому инфекция определенное время не проявляется.

В основе безусловной латентной вирусной инфекции лежит латентный тип взаимодействия вируса с клеткой, при котором происходит синтез и клеточных и вирусных компонентов, но клеточный синтез преобладает и поэтому клетка длительно сохраняет свои функции.

3.Абортивная вирусная инфекция – репродукции вируса не происходит (она нарушается), а клетка восстанавливает свои свойства.

4.Вирус-индуцированная трансформация – клетка приобретает новые свойства под действием генома вируса, который встраивается в геном клетки. Этот тип взаимодействия обуславливает механизм вирусного канцерогенеза.

ПРОДУКТИВНАЯ ВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ - осуществляется в три периода:

1.Начальный период

Адсорбция вируса на клетке осуществляется при наличии рецепторов. Адсорбция вируса на клетке начинается как неспецифическая, затем переходит в специфическую фазу.

Проникновение вирионов в клетку происходит путем рецепторного эндоцитоза или путем слияния мембран суперкапсида вируса и клетки.

Депротеинизация вирусов с целью освобождения его НК. Освобожденная геномная НК приобретает способность индуцировать репродукцию вирусов.

2.Средний период

Эксперессия вирусного генома становиться возможной после высвобождения вирусной НК, иногда требуется ее транспортировка в ядро клетки и взаимодействие с клеточным геномом. Проникнув вглубь клетки, вирус исчезает и никакими методами его не обнаружить.

Синтез белков и НК вируса, который разобщен во времени и пространстве. Синтез осуществляется в различных частях клетки – дезъюнктивный. Это соответствует первой фазе среднего периода - фазе ранних вирусных белков. Во вторую фазу среднего периода происходит смена генетической информации клетки на генетическую информацию вируса. Управление функциями клеток переходит к вирусному геному – что соответствует фазе СИ (смены информации).

3.Заключительный период

Реализация генетической программы вируса начинается с процесса транскрипции с последующей трансляцией и репликацией вирусного генома, в результате чего образуются компоненты вируса.