2 курс / Нормальная физиология / XXIV_съезд_физиологического_общества_им_И_П_Павлова

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

HET (0.04±0.001 г и 0,076±0,028 г, соответственно) по сравнению с Wistar (0.84±0.133 г, p<0.001), но не между WT

и DAT-HET. Введение НТГ приводило к снижению порогов тактильной чувствительности относительно базовых у всех групп животных уже в течение 1 часа тестирования (p<0.05). В тесте «Темно-светлая камера», крысы линии Wistar до введения НТГ проводили больше времени в темном отсеке (128.2±40.5 с), чем WT и DAT-HET (56.5±25.3 с (p<0.05) и 17.8±7.9 с (p<0.001), соответственно). Через 3 часа после введения НТГ время проведенное в темной камере у группыWistar (142.4±7.1 с) повысилось относительно фоновых значений (128.2±40.5 с, p<0.05). У животных групп WT и DAT-HET данный показатель достоверно не изменился.

Результаты исследования показали более низкий уровень тревожности и порогов тактильной чувствительности у крыс линии WT и DAT-HET по сравнению с животными группы Wistar. Введение нитроглицерина вызывало быстрые изменения тактильной чувствительности у всех групп и развитие фотофобии/тревожности у крыс группы

Wistar.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 23 15 00328.

ИЗМЕНЕНИЕ СОМАТИЧЕСКОЙ БОЛЕВОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К ДЕЙСТВИЮ МЕХАНИЧЕСКОГО СТИМУЛА В УСЛОВИЯХ ПОРАЖЕНИЯ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА, ВЫЗВАННОГО ДЕЙСТВИЕМ ИНДОМЕТАЦИНА

Пунина П. В.*, Морозова О. Ю., Ярушкина Н. И.

Институт физиологии им. И. П. Павлова РАН, г. Санкт-Петербург

*e-mail: puninapv@infran.ru

Висцеральная боль является одним из симптомов заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), включающих язвенную болезнь. В отличие от соматической боли, имеющей точную локализацию, висцеральная боль является диффузной и может «отражаться» в соматические области. Ранее нами было показано, что патологический процесс в ЖКТ, вызванный ульцерогенным действием индометацина (ИМ), сопровождается уменьшением соматической болевой чувствительности к действию термического стимула (Yarushkina et al., 2015). Цель настоящего исследования заключалась в изучении соматической болевой чувствительности к действию механического стимула в условиях патологического процесса в ЖКТ, индуцированного введением ИМ. Соматическую болевую чувствительностьоцениваличерез4и48чпослевведенияИМ(35мг/кг,подкожно)илиегорастворителя(физиологический раствор) на основании порога болевой реакции в ответ на механическое воздействие на кожу стопы или живота (тест фон Фрея) у предварительно голодавших в течение 24 ч крыс. Болевым порогом являлась измеренная с помощью электронного алгезиметра BIO-EVF сила механического давления, при которой наблюдалось рефлекторное отдергивание стопы или втягивание брюшной стенки. Введение ИМ приводило к образованию геморрагических эрозий в желудке через 4 ч после его введения. Через 48 ч после введения ИМ не было обнаружено геморрагических эрозий в желудке, но при этом наблюдались повреждения в тонком кишечнике. Через 4 ч после введения ИМ голодавшим крысам, когда в желудке образовывались геморрагические эрозии, наблюдалось увеличение болевого порога на механическую стимуляцию лапы по сравнению с контролем (введение физиологического раствора), однако введение ИМ не влияло на болевой порог, вызванный механической стимуляцией живота. Через 48 ч после введения ИМ наблюдалось дальнейшее увеличение порога болевой реакции (соматическая гипоалгезия) на механическую стимуляцию кожи лапы, при этом порог болевой реакции на механическую стимуляцию кожи живота, наоборот, уменьшался (соматическая гипералгезия). Полученные данные свидетельствуют о том, что патологический процесс в ЖКТ может сопровождаться соматической гипоалгезией (ослаблением соматической болевой чувствительности) в области кожи стопы и соматической гипералгезией (усилением соматической болевой чувствительности) в области живота, при этом соматическая гипералгезия проявляется только на поздней стадии патологического процесса (через 48 ч после введения ИМ).

Финансовая поддержка: Госпрограмма 47 ГП «Научно-технологическое развитие Российской Федерации» (2019 2030), тема 0134 2019 0001.

МАТЕМАТИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ МЕХАНИЗМА КОДИРОВАНИЯ НОЦИЦЕПТИВНЫХ СИГНАЛОВ: РОЛЬ МЕДЛЕННЫХ НАТРИЕВЫХ КАНАЛОВ

Скребенков Е. А.1,*, Власова О. Л.1, Крылов Б. В.2

1Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, г. Санкт-Петербург 2ФГБУН Институт физиологии им. И. П. Павлова РАН, г. Санкт-Петербург

*e-mail: skrebenkovea@gmail.com

Натриевые каналы Nav1.8 ноцицепторов участвуют в кодировании ноцицептивных сигналов полимодальных ноцицепторов, причем только высокочастотная составляющая этого импульсного ответа информирует мозг о болевом повреждающем воздействии. Специфическое снижение функциональной активности указанных каналов должно приводить к «выключению» именно этой высокочастотной компоненты, что позволит сохранить нормальное функционирование полимодальных механо-, термо- и хеморецепторов в случае возникновения хронической боли.

141

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

К сожалению, для ее лечения в арсенале практической медицины отсутствуют безопасные анальгетики, длительное использование которых было бы совершенно безопасным. Методом математического моделирования на основании ионной теории Ходжкина-Хаксли исследован механизм специфической модуляции функциональной активности каналов Nav1.8 и его роль в первичном сенсорном кодировании ноцицептивной информации. Этот механизм основан на уменьшении потенциалочувствительности указанных каналов за счет снижения эффективного заряда, переносимого их активационным воротным устройством. Впервые показано, что приводит к полному восстановлению нормальной функции стимул-ответ ноцицептивного нейрона. При этом специфически устраняется только высокочастотная компонента ответа его мембраны. Этого же эффекта можно добиться и при снижении плотности медленных натриевых каналов. Однако очевидно, что во втором случае действие фармакологических субстанций, претендующихнарольанальгетиков,будетменееспецифично,посколькустановитсявероятнымихвзаимодействие с другими представителями суперсемейства натриевых каналов.

Финансовая поддержка: Государственная Программа ГП 47 “Научное и технологическое развитие Российской Федерации” (2019 2030), тема 0134 2019 0001.

