4 курс / Акушерство и гинекология / Перитонеальные_макрофаги_и_репродуктивная_система_женщин_Храмова

Рис. 24. Цитологическая картина перитонеальных макрофагов у женщин с бесплодием при окраске методом Романовского-Гимзе × 1000.

Клетки получены из пунктата заднего свода влагалища с последующим прикреплением к стеклу: а – препарат здоровой женщины: видны малые и средние макрофаги; б – препарат женщины с трубно-перитонеальным бесплодием: количество макрофагов повышено с увеличением числа средних и больших макрофагов; в – препарат женщины с эндокринным бесплодием: выражено количество больших макрофагов; г – препарат женщины с бесплодием неясного генеза: видны малые и большие макрофаги.

Рис. 25. Цитологическая картина перитонеальных макрофагов у женщин с бесплодием при окраске иммуноцитохимическим методом на CD16 × 1000.

Клетки получены из пунктата заднего свода влагалища с последующим прикреплением к стеклу, окрашены иммуноцитохимически с применением моноклональных антител к CD16: а – в препарате здоровой женщины видны малый, средний и большой макрофаги с сильной экспрессией CD16 – рецепторов (мелкогранулезное цитоплазматическое окрашивание); б – в препарате женщин с трубно-перитонеальным бесплодием количество макрофагов повышено с умеренной и сильной экспрессий CD16 – рецепторов; в – в препарате женщин с эндокринным бесплодием много макрофагов с умеренной и слабой экспрессией CD16 – рецепторов; г – при бесплодии неясного генеза макрофагов немного, со слабой экспрессией CD16 – рецепторов.

Глава 7

Изменения активности моноцитов и макрофагов у женщин с разным уровнем секреции IL-8

7.1. Острый и хронический сальпигооофорит

Активация клеток системы макрофагов – важный процесс их включения в биологические реакции в организме. При активации макрофагов возникает усиление синтетических, секреторных процессов в клетках. В частности, происходит повышение синтеза и секреции лизосомных ферментов из клеток, усиление выработки провоспалительных цитокинов, в том числе секреции интерлейкина-8 (IL-8), уровень которого в крови заметно повышается [211, 228, 288].

Мы попытались определить сопряженность ПСЛМ, секреторносинтетическую активность моноцитов крови и перитонеальных макрофагов с процессом их активации по уровню провоспалительного цитокина интерлейкина-8 (IL-8) у женщин с острым и хроническим сальпингооофоритом (табл. 14).

Нахождение IL-8 в супернатанте культивированных клеток (оценивалась секреция интерлейкина-8 моноцитами крови) осуществлялось методом сендвич-варианта твердофазного иммуноферментного анализа с использованием реактивов фирмы «R&D DiagnosticsInc» (США).

В результате предпринятого исследования выявлено, что у здоровых женщин уровень секреции IL-8 моноцитами крови составляет 90-140 пг/мл/106 кл. При остром воспалительном процессе в придатках матки происходит возрастание уровня секреции IL-8 до 300-400 пг/мл/106 кл, а при хроническом воспалении – до 1100-1350 пг/мл/106 кл, что соответствует различной степени активации клеток-проду- центов интерлейкина.

Изменения активности моноцитов и макрофагов у женщин с разным уровнем секреции 93

Таблица 14

Показатели активности моноцитов крови и перитнеальных макрофагов

уздоровых женщин и больных воспалением матки

ипридатков матки с разным уровнем IL-8

Состояние стабильности лизосомных мембран моноцитов крови

иперитонеальных макрофагов, их секреторная и синтетическая активность при разном уровне секреции IL-8 моноцитами крови также имеют различие у здоровых женщин и у женщин с острым и хроническим сальпингооофоритом.

Выявлено, что при остром сальпингооофорите наряду с увеличением секреции IL-8 происходит повышение ПСЛМ моноцитов крови

иперитонеальных макрофагов по сравнению с ПСЛМ здоровых женщин с нормальным уровнем секреции IL-8 (p<0,05). Еще больше по сравнению со здоровыми женщинами возрастает ПСЛМ моноцитов/ макрофагов у женщин с хроническим сальпингооофоритом, имеющим высокий уровень секреции IL-8 (p<0,01).

Параллельно с лабилизцией лизосомных мембран моноцитов крови перитонеальных макрофагов происходит увеличение секреции клеточного лизоцима. При этом, наиболее выраженная секреция лизоцима моноцитами крови и перитонеальными макрофагами наблюдается у женщин с хроническим сальпингооофоритом, у которых прослеживается более высокий уровень секреции моноцитами крови IL-8.

