Основные методы диагностики грибных заболеваний

Для правильного диагноза, т. е. распознавания (определе­ния) болезни и ее возбудителя, необходимо всестороннее изу­чение больного растения. Прежде всего тщательно изучают внешние симптомы поражения (макроскопический метод). При этом наряду с констатацией типа болезни (пятнистость, увяда_: ние или гниль, налет и т. д.) обращают внимание на наличие на пораженной ткани самого возбудителя (его плодоношения, мицелия, склероциев и пр.). В некоторых случаях, когда симп­томы болезни очень четки и характерны только для определен­ного вида болезни (например, белый мучнистый налет и плодо­вые тела на верхней поверхности листа при поражении настоя­щей мучнистой росой; вытянутые в длину пустулы на стеблях злаков при поражении их линейной ржавчиной и др.) для уста­новления диагноза можно ограничиться и внешними симптома­ми. Но для большей достоверности всегда следует прибегнуть к микроскопическому методу — исследованию больного расте­ния под микроскопом. Анализируют спороношение возбудителя, выявляя форму и строение плодового тела, форму, размеры и окраску спор и т. д.

Если возбудитель на поверхности анализируемого образца не обнаружен, можно прибегнуть к методу влажной камеры; основанному на использовании способности мицелия грибов, находящихся внутри пораженной ткани растения, прорастать наружу и образовывать спороношение в условиях повышенной влажности.

Отбор проб (стебли, корни, плоды и др.) проводят с расте­ний, имеющих характерные признаки болезни. Для анализа используют участки на границе между здоровой и пораженной тканью. Отобранный образец тщательно отмывают от загряз­нения под струей водопроводной воды в течение 2—3 ч, просу­шивают его между листами фильтровальной бумаги и подвер­гают стерилизации 96- или 50%-ным спиртом (1—3 мин), 9,5—1%-ным раствором марганцово-кислого калия (2—5 мин) или раствором азотно-кислого серебра (от 15 с до 2 мин). Об­работанный таким образом образец вновь промывают водо­проводной водой (10 мин), затем ополаскивают 2—3 раза сте­рильной или свежекипяченой водой, закладывают во влажную камеру (эксикаторы, чашки Петри или чашки Коха) и выдерживают там при температуре 20—24 °С. Анализ возбудителя проводят через 1—2 сут (иногда для образования спороношения гриба требуется более длительное время). Стерилизацию можно проводить и методом фламбирования, т. е. быстрого про­ведения над пламенем спиртовки образца, предварительно смо­ченного в спирте.

В случаях, когда исследование во влажной камере не дало положительных результатов, прибегают к выделению возбуди­теля в чистую культуру. Для этого небольшой участок пора­женной ткани фламбируют и проводят посев на стерильную агаризироваиную питательную среду (картофельно-глюкозный агар, агаризированную среду Чапека или др.).

21