13.Исследование фекалий на шистосомы.

При обработке фекалий яйца шистосом обнаруживают в осадке после отстаивания или центрифугирования.

Метод осаждения. В коническом стакане вместимостью 200 мл смешивают 1 г фекалий с 1—2 мл растворителя (смесь 50 % водного раствора глицерина и изотонического раствора хлорида натрия в соотношении 1:1).

После размешивания доливают растворитель до объема посуды и дают отстояться в течение 20—30 мин. Надосадочную жидкость сливают, осадок исследуют под микроскопом. Для лучшей концентрации осадок вновь взбалтывают с растворителем в том же стакане, оставляют еще на 10 мин. Осадок забирают пастеровской пипеткой, помещают 2 капли на предметное стекло и исследуют.

Метод Ритчи. В сосуде вместимостью 150 мл смешивают 2 г фекалий с 10 мл изотонического раствора хлорида натрия и помещают в центрифужную пробирку вместимостью 15 мл. Пробирку закрывают пробкой и встряхивают 30 с. Затем пробку удаляют, а содержимое центрифугируют 2 мин при 2000 об/мин.

После этого надосадочную жидкость сливают, добавляют к осадку 10 мл 10% раствора формалина, тщательно смешивают и дают отстояться 5 мин. Добавляют 3—4 мл эфира, закрывают пробирку пробкой, встряхивают для получения однородной массы, удаляют пробку и центрифугируют повторно 2 мин.

В результате в пробирке образуется 4 слоя: 1) осадок на дне пробирки с яйцами шистосом; 2) слой формалина; 3) слой фекального детрита; 4) слой эфира. Аппликатором удаляют детрит, сливают надосадочную жидкость (смесь формалина с эфиром), осадок с придонного слоя забирают пастеровской пипеткой и переносят иа предметное стекло, исследуют под малым увеличением микроскопа.

14.Исследование мышц на трихинеллез.

Исследование мышц. При подозрении на трихинеллез исследуют мышцы больного или трупа, а также остатки мяса, предположительно послужившего причиной заражения человека.

С целью трихинеллоскопии мышцу разрезают на очень мелкие кусочки и помещают в компрессорий Он представляет собой два широких толстых стекла, скрепляемых по типу пресса двумя винтами. Волокна мышц в нем при сдавливании располагаются тонким слоем и хорошо просвечивают при исследовании под малым увеличением микроскопа (трихинеллоскопа, см. рис. 10.8, а).

Личинок трихинелл обнаруживают в виде спиралевидно свернутых червячков, находящихся в лимонообразных или округлых капсулах внутри мышечных волокон.

Более эффективен, хотя и более сложен, метод переваривания мышц. 10 г мелко измельченных мышц заливают 20—25-кратным количеством искусственного желудочного сока (1 л дистиллированной воды, 10 мл концентрированной хлороводородной кислоты и перед использованием—30 г пепсина). Смесь помещают в термостат при температуре 42—47 °С на 3,5—4 ч или на 12—16 ч при температуре 37 °С. Личинки, в большинстве жизнеспособные, в свободном состоянии выявляются среди массы остатков переваренных мышечных волокон (рис. 10.9).

Механическое перемешивание или использование магнитной мешалки улучшают ход переваривания и повышают эффект выявления личинок.

Для осаждения личинок после переваривания мышц применяют пробирки вместимостью 50 мл. Через 20—30 мин после отстаивания жидкость осторожно сливают, осадок помещают на предметное стекло в желобок из пластилина и исследуют при малом увеличении микроскопа или трихинеллоскопа. Определяют интенсивность инвазии: количество личинок до 200 на 1 г мышечной ткани — умеренно интенсивная инвазия; до 500 — интенсивная; свыше 500 — сверхинтенсивная.