3. Практическая часть.

1. Лабораторные работы. Обнаружение глюкозы с помощью диагностических тест-полосок; реактива Гайнеса.

Лабораторная работа № 1: Обнаружение глюкозы при помощи тест-полосок «Глюко-уротест».

Принцип метода: При окислении глюкозы в присутствии фермента глюкозооксидазы образуется перекись водорода, которая разлагается ферментов пероксидазой и окисляет добавленный краситель (ортотолидин, бензидин).

Изменение цвета красителя свидетельствует о наличии глюкозы в моче.

Оборудование: набор тест-полосок «Глюко-уротест».

Биологическая жидкость: свежесобранная моча.

Ход работы:

1.1. Аналитический элемент светло-бежевого цвета на тест-полоске опускают на 1-2 секунды в мочу. Каплю мочи, оставшуюся на полоске вытирают, проведя гранью полоски по краю сосуда с мочой. Через 60 секунд производится визуальная оценка результата по изменению окраски аналитического элемента. Все варианты изменения окраски от голубовато-зеленого до темно-синего учитываются как положительный результат.

1.2. В пробирку налейте мочи, полоску из набора «ДиаФан» опустите на 1-2 секунды в исследуемую мочу так, чтобы все зоны были смочены. Капли мочи с полоски удалите проведя полоской по краю сосуда с мочой. Полоску оставьте в горизонтальном положении. Приблизительно через 60 секунд сопоставьте окраску зоны индикации с соответствующей цветной шкалой.

Примечание: на полоске 2 аналитических элемента: один – светло-бежевого цвета (кетоны), второй – светло-желтого (глюкоза). При положительной реакции на глюкозу диагностическая зона тест-полоски окрашивается от светло-зеленого до темно-зеленого цвета. Минимальное количество глюкозы, которое может быть нормально выделено почками, окрашивает диагностическую зону в зеленоватый оттенок, который на этикетке обозначен «normal».

1.3. В пробирку с мочой полностью погрузить индикаторный элемент полоски «Биоскан-Глюкоза» не более чем на 1 секунду. Извлечь из мочи, удалить избыток жидкости на индикаторном элементе. Через 2 минуты с момента погружения полоски определить содержание глюкозы по цветной шкале.

Лабораторная работа № 2: Обнаружение глюкозы с использованием реактива Гайнеса.

Принцип метода: Глюкоза в щелочной среде восстанавливает оксид меди (II) в оксид меди (I), образуя красноватое, зеленоватое или коричнево-зеленоватое окрашивание. При отсутствии глюкозы синий цвет реактива Гайнеса не изменяется.

Реактивы: Реактив Гайнеса: 13,3 г х.ч. СuSО₄ растворяют в 400 мл дистиллированной воды (раствор 1); во 2-ой посуде растворяют 50 г NаОН в 400 мл дистиллированной воды (раствор 2); в 3-ей – разводят 15 г глицерина в 200 мл дистиллированной воды (раствор 3). Смешивают 1 и 2 и к смеси при постоянном помешивании прибавляют небольшими порциями раствор 3. получают готовый реактив синего цвета, который пригоден для употребления в течение длительного времени.

Оборудование: спиртовка, спички. Пипетки, пробирки.

Биологическая жидкость: моча.