- •Государственное бюджетное образовательное учреждение
- •Учебный модуль 1. Биология клетки Практическое занятие № 1
- •3. Вопросы для самоподготовки к освоению данной темы:
- •7. Содержание занятия:
- •7.1. Контроль исходного уровня знаний и умений.
- •7.2. Разбор с преподавателем узловых вопросов, необходимых для освоения темы занятия. Устройство светового микроскопа мбр- 1(рис. 1)
- •Правила работы с микроскопом:
- •Правила оформления лабораторной работы
- •7.4. Самостоятельная работа студентов под контролем преподавателя. Практическая работа
- •Микроскопический анализ постоянного микропрепарата «Клетки эпителия кожи лягушки»
- •Микроскопический анализ постоянного микропрепарата «Клетки крови лягушки»
- •Микроскопический анализ постоянного микропрепарата «Клетки крови человека»
- •Практическое занятие №2
- •3. Вопросы для самоподготовки к освоению данной темы:
- •7. Содержания занятия:
- •Практическое занятие №3
- •3. Вопросы для самоподготовки по данной теме:
- •7. Содержание занятия:
- •Эндоплазматическая сеть (эпс)
- •Рибосомы
- •Пластинчатый комплекс Гольджи
- •Микротрубочки
- •2. Органоиды с защитной и пищеварительной функцией Лизосомы
- •Пероксисомы (микротельца)
- •3. Органоиды, участвующие в энергообеспечении клетки
- •Митохондрии
- •4. Органоиды, участвующие в делении и движении клеток
- •Клеточный центр
- •7.4. Самостоятельная работа студентов под контролем преподавателя. Практическая работа №1
- •Микроскопический анализ постоянного препарата «Комплекс Гольджи в клетках спинального ганглия»
- •Микроскопический анализ постоянного препарата «Клеточный центр в делящихся клетках лошадиной аскариды»
- •3. Микроскопический анализ постоянного препарата «Митохондрии в клетках печени»
- •4. Микроскопический анализ постоянного препарата «Лизосомы»
- •Практическая работа №1 Работа с электронными микрофотографиями:
- •1. Рибосомы
- •2. Гранулярная эндоплазматическая сеть
- •Цитоплазматические микротрубочки
- •Практическое занятие № 4
- •7. Содержания занятия:
- •7.1. Разбор с преподавателем узловых вопросов, необходимых для освоения темы занятия. Митотическая активность в тканях и клетках
- •7.3. Самостоятельная работа студентов под контролем преподавателя. Практическая работа
- •1. Митоз (непрямое деление) в клетках корешка лука
- •2. Амитоз (прямое деление) в клетках печени мыши
- •Практическое занятие №5
- •3. Вопросы для самоподготовки к освоению данной темы:
- •7. Содержания занятия:
- •Решение задач
- •3. Вопросы для самоподготовки к освоению данной темы:
- •7. Содержания занятия:
- •7. Содержания занятия
- •3.Вопросы для самоподготовки к освоению данной темы:
- •7. Содержания занятия:
- •3.Вопросы для самоподготовки к освоению данной темы:
- •7. Содержания занятия:
- •3. Вопросы для самоподготовки к освоению данной темы:
- •7. Содержания занятия:
- •7.1. Контроль исходного уровня знаний и умений.
- •7.2. Разбор с преподавателем узловых вопросов, необходимых для освоения темы занятия.
- •7.4. Самостоятельная работа студентов под контролем преподавателя.
- •Решение типовых и ситуационных задач
- •8. Задание для самостоятельной работы студентов.
- •Практическое занятие № 12
- •3. Вопросы для самоподготовки к освоению данной темы:
- •7. Содержания занятия:
- •7.1. Контроль исходного уровня знаний и умений.
- •7.2. Разбор с преподавателем узловых вопросов, необходимых для освоения темы занятия.
- •1. Анализ родословных
- •2. Близнецовый метод исследования генетики человека
- •7.4. Самостоятельная работа студентов под контролем преподавателя.
- •3. Вопросы для самоподготовки к освоению данной темы:
- •7. Содержания занятия:
- •7.1. Контроль исходного уровня знаний и умений.
- •7.2. Разбор с преподавателем узловых вопросов, необходимых для освоения темы занятия.
- •1. Дерматоглифический метод исследования генетики человека
- •2. Цитогенетический метод в исследовании генетики человека
- •Изучение хромосомного набора
- •Экспресс-метод определения полового хроматина
- •3. Проведение дактилоскопического анализа
- •Выводы: ___________________________________________________________
- •4.Цитогенетический анализ кариотипа (по микрофотографиям метафазных пластинок).
- •5.Экспресс-метод исследования х-полового хроматина в ядрах эпителия слизистой оболочки полости рта
- •8. Задание для самостоятельной работы студентов.
