- •Рецензенты:
- •1.2. Статус клинико-диагностической лаборатории
- •1.4. Организация рабочих мест и оснащение клинико-диагностической лаборатории
- •1.5. Правила безопасной работы в лаборатории
- •1.5.1. Санитарно-противоэпидемический режим в клинико-диагностической лаборатории
- •1.5.2. Средства индивидуальной защиты
- •1.5.3. Правила обеззараживания использованного биологического материала
- •1.5.4. Способы и средства дезинфекции и стерилизации изделий медицинского назначения в кдл
- •1.5.5. Противопожарная безопасность в кдл
- •1.5.6. Правила безопасной работы с едкими веществами (кислоты, щелочи)
- •1.5.7. Первая помощь пострадавшим в лаборатории
- •2.2. Средства пробоподготовки в лаборатории. Дозирующие устройства
- •2.3. Центрифугирование
- •2.4. Перемешивающие и термостатирующие устройства
- •2.5. Весоизмерительная техника
- •2.6. Лабораторные реагенты
- •Правила хранения химических реактивов
- •2.7. Правила приготовления растворов
- •Например, широко используемый для работы с клетками крови фосфатный буфер (рН 5,8-8,2) приготавливается следующим образом:
- •2.7.1. Определение рН растворов
- •2.7.2. Фильтрование
- •2.7.3. Определение плотности растворов
- •2.7.4. Измерение температуры растворов
- •2.8. Оборудование клинико-диагностической лаборатории
- •3.2. Запрос на анализ
- •3.3. Взятие материала
- •3.6. Выбор метода и режима исследования
- •3.7. Обеспечение качества лабораторных исследований
- •3.7.1. Система управления качеством лабораторных исследований
- •3.8. Представление результатов лабораторных исследований
- •3.9. Принципы оценки результатов лабораторных исследований
- •3.9.2. Референтные интервалы лабораторных показателей
- •4.1.1. Основные условия измерений при работе с фотометрической аппаратурой
- •4.1.2. Способы измерений, расчета и представления результатов фотометрии
- •4.2.1. Способы детекции результатов иммунохимической реакции
- •4.2.2. Краткий обзор некоторых иммунохимических тестов
- •4.2.3. Радиоиммунологический анализ
- •4.2.4. Иммуноферментный анализ
- •4.2.5. Иммуноблотинг
- •4.3. Методы фракционирования биологических жидкостей
- •4.3.2. Электрофорез
- •Иммуноэлектрофорез
- •Электрофорез с последующей иммунофиксацией
- •4.4. Методы микроскопии в клинико-диагностической лаборатории
- •4.4.1. Методы световой микроскопии
- •4.4.2. Современные микроскопические приборы
- •Инвертированные микроскопы проходящего света
- •Люминесцентный микроскоп
- •4.4.3. Уход за микроскопом
- •4.5. Сухая химия
- •4.6. Молекулярно-биологические методы исследований
- •4.6.1. Применение пцр в клинической практике
- •4.6.2. Пцр в реальном времени
- •Глава 1. Введение
- •Глава 2. Цель, задачи, критерии контроля качаства
- •Глава 3. Контрольные материалы
- •Глава 4. Этапы лабораторных исследований, подлежащие контролю качества
- •Глава 5. Проведение внутрилабораторного контроля
- •Глава 6. Стадии внутрилабораторного контроля
- •Глава 1. Введение
- •Глава 2. Цель и задачи
- •Глава 3. Организация внешнего контроля качества
- •Глава 4. Мероприятия внешнего контроля качества
- •Глава 5. Статистическая обработка и оценка результатов внешнего контроля качества
4.4.3. Уход за микроскопом
Срок службы микроскопа рассчитан приблизительно на 15 лет с учетом естественного старения. Для длительного сохранения микроскопа в рабочем состоянии необходимо выполнять следующие правила эксплуатации и ухода:
В нерабочее время микроскоп убирают в футляр или, еще лучше, оставляя на рабочем столе, накрывают специальным чехлом, нижний край которого плотно, без щелей соприкасается с поверхностью стола.
Удаление пыли с микроскопа производят мягкой чистой кистью, затем протирают сухой, мягкой, совершенно чистой салфеткой.
Жидкости, попадающие на микроскоп во время работы, тщательно удаляют (кедровое масло и канадский бальзам смываются бензином, наркозным эфиром или ксилолом).