Симпозиум Физиологические и молекулярные механизмы стресса: точки роста и трансляционные аспекты

ГИПОКСИЧЕСКИЙ СТРЕСС ВО ВРЕМЯ ПРЕНАТАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ ВЫЗЫВАЕТ ДЕПРЕССИВНО-ПОДОБНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ АКТИВНОСТИ ГЛЮКОКОРТИКОИДНОЙ СИСТЕМЫ У ВЗРОСЛЫХ КРЫС

Ветровой О. В.1,2*, Стратилов В. А.1, Тюлькова Е. И.1

1Институт физиологии им. И. П. Павлова РАН, г. Санкт-Петербург 2 Санкт-Петербургский государственный университет, г. Санкт-Петербург

*e-mail: vov210292@yandex.ru

Патологии развития мозга,вызванные гипоксией плода, во многом определяются выработкойстрессорных гормонов организмом матери и чрезмерной глюкокортикоидной стимуляцией развивающегося мозга, которая может «запечатляться» на всю жизнь на эпигенетическом уровне в нарушении чувствительности рецепции глюкокортикоидов экстрагипоталамическими структурами мозга, ведя к нарушению отрицательной обратной связи и, как следствие, завершаясь повышенной базальной выработкой кортикостероидов и повышенной глюкокортикоидной стимуляцией реципиентных органов и тканей. Целью данной работы было проведение детального анализа особенностей функционирования глюкокортикоидной системы в структурах мозга взрослых крыс, переживших пренатальную гипоксию (ПГ, 3 сеанса по 3 часа при 180 мм.рт.ст. с интервалами в 24 часа) на 14, 15 и 16-е сутки эмбрионального развития, а также при их реакции на слабый стресс (СС).

ПГ вызывает значительные нарушения транскрипции и трансляции глюкокортикоидных рецепторов (ГР) и глюкокортикоид-зависимой транскрипции в гиппокампе и медиальной префронтальной коре, но не в амигдале, по сравнению с контролем. В частности, нарушенная экспрессия ГР в гиппокампе и префронтальной коре сопровождается снижением количества мРНК и белковой экспрессии альфа 7 субъединицы никотиновых ацетилхолиновых рецепторов, что играет существенную роль в формировании склонности к аддиктивным состояниям. В ответ на СС у ПГ крыс наблюдаются слабые изменения активности глюкокортикоидной системы, в то время как у контрольных животных индуцированная СС активность глюкокортикоидной системы в этих структурах мозга сходна с таковой у интактных животных с ПГ. Нарушение активности глюкокортикоидной системы в экстрагипоталамических структурах головного мозга ПГ крыс сопровождается повышением уровня гипоталамического кортиколиберина по сравнениюсконтролемнезависимоотСС.Синтезпроопиомеланокортина(ПОМК)вгипофизеивыбросадренокортикотропного гормона (АКТГ) в кровь снижаются в ответ на СС у контрольных крыс, что демонстрирует механизм глюкокортикоидной отрицательной обратной связи. В то же время в гипофизе ПГ крыс обнаружены сниженные уровни ПОМК независимо от СС.

Таким образом, результаты проведенного исследования свидетельствуют о существенных перестройках активности глюкокортикоидной системы в структурах мозга крыс, переживших пренатальную гипоксию, предопределяющих развитие хронического депрессивно-подобного состояния, сопряженного со сниженной пластичностью реакций на внешние стимулы.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 20 75 00003.

142

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

ГЛЮКОКОРТИКОИДЫ, ИШЕМИЧЕСКИЙ ИНСУЛЬТ И ДИСТАНТНОЕ ПОВРЕЖДЕНИЕ ГИППОКАМПА: ТРАНСЛЯЦИОННЫЕ АСПЕКТЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ МОДЕЛИРОВАНИЯ ИНСУЛЬТА НА ГРЫЗУНАХ

Гуляева Н. В.1,2*, Онуфриев М. В.1,2

1ГБУЗ «Научно-практический психоневрологический центр имени З. П. Соловьева» ДЗМ, г. Москва 2ФГБУН Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН, г. Москва

*e-mail: nata_gul@ihna.ru

Прогресс в лечении ишемического инсульта (ИИ) и его отдаленных последствий происходит удручающе медленно из-за недостаточного понимания механизмов патогенеза нарушений, в т. ч. происходящих в отдаленный период,когданеврологическиепризнакиострогоИИуженепроявляются.Важнейшийфактор,вовлеченностьвразвитие постинсультнойпатологиимозгагипоталамо-гипофизарно-адреналовойсистемы(ГГАС),восновномигнорируется. Тем не менее, как клинические данные, так и результаты моделирования ИИ на грызунах показывают, что глюкокортикоиды, гормоны этой стресс-реализующей системы, участвуют в индуцированной ИИ острой и хронической дисфункции мозга. Повышенный уровень кортизола в остром периоде ИИ рассматривается как биомаркер высокой смертности и худшего прогноза выздоровления, однако детальные механизмы вовлечения дисфункции ГГАС в отсроченные постинсультные когнитивные и эмоциональные расстройства остаются не до конца изученными. Анализ вызванных ИИ изменений ГГАС и предполагаемой связи кортикоид-зависимого отсроченного повреждения гиппокампа с постинсультными нарушениями функции мозга в эксперименте и клинике подтверждает наличие ассоциации избыточной секреции глюкокортикоидов с изменениями функционирования гиппокампа и развитием когнитивных расстройств. Трансляционно важной точкой роста в преодолении разрыва между пониманием механизмов патогенеза и течением ИИ в клинике является изучение участия нарушений ГГАС и связанной с ними дисфункции гиппокампа на разных стадиях ИИ. Для этого необходимо усовершенствовать и использовать валидные модели ИИ на грызунах, воспроизводящие состояние ГГАС в разных клинических вариантах ИИ, и это следует учитывать при планировании доклинических исследований. В клинических исследованиях ИИ целесообразно принимать во внимание диагностический и прогностический потенциал кортизола и других гормонов ГГАС. Наконец, важно выявлять больных ИИ со стойким нарушением ГГАС. Пациенты группы риска с высоким уровнем кортизола, склонные к дистантным повреждениям гиппокампа, должны находиться под наблюдением, поскольку дисфункция гиппокампа может быть основой развития постинсультных когнитивных и эмоциональных расстройств, а также эпилепсии.

УПРАВЛЕНИЕ КЛЕТОЧНЫМИ И ПОВЕДЕНЧЕСКИМИ ОТВЕТАМИ НА СТРЕСС ХЕМОГЕНЕТИЧЕСКОЙ МОДУЛЯЦИЕЙ АКТИВНОСТИ НЕЙРОНОВ МОЗГА

Дыгало Н. Н.*, Калинина Т. С., Булыгина В. В., Комышева Н. П., Баннова А. В., Дрозд У. С., Сухарева Е. В., Шишкина Г. Т., Ланшаков Д. А.

