4 курс / Акушерство и гинекология / Ботвиньева_И_А_Иммунорегуляторные_белки_и_цитокины_при_беременности

71

Сходные тенденции наблюдались при изучении концентраций СРБ – отсутствовали статистически достоверные различия между подгруппами антителоносительниц и отличия от контрольных значений.

Стандартное отклонение и ошибка средней были сопоставимы в подгруппах антителоносительниц.

Таблица 10

Уровень белков в пуповинной крови ребенка при наличии у матери

IgG-антител к Chlamydia trachomatis

Антитела к Ch. trachomatis

Уровни альбумина менее 35 г/л в сыворотке пуповинной крови обнаружены в 14 % контрольной группы, у 22 % антителоносительниц, родивших здорового ребенка и у 14 % женщин, родивших детей с ПВИ.

Повышенное содержание СРБ более 1,1 мг/л обнаруживалось не более чем в 10% случаев при норме и при патологии.

Таким образом, в отличие от содержания, по крайней мере одного из 2-х изученных иммунорегуляторных белков, антителоносительство не оказывает существенного влияния на содержание в пуповинной крови таких «классических» маркеров воспалительной реакции как альбумин и С- реактивный белок. Данные результаты косвенно подтверждают предположение

72

об участии иммунорегуляторных белков не столько в классических воспалительных, сколько в аутоиммунных процессах при носительстве IgG антител к Chlamydia trachomatis во время беременности.

4.3. Про- и противовоспалительные цитокины в пуповинной крови новорожденных, рожденных от матерей с циркулирующими

IgG антителами к Chlamydia trachomatis

При исследовании содержания цитокинов в сыворотке пуповинной крови новорожденных (табл. 11) максимальные концентрации были получены при исследовании IL-8 и IL-1RА, а минимальные - INF-γ и TNF-α.

Таблица 11

Уровни цитокинов в пуповинной крови новорожденных в подгруппах рожениц с IgG антителами к Chlamydia trachomatis

Примечание: р1статистическая достоверность отличий показателей от контрольной группы; ndsнедостаточно значимая статистически тенденция к изменению показателя.

73

Необходимо отметить, что в контрольной группе выявлялись значительные отличия по ряду показателей по сравнению с нормой в обычной сыворотке, установленной для здоровых людей. В частности, содержание IL-6 было в 16 раз выше, уровень IL-8 – почти в 200 раз выше и IL-1RA – в 1,5 раза выше при том, что концентрации других изученных цитокинов в пуповинной сыворотке контрольной группы не превышали пределы референсных значений, рекомендованных для венозной сыворотки крови у здоровых небеременных женщин.

При сопоставлении результатов, полученных при анализе сыворотки пуповинной крови новорожденных в группе женщин-антителоносительниц с результатами определения уровней цитокинов в пуповинной крови здоровых детей, рожденных в контрольной группе, было установлено следующее.

Содержание «классического» провоспалительного TNF-α на фоне антителоносительства имело тенденцию к повышению в среднем в 4 раза, однако различия были недостоверны, вследствие высокой индивидуальной вариабельности результатов (табл. 12).

Уровень иммунорегуляторного IL-6 и без того высокий в норме, дополнительно повышался при антителоносительстве (табл. 11, рис.9).

при антителоносительстве у матери, в зависимости от состояния новорожденного.

При этом здоровые дети, рожденные от носительниц антител к Chlamydia trachomatis, имели в среднем, в 4,7 раза повышенное содержание IL-6, а рожденные дети с признаками внутриутробного инфицирования – в 5,5 раз.

Изменение концентрации хемоаттрактанта IL-8, условно относимого к провоспалительным цитокинам, также было достоверно повышено в группе женщин, имеющих IgG антитела к Ch. trachomatis и родивших здорового ребенка (в 3,3 раза). Однако аналогичное изменение концентрации IL-8 среди новорожденных, имеющих в раннем неонатальном периоде ПВИ (увеличение в 2,5 раза), имело недостаточно значимую тенденцию к повышению.

