6. При учете результатов фаготипирования отмечают наличие

лизиса тем или иным фагом на ++++, +++ и ++ креста. При учете

отмечают ++++ - сливной (полный) лизис.

+++ - полусливной лизис (незначительный рост культуры в зоне

лизиса).

++ - наличие в месте нанесения капли фага свыше 50 колоний

фага.

+ - почти полное отсутствие лизиса.

- - полное отсутствие лизиса.

Некоторые фаги вызывают как бы утончение роста культуры в

месте нанесения фага, т.е. феномен ингибиции (подавление),

обозначаемое "О". Ингибиция относится к слабой реакции, но ее

наличие должно обязательно отмечаться в рабочем журнале.

Штамм считается типируемым, если хотя бы один фаг вызвал

сильную реакцию на ++++, +++ или ++ креста. Стафилококковые штаммы

чаще лизируются не одним, а несколькими фагами, что дает для

каждого штамма характерную фагомозаику. Результаты фаготипирования

регистрируются в журнале, с указанием дозы фага, вызвавшей лизис и

степени лизиса.

Например: 100ТР - 3С++++/55+++/71++++.

В ответе степень лизиса не обозначается, указывается только

фагомозаика данного штамма - 3С/55/71.

При определении идентичности штаммов следует ориентироваться

на следующее: если культуры стафилококков, типированные в один и

тот же день, дают фагомозаику не различающуюся или различающуюся

на одну сильную реакцию, то их следует считать идентичными. Если

культуры стафилококка, типированные в один и тот же день,

обнаруживают разницу на 2 и более сильные реакции, штаммы следует

признать разными. Однако этот результат является ориентировочным

и в каждом отдельном случае при решении вопроса об идентичности

выделенных культур следует уточнить место их выделения,

характеристику патогенных свойств, отношение к антибиотикам,

эпидемическую ситуацию. Следует отметить, что внутри одной группы

идентичные штаммы могут иметь различие более, чем в одну сильную

реакцию.

В настоящее время примерно 30-40% выделенных культур

золотистого стафилококка не чувствительны к используемым типовым

фагам (так называемые нетипируемые штаммы золотистого

стафилококка).

Идентичность таких штаммов может быть установлена весьма

ориентировочно на основании антибиограммы.

VIII. Определение фосфатазной активности

В 100 мл растительного и остуженного до 40 град. питательного

агара добавляют 50 мг паранитрофенилфосфата. Смесь разливается

стерильно в чашки (по 10-12 мл на чашку). Чашки с застывшим агаром

подсушивают и на каждую из них точечным посевом наносятся

исследуемые культуры (16-20 культур). Чашки помещают в термостат

на 24 часа при 37 град.С. Появление интенсивного желтого

окрашивания вокруг посевов регистрируется как положительная

реакция.

Обязательным является постановка контролей со штаммами

стафилококка, заведомо обладающими и не обладающими фосфатазной

активностью.

Реакция фогес - Проскауэра (в модификации Баррита).

Исследуемую культуру засевают в глюкозо - фосфатный бульон

Клерка. После 3 дней роста при 37 град.С 1,0 мл культуры переносят

в пробирку и прибавляют 0,6 мл альфа - нафтола (5% раствор в

абсолютном спирте) и 0,2 мл КОН (40% раствор) и взбалтывают. В

положительном случае через 2-5 минут наступает розовое

окрашивание. У штаммов, дающих сильную реакцию, окраска становится

интенсивной и через 30 минут, - - 1 час переходит в малиновую. В

отрицательных случаях розового окрашивания не наступает и раствор

принимает цвет меди. (КОН+альфа - нафтол).

Приложение N 4

к приказу Министерства

здравоохранения СССР

от 31.07.1978 г. N 720

ИНСТРУКЦИЯ <*>

ПО ОЧИСТКЕ (МОЙКЕ) И ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЮ АППАРАТОВ

ИНГАЛЯЦИОННОГО НАРКОЗА И ИСКУССТВЕННОЙ

ВЕНТИЛЯЦИИ ЛЕГКИХ