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный исследовательский центр Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук», г. Новосибирск

*e-mail: dygalo@bionet.nsc.ru

В основе поведения лежит активность центральной нервной системы, обеспечиваемая функционированием большихилокальныхнейронныхсетеймозга.Активностьивзаимодействиенейронныхансамблейизменяютсяпод влиянием внешних и/или внутренних стрессовых стимулов, что, как полагают, определяет клеточные и поведенческие ответы на стресс. Логично предположить возможность коррекции клеточных ответов на стресс и поведения путем целенаправленного повышения или снижения активности одной или нескольких групп взаимодействующих нейронов. В данной работе оценка такой возможности проводилась с помощью хемогенетической модуляции активности нейронов, участвующих в регуляции поведения, в том числе и при остром стрессе. Были использованы AAV векторы, экспрессирующие после введения в миндалину в глутаматергических нейронах структуры специфи-

ческие рецепторы -DREADDs (Designer Receptors Exclusively Activated by Designer Drugs), которые под влиянием Clozapine-N-oxide (CNO) повышали (CaMKIIa-hM3D(Gq)-mCherry), снижали (CaMKIIa-hM4D(Gi)-mCherry) или не меняли (CaMKIIa-Egfp) активность нейронов. Стимуляция активирующего DREADD ослабляла через 30 мин де- прессивно-подобное поведение ювенильных и взрослых крыс в тесте «подвешивание за хвост» (TST), эффект, кото- ромусопутствовалоувеличениеуровнямРНКbdnfвпрефронтальнойкоре.Вотличиеотдепрессивно-подобногопо- ведения, влияние хемогенетических воздействий на тревожность, оцененное в тесте «светлый/темный бокс» (LDB), было обнаружено лишь у взрослых крыс, которые при стимуляции в их миндалине DREADD, угнетающего активность нейронов, скрывались в темном отсеке LDB в 3 раза быстрее, чем животные всех остальных групп. Причина такого поведения этих животных могла состоять в снижении активности глутаматергических нейронов миндалины, оцененнойпоуровнюбелкаc-Fos,атакжесодержаниянейротрофинаBDNFвэтихнейронах,обеспечивающего,как считается, поведенческий ответ на стресс. Хемогенетическая модуляция активности глутаматергических нейронов базолатеральной миндалины молодых и взрослых крыс вызывала как зависимые, так и независимые от возраста изменения экспрессии BDNF в мозге, некоторые из которых способны обусловливать возрастные особенности по-

143

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

веденческих ответов. В целом хемогенетическая модуляция активности глутаматергических нейронов миндалины способна влиять как на нейрохимические (c-Fos и BDNF), так и поведенческие ответы на кратковременный стресс.

Финансовая поддержка: грант Российского фонда фундаментальных исследований (№ 20 015 00129) и бюджет (№ FWNR 2022 0023).

МОДЕЛЬ ДЛИТЕЛЬНОЙ СОЦИАЛЬНОЙ ИЗОЛЯЦИИ КРЫС: НОВЫЙ ИНСТРУМЕНТ В ТРАНСЛЯЦИОННОЙ МЕДИЦИНЕ?

Крупина Н. А. *, Ширенова С. Д., Хлебникова Н. Н.

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», г. Москва

*e-mail: krupina-na@yandex.ru

Для социальных видов млекопитающих, включая человека, коммуникации спредставителями своего сообщества являются сформировавшимся в эволюции важным условием выживания. Социальная изоляция / депривация – источ​ - ник хронического стресса, как улюдей, так иусоциальных животных (Xia, Li, 2018). Хронический стресс социальной изоляции (СИ) может приводить к выраженным негативным последствиям у человека и животных по целому ряду показателей эмоционально-мотивационного поведения и когнитивной деятельности, а также к развитию психосоматических расстройств. В настоящее время недостаточно данных опоследствиях СИ при значительном увеличении ее длительности и о половых различиях ответа на такой стресс. Цель настоящей работы – проанализировать​ нарушения поведения, когнитивных функций, иммуновоспалительных и нейрохимических показателей у крыс обоего пола на модели социальной изоляции, пролонгированной до 9 10,5 мес., спозиции трансляционной медицины.

По однойсхемепроведенытрисерии исследований на190белыхкрысахWistar.Крысятотсаживалиотматерей

ввозрасте примерно 1 мес. С использованием общепринятых методов в динамике СИ оценивали эмоционально-мо- тивационное состояние крыс и их когнитивные функции. Эксперименты на животных проводили под контролем Этического комитета ФГБНУ «НИИОПП». По завершении поведенческих исследований c помощью иммуноферментного анализа определяли уровень кортикостерона в крови, в структурах мозга оценивали экспрессию белков методом Вестерн-блоттинга и содержание моноаминов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Сравнительный анализ эффектов длительной СИ у самцов и самок крыс выявил более выраженные нарушения обучения и памяти, эмоционального и социального поведения у самок, что сопровождалось изменением уровня молекулярных маркеров нейропластичности, снижением уровня провоспалительных цитокинов, повышением экспрессии пролинспецифических пептидаз, а также более выраженным изменением активности катехоламинергиче-

ских систем в структурах мозга (Krupina et al., 2020; Ширенова и др., 2021, 2022; Shirenova et al., 2023). У самок об-

наружена смена стратегий преодоления стресса при пролонгировании СИ от увеличения социального предпочтения к снижению социальности и предпочтения «социальной новизны».

На основании полученных данных модель пролонгированной до многих месяцев СИ, несмотря на практические ограничения ее использования вследствие большой длительности, может быть полезной для исследований

вобласти трансляционной медицины.

СТРЕСС В ОНТОГЕНЕЗЕ КАК ИСТОЧНИК БОЛЕЗНИ: РОЛЬ ОТЦОВ

Ордян Н. Э.1,*, Пивина С. Г.1, Малышева О. В.1,2, Ракицкая В. В.1, Акулова В. К.1, Холова Г. И.1, Шигалугова Е. Д.1

1Институт физиологии им. И. П. Павлова РАН, г. Санкт-Петербург 2Институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д. О. Отта, г. Санкт-Петербург

*e-mail: neo@infran.ru

Введение. Многочисленные экспериментальные и клинические данные указывают на значимое влияние неблагоприятных воздействий на организм отца в отношении нарушений физиологических функций у их потомков и предрасполагать к развитию различных заболеваний. Особое место в ряду неблагоприятных факторов, воздействующих на родителей, занимают те, которые приводят к изменению гормонального баланса, прежде всего, гормонов стресса – глюкокортикоидов​ . Их изменение наблюдается не только в результате стресса, но и при различных психических заболеваниях, например, при посттравматическом стрессовом расстройстве (ПТСР), которое в человеческойпопуляциикоррелируетсвоздействиемтравматическихстрессовыхфакторов.Всвоихисследованияхосновноевниманиемысосредоточилинаэкспериментальнойпроверкегипотезыотом,чтоПТСР,которымотцыстрадают в репродуктивном возрасте, может негативно сказываться на физиологических функциях их потомков.

