Глава 3. Расширенное исследование

3.8.4 Пулы семенной плазмы для внутреннего контроля качества

Одним из необходимых компонентов биохимической оценки эякулята является систематическое использование образцов для ВКК, который должен проводиться применительно к каждой серии. Свободную от сперматозоидов семенную плазму, полученную после центрифугирования (при 3000g в течение 10–15 минут), следует хранить до проведения оценки при температуре –20°C. Оставшуюся после анализа семенную плазму можно повторно замораживать и один или два раза в год использовать для приготовления большого пула смешанной семенной плазмы, которая после тщательного перемешивания (магнитной мешалкой при комнатной температуре) аликвотируется в объемах, достаточных для проведения серии биохимических анализов. Образцы для КК могут храниться в герметичных пробирках при температуре –20°C до 12 месяцев.

Новая серия пула семенной плазмы используется параллельно с текущими образцами для КК в нескольких препаратах в рамках проведения по меньшей мере трех различных анализов для каждого аналита. Таким образом оценивается вариабельность результатов в пределах одного и разных анализов и определяется общая приемлемая вариабельность новой серии семенной плазмы для КК.

3.9 Оценка последовательности эякуляции

Нормальная последовательность эякуляции имеет физиологическое значение для функции сперматозоидов и их нормальной способности к оплодотворению и эмбриональному развитию. Нормальная последовательность означает, что подавляющее большинство сперматозоидов извергается в первых фракциях эякулята преимущественно вместе с секретом предстательной железы, тогда как в последующих двух третях эякулята преобладает жидкость семенных пузырьков (251, 252). Хорошо известно, что при первичном контакте с богатым цинком секретом предстательной железы подвижность, выживаемость и стабильность хроматина сперматозоидов повышаются, в то время как при первичном контакте со щелочной, связывающей цинк жидкостью семенных пузырьков наблюдается обратная картина (13, 253–257).

Воспалительные процессы в предстательной железе или врожденные пороки развития могут вызвать стеноз (или обструкцию семявыбрасывающего протока – ОСП) в отверстиях семявыбрасывающих протоков, открывающихся в уретру, или рядом с ними (258–265). Последствием стеноза будет задержка поступления сперматозоидов в уретру до тех пор, пока под давлением сокращающихся семенных пузырьков содержимое семявыбрасывающего протока не попадет в уретру. Лабораторным результатом при обычном исследовании эякулята будет, прежде всего, плохая подвижность.

Даже биохимическая оценка всего эякулята не покажет, подвергались ли сперматозоиды аномальному воздействию жидкости семенных пузырьков. Единственным способом диагностировать ОСП путем исследования эякулята является сбор отдельных фракций эякулята и исследование содержания, подвижности и биохимического состава сперматозоидов (секрета предстательной железы и семенных пузырьков соответственно) (13).

Если диагностирована нарушенная последовательность эякуляции, существуют малоинвазивные хирургические методы лечения ОСП (266–272); кроме того, негативное влияние жидкости семенных пузырьков можно

153

Лабораторное руководство ВОЗ по исследованию и обработке эякулята человека, шестое издание

уменьшить, предоставив мужчине возможность собрать весь эякулят непосредственно в среду для отмывки сперматозоидов.

3.9.1 Оборудование – в дополнение к обычному исследованию эякулята

Сюда входит любой набор устройств для сбора эякулята, позволяющий пациенту собрать фракции эякулята в том порядке, в котором они извергаются.

Рис. 3.8 Два примера устройств для сбора разделенного эякулята

A

B

Воспроизведено с разрешения A Practical Guide to Practical Laboratory Andrology, Cambridge University Press (273)

3.9.2 Процедуры для пациента

Пациента инструктируют собрать фракции эякулята в том порядке, в котором они будут извергаться, причем этот порядок подтверждается пациентом при предоставлении пробирок в лабораторию. Пробирки должны быть пронумерованы в последовательном порядке в дополнение к их обычной идентификационной маркировке.

3.9.3 Процедуры обработки образцов

Образование преципитата или геля возможно только во фракциях с преобладанием секрета семенных пузырьков. Исследование фракций, в которых преобладает секрет предстательной железы, можно начинать через

154

Воспроизведено с разрешения A Practical Guide to Practical Laboratory Andrology, Cambridge University Press (273)

155

Лабораторное руководство ВОЗ по исследованию и обработке эякулята человека, шестое издание

3.9.6 Интерпретация

Основная масса сперматозоидов, как ожидается, находится в первой трети эякулята, где преобладает богатый цинком секрет предстательной железы. Поступление значительного количества жидкости семенных пузырьков в богатую сперматозоидами фракцию (фракции) указывает на нефизиологическую ситуацию, которая может подавлять функциональную способность сперматозоидов.

Выявление фракции эякулята с хорошей прогрессивной подвижностью может быть полезным для будущего отбора сперматозоидов для ВРТ, что было описано задолго до наступления эпохи ЭКО (274).

Кроме того, для лабораторий, не имеющих возможности определять такие маркеры функции добавочных желез, как концентрация цинка и фруктозы, полезная информация может быть получена путем оценки относительного распределения сперматозоидов и прогрессивной подвижности, с тем чтобы определить возможные источники сперматозоидов с более высокой вероятностью успешного оплодотворения.

156