1. Построение градуировочного графика

В мерные колбы вместимостью 50,00 мл последовательно вносят 0,50; 1,00; 1,50; 2,00; 2,50 и 3,00 мл стандартного раствора железа с концентрацией Fe(III) 100,0 мкг/мл. В каждую колбу прибавляют по 5 мл 10% раствора KSCN, доводят водой до метки и перемешивают. Затем измеряют оптическую плотность каждого раствора на фотоэлектроколориметре (КФК-2, КФК-2МП) при светофильтре с максимумом пропускания 490 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Полученные результаты рекомендуется представить в виде следующей таблицы.

№	1	2	3	4	5	6
V (Fe3+), мл	0,50	1,00	1,50	2,00	2,50	3,00
C(Fe3+), мкг/мл	1,00	2,00	3,00	4,00	5,00	6,00
А

По полученным данным методом наименьших квадратов рассчитывают уравнение зависимости С от А (обратное уравнение градуировочного графика).

Расчёт уравнения и графическую интерпретацию полученных данных рекомендуется проводить под руководством преподавателя с помощью электронных таблиц Excel или аналогичной компьютерной программы.

2. Определение массы Fe³⁺ в пробе

Полученную пробу количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50,00 мл, прибавляют 5 мл 10% раствора KSCN, доводят водой до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора в условиях, описанных выше. По рассчитанному обратному уравнению градуировочного графика определяют концентрацию Fe³⁺ в растворе (С_х, мкг/мл), а затем по формуле m = C50,00 - массу Fe³⁺ в анализируемой пробе.

ФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИАНОКОБАЛАМИНА

Спектр поглощения цианокобаламина в видимой области показан на рис. 27.4. Оптимальным светофильтром для измерения оптической плотности растворов данного вещества является светофильтр с максимумом пропускания 364 нм (для прибора КФК-2) или 340 нм (КФК-2МП).

В предлагаемой методике количественное определение цианокобаламина проводится с использованием двух стандартных растворов

Рис. 27.4. Спектр поглощения цианкобаламина в видимой области

Содержимое ампулы раствора цианокобаламина для инъекций количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25,00 мл и доводят водой до метки. Затем измеряют оптическую плотность трёх растворов: стандартного раствора цианокобаламина с концентрацией 15,0 мкг/мл - А₁; раствора, полученного при разбавлении анализируемого раствора для инъекций - A_x и стандартного раствора с концентрацией цианокобаламина 25,0 мкг/мл - A₂.

Массу цианокобаламина (мкг), содержащегося в 1 ампуле инъекционного раствора, рассчитывают по следующей формуле:

ЗАНЯТИЕ 28

Цель занятия

Знать:

• основные принципы, положенные в основу атомно-абсорбционной спектроскопии, устройство и принцип работы приборов, используемых в данном методе анализа и область его практического применения;

• устройство и принцип работы приборов, используемых в молекулярной абсорбционной спектроскопии в УФ- и ИК-области;

• сущность основных приёмов, используемых в фотометрическом анализе;

• основные принципы, положенные в основу ИК-спектроскопии, устройство и принцип работы приборов, используемых в данном методе анализа, особенности подготовки пробы, практическое применение ИК-спектроскопии.

Уметь:

• проводить фотометрическое определение этония, основанное на реакции его взаимодействия с эозином, и новокаина, основанное на собственном поглощении данного вещества в УФ-области.

1. Атомно-абсорбционная спектроскопия. Принцип метода. Устройство и принцип работы используемых приборов. Практическое применение.

2. Молекулярная абсорбционная спектроскопия в УФ- и видимой области (спектрофотометрия, фотометрия). Принцип метода. Устройство и принцип работы используемых приборов.

3. Основные приёмы, используемые в спектрофотометрическом анализе: прямая спектрофотометрия, фотометрические реакции, экстракционная фотометрия, дифференциальная, производная и многоволновая спектрофотометрия, фотометрическое титрование.

4. ИК-спектроскопия. Принцип метода. Устройство и принцип работы используемых приборов. Практическое применение.

1. Почему атомные спектры поглощения в оптической области спектра линейчатые, а молекулярные состоят из широких полос?

2. Почему в качестве источника в ААС не используют обычные лампы, дающие непрерывный спектр испускания? Объясните принцип работы лампы с полым катодом.

3. Какую форму имеет пламя, используемое в качестве атомизатора в ААС? Почему такая форма пламени повышает чувствительность определения?

4. 

   Рис. 28.1. УФ-спектр поглощения органического вещества

   В чём разница между спектрофотометром и фотоэлектроколориметром? Какие задачи можно и какие нельзя решать с помощью фотоэлектроколориметра? Отличаются ли рабочие интервалы оптических плотностей для данных приборов?

5. На рис. 28.1 приведен спектр поглощения органического вещества в УФ-области. Какому веществу - бензолу или циклогексану принадлежит данный спектр? Объясните Ваш выбор.

6. Что такое «фотометрическая реакция». Приведите примеры использования таких реакций для количественного определения неорганических и органических веществ.

7. Почему спектрофотометрия в УФ- и видимой области спектра обычно используется для количественного определения веществ, в то время как ИК-спектроскопия - для качественного?

8. Почему не все молекулы и химические связи поглощают ИК-излучение? От чего зависит, в какой области ИК-спектра будет находиться полоса поглощения той или иной связи? Почему волновое число для валентных колебаний больше, чем для деформационных; для колебаний связи С-H больше, чем для аналогичных колебаний С-С, а связи СС больше, чем С=С?

9. Что такое область “отпечатков пальцев” и область функциональных групп?

10. Почему в ИК-спектрометре монохроматор находится не перед кюветой с исследуемым образцом, а после неё?