Методы. Для моделирования ПТСР в эксперименте использовали парадигму «стресс-рестресс» как наиболее полно воспроизводящую клиническую картину заболевания. У потомков самцов крыс со сформированным ПТ- СР-подобным состоянием исследовали соматическое развитие, поведенческий фенотип и память. С целью выявлениямеханизмовэффектовотцовскогоПТСРусамцованализировалисодержаниямалыхнекодирующихРНКвсперматозоидах методом NGS.

144

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

Результаты. Потомство, рожденное от самцов с моделированием ПТСР, отставало в соматическом развитии от потомков контрольных самцов до 10 дня жизни. Анализ выживаемости крысят в пометах выявил, что травматический стресс и рестресс самцов-отцов значительно снижал выживаемость потомков самцов, но не самок. У половозрелых потомков самцов выявлено снижение уровня тестостерона и ухудшение памяти, сопровождающееся пониженной экспрессии гена инсулиноподобного фактора роста 2 в головном мозге. Потомки самки проявляли определенную устойчивость к стрессу отцов: изменение их поведенческого фенотипа и памяти были незначительными. Анализ спектра малых РНК в сперматозоидах стрессированных самцов показал изменение экспрессии 27 piwiРНК и 77 микроРНК. Среди генов-мишеней этих микроРНК существуют гены, продукты которых могут быть вовлечены в такие механизмы передачи отцовских эффектов потомству, как изменения метилирования ДНК, модификации гистонов и РНК-интерференции.

Заключение. Одним из механизмов, ответственных за передачу отцовских эффектов потомству, может быть, изменение спектра регуляторных некодирующих РНК в сперматозоидах.

ИЗМЕНЕНИЕ ПОВЕДЕНИЯ И СТРЕСС-РЕАКТИВНОСТИ У СТАРЕЮЩИХ КРЫС WKY

И SHR, ПЕРЕНЕСШИХ ХРОНИЧЕСКУЮ ИЗОЛЯЦИЮ

Степаничев М. Ю.*

Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН, г. Москва

*e-mail: m_stepanichev@ihna.ru

Социальное дистанцирование и изоляция стали популярными мерами борьбы с пандемией COVID19. Между тем социальная изоляция является достаточно сильным стрессирующим фактором, оказывающим выраженные эффекты на развитие и созревание нервной системы. Эффекты социальной изоляции (СИ) в старшей возрастной группе, характеризующейся манифестацией различных коморбидных патологий, проявляются в виде усиления симптоматики хронических заболеваний, развития депрессивных состояний и когнитивных нарушений. Однако изменения поведения у стареющих животных вследствие изоляции и механизмы, лежащие в их основе, исследованы относительно слабо. В этой работе изучали изменения поведения после трёхмесячной СИ стареющих животных WKYи SHR. СИ препятствовала набору массытела, ноне приводилак значимым изменениямартериального давления. Практически во всех поведенческих тестах крысы SHR демонстрировали более высокий уровень двигательной активности. Крысы WKY были более тревожны по сравнению с SHR, а СИ усиливала тревожность у крыс обоих генотипов. Не наблюдалось развития депрессивноподобного состояния у крыс в результате СИ. У всех крыс наблюдалась выраженная габитуация в условиях теста «открытое поле». И самцы WKY, и самцы SHR демонстрировали способности к решению пространственной задачи в лабиринте Барнс, но СИ вызывала нарушения долговременной памяти у крыс SHR. У крыс SHR также была хуже выражена способность к адаптации когнитивной деятельности при изменении условий эксперимента (cognitive flexibility), особенно после перенесенной СИ. СИ изменяла реакцию на острый стресс гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси, но не симпато-адреналовой системы у крыс SHR. Таким образом, СИ приводила к усилению тревожности и нарушениям когнитивных функций, а также изменению стресс-реактивности, которые были более выражены у стареющих крыс SHR по сравнению с крысамиWKY.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 22 015 00132.

ПСИХОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ БОЕВОГО СТРЕССА И ФОРМИРОВАНИЯ ПТСР В СОВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ

Федотова Ю. О.*

Институт физиологии им. И. П. Павлова РАН, г. Санкт-Петербург

*e-mail: julia.fedotova@mail.ru

Изучениемеханизмовбоевогострессаипосттравматическогострессовогорасстройства(ПТСР)увоенныхявляется одной из наиболее актуальных проблем фундаментальной медицины, вреалиях нашего времени. Несмотря на тщательныйотборпокритериямпрофессиональнойпригодностивоеннослужащихдляучастиявбоевыхдействиях,вероятность ПТСР после военных конфликтов весьма высока (примерно 40 %). Исследователи полагают, что распространенность ПТСР зависит от интенсивности стрессовых событий во время военных действий. При этом сами военные могут быть частично защищены за счет специальной подготовки ивыработанных навыков выживания ввоенной обстановке. ПТСР развивается улюдей, которые напрямую подвергаются стрессу, утех, кто присутствует при трагедии, значительно реже, но встречается у лиц, узнавших, о произошедшей трагедии (это могут быть близкие погибшего человека).

ПТСР приводит к нарушениям функционирования нейроэндокринной системы, а также встречаются соматические проявления. Не вызывает сомнения, что в зависимости от длительности и интенсивности воздействия психической травмы увеличивается вероятность и развития ПТСР. При этом, ряд исследователей высказывают мнение о том, что отдельные психотравмы, такие как пытки, всегда вызывают ПТСР. Многочисленными исследованиями продемонстрировано существенное значение боевого стресса в развитии психосоматических расстройств у военных. Как регистрируемые осложнения боевого стресса, так и ПТСР у военных включают в себя схожие поведен-

145

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

ческие расстройства, а также сходные нарушения нейроэндокринной регуляции, и сходный спектр коморбидных заболеваний. Известно, что боевой стресс является пусковым звеном для ПТСР у военных. Поэтому одним из важнейших современных направлений исследований является анализ патогенетических связей между боевым стрессом

иПТСР.Этапроблемаисследуетсякакнауровнеанализаклиническихданных,такинауровнеэкспериментального моделирования боевого стресса. На основании клинических наблюдений охарактеризована специфика адаптивных

идезадаптивных реакций организма в ходе боевого стресса.