Особое внимание следует обращать на чистоту оптических частей микроскопа, особенно объективов. Нельзя прикасаться к поверхностям линз пальцами, так как это загрязняет их жиром и потом. Для чистки внешних поверхностей линз объективов используют мягкую тряпочку, смоченную чистым спиртом (можно использовать также бензин, наркозный эфир или ксилол). Особое внимание следует обратить на очистку иммерсионных объективов после использования. Масло стирают сухой мягкой тряпочкой, при необходимости объективы протирают чистым спиртом. Развинчивать и разбирать объектив нельзя во избежание его порчи.
4.5. Сухая химия
Сухая химия («dry сhemistry») подразумевает анализ биологических жидкостей с помощью технологий использования сухих реагентов на твердофазных носителях. После нанесения исследуемой жидкости на тест-системы происходит активация реагентов и химическая реакция (как в пробирке). Учет результатов может быть качественным, полуколичественным и количественным.
Среди простейших диагностических тестов на твердофазном носителе следует назвать экспресс-тесты в виде моно- (на один компонент) и политестов (на несколько компонентов) для исследования мочи (рН, кетоны, глюкоза, белок, билирубин, уробилиноген, эритроциты, гемоглобин, нитриты, удельный вес) и некоторых компонентов в сыворотке крови (например, мочевина, глюкоза, псевдо-холинэстераза). Оценка результатов производится визуально по цветной шкале и позволяет проводить полуколичественные определения.
Количественные методы «сухой химии» связаны с использованием измерительных приборов. Наиболее часто они основаны на принципах отражательной фотометрии, флюоресцентной спектроскопии, кондуктометрии.
Разработка систем “сухой химии” проводится по двум основным направлениям: с использованием многослойных пленок (слайдов) и с применением импрегнированных волокон.
Аналитические слайды состоят из нескольких слоев, каждый из которых выполняет свою функцию:
1. распределительный слой представляет собой полимер капиллярной структуры со свободным объемом 80%. Он обеспечивает быстрое и равномерное распространение анализируемой жидкости в более глубокие слои. При спектрофотометрическом определении этот слой служит отражающей поверхностью. Свет определенной длины волны проникает через прозрачное основание пленки, отражается от нижней поверхности распределительного слоя, улавливается фотодетектором и измеряется.
2. буферный слой содержит компоненты буферных смесей для поддержания оптимальной для химической реакции рН.
3. реакционный слой (каталитический). В этом слое происходит химическая реакция.
4. разделительный слой. Если продукты химических превращений мешают определению исследуемого вещества, их действие нивелируется физическими или химическими способами.
5. проявительный слой содержит красители или специальные реагенты для образования окрашенных продуктов реакции, которые могут быть определены количественно.
Технологии, основанные на использовании слайдов, впервые были предложены в лабораториях фирмы Коdak. В настоящее время микрослайдовые технологии этой фирмы широко используются в различных областях медицины (военной, экстремальной и.т.д.).
В тестах второго типа в качестве носителя используют импрегнированные волокна из чистой альфа-целлюлозы. Бумажные матрицы имеют стандартную плотность волокон и определенную толщину. Реактивы абсорбируются на носителе путем погружения в соответствующие растворы с последующим высушиванием. Ведущим производителем таких систем является фирма «Roche Diagnostics». Эти системы «сухой химии» позволяют определить количественно различные компоненты биожидкостей: ферменты, субстраты (глюкоза, холестерин, белок, билирубин и др.).
Системы “сухой химии” являются удобным диагностическим средством для тех ситуаций, когда необходимо получение быстрых и надежных результатов (скорая помощь; у постели больного; полевые условия, профосмотры, скрининговые обследования, амбулаторные приемы).
К их достоинствам относятся:
быстрота и простота анализа;
малый объем биопробы жидкости, необходимый для анализа;
возможность получения качественных и полуколичественных результатов без использования оборудования и высококвалифицированного персонала;
возможность проведения анализа в цельной крови (во многих случаях);
простота обслуживания приборов для количественного определения.
Недостатками систем «сухой химии» являются:
довольно высокая стоимость анализа;
зависимость выбора метода от производителя;
возможность интерференции лекарств.
Основная часть стоимости приходится на дорогостоящую технологию, так как каждая партия требует калибровки, и специфическая информация для каждого носителя реактивов должна быть нанесена на магнитный код.