- •Практическое занятие № 14
- •2. Учебные цели:
- •3. Вопросы для самоподготовки к освоению данной темы:
- •7. Содержания занятия:
- •7.1. Контроль исходного уровня знаний и умений.
- •7.2. Разбор с преподавателем узловых вопросов, необходимых для освоения темы занятия.
- •Популяционно-статистический метод
- •2. Биохимический метод
- •3. Молекулярно-генетический метод
- •Полимеразная цепная реакция синтеза днк
- •7.4. Самостоятельная работа студентов под контролем преподавателя. Практическая работа
- •1. Применение закона Харди-Вайнберга для расчета частот генотипов, аллелей и характеристики генетической структуры популяции (группы), используя тест на праворукость и леворукость
- •Наблюдаемые частоты генотипов и аллелей
- •Наблюдаемые частоты генотипов и аллелей
- •Наблюдаемые и ожидаемые частоты генотипов и аллелей
- •Наблюдаемые частоты генотипов и аллелей
- •Молекулярно-генетический метод: моделирование пцр-анализа делеции f508 гена cftr при диагностике муковисцидоза
- •5’ Act gcg agc t 3’
- •3’A ccc gct cta 5’
- •8. Задание для самостоятельной работы студентов.
- •7. Содержания занятия:
- •3.5.2. Дополнительная литература2
2. Биохимический метод
Биохимические методы основаны на изучении активности ферментных систем (либо по активности самого фермента, либо по количеству конечных продуктов реакции, катализируемой этим ферментом). Биохимические методы позволяют выявить генные мутации, которые являются причиной заболевания обмена веществ (например, фенилкетонурия). Фенилкетонурия наследуется по аутосомно-рецессивному типу больные являются рецессивными гомозиготами (аа). Ген (картирован 12q22-q24), мутации которого приводят к заболеванию, кодирует фермент фенилаланин-гидроксилазу, катализирующей превращение фенилаланина в тирозин. В результате у больного происходит накопление фенилаланина, который превращается фенилпировиноградную кислоту, которая в больших концентрациях является нейротропным ядом. С помощью нагрузочных тестов можно выявлять гетерозиготных носителей патологических генов, например фенилкетонурии. Исследуемому вводят внутривенно определенное количество аминокислоты фенилаланина и через равные промежутки времени определяют его концентрацию в крови. Если человек гомозиготен по доминантному аллелю (генотип АА), то концентрация фенилаланина быстро возвращается в контрольному значению, а если гетерозиготен (генотип Аа), то снижение концентрации фенилаланина идет вдвое медленнее. Аналогично проводят тесты, выявляющие предрасположенность к гипертонии, сахарному диабету и т.д.
3. Молекулярно-генетический метод
В основе всех молекулярно-генетических методов лежит изучение структуры ДНК.
Этапы анализа ДНК:
Выделение ДНК из клеток, содержащих ядра (крови, тканей, спермы, костей, волос и др. биологических материалов), включая трупный материал и ископаемые останки;
Обнаружение и размножение (копирование) небольшого интересующего фрагмента из тотальной ДНК методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК (ПЦР);
Анализ последовательности нуклеотидов интересующего фрагмента ДНК: регистрация результатов ПЦР обычно с помощью электрофореза.
Полимеразная цепная реакция синтеза днк
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) - метод амплификации (размножения) ДНК in vitro, с помощью которого в течение нескольких часов можно выявить и размножить интересующий фрагмент ДНК размером от 80 до 3000 пар нуклеотидов (пн).
Исходные компоненты ПЦР:
ДНК-матрица (тотальная ДНК);
Праймеры (однонитевые синтетические фрагменты ДНК размером 20-30 нуклеотидов), строго комплементарные правой и левой границам интересующего фрагмента ДНК).
Нуклеотиды, являющиеся материалом для синтеза новых комплементарных цепей ДНК);
Фермент - ДНК-полимераза, катализирующий удлинение цепей праймеров путем последовательного присоединения нуклеотидов к растущей цепи синтезируемой ДНК.
ПЦР–анализ включает 30 циклов амплификации. Каждый цикл состоит из трех стадий:
1. Денатурация ДНК (расплетение двойной спирали, разрыв водородных связей между комплементарными нуклеотидами). Проходит при температуре 93-95оС в течение 1 мин.
2. Отжиг (присоединение) праймеров (50-60оС, 1 мин). 3. Синтез ДНК - достраивание одноцепочечных участков ДНК по принципу комплементарности (72оС, 1 мин).
К концу ПЦР происходит накопление нужного участка ДНК до 2n фрагментов, где n-число циклов амплификации. Этого количества достаточно для точной детекции этого фрагмента методом электрофореза.