Вусловиях боевого стресса и развития ПТСР у военных, стандартно рекомендуемые схемы лечения согласно фармакопротоколу недостаточно эффективны, в связи с чем, актуальным становится изыскание новых стратегий лечения, особенно для нон-респондеров.

Таким образом, в условиях современной реальности необходим поиск новых подходов для профилактики развития и формирования ПТСР у военных.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 23 15 00115.

НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ КОРРЕКЦИИ ПОСТТРАВМАТИЧЕСКИХ СТРЕССОРНЫХ РАССТРОЙСТВ НА ОСНОВЕ РЕСВЕРАТРОЛА

Цейликман В. Э.1,*, Цейликман О. Б.1, Шатилов В. А.1, Жуков М. С.1, Аристов М. Р.2, Кошелев А. Г.2, Мануйлов Г. В.2, Эпиташвили А. Е.2, Букша И. А.2, Липатов И. А.2, Егоров О. Н.2, Лукин А. А.1, Карпенко М. Н.3, Майстренко Е. А.3,1

1ФГАОУ Южно-Уральский государственный университет (НИУ), г. Челябинск 2ФГБОУ ВО Челябинский государственный университет, г. Челябинск 3ФГБНУ Институт экспериментальной Медицины, г. Санкт-Петербург

*e-mail: vadimed@yandex.ru

Связанная со стрессом психологическая травма, является триггером синдрома посттравматических стрессорных расстройств (ПТСР). ПТСР является социально-значимым заболеванием, для которого до сих пор не удалось предложитьэффективнуюфармакологическуюкоррекцию.ПрепаратамипервойлинииприлеченииПТСРявляются селективныеингибиторыобратногозахватасеротонина(СИОЗы),основноймишеньюдлякоторыхявляетсясеротониновый транспортер. Исходя из особенностей патогенеза ПТСР очевидно, что для лечения этого заболевания требуются биологически активные вещества политаргетного характера. Ресвератрол, природный фитоаллексин, растительного происхождения полностью соответствует этому критерию. Во-первых, среди многочисленных защитных эффектов ресвератрола присутствует антистрессорный, который проявляется в способности снижать уровень тревожности, депрессивное поведение, а также улучшать когнитивные способности экспериментальных животных. Более того уже имеются эпизодические исследования, демонстрирующие способность ресвератрола ограничивать поведенческие расстройства при экспериментальном ПТСР. Во-вторых, возможности всех применяемых для коррекции ПТСР фармакологических препаратов сводятся исключительно к ограничению выраженности психиатрической симптоматики. разносторонние защитные эффекты ресвератрола могут купировать ряд осложнений ПТСР. В-третьих, учитывая наличия у ресвератрола множества защитных эффектов, представленные на его основе функциональные продукты возможно перепрофилировать для нутрицевтической поддержке терапии различных заболеваний. На экспериментальной модели ПТСР в виде предаторного стресса, установлено, что введение ресвератрола: а) существенно ограничивало выраженность тревожных расстройств; б) предупреждало вызванные ПТСР изменения экспрессии генов нейротрофинов в гиппокампе; в) компенсаторно увеличивало интенсивность пострессорного повышения уровеня экспрессии генов дофаминового транспортера и каткхол-О-метил трансферазы в гиппокампе; г) в гиппокампе и в печени снижало активности моноаминооксидаз и окислительного стресса; д) в печени снижало активности ферментов тканевого метаболизма глюкокортикоидов. Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о перспективности использования ресвератрола для коррекции ПТСР.

Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (Региональный грант, Челябинская область) № 23 15 20040.

Постерная секция: Физиологические и молекулярные механизмы стресса: точки роста и трансляционные аспекты

TRKB.T1 РЕЦЕПТОР В МЕХАНИЗМАХ ГЕНЕТИЧЕСКИ ДЕТЕРМИНИРОВАННОГО ДЕПРЕССИВНО-ПОДОБНОГО ПОВЕДЕНИЯ У МЫШЕЙ

Алсаллум М.*, Ильчибаева Т., Цыбко А., Ерёмин Д., Науменко В.

Институт цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск

*e-mail: mr7salloum@gmail.com

Депрессия – ​одно из самых тяжелых психических расстройств, существенно снижающих качество жизни пациентов. Однако, поскольку доступные антидепрессанты по-прежнему эффективны не для всех пациентов, крайне

146

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

актуальной проблемой современной нейронауки является изучение механизмов депрессии.

Ранее мы обнаружили, что уровень рецептора TrkB.T1 снижен в гиппокампе мышей линииASC (мыши с генетически детерминированным депрессивно-подобным поведением) по сравнению с «нормальными» мышами линии C57BL/6. В нашем исследовании мы индуцировали сверхэкспрессию TrkB.T1 рецептора в гиппокампе мышейASC для изучения роли TrkB.T1 в механизмах депрессивно-подобного поведения. Используя аденоассоциированные вирусы в качестве носителей гена, кодирующего TrkB.T1, мы индуцировали сверхэкспрессию TrkB.T1 и изучали ее влияние на экспрессию ключевых генов серотониновой и BDNF систем мозга. Также мы оценили влияние сверхэкспрессииTrkB.T1рецепторанаразличныевидыповедения.Былообнаружено,чтоTrkB.T1рецепторвовлеченврегуляцию агрессивного поведения, тревожности и депрессивно-подобного поведения у мышей линииASC. Принимая во внимание наши результаты, мы считаем, что TrkB.T1 рецептор может служить мишенью для создания антидепрессантов нового поколения.

СВЯЗЬ МЕЖДУ УРОВНЕМ ТРЕВОЖНОСТИ У КРЫС И ГЛИОВАСКУЛЯРНЫМ РЕМОДЕЛИРОВАНИЕМ ЧЕРНОЙ СУБСТАНЦИИ МОЗГА В МОДЕЛИ ЛПСИНДУЦИРОВАННОГО НЕЙРОВОСПАЛЕНИЯ

Аникаева М. С.1*, Сергеева Т. Н.1, Вежеева О. А.1, Николенко В. Н.2, Сергеев В. Г.1,3

1Удмуртский государственный университет, г. Ижевск 2Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова, г. Москва

3Ижевская государственная медицинская академия, г. Ижевск

*e-mail: mariaanikaeva@mail.ru

Нейровоспаление является одним из ключевых патофизиологических механизмов спорадических форм нейродегенеративныхзаболеваний,вчастности,болезниПаркинсона(БП).Остаетсяоткрытымвопросовлияниииндивидуальных различий в уровне тревожности на интенсивность нейровоспалительного процесса. Целью работы стало исследование связи между уровнем тревожности у крыс и выраженностью молекулярных и клеточных изменений, характерных для нейровоспаления в черной субстанции (ЧС), вызванных введением в неё бактериального липополисахарида (ЛПС).

