Структура занятия.

1. Теоретическая часть:

1. Повторение теоретического материала по теме «Химия белка».

2. Рассказ преподавателя.

Белки в растворе и, соответственно, в организме сохраняются в коллоидном состоянии за счет факторов устойчивости: а) заряд белковой молекулы; б) гидратная (водная) оболочка вокруг неё. Удаление этих факторов приводит к склеиванию белков и выпадению их в осадок. Осаждение белков может быть обратимым и необратимым в зависимости от состава реактивов и условий реакций. В клинической лабораторной практике реакции осаждения используют для выделения альбуминовой и глобулиновой фракций белков плазмы крови, количественной характеристики их устойчивости в плазме, обнаружения белков в биологических жидкостях и освобождения от них с целью получения безбелкового раствора.

2. Указания к занятию:

1. Внимательно изучите инструкцию.

2. Прочитайте и осмыслите ход выполнения лабораторной работы.

3. Соблюдайте меры предосторожности в работе с реактивами.

4. При работе с пипетками используйте резиновые груши с переходником.

3. Практическая часть.

1. Лабораторная работа № 1. Осаждение белков методом высаливания.

Принцип: Насыщенным раствором сульфата аммония осаждается альбуминовая фракция белков, а полунасыщенным раствором сульфата аммония – глобулиновая фракция. Сущность реакции заключается в дегидратации (обезвоживании) молекул белка.

Реактивы: 1) неразведенный яичный белок;

2) насыщенный раствор сульфата аммония;

3) раствор NаОН, 10%;

4) сульфат меди, 1% раствор;

5) дистиллированная Н₂О;

6) сульфат аммония, в порошке.

Оборудование: штатив с пробирками, стеклянные палочки, фильтры.

Ход определения.

30 капель неразведенного яичного белка наливают в пробирку и добавляют 30 капель насыщенного раствора сульфата аммония. Содержимое пробирки перемешивают. Получают полунасыщенный раствор сульфата аммония, при этом глобулиновая фракция белка осаждается, а альбуминовая остается в растворе. Через 5 минут осадок отфильтровывают, на фильтре остается глобулиновая фракция, а в фильтре – альбуминовая. Осадок с фильтра снимают стеклянной палочкой и переносят в пробирку, куда добавляют 5 капель воды. Осадок растворяется. Наличие белка в растворе обнаруживают с помощью биуретовой реакции, которая будет положительной.

В пробирку с фильтратом добавляют порошок сульфата аммония до полного насыщения раствора, т.е. до тех пор, пока не прекратится растворение соли. при этом выпадает осадок – альбумины. Его отфильтровывают, растворяют и проводят биуретовую реакцию.

2. Зарисовать схематично проведение опыта. Оформить результаты, сделать выводы.

4. Формирование новых понятий, умений и навыков.

4.1. Изучение инструкции.

4.2. Выполнение лабораторной работы № 1.

4.3. Наблюдения. Результаты.

5. Контроль конечного уровня знаний, умений.

5.1. Оформление результатов лабораторной работы в рисунках. Вывод.