2. Влияние экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка на иммунологические показатели у больных токсидермией.

Результаты проведенных иммунологических исследований свидетельствовали о положительных изменениях в цитокиновом профиле больных токсидермией, которым назначался экстракт из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка (Рис. 8).

Рисунок 8. Содержание некоторых цитокинов в сыворотке крови больных токсидермией до и после лечения экстрактом из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка.

Мы провели исследование содержания цитокинов (табл. 17). В процессе лечения экстрактом из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка у больных токсидермией произошло резкое снижение в сосудистом русле провоспалительных цитокинов (ФНО-α - до 23,4±2,4 пг/мл), IL-1RА с 186,3±16,3 пг/мл до 130,8±15,5 пг/мл при 125,9±15,5 пг/мл – у здоровых доноров. Содержание IL-1β осталось практически на том же уровне (соответственно 28,1±2,4 пг/мл до 26,3±2,3 пг/мл при 24,5±2,3 пг/мл).

Таблица 17

Содержание цитокинов в сыворотке крови больных токсидермией до и

после лечения Рузамом

Цитокины пг/мл	Больные токсидермией до лечения (n=20)	Больные токсидермией после лечения (n=19)	Здоровые доноры (n=20)
IL1 β	28,1±2,4	26,3±2,3	24,5±2,3
IL1-RA	186,3±16,3	130,8±15,5	125,9 ±15,5
ФНОα	85,6±3,8*	23,4±2,4	21,3±2,1

*- достоверно по сравнению со здоровыми донорами, p<0,05

Положительное воздействие экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка на состояние цитокинового статуса больных токсидермией характеризовалось также значительным снижением количественного содержания гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ) провоспалительного цитокина, играющего значительную роль в сохранении воспалительной реакции в дермо-эпидермальном пространстве, с 96,4±8,5 пг/мл до 27,6±2,3 пг/мл при 23,8±2,2 пг/мл - у здоровых доноров (Рис. 9).

Рисунок 9. Содержание Г-КСФ в сыворотке крови больных токсидермией до и после лечения Рузамом.

Наблюдалось также снижение концентрации IL-8 (с 265,3±15,6 пг/мл до 37,8±2,9 пг/мл при 26,8±2,7 пг/мл – у здоровых доноров), что оказывало тормозящее действие на избыточный хемотаксис мононуклеаров нейтрофильных лейкоцитов в эпидермис пораженных участков кожи (табл. 18, Рис. 10).

Таблица 18 Содержание некоторых цитокинов в сыворотке крови больных токсидермией до и после лечения экстрактом из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка

Цитокины	Больные токсидермией		Здоровые доноры (n=20)
	До лечения (n=20)	После лечения (n=19)
IL-8 пг/мл	265,3±15,6*	37,8±2,9	26,9±2,7

*- достоверно по сравнению со здоровыми донорами, p<0,05

Рисунок 10. Содержание некоторых цитокинов в сыворотке крови больных токсидермией до и после лечения экстрактом из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка.

После окончания лечения экстрактом из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка у больных токсидермией наблюдалось значительное повышение уровня IL-10 с 6,9±1,6 пг/мл до 12,8±2,2 пг/мл при 13,2±2,3 пг/мл – у здоровых доноров. (Рис. 11)

Рисунок 11. Уровень IL-10 в сыворотке крови больных токсидермией до и после применения экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка.

Увеличение концентрации IL-10 на фоне резкого снижения уровня ФНО -α и IL-1RА у больных токсидермией приводила к нормализации соотношения провоспалительных и противовоспалительных интрлейкинов, восстановлению адекватного регуляторного ответа (табл. 19, Рис.12).

Таблица 19 Соотношение про- и противовоспалительных цитокинов у больных токсидермией после лечения экстрактом из культуры термофильного

штамма золотистого стафилококка

Показатели	Больные токсидермией		Здоровые доноры
	до лечения	после лечения
IL8/ IL10	20,1±1,1*	2,9±0,1	2,05±0,1
ФНОα/ IL10	6,5±0,5*	1,8±0,1	1,6±0,1

*- достоверно по сравнению со здоровыми донорами, p<0,05

Рисунок 12. Соотношение про- и противовоспалительных цитокинов у

больных токсидермией после лечения экстрактом из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка.

Таким образом, положительный клинический эффект экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококкаа у больных токсидермией в немалой степени обусловлен нормализацией соотношения про- и противовоспалительных цитокинов.

Проведенные исследования показали (табл.20, Рис.13), что концентрация МИФ в крови больных токсидермией после применения экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка статистически достоверно уменьшилась с 34,5±2,9 нг/мл до 7,10,6 нг/мл, практически не отличаясь от референтных значений (6,3±0,6 нг/мл).