Исследование проведено на 32 самцах линии Вистар, весом 280 320 гр., содержащихся в стандартных условиях и разделенных на основе тестирования в крестообразном лабиринте на группы животных с низкой и высокой тревожностью, которые, в свою очередь, делились на контрольную и основную группы. Животным вводили при помощи стереотаксиса унилатерально в ЧС 2 мкл стерильного физиологического раствора (контроль) или 2 мкл 0,01 % раствора ЛПС (основная группа). Через 8 недель после введения растворов в область черной субстанции извлекали мозг для гистохимического (лектин томата) и иммуногистохимического (GFAP, MHC II и TNF-α) окрашивания криостатных срезов. Морфометрические исследования проводили при помощи компьютерных программ

ImagePro Insight 7.0 иAngioTool.

Интранигральное введение ЛПС животным с низкой тревожностью вызывало достоверный рост в ЧС количества микроглии и астроглии. В то же время, после введения ЛПС у высокотревожных животных обнаруживали достоверно более высокие уровни количества микроглии и астроглии по сравнению с низкотревожными. Кроме того, у них обнаруживали экспрессию в микроглиальных клетках провоспалительного TNF-α и увеличение количества и ветвления сосудов микроциркуляторного русла.

Наблюдаемые изменения свидетельствуют об индуцировании нейровоспаления и ремоделирования обменного русла в ЧС в ответ на провоцирующее воздействие бактериального эндотоксина у крыс с базальной высокой тревожностью.

ОЦЕНКА ПРЕДПОЧТЕНИЯ АЛКОГОЛЯ И ИССЛЕДОВАНИЕ ИЗМЕНЕНИЙ УРОВНЯ ТИРОЗИНГИДРОКСИЛАЗЫ В ПРИЛЕЖАЩЕМ ЯДРЕ ПРИ ПРЕРЫВИСТОМ ХРОНИЧЕСКОМ СПАИВАНИИ У САМЦОВ И САМОК КРЫС WISTAR

Антонова И. В.1,*, Дорофейкова М. В.1,2, Веракса А. Е.1, Громова Г. Е.1, Морина И. Ю.1, Егоров А. Ю.1

1Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова РАН, г. Санкт-Петербург

2Institute of Developmental Neurophysiology, Center for Molecular Neurobiology, University Medical Center HamburgEppendorf, Hamburg, Germany

*e-mail: risha.irina999@mail.ru

Проблемаалкоголизмаостаетсяоднойизсамыхактуальныхвмире.Формированиеалкогольнойзависимостипроисходитприучастиисистемынаградыиподкрепления.Подкрепляющийэффекталкоголяспособствуетвыбросудофамина при потреблении малых доз, но приводит кснижению дофамина при хроническом потреблении алкоголя. Пол также может оказывать существенное влияние на предпочтение ипотребление алкоголя. Считается, что самки крыс более уязвимы квоздействию алкоголя вследствие влияния гормонов иразличий вуровне метаболизма, по сравнению ссамцами. Тирозингидроксилаза (ТГ) – основной​ фермент, лимитирующий скорость синтеза дофамина. Исследование количества ТГ в тканях мозга позволяет определить локализацию, дифференцировку и развитие дофаминергических нейронов.

147

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

ЦельюработыбылоисследованиепредпочтенияалкоголяиоценкаизмененийуровняТГвобластиприлежащего ядра в условиях прерывистого спаивания с пероральным введением этанола у самок и самцов крыс Wistar.

Эксперимент проведен на 4х группах крыс: Wistar male eth (n=10), Wistar fem eth (n=10) – ​в режиме 2 через 2 суток перорально получали 18.12мл/кг 35 %-го этанола, в общем количестве 12 доз; Wistar male wat (n=10) и Wistar fem wat (n=10) – ​контрольные группы, в таком же режиме получали воду. Для оценки предпочтения алкоголя был использован тест «Двухстаканная проба» до и спустя неделю после прерывистого спаивания. После окончания алкоголизации из каждой группы в случайном порядке было взято по 4 мозга для изучения ТГ. Исследование ТГ проводилось с помощью иммуногистохимического (АВС-ДАБ) метода на фронтальных срезах мозга (20мкм). Были использованы первичные антитела мыши против ТГ (ТГ, Sigma, США), разведенные 1:1500, вторичных антитела козы против IgG мыши, конъюгированные с биотином (VectorLabs., Великобритания), разведенные 1:600 и раствор стрептовидин–пероксидазы (BioLegend, США), разведенной 1:700.

По результатам теста «Двухстаканная проба», самки, но не самцы, изначально проявляли интерес к этанолу и снижали предпочтение этанола после спаивания. При анализе результатов иммуногистохимического исследованиябыловыявленоповышениеуровняТГусамокWistar,подвергавшихсяспаиваниюпосравнениюсалкоголизированнымисамцами.Такимобразом,былипроявленыполовыеразличиявуровнепредпочтенияалкоголяиколичестве ТГ в прилежащем ядре у самок и самцов крыс Wistar при прерывистом введении высокопроцентного этанола.

Финансовая поддержка: государственное задание ИЭФБ РАН № 075 00967 23 00.

СУБСТАНЦИЯ Р КАК РЕГУЛЯТОР СОДЕРЖАНИЯ ГЛИКОПРОТЕИНОВ ПЕЧЕНИ

УЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ С РАЗЛИЧНОЙ СТРЕСС-РЕАКТИВНОСТЬЮ

ВУСЛОВИЯХ ТЕХНОГЕННОГО СТРЕССА

Воронцова Т. С.*, Васильева Н. Н., Елисеева Е. В., Пермяков А. А., Исакова Л. С.

Ижевская государственная медицинская академия, г. Ижевск

*e-mail: solnoshko@udm.ru

Важным органом в регулирования процессов гомеостаза в организме является печень; которая отвечает на изменения окружающей среды, и как следствие является причиной изменений функции и структуры данного органа. Причиной функциональных органных расстройств при стрессе возможно, является сдвиг в метаболизме гликопротеинов, формирующих систему, которая осуществляет структурообразующую функцию различных органов, определяет полиморфизм, контролирует дифференцировку эпителия, принимает участие в регенерации тканей.

Цельработы – ​оценитьвлияниесубстанцииРнауровеньгликопротеиноввпечениуэкспериментальныхживот- ных с различной стресс-устойчивостью при действии техногенного стресса.