Содержание противовоспалительного IL-10 в пуповинной крови было достоверно повышено в группе женщин-антителоносительниц, вне зависимости от состояния новорожденного, по сравнению с контрольной группой (в 2,4-2,6 раза). Однако оно не выходило за пределы, обозначенные как норма для обычной сыворотки крови (до 31 пкг/мл).

75

Любопытно, что содержание в ПС другого противоспалительного цитокина - INF-γ у детей, рожденных от антителоносительниц, достоверно не различалось с показателями, характерными для пуповинной сыворотки крови здоровых детей контрольной группы.

К сожалению, у нас не было технической возможности оценить содержание провоспалительного IL-1β, но при определении концентрации IL1RА установлено, что наблюдается тенденция к повышению на фоне антителоносительства (в 1,9 раз в подгруппе детей, у которых отсутствовали при рождении клинические признаки внутриутробного инфицирования и в 1,6 раз в подгруппе детей с ПВИ). Однако только у здоровых детей, рожденных от женщин с антителами в циркуляции различия приближались к статистически достоверным.

Наконец, сывороточная концентрация в пуповинной крови относительно малоизученного IL-18, и при рождении здорового ребенка матерьюносительницей IgG антител к Ch. trachomatis, и при рождении ребенка с ПВИ, не демонстрировала выраженных отличий от уровней данного цитокина в контрольной группе здоровых детей.

Как упоминалось выше, причиной отсутствия достоверных различий в ряде случаев следует признать высокую индивидуальную вариабельность (различия от 10 до 100 раз) показателей (табл.12), особенно у беременных женщин, в крови которых обнаруживались антитела класса G к Ch. trachomatis.

Таблица 12

Значения 95% доверительного интервала (ДИ) и стандартного отклонения (SD) в пуповинной крови новорожденных от матерей, имеющих

IgG антитела к Chlamydia trachomatis

При анализе индивидуальных показателей уровень TNF-α выше 6 пкг/мл обнаруживался у 25 % в норме, у 53 % при рождении здорового ребенка на фоне антителоносительства и у 50 % при рождении детей с ПВИ.

Сывороточное содержание IL-10 более 31 пкг/мл в норме не обнаруживалось и определялось в 16% у женщин-антителоносительниц, родивших здоровых детей и в 15% у детей с признаками внутриутробного инфицирования соответственно.

Содержание INF-γ в ПС выше 10 пкг/мл не выявлялось у контрольной группы, при антителоносительстве и рождении детей с признаками внутриутробного инфицирования обнаруживалось в 6% случаев, и у здоровых новорожденных на фоне антителоносительства матери – в 19 %.

Уровень IL-18 превышал допустимые 120 пкг/мл в контрольной группе в 15% случаев, при рождении детей на фоне антителоносительства без ПВИ в 40% и с клиническими ПВИ – 25%.

Поскольку в случае определения IL-6, IL-8 и IL-1RA в ПС мы не могли опираться на нормативные данные, рекомендованные для сыворотки крови, мы приблизительно определили предельные нормативные значения, опираясь на среднестатистические результаты контрольной группы и 95 % ДИ (табл. 12).

Согласно этим данным, уровень IL-6 выше 300 пкг/мл обнаруживался у 19 % в норме, в 51 % при рождении здорового ребенка на фоне

77

антителоносительства и у 50 % при рождении детей с признаками внутриутробного инфицирования.

Концентрация IL-8 более 3000 пкг/мл в контрольной группе определялась у 26 % женщин, а также у 64 % антителоносительниц, родивших детей без ПВИ, и у 43 % женщин, родивших детей с клиническими ПВИ.

Концентрация IL-1RА более 2000 пкг/мл выявлялась у 18 % новорожденных из контрольной группы и у 50 % детей при антителоносительстве у матери, вне зависимости от состояния новорожденного и течения раннего неонатального периода.

