1. Тиогликолевая среда

1.1. Состав

гидролизат казеина (в пересчете на сухой остаток - 15 г;

дрожжевой экстракт (10% в пересчете на сухой остаток) - 5 г;

натрий хлорид - 2,5 г;

глюкоза - 5 г;

цистин - 0,75 г;

тиогликолевая кислота - 0,3 мл;

раствор резазурина 1:1000 свежеприготовленный - 1 мл;

агар - агар дальневосточный - 0,75 г;

вода дистиллированная до - 1000 мл;

------------------------------------------------------------------

рН среды после стерилизации 7,0-7,2.

1.2. Приготовление.

Смешивают все компоненты среды, кроме глюкозы и тиогликолевой

кислоты.

Цистин предварительно растворяют в небольшом количестве

дистиллированной воды при постепенном добавлении 10-20% раствора

едкого натра до его полного растворения. Смесь подщелачивают 10%

раствором едкого натра до рН 8,0-8,2, кипятят в котле с паровой

рубашкой или на открытом огне при постоянном перемешивании до

расплавления агар - агара 5-10 минут. Можно автоклавировать 20

минут при 100 град., затем прибавляют горячую воду до

первоначального объема, прибавляют глюкозу и тиогликолевую

кислоту, фильтруют через полотно, устанавливают рН 7,2-7,3.

Добавляют раствор резазурина, смешивают и разливают в стерильные

пробирки по 20 мл. Стерилизуют 20 минут при 120 град.

Тиогликолевую среду можно хранить до посева, предохраняя ее от

света, при комнатной температуре в течение не более 7 суток со дня

приготовления.

Примечание: 1. Допускается приготовление среды без раствора

резазурина натрия.

2. Допускается применение других сортов агара, но с заранее

вытитрованным количеством.

2. Питательный агар с 0,5% глюкозы

2.1. Состав.

Панкреатического гидролизата казеина (в пересчете

на сухой остаток) - 15 г;

дрожжевого экстракта (10%) (в пересчете на

сухой остаток) - 5 г;

глюкозы - 5 г;

натрия хлористого (с учетом содержания в

гидролизате) - 5 г;

агар - агара (в зависимости от плотности агара) - 10-20 г;

воды дистиллированной - до 1000 мл;

------------------------------------------------------------------

рН среды после стерилизации 7,2-7,4.

2.2. Приготовление.

Смешивают все компоненты среды, кроме глюкозы, подщелачивают

10-20% раствором NaOH до рН 8,0-8,2 и оставляют на 20-30 минут для

набухания агар - агара. Затем его расплавляют в автоклаве текучим

паром или в открытом котле с подогреванием в течение 30 минут,

отстаивают 20-30 минут, отфильтровывают через ватный фильтр. На

полученный после фильтрации объем среды добавляют глюкозу,

устанавливают рН 7,3-7,5, разливают в стерильные пробирки по 5 мл.

Стерилизуют при 110-112 град.С (0,5 атм) - 30 минут.

Химические показания: аминный азот 30-110 мг %

хлориды 0,5-0,6%

Агар годен для применения в течение 3 месяцев при хранении в

холодильнике (4-10 град.С) или 1 месяц при комнатной температуре.