Эксперименты проведены на белых крысах-самцах. Животных подвергали действию техногенного вращающегося электрического поля (ВЭП) – патент​ на полезную модель № 166292 «Устройство для исследования влияния вращающегося электрического поля на биологические объекты». Опыты проводились ежедневно по 60 минут в течение 20 дней.

Для ранжирования животных на группы использовали тест «открытое поле» по Е. В. Коплик (2002). В ходе исследования проводили видеосъемку, и регистрировали следующие поведенческие показатели: время первого движения и выхода в центр, количество пересеченных квадратов. В зависимости от результатов крысы были разделены на три группы: стресс-устойчивые (Куст=2,00 5,00), стресс-неустойчивые (Куст=0,30 0,70) и амбивалентные

(Куст=0,8 1,99).

В плазме крови фотометрическим методом определяли уровень сиаловых кислот, мукопротеинов, фукозы и фукозидазы до, на 10 и 20 день воздействия ВЭП. Субстанцию Р (Sigma, USA) вводили в дозе 25 мкг/кг, растворенной в 1 мл 0,9 % NaCl через день внутрибрюшинно в течение 20 дней, на фоне ежедневного воздействия ВЭП в течение 60 мин.

На 10 день влияния ВЭП во всех группах повышалось содержание сиаловых кислот, мукопротеинов, а также уровень фукозы и активность α-L-фукозидазы в гомогенате печени, что характерно для преобладания катаболических процессов. К 20 дню влияния ВЭП интенсивность процессов распада гликопротеинов в гомогенате печени снижалась во всех группах особей. Введение субстанции Р ограничивало эффекты ВЭП в отношении содержания гликопротеинов в гомогенате печени. Наибольшие изменения наблюдались у стресс-неустойчивых особей.

Таким образом, субстанция Р ограничивала влияние техногенного стресса на содержание гликопротеинов в печени у животных с различной устойчивостью к стрессу, наибольшие изменения наблюдались у стресс-неустойчи- вых особей.

148

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ РЕАКЦИИ ГИПОТАЛАМО-ГИПОФИЗАРНО- АДРЕНАЛОВОЙ СИСТЕМЫ НА ОСТРОЕ СТРЕССОВОЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ В УСЛОВИЯХ ПОСТОЯННОГО ОСВЕЩЕНИЯ

Гончарова Н. Д.*, Чигарова О. А., Оганян Т. Э., Тимошенко Н. В.

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт медицинской приматологии», г. Сочи

*e-mail: ndgoncharova@mail.ru

Гипоталамо-гипофизарно-адреналовая система (ГГАС) – ​ключевая адаптивная нейроэндокринная система, дисфункции которой играют важную роль в увеличении частоты стресс-зависимой возрастной патологии. Среди факторов окружающей среды, влияющих на увеличение возрастной патологии, большое значение отводится нарушениям в природном цикле свет – ​темнота, особенно с увеличением освещенности в ночное время. В то время как разрыв цикла свет-темнота давно известен как мощный поведенческий стрессор, мало известно относительно стресс-реактивности ГГАС в условиях постоянного освещения (CL). Целью настоящего исследования явилось изучение возрастных особенностей реакции ГГАС на острое психоэмоциональное стрессовое воздействие (ОСВ)

вусловиях хронического CL на трансляционной модели лабораторных приматов. Молодые и старые самки ма- как-резусов подвергались CL (24 ч свет/сутки, в течение 4 8 нед, 330 400 lux с помощью обычных светодиодных ламп,«Navigator»71 302NLL-G-T8 18 230 4K-G13,Москва).Контрольныемолодыеистарыеживотныенаходились

впомещении с природным освещением в течение дня и отсутствием освещения ночью (стандартное освещение, SL) в течение 4 8 нед. Все животные подвергались ОСВ (нежесткой иммобилизации в течение 2 ч), функциональным тестам с кортиколиберином и аргинином-вазопрессином, изучению циркадианных ритмов уровней кортизола (КОРТ) и пинеального гормона мелатонина (МЕЛ) в плазме крови. Впервые был выявлен ингибирующий эффект CLна реакцию коры надпочечников на ОСВ у всех индивидов, независимо от возраста и предшествующего стрессу поведения,механизмыкоторогобыливозраст-зависимыми:вследствиеингибированиягипофизарнойсекрециикор- тикотропина(АКТГ)умолодыхживотныхипреимущественнобезвоздействиянасекрециюАКТГустарыхособей. Существенным нарушениям подвергалась также суточная динамика концентрации КОРТ при отсутствии значимых изменений в циркадианном ритме МЕЛ. Выявленные нарушения в функционировании ГГАС на фоне хронического CL свидетельствуют о потенциальном риске ослабления адаптационных способностей организма и формировании патофизиологических условий для стресс-зависимой патологии и ускоренного старения.

ВЛИЯНИЕ РАННЕГО ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА И УСЛОВИЙ СОДЕРЖАНИЯ НА ПРОСТРАНСТВЕННОЕ ОБУЧЕНИЕ И ПАМЯТЬ КРЫС

Зайченко М. И.*, Сидорина В. В., Шаркова А. В., Груздева В. А., Герасимова Ю. А., Павлова И. В., Брошевицкая Н. Д., Григорьян Г. А.

ФБГУН Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН, г. Москва

*e-mail: mariya-zajchenko@yandex.ru

Введение. Известно, что стресс в раннем возрасте вызывает дисрегуляцию гипоталамо-гипофизарной надпочечниковой и иммунной систем, повышая чувствительность нейровоспалительной системы на повторные стрессовые воздействия. Важную роль в регуляции поведенческих функций играют условия содержания: длительная социальная изоляция (СИ), обогащенная среда (ОС) и скученные (СК) условия проживания. Целью настоящей работыбылоисследованиевлияний раннегострессаиусловий содержаниякрыснапроявлениекогнитивных функций (обучения и памяти).

Методы исследования. Опыты проведены на крысах линии Вистар обоего пола. На 3- и 5-й дни жизни у части крысят вызывали провоспалительный стресс введением липополисахарида, ЛПС (50 мкг/кг), другой части вводили физиологический раствор. Обучение поиска скрытой под водой платформы проводили у крыс в возрасте 4 5 мес. в водном лабиринте Морриса в течение 9 дней по две пробы в день. Рабочую память исследовали в течение 4-х дней по 4 пробы в день. Скорость обучения оценивали по времени нахождения платформы, пройденной дистанции, времени пребывания в квадранте платформы и периферии бассейна. С 25-го дня жизни крыс помещали в разные условия проживания. Изолянтов содержали поодиночке. В ОС животные проживали в трех-ярусных клетках, которые были оборудованы развивающими предметами. В одной клетке проживали по 9 самцов или 12 самок. В скученных условиях в клетке находилось 16 крыс.

