- •Раздел 3
- •Занятие 27
- •1. Построение градуировочного графика
- •Цель занятия
- •1. Что из перечисленного не используется в атомно-абсорбционной спектроскопии?
- •2. Что из перечисленного ниже верно?
- •3. При измерении оптической плотности раствора аскорбиновой кислоты при 245 нм:
- •4. Ниже приведены спектры поглощения двух органических соединений. Какие из перечисленных утверждений, касающихся данных спектров, истинные?
- •1. Построение градуировочного графика
- •2. Определение массы этония в пробе
- •1. Построение градуировочного графика
- •2. Определение массы новокаина в пробе
- •Занятие 29
- •Цель занятия
- •1. Что из перечисленного используется в аэс?
- •2. Что из перечисленного верно?
- •9. Эффект Шпольского - это:
- •10. Флуориметрия является более чувствительным методом анализа, чем фотометрия, потому что:
- •1. Построение градуировочного графика
- •2. Определение массы рибофлавина в пробе
- •Занятие 30
- •Цель занятия
- •1. Что из перечисленного ниже верно?
- •9. Исправленное время удерживания вещества а составляет 150 секунд, а вещества b - 100 секунд. Коэффициент разделения веществ а и в равен:
- •10. Для двух компонентов анализируемой смеси величина rs равна 1,8. Что из перечисленного ниже верно?
- •Занятие 31
- •Цель занятия
- •Занятие 32
- •Цель занятия
- •1. Ниже приведены значения Rf для пяти компонентов анализируемой смеси. Пятно, соответствующее какому компоненту, будет находиться ближе всего к линии фронта растворителя?
- •2. Ниже приведены значения коэффициентов распределения для пяти компонентов анализируемой смеси. Пятно, соответствующее какому компоненту, будет находиться ближе всего к линии старта?
- •3. Найдите выражения, в которых имеются ошибки:
- •4. Двухмерная тсх отличается от одномерной тем, что:
- •Цель занятия
- •1. Настройка прибора и измерение рН раствора
- •2. Потенциометрическое титрование смеси фосфата и гидрофосфата натрия
- •Цель занятия
1. Построение градуировочного графика
В мерные колбы вместимостью 50,00 мл последовательно вносят 0,40; 0,80; 1,20; 1,60; 2,00 стандартного раствора этония (100,0 мкг/мл). В каждую колбу прибавляют по 1,0 мл 0,1% раствора ПВС, 1,5 мл 0,07% раствора эозина, 5,0 мл 0,01 М HCl, доводят водой до метки и перемешивают. Затем измеряют оптическую плотность каждого раствора на фотоэлектроколориметре (КФК-2, КФК-2МП) при светофильтре с максимумом пропускания 540 нм в кювете с толщиной слоя 2 см относительно раствора контрольного опыта. Для получения этого раствора в мерную колбу вместимостью 50,0 мл помещают все перечисленные выше вещества, за исключением этония. Полученные результаты представляют в виде следующей таблицы.
№ |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
V(этония), мл |
0,40 |
0,80 |
1,20 |
1,60 |
2,00 |
C(этония), мкг/мл |
0,80 |
1,60 |
2,40 |
3,20 |
4,00 |
А |
|
|
|
|
|
По полученным данным методом наименьших квадратов рассчитывают уравнение зависимости С от А.
2. Определение массы этония в пробе
Полученную пробу количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50,00 мл, прибавляют 1,0 мл 0,1% раствора ПВС, 1,5 мл 0,07% раствора ЭО, 5 мл 0,01 М HCl, доводят водой до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора в условиях, описанных выше. По рассчитанному обратному уравнению градуировочного графика определяют концентрацию этония в растворе (Сх, мкг/мл), а затем по формуле m = C50,00 - массу этония в анализируемой пробе.
УФ-СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ НОВОКАИНА
Новокаин обладает достаточно интенсивным поглощением УФ-излучения ближнего диапазона и поэтому данное вещество можно определять спектрофотометрическим методом на основе собственного поглощения. Спектр поглощения новокаина зависит от рН (рис. 28.3). Раствор новокаина в воде имеет максимум поглощения при 290 нм. В кислой среде (0,1 М HCl) происходит ионизация первичной ароматической аминогруппы, что сопровождается гипсохромным смещением полосы поглощения, а также гипохромным эффектом.
Рис. 28.3. Спектры поглощения новокаина
1 - в 0,1 М HCl, 2 - водный раствор
Измерение оптической плотности на спектрофотометре СФ-46 (рис. 28.4) проводится следующим образом.
Прибор следует включить в сеть не менее, чем за 30 минут до начала измерений. Перед включением рычаг 8 следует поставить в положение, соответствующее выбранной лампе (дейтериевая лампа предназначена для работы в области 190-350 нм, лампа накаливания - 340 - 1100 нм), шторка фотоэлемента (5) должна быть закрыта, ширина щели (3) установлена в положение 0,15 нм. Для включения прибора следует нажать кнопку СЕТЬ, после чего должна загореться индикаторная лампа, и клавишу ПУСК на табло микропроцессора (2), после чего на клавиатуре микропроцессора должна высветиться запятая.
Открывают крышку кюветного отделения (при закрытой шторке фотоэлемента) и помещают в него кювету сравнения (в первое положение) и кювету с исследуемым раствором (во второе положение). Закрывают крышку.
Устанавливают требуемую длину волны, вращая рукоятку длин волн (1) в сторону увеличения . Если при этом шкала повернётся на большую величину, то следует возвратить её назад на 5-10 нм и снова подвести к требуемому делению. Перед началом дальнейшей работы следует убедиться, что для измерения правильно выбран фотоэлемент (ручка 7). Сурьмяно-цезиевый фотоэлемент(Ф) применяется для измерений в области 190 - 700 нм, кислородно-цезиевый (К) - 600 - 1100 нм.
При закрытой шторке фотоэлемента нажимают клавишу «Ш(0)», при этом на табло микропроцессора высвечивается значение сигнала в вольтах, пропорциональное значению темнового тока фотоэлемента. Величина темнового тока должна быть не больше 0,1 и не меньше 0,05. В противном случае величину темнового тока следует отрегулировать с помощью рукоятки НУЛЬ. Клавишу «Ш0» следует нажимать несколько раз до появления показания, равного предыдущему или отличающегося от предыдущего не более, чем на 0,001. Последнее показание заносится в память микропроцессора и остаётся там до следующего нажатия клавиши «Ш0».
Помещают в поток излучения кювету с раствором сравнения, открывают шторку фотоэлемента и нажимают (насколько раз) клавишу «К(1)». При этом слева на табло высвечивается индекс «1». Показание на табло должно находится в пределах 0,5-5,0. При показании меньше 0,5 следует увеличить ширину щели. При показании больше 5,0 на табло высвечивается индекс «П». Ширину щели при этом следует уменьшить и вновь несколько раз нажать кнопку К(1).
Нажимают клавишу «D(5)», при этом на табло микропроцессора должен появиться индекс «5» и показание 0,0000,001». Если показание имеет другое значение необходимо вновь повторить п.5.
С помощью рукоятки(4) помещают в поток излучения кювету с исследуемым раствором и нажать несколько раз клавишу «D(5)». Снять показание с фотометрического табло.