10. Клостридии. Микробиологическая диагностика клостридиозов.

КЛОСТРИДИИ СТОЛБНЯКА.Clostridium tetani.

Морфология. Гр+ прямые палоч­ки. Образуют споры круглой формы, расположенные терми­нально, превы­шают поперечник бактериивид барабанной палочки. Перитрихи, капсулу не образу­ют. Строгие анаэробы, культи­вируются в бескислородных условиях на сахарном кровяном агаре, образуют прозрачные или несколько сероватые колонии с зоной гемолиза. В высо­ком столбике агара С.tetani дают колонии двух видов: похожие на пушинку с плотным центром (S-форма) и чечевицеподобные (R-форма). В среде Китта–Тароцци эти анаэробы образуют равномерную муть.

С.tetani не обладают сахаролитическими ферментами, не образуют каталазу и оксидазу, протеолитические свойства сла­бо выражены.

Антигены.С.tetani имеют О- и Н-АГ. По Н-Аг делятся на 10 сероваров, но все они продуцируют идентичный по АГ свойст­вам экзотоксин.

Экология и распространение.Обитают в кишечнике животных и человека. С испражнениями вегетативныепопадают в почву, где обра­зуют споры. Столб­няк развивается при попадании клостридий в рану (особенно опасны рваные и колотые раны, в которых создаются анаэроб­ные условия). У новорожденных заражение – через пупочный канатик, а у рожениц – через слизистую оболоч­ку матки.

Патогенность и патогенез.С.tetani продуцируют сильные токсины, они представляют собой белок, освобождающийся при аутолизе бактерий. По механизму действия различают ТЕТАНОСПАЗМИН (поражение нервной тканиспазматическое сокращение ППМ), и ТЕТАНОЛИЗИН (лизис эр-в).

В анаэробных условиях споры прорастают, мкразмножаются и выделяют токсины. Токсины поступают в кровь, достигают нервной ткани и поражают её → клинические симптомы болезни. Столбняк развивается по НИСХОДЯЩЕМУ ТИПУ: первые симптомы – тонические сокращения жевательных и мимических мышц («сардоническая» улыбка), затем – тоническое напряжение и спазм мышц затылка, спины, тело во время приступа вид дуги. Смерть – от асфиксии и поражения жизненно важных центров при полном сохранении сознания.

Лабораторная диагностика.КЛИНИКА! Исследования проводятся для проверки стерильности и как противоэпидемический надзор.

При исследованиях материал делят на 2 части: из одной делают посевы и питательные среды для получения КУЛЬТУРЫ возбудителя, другую используют для БИОЛОГИЧЕС­КОЙ ПРОБЫ – вводят внутримышечно мышам. У мышей развивается столбняк, протекающий по типу восходящего, – сначала наступает судорожное сокращение мышц конечностей, хвоста, а затем туловища.

Профилактика и лечение.Специфическую профилактику проводят путем активной иммунизации АКДС и АДС, иммунизируют детей с 3-месячно­го возраста по схеме. Антитоксический иммунитет соз­дается у людей, работающих в зонах с высоким инфицированием почвы спорами С.tetani.

Людям, получившим травмы, сразу ПХОР вводят столбнячный анатоксин (для стимуляции активного иммунитета) и противостолбнячный Ig для создания быстрого пассивного иммунитета.

Антитоксическую противостолбнячную сыворотку (или Ig) используют и для лечения (в больших дозах). Более эффективен противостолбнячныйIg, полученный от людей, иммунизированных анатоксином. Одновременно применяют антибиотики для предупреждения вторичной инфекции.

КЛОСТРИДИИ АНАЭРОБНОЙ РАНЕВОЙ ИНФЕКЦИИ

Анаэробная раневая инфекция – полимикробное заболевание. В его возникновении и развитии принимают участие несколько видов клостридий в ассоциации с аэробными бактериями (стафилококками, стрептококками и др., легко инфицирующими раны). Основными возбудителями анаэробной раневой инфекции являются С.perfringens, С.novyi, С.septicum. В патогенезе заболевания участвуют и другие клостридий – С.histolyticum, С.sordellii и др.

Основной возбудитель анаэробной раневой инфекции С.per­fringens чаще других обнаруживается в патологических очагах. Вызывает газовую гангрену, пищевую токсикоинфекцию, если попадает в пищевые продукты и размножается в них. .

Морфология, физиология.Крупные гр+ па­лочки с субтерминально расположенными спорами.

С.perfringens имеет размеры, не обладает жгутиками. В организме животных и человека образует капсу­лу, которая утрачивается при пересевах на питательные среды. С.novyi – наиболее крупные из всех возбудителей ана­эробной инфекции палочки, прямые или слегка изогнутые. Капсул не образуют, имеют жгутики, как и все остальные возбудители этого заболевания. С.septicum– полиморфные, в культурах могут иметь нитевидные формы.

Культивируют клостридий в средах, разработанных для раз­множения анаэробных споровых микроорганизмов. Чувствитель­ность к кислороду у этих бактерий различна. Если С. perfringens (равно как и С. histolyticum и С. sordellii) могут расти и в присутствии небольшого количества кислорода, то С.novyi и С.septicum не выносят даже малого количества кислорода (строгие анаэробы).

Клостридии дифференцируют по культуральным признакам. На сахарно-кровяном агаре С. perfringens образует гладкие сероватые с ровными краями и плотным возвышением в центре колонии; С. novyi–шероховатые колонии с признаками гемо-лиза; С. septicum образует сплошной нежный налет, перепле­тающиеся нити на фоне гемолиза, С. histolyticum – небольшие блестящие колонии с ровными краями и небольшой зоной ге­молиза вокруг, С. sordellii–сероватые колонии с небольшим гемолизом.

В жидких средах клостридий дают диффузное помутнение, затем хлопьями оседают на дно пробирки. С. perfringens в сре­де Китта – Тароцци растет с обильным газообразованием, но более характерен тест в молоке, которое при культивирова­нии микроорганизма быстро и интенсивно свертывается. Образу­ется при этом губка, пронизанная пузырьками газов, подбрасы­вается под самую пробку пробирки.

В столбике агара колонии С. perfringens выглядят либо в виде комочков ваты (R-форма), либо в виде чечевицы (S-форма). С. novyi образует колонии, похожие на нежные хлопья ваты, С. septicum – чечевицеобразные колонии.

Ферментативная активность клостридий различна у отдель­ных видов, что используется в дифференциации. С. perfrin­gens обладает большим набором сахаролитических ферментов сбраживает многие углеводы с образованием кислоты и газов, протеолитические ферменты разжижают желатину, свернутую сыворотку. При росте в питательном бульоне образуется масляная, уксусная кислоты и большое количество газов (С02, H2S, NHs).