Результаты. Самки крыс обучались поиску скрытой под водой платформы хуже, чем самцы. Ранний ЛПС стресс ухудшал обучение в водном лабиринте у самцов, но не оказывал влияния на обучение самок. Все условия содержания крыс, включая стрессовые, улучшали обучение в водном лабиринте по сравнению со стандартными условиями проживания, но не влияли на пространственную рабочую память.

Заключение. Ухудшение обучения и долгосрочной памяти в водном лабиринте Морриса вызывалось только у самцов, испытавших ранний ЛПС стресс. Проживание в ОС улучшало обучение. Неожиданно, СИ и СК, не ухудшали, а улучшали долгосрочную память по сравнению с крысами, проживавшими в стандартных условиях.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 23 25 00484.

149

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

ВЛИЯНИЕ BDNFНА ЭКСПРЕССИЮ 5-HT4 И 5-HT7 РЕЦЕПТОРОВ ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ ХРОНИЧЕСКОГО НЕПРЕДСКАЗУЕМОГО СТРЕССА in vivo

Карпенко Е. А., Кубарева А. М., Перенков А. Д., Ведунова М. В., Митрошина Е. В.*

ННГУ им. Н. И. Лобачевского, г. Нижний Новгород

*e-mail: helenmitroshina@gmail.com

Депрессия является одной из важнейших проблем здравоохранения как в России, так и во всем мире. Серотониновая система модулирует реакцию на острый стресс и участвует как в этиологии депрессивных и тревожных расстройств, так и в ответе на их лечение. Известно также об участии серотониновых рецепторов (5-HTR) в определенных аспектах развития нейронов, таких как рост нейритов, регуляция соматической морфологии, подвижности аксонального конуса роста и формы дендритных шипиков, помимо классической роли серотонина в качестве нейротрансмиттера. В последнее время большое внимание уделяется положительному воздействию активации ранее мало исследованных подтипов 5-HT4R и 5-HT7R на обучение и память, поскольку дефицит когнитивных функций часто связан с беспокойством, депрессией, а также с развитием нейродегенеративных заболеваний. Известно, что экзогенное введение нейротрофического фактора BDNF способствует функционированию и прорастанию серотонинергических нейронов мозга у взрослых крыс Целью нашей работы послужило изучить влияние экзогенного введения BDNF на экспрессию 5-HT4R и 5-HT7R при индуцированном хроническим непредсказуемым стрессом (ХНС) депрессивноподобном состоянии у мышей линии С57Bl/6.

ОбъектомисследованияявилисьмышилинииC57BL/6,разделенныенаследующиегруппы:«Контроль»(n=10), «ХНС» (n=10, ХНС в течение 21 дня), «ХНС+BDNF» (с 14 по 21 день моделирования ХНС интраназальное введение BDNF 0,4 мг/кг). Тест на предпочтение сахарозы продемонстрировал, что после моделирования стресса коэффициент предпочтения сахарозы снижался с 66,45±1,17 % до 55,97±0,79 %, что говорит о формировании ангедонистического поведения – одного​ из главных симптомов депрессивных расстройств. Применение BDNF сохраняло нормальный уровень предпочтения сахарозы (68,43±2,26 %). Анализ экспрессии мРНК серотониновых рецепторов с помощью ПЦР в реальном времени показал, что моделирование ХНС приводит к достоверному снижению экспрессии рецепторов 5HT4 и 5HT7-R, а также нейротрофического фактора BDNF относительно контрольной группы вовсехисследованныхструктурахголовногомозга(кора,гиппокамп,мозжечок).Такжевкореигиппокампепоказано снижение экспрессии рецептора TrkB. Интраназальное применение BDNF сохраняло уровень экспрессии BDNF и TrkB в коре, но не других отделах мозга. Таким образом, применение BDNF при моделировании ХНС оказывает антидепрессантное действие, однако не влияет на экспрессию серотониновых рецепторов 4 и 7 типов.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 22 15 00178.

БИОЛОГИЧЕСКАЯ ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДА ОЦЕНКИ ДОЛГОВРЕМЕННОЙ СТРЕССИРОВАННОСТИ ДОМОВЫХ МЫШЕЙ ПО СОДЕРЖАНИЮ КОРТИКОСТЕРОНА В ШЕРСТИ

Ключникова М. А.*, Лактионова Т. К., Кваша И. Г., Вознесенская В. В.

Институт проблем экологии и эволюции им. А. Н. Северцова РАН, г. Москва

*e-mail: klyuchnikova@gmail.com

Гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система (ГГНС) играет ключевую роль в организации ответной реакции организма на стресс. Активация ГГНС сопровождается выбросом в кровь гормонов стресса глюкокортикоидов (ГК). Уровень ГК в шерсти животных может служить интегральным показателем стрессированности на длительном временном промежутке (от нескольких недель до нескольких месяцев). Несмотря на перспективность использования такого показателя для фундаментальных и прикладных исследований, широкое использование такого подхода в значительной мере тормозится недоработкой методической базы. Цель нашей работы: биологическая валидация метода оценки стрессированности животного по содержанию ГК в шерсти при долговременном воздействии стрессирующего фактора. Объектом исследования были выбраны мыши линии C57Bl/6 (в возрасте 3 4 мес.) как широко используемые в биомедицинских исследованиях и биологическом мониторинге. В качестве стрессирующих воздействий были выбраны такие, для которых хорошо известно длительное повышение содержания в крови мышей основного ГК кортикостерона (КРТ), а именно: содержание незнакомых самцов в однополых группах и долговременные предъявления химических сигналов хищника. Предварительно нами была оптимизирована методика измерения КРТ в шерсти для мелких грызунов в связи с малым объемом образца и тонкостью волос: была отработана методология стрижки и промыва шерсти; определён минимальный интервал между стрижками; подобраны параметры размола; оптимизированы протоколы экстракции. Определение концентрации КРТ проводили методом иммуноферментного анализа с использованием готовых наборов реактивов, валидированных для различных биологических сред (K014-H, Arbor Assays). Содержание незнакомых самцов в однополых группах на протяжении 21 дня вызывало достоверное повышение содержания КРТ в шерсти (n=14, p=0.02, критерий Вилкоксона для связанных выборок), что хорошо согласуется с данными для плазмы крови (Williamson et al., 2017). При многократных предъявлениях мочи домашней кошки (как источника хемосигналов хищника) на протяжении 21 дня наблюдалась

150

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/