18. Агглютиногены и агглютинины. Классификация, свойства

-АВО: 0; А1, А2, А3…; В1, В2…

-Rh – Hr (D,C,E - d,c,e)

Имеется 6 антигенов системы Rh  (D, C, E) — Hr (d, c, е). Наиболее антигенным является антиген D, менее антигенным — С затем — c, E и т. д.

Лиц, имеющих антиген D, называют резус-положительными (Rh+), не имеющих — резус-отрицательными (Rh–).

Агглютинины: 1) регулярные. 2) иррегулярные.

Регулярные: естественные антитела, передаются по наследству и постоянно присутствуют в жидкостях человека в соответствии с группой крови — это a- и b-агглютинины.

Иррегулярные: 1) естественные: а) анти-М, анти-N, анти-Le, анти-H, анти-Tj антитела; б) холодовые неспецифические эритроцитарные агглютинины; холодовые лимфоцитотоксины;

2) иммунные — появляются у человека в результате иммунизации чужеродным агглютиногеном, например, Rh-фактором.

3)Холодовые агглютинины: (a и b) наиболее активны при температуре +4…+8 °С (холодовые неспецифические эритроцитарные агглютинины, холодовые лимфоцитотоксины).

4)Тепловые агглютинины: наиболее активны при температуре +37 °С (анти-Rh-антитела).

5)Полные антитела: в любой среде, соединяясь с одноименным агглютиногеном, вызывают видимую агглютинацию. Например, агглютинины a и b являются полными антителами вне зависимости от того, находятся ли эритроциты в физиологическом растворе (солевая среда) или в капле крови (коллоидная среда), агглютинация произойдет.

6)Неполные антитела: склеивают эритроциты только в коллоидной среде (желатина, полиглюкин, сыворотка крови).

7)Неполные блокирующие антитела: склеивают эритроциты лишь в специальной белковой среде. Их можно выявить с помощью антиглобулиновой (АГС) сыворотки в реакции Кумбса

19. Система АВ0, Rh и Hr. Определение групп крови и резус-фактора. Ошибки при определении.

Система АВО: основная серологическая система, определяющая совместимость и несовместимость переливаемой крови. Ее определяют два генетически детерминированных агглютиногена, содержащиеся в строме эритроцитов (антигены А и В) и два агглютинина, содержащиеся в сыворотке крови (антитела альфа и бета). Агглютинин альфа – антитело к агглютиногену А, то же самое с В. У одного человека не может быть одноименных агглютининов и агглютиногенов, т.к. при их встречи возникает реакция гемагглютинации. В зависимости от сочетания агглютиногенов и агглютининов всех людей разделяют на 4 группы.

Антигенная система Резус: представлена 5 антигенами. Rh-фактор присутствует у 85% людей – они резус-положительные, и отсутствует у 15% - резус-отрицательные. Роль резус-фактора очень значительна при гемотрансфузии и беременности.

Техника определения групп крови при помощи стандартных сывороток:

1. Подписывают тарелку для определения группы крови.

2. Под соответствующим обозначением группы крови на тарелку наносят по одной большой капле (0,1 мл) стандартной сыворотки соответствующей группы, при этом получается два ряда по три капли в следующем порядке слева направо: О(I), А(II), B(III).

Сыворотку берут из ампулы пипеткой, которую тотчас после выпускания сыворотки опускают в свой флакон.

3. Капли исследуемой крови величиной приблизительно 0,01 мл последовательно наносят сухой стеклянной палочкой на тарелку, каждую рядом с каплей стандартной сыворотки. Важно соблюсти соотношение количества исследуемой крови и стандартной сыворотки (1:10).

4. Чистой стеклянной палочкой перемешивают каплю крови с сывороткой группы О(I) пока смесь не окрасится равномерно в красный цвет. Вновь чистой палочкой перемешивают следующую каплю крови с сывороткой группы А(II) и так же поступают с сывороткой В(III). Точно так же перемешивают капли крови с сыворотками второго ряда (второй серии). Сразу же засекают время (песочные часы на 5 минут).

5. В течение 5 минут периодически покачивают тарелку. Хотя агглютинация начинается в течение первых 10—30 секунд, наблюдение следует вести до 5 минут ввиду возможности более поздней агглютинации, например, с эритроцитами слабой А(II) группы.

6. По мере наступления агглютинации, но не ранее 3 минут в капли смеси сыворотки с эритроцитами, в которых наступила агглютинация, добавляют по одной капле

(0,05 мл) физиологического раствора NaCl и продолжают наблюдение при периодическом покачивании до 5 минут.

Определение резес-фактора:

На пробирке пишут фамилию и инициалы лица, кровь которого исследуют.  В две пробирки последовательно вносят:

1 пробирка 2 пробирка

2 капли (0,1мл) стандарт- - 2 капли (0,1 мл) физ. р-ра NaCl

ного реагента антирезус -1 каплю 33% р-ра полиглюкина

- 1 каплю исследуемой крови - 1 каплю исследуемой крови

Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием и затем медленно поворачивают по оси, наклоняя до горизонтального положения, чтобы содержимое растекалось по стенкам. Процедуру, несмотря на раннюю реакцию, продолжают строго 3 минуты.

 Через 3 минуты в пробирки добавляют по 2—3 мл физиологического раствора NaCl и перемешивают содержимое 2—3-кратным перевертыванием пробирок (не встряхивать).

Пробирки просматривают на свет невооружённым глазом или через лупу с 2-кратным увеличением.

Ошибки:

1. Неправильное обозначение на этикетках стандартных сывороток.

2. Неправильное обращение с пипетками и палочками для смешивания.

3. Неправильное помещение эритроцитов и сывороток (можно перепутать при нанесении).

4. Наличие испорченных сывороток или низкого титра сыворотки, а эритроциты слабочувствительны (А2).

5. Неправильное соотношение крови и сыворотки.

6. При температуре > 25 °С агглютинация резко замедляется или вообще не происходит (лето, жаркие страны). Титр агглютинации – максимальное разведение сыворотки (или эритроцитов), при котором ещё может наступать реакция агглютинации. Титр сыворотки – 1:8 – 1:32; титр эритроцитов – 1:100.

7. Ложная (псевдоагглютинация) — наличие монетных столбиков, которые разбиваются физиологическим раствором (краевая псевдоагглютинация при подсыхании).

8. Феномен Томсена — бактериальное загрязнение.

9. Панагглютинация (аутоагглютинация) — нужно подогреть до 37 °С, так как наступает аутоагглютинация только при комнатной температуре.

10. Оставление тарелок неподписанными и перепутывание группы крови пациентов.