Наряду с повышением IL-8 у женщин с острым и хроническим сальпингооофоритом ускоряется и синтез лизоцима моноцитами/макрофагами. Но есть заметные различия между синтезом лизоцима и уровнем IL-8 у больных острым и хроническим воспалительным про-

цессом. Если при хроническом сальпингооофорите отмечается значительное повышение секреции IL-8 моноцитами крови по сравнению с уровнем секреции IL-8 при остром воспалении (p<0,05), то синтез лизоцима моноцитами/макрофагами при хроническом воспалительном процессе возрастает незначительно и практически находится на одном уровне с синтезом лизоцима клетками женщин с острым сальпингооофоритом (p>0,05).

Оценивая полученный результат с точки зрения изменения функционального состояния моноцитов/макрофагов у женщин при остром

ихроническом сальпингооофорите, выявлены как общие закономерности, так и существенные различия. При хроническом сальпингооофорите по сравнению с острым процессом отмечен более высокий уровень секреции IL-8 моноцитами крови. Гиперпродукция IL-8 моноцитами крови происходит одновременно с процессом выраженной лабилизации лизосомных мембран и отсутствием дополнительного повышения секреции лизосомного фермента лизоцима моноцитами крови и перитонеальными макрофагами. По-видимому, данные внутриклеточные процессы связаны с разной активацией моноцитов/макрофагов при остром и хроническом воспалении.

Таким образом, при остром сальпингооофорите наряду с повышением уровня секреции интерлейкина-8 моноцитами крови происходит лабилизация лизосомных мембран, повышение секреции

исинтеза лизоцима моноцитами крови и перитонеальными макрофагами.

При хроническом сальпингооофорите имеет место гиперсекреция IL-8 моноцитами крови, выраженная лабилизация лизосомных мембран, высокий уровень секреции лизоцима моноцитами крови и перитонеальными макрофагами при относительно невысоком синтезе этого фермента.

Неоптимальное повышение активности моноцитов/макрофагов с нарушением их секреторно-синтетических процессов при воспалении женских половых органов может привести к хронизации процесса, частым обострениям воспаления, отсутствию эффекта от проводимой антибактериальной терапии. Правильно подобранная иммунокоррегирующая терапия под контролем уровня секреции IL-8 моноцитами крови, секреторно-синтетической активности моноцитов крови и перитонеальных макрофагов при остром и хроническом сальпингооофорите может благоприятно сказаться на исходе заболевания с полным восстановлением репродуктивного здоровья женщины.

Изменения активности моноцитов и макрофагов у женщин с разным уровнем секреции 95

7.2. Трубно-перитонеальное бесплодие и бесплодие неясного генеза

Нам интересно было проследить связь между состоянием стабильности лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов, уровнем синтеза и секреции лизоцима этими клетками с процессом их активации при трубно-перитонеальном бесплодии и бесплодии неясного генеза. В результате проведенного исследования мы установили, что у здоровых фертильных женщин уровень секреции IL-8 моноцитов крови колеблется в пределах от 80 до 130 пг/мл/106 кл и в среднем составляет 118+25 пг/мл/106 кл. У женщин с трубно-пери- тонельным бесплодием происходит значительное возрастание уровня секреции IL-8 по сравнению со здоровыми фертильными женщинами (p<0,01) и составляет 1130+112 пг/мл/106 мл, а при бесплодии неясного генеза уровень IL-8 (128+30 пг/мл/106 кл) незначительно превышает этот показатель здоровых фертильных женщин (p>0,05), что соответствует различной степени эндогенной активации клеток-продуцентов интерлейкина, в частности моноцитов.

При этом, состояние стабильности лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов, их секреторно-синте- тическая активность при разном уровне секреции IL-8 моноцитами крови имеет различие у здоровых фертильных женщин, пациенток с трубно-перитонеальным бесплодием и бесплодием неясного генеза. При трубно-перитонеальном бесплодии наряду с усилением секреции IL-8 происходит выраженное повышение ПСЛМ моноцитов крови и перитонеальных макрофагов по сравнению с показателями здоровых фертильных женщин (p<0,05 и p<0,01, соответственно). Установлена прямая сильная корреляционная связь секреции IL-8 и показателя стабильности лизосомных мембран (r<0,74, p<0,05). Это свидетельствует

опроисходящей лабилизации лизосомных мембран таких клеток при данной патологии (табл. 15).