Применение экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка обеспечивало выраженное уменьшение спонтанного высвобождение МИФ культурой моноцитов больных токсидермией (с 14,4 ± 1,3 нг/мл – в исходном фоне до 4,1± 1,1 нг/ мл при 4,3±1,1 нг/ мл у здоровых доноров). Отмечалось также выраженное статистически достоверное снижение продукция МИФ моноцитами больных

токсидермией при стимуляции их конковалином А с 65,3 ±8,9 нг/мл до 26,0

± 1,7 нг/мл при 23,5 ± 1,7 нг/мл – у здоровых доноров.

Таблица 20

Концентрация МИФ в крови больных токсидермией под влиянием

Рузама

Пациенты	МИФ (нг/мл)
	До начала лечения	В процессе лечения	После лечения
Больные токсидермией	34,5±2,9*	20,12,1	7,10,6
Здоровые доноры (n=20)	6,3±0,6

* Примечание - различия статистически достоверны относительно показателей у здоровых доноров (р<0,05).

Рисунок 13. Концентрация МИФ в крови больных токсидермией под влиянием Рузама.

В результате применения экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка площадь миграции клеток, определяемая балансом МИФ и МСФ у больных токсидермией, увеличилась более чем на 18%. Индекс клеточной миграции, значительно уменьшившись, варьировал при различных по тяжести течения токсидермии от 2,9±0,5% до 6,9±0,7%.

Наиболее значимым падение индекса клеточной миграции прослеживалось у пациентов с распространенным островоспалительным характером течения патологического процесса.

На основании результатов проведенных исследований можно сделать вывод о том, что положительный клинический эффект экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка у больных токсидермией в значительной степени обусловлен нормализацией продукции МИФ.

Таким образом, проведенные клинико-лабораторные исследования выявили высокую тропность экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка к иммунокомпетентным клеткам. Применение экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка у больных токсидермией оказывало стабилизирующее влияние на процессы синтеза и экспрессии цитокинов, что способствовало нормализации интерлейкинзависимой клеточной кооперации иммунокомпетентных клеток.

Из представленных в таблице 21 данных следует, что функциональная активность естественных клеток-киллеров (ЕКК) у больных с различными клиническими вариантами течения токсидермии после проведенного лечения экстрактом из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка значительно снизилась по сравнению с исходными данными (до 41,4±3,3%), что блокировало процессы цитотоксичности к эпидермоцитам и нормализации продукции сывороточных антител.

Таблица 21

Активность ЕКК у больных токсидермией до и после применения

Рузама

Пациенты	ци %
	До начала лечения	В процессе лечения	После лечения
Больные токсидермией (n=20)	73,4±9,9*	56,13,9	41,43,3
Здоровые доноры (n=20)	41,4±3,3

* Примечание - различия статистически достоверны относительно показателей у здоровых

доноров (р<0,05)

После проведенного лечения экстрактом из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка у больных токсидермией выявлен значительный рост концентрации в сосудистом русле антигенов sCD50 до 230,6±41,8 U/мл и sCD54 до 38,4±7,7 U/мл. Повышенные концентрации растворимых антигенов CD50+ и CD54+ являлось результатом интенсивного шеддинга с поверхности антигенположительных клеток. Следствием такого процесса являлось статистически достоверное снижение относительного количества CD50 и CD54-положительных мононуклеарных клеток происходящее вследствие уменьшения плотности экспрессии данных антигенов на клеточной мембране (соответственно до 64,4±4,2 U/мл и 63,6±4,2 U/мл). Повышение сывороточных концентраций растворимых антигенов ICAM-1и ICAM-3 свидетельствовали о возникновении нормализующего процесса, направленного на торможение избыточной миграции воспалительных клеток в область пораженной кожи и купирования воспалительного процесса.

Рисунок 14. Уровень антигенов адгезии до и после применения Рузама у больных токсидермией и здоровых доноров.

Выявлено, что применение экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка у больных токсидермией способствовало уменьшению выработки эндогенного NO (с 33,52,78 мкмоль/л до 19,71,5 мкмоль/л). Наиболее значительным было снижение уровня оксида азота у больных токсидермией сопровождавшейся явлениями общей интоксикации (табл. 22, Рис.14).

Таблица 22 Влияние экстракта из культуры термофильного штамма золотистого стафилококка на содержание эндогенного оксида азота у больных

токсидермией

Пациенты	Содержание NO мкмоль/л
	До лечения	После лечения
Больные токсидермией	33,52,8*	19,71,5
Здоровые доноры	18,91,5

* Примечание - различия статистически достоверны относительно группы контроля (р<0,05)

Рисунок 14. Влияние Рузама на содержание эндогенного оксида азота у больных токсидермией.

Понижение содержания оксида азота по сравнению с исходным уровнем свидетельствовало о нормализации функционально-метаболической активности фагоцитов и мононуклеаров.

Таким образом, проведенные исследования показали, что оксид азота может рассматриваться как маркер степени активности и распространенности патологического процесса у больных токсидермией.