Таким образом, сывороточные концентрации цитокинов в пуповинной крови подвержены значительным индивидуальным колебаниям, особенно на фоне наличия антител к Chlamydia trachomatis, что делает их изучение малоинформативным в плане прогнозирования осложнений в раннем неонатальном периоде. В целом, нами не выявлено значительных различий между подгруппами антителоносительниц, родивших здорового ребенка и ребенка с признаками внутриутробного инфицирования. Обращает на себя внимание, что на фоне антителоносительства достоверно повышено содержание иммунорегуляторного IL-6 (в числе прочего, контролирующего синтез иммунорегуляторного а2-МГ) и противовоспалительного IL-10. Изменения уровней классического провоспалительного TNF-α и IL-8 выражены несколько слабее, и, несмотря на значительное увеличение их концентрации у отдельных индивидуумов, подвержены значительной индивидуальной вариабельности, что позволило выявить лишь недостоверную тенденцию к повышению. Содержание INF-γ практически не связано с антителоносительством. Данная картина не соответствует классической воспалительной реакции и свидетельствует скорее о дисрегуляции цитокинового синтеза на фоне отдельных проявлений вялотекущего воспаления не более чем у половины обследованных. Тем не менее, подобная системная дисрегуляция цитокинового профиля,

78

затрагивающая не только мать, но и плод, и, возможно, связанная с аутоиммунными процессами и повреждением такого носителя цитокинов, как а2-МГ, может оказывать негативное влияние на развитие ребенка.

В целом, ни один из изученных показателей пуповинной сыворотки не может быть использован в диагностических целях. Содержание ЛФ, являющееся информативным при исследовании сыворотки венозной крови, достоверно не изменяется в сыворотке пуповинной крови при признаках внутриутробного инфицирования у новорожденного. Уровни цитокинов и иммунокомплексов подвержены слишком большой индивидуальной вариабельности. Альфа-2-макроглобулин на фоне антителоносительства при ПВИ и без ПВИ демонстрирует несколько различающиеся тенденции к изменениям, однако статистически достоверных отличий так же не выявлено.

79

Глава 5. ИММУНОРЕГУЛЯТОРНЫЕ БЕЛКИ И ЦИТОКИНЫ В ОКОЛОПЛОДНЫХ ВОДАХ ПРИ РОДАХ, ОСЛОЖНЕННЫХ

НОСИТЕЛЬСТВОМ IgG АНТИТЕЛ К CHLAMYDIA TRACHOMATIS

Плацента представляет собой физиологический барьер, препятствующий проникновению инфекционного агента к плоду. Однако на ранних этапах беременности быстро делящиеся клетки формирующегося трофобласта, имеющие высокий уровень обменных процессов, являются прекрасной средой для репликации патогена, который может оказывать прямое повреждающее действие на плаценту. Околоплодные воды — сложная, биологически активная среда, состав которой меняется при развитии плода. Так, с момента установления маточно-плацентарного кровообращения околоплодные воды в основном являются ультрафильтратом плазмы материнской крови, однако к концу беременности околоплодные воды на 98—99 % состоят из воды, в которой содержатся органические вещества, неорганические вещества и клеточные элементы. У здоровых женщин околоплодные воды стерильны, но при инфекции состав околоплодных вод изменяется, создавая благоприятные условия для заражения плода. Отчасти данные изменения связаны с нарушениями барьерных функций тканей при сопутствующем инфицированию воспалении, а отчасти – с активацией локального синтеза регуляторных, транспортных, про- и противовоспалительных белков.

Для оценки проницаемости фетоплацентарного комплекса, а также в целях оценки изменений локальной синтетической активности клеток в ответ на антителоносительство, мы исследовали околоплодные воды (ОВ) на содержание а2-МГ, ЛФ и альбумина в сравнении с уровнями ряда про-, противовоспалительных и иммунорегуляторных цитокинов, что позволило уточнить их роль в патогенезе процессов, приводящих к рождению ребенка с