Уженщин с бесплодием неясного генеза при незначительном повышении IL-8, напротив, наблюдается снижение ПСЛМ моноцитов/макрофагов по отношению к здоровым женщинам, что говорит

остабилизации лизосомных мембран клеток (p<0,05 и p<0,01, соответственно).

Секреция лизоцима моноцитами крови и перитонеальными макрофагами при бесплодии отличается от уровня секреции здоровых женщин: при трубно-перитонеальном бесплодии она повышена (p<0,05), при бесплодии неясного генеза, напротив, снижена (p<0,01) (табл. 16).

Таблица 15

Стабильность лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов фертильных женщин,

женщин с трубно-перитонеальным бесплодием и бесплодием неясного генеза

Примечание (достоверность различий между сравниваемыми группами): * – p<0,01; ** – p<0,001.

Таблица 16

Уровень секреции лизоцима (Lсекр) моноцитами крови и перитонеальными макрофагами у фертильных женщин,

женщин с трубно-перитонеальным бесплодием и бесплодием неясного генеза

Примечание (достоверность различий между сравниваемыми группами): * – p<0,01; ** – p<0,001.

По сравнению со здоровыми фертильными женщинами у пациенток с трубно-перитонеальным бесплодием наблюдается понижение синтеза лизоцима моноцитами крови и перитонеальными макрофагами (p<0,05). Еще большее снижение этого фермента моноцитами/ макрофагами отмечается при бесплодии неясного генеза (p<0,01). Причем, снижение синтеза лизоцима перитонеальными макрофагами, более выражено (табл. 17).

Описанные результаты свидетельствуют о том, что при трубноперитонеальном бесплодии происходит лабилизация лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов с повы-

Изменения активности моноцитов и макрофагов у женщин с разным уровнем секреции 97

Таблица 17

Уровень синтеза лизоцима (Lсинт) моноцитами крови

и перитонеальными макрофагами у фертильных женщин, женщин с трубно-перитонеальным бесплодием и бесплодием неясного генеза

Примечание (достоверность различий между сравниваемыми группами): * – p<0,01; ** – p<0,001.

шением секреции и снижением синтеза лизоцима этими клетками, и увеличением секреции IL-8 моноцитами крови. При бесплодии неясного генеза незначительное повышение секреции IL-8 сочетается со стабилизацией лизосомных мембран моноцитов/макрофагов, снижением секреции и синтеза лизоцима этими клетками. Повышение секреции IL-8 моноцитами крови и секреции лизоцима моноцитами/ макрофагами, тесно связанное с лабилизацией лизосомных мембран, при трубно-перитонеальном бесплодии может быть вызвано длительной активацией клеток системы макрофагов как результ хронического воспалительного процесса [210]. Незначительное усиление секреции IL-8, стабилизация лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов, снижение секреции и синтеза лизоцима этими клетками, выявленные при бесплодии неясного генеза, могут отражать скрытые процессы в организме женщины, в том числе латентную инфекцию [205].

Таким образом, выраженные изменения секреторно-синтетиче- ской активности клеток макрофагальной системы при бесплодии неясного генеза открывают новые возможности диагностики и перспективы лечения этой патологии.

Глава 8

Активация макрофагальных клеток и экспресия рецепторов

кполовым гормонам

Внастоящее время установлено, что решающую роль в имплантации оплодотворенной яйцеклетки играет количество функционально полноценных рецепторов ткани эндометрия к соответствующим стероидным гормонам [40]. При этом эстрадиол повышает концентрацию рецепторов эстрадиола (РЭ) и прогестерона (РП) в цитолизе клеток, а прогестерон ее снижает. В ходе нормального менструального цикла происходят широкие индивидуальные колебания содержания РЭ и РП в эндометрии. Максимальное количество РЭ и РП в эндометрии отмечается в овуляторный период, а в секреторную фазу их количество уменьшается [169].

Патология синтеза рецепторов в матке может происходить под влиянием изменения количества и соотношения половых гормонов, поражения патологическим процессом матки, дисбаланса других гормонов [32,77].

Нарушение экспрессии рецепторов стероидных гормонов является главной причиной в формировании гиперпластических процессов эндометрия и миомы матки. От состояния рецепторного аппарата матки и уровня сывороточных гормонов зависит также эффект от применяемой гормональной терапии, вплоть до полной нечувствительности к ней.

Эстрогены и прогестерон обладают способностью взаимодействовать с клетками системы макрофагов за счет присутствующих на их плазматической мембране рецепторов к стероидным гормонам [238].

Активация макрофагальных клеток сопровождается усилением экспрессии клеточных рецепторов [207, 211]. В клетках, при этом,