2 курс / Нормальная физиология / XXIV_съезд_физиологического_общества_им_И_П_Павлова

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

лифлозина имело концентрационно-зависимый характер в диапазоне от 0,2 до 5 мкМ с полумаксимальными эффективными концентрациями 0,56 мкМ и 0,76 мкМ для IKr и IKs соответственно. Анализ вольт-амперных характеристик и параметров потенциал-зависимости активации и инактивации INa, ICaL и ICaT не выявил эффектов эмпаглифлозина. Длительность ПД при реполяризации на уровне 50 и 90 % достоверно уменьшалась в клетках желудочкового миокарда после предварительной инкубации с эмпаглифлозином (5мкМ).

Таким образом, было показано усиление реполяризующих токов и соответственное укорочение длительности ПД под действием эмпаглифлозина, что может лежать в основе кардиопротекторного действия препарата.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 22 15 00186.

МЕХАНИЗМЫ БЛОКАДЫ АТРИОВЕНТРИКУЛЯРНОГО ПРОВЕДЕНИЯ ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ВЫСОКОЙ ТЕМПЕРАТУРЫ И ГИПЕРКАЛЕМИИ В СЕРДЦЕ РАДУЖНОЙ ФОРЕЛИ (ONCORHYNCHUS MYKISS)

Кузьмин В. С.1,2,*, Абрамочкин Д. В.1,2, Ворнанен М.3

1Биологический факультет МГУ имени М. В. Ломоносова, г. Москва 2Институт экспериментальной кардиологии НМИЦ Кардиологии им. ак. Е. И. Чазова, г. Москва

3Университет восточной Финляндии, Отделение экологии и биологических наук, г. Йоэнсуу, Финляндия

*e-mail: ku290381@mail.ru

Введение. При повышении температуры окружающей среды и тела у рыб развиваются аритмии, включая выраженную брадикардию, что приводит к критическому снижению сердечного выброса и гемодинамической недостаточности. Причиной брадикардии и нарушений ритма сокращения желудочка может является дисфункция атри- о-вентрикулярного (АВ) соединения (АВ-канала) сердца рыб. В данной работе исследованы механизмы нарушения предсердно-желудочкового проведения, индуцированного острым повышением температуры у рыб.

Методы.Вработеиспользовалитканевыеизолированныепрепараты,включающиетканьпредсердия,желудочка, а также АВ-соединения (АВ-кольца) сердца радужной форели (oncorhynchus mykiss), акклиматизованной к 15ºС. Использовали метод картирования электрической активности, основанный на регистрации потенциалзависимой флюоресценции зонда di 4-ANEPPS. На основе оптических сигналов реконструировали изохронные карты активации, рассчитывали скорость проведения волны возбуждения (СП) в ходе антероградной и ретроградной активации АВ-соединения (40 уд/мин) при острой гипо- (5ºС, 1ºС/3 мин) или гипертермии (27ºС, 1ºС/3 мин) в присутствии 4 и 8 мМ K+ во внеклеточном р-ре ([K+]o).

Результаты. СП зависит от температуры и значимо ниже в АВ-кольце, чем в рабочем миокарде, что является основой физиологической АВ-задержки (0,32 ± 0,09, 1,32 ± 0,20 и 1,53 ± 0,24 см/с при 5, 22 и 27 °C, n=6). Острое повышение температуры (от 15 до 27ºС), как и острое охлаждение (от 15 до 5ºС) не приводит к нарушению паттерна, подавлению антероградного либо ретроградного проведения возбуждения в АВ-кольце при [K+]o=4 мМ. Гиперкалемия ([K+]o=8 мМ) приводит к блоку проведения антероградной волны возбуждения на границе АВ-кольца и желудочкового миокарда при остром повышении температуры (27ºС, n=5). При ретроградном режиме активации гиперкалемия на фоне гипертермии приводила к блоку проведения возбуждения на границе АВ-кольца и предсердного миокарда (5ºС, n=5).

Заключение. Миокард АВ-соединения рыб устойчив к быстрым колебаниям температуры и гиперкалемии, которая обычно сопровождает гипертермию. Миокард камер сердца не может быть охвачен возбуждением при сочетании гипертермии и гиперкалемии в результате блока «выхода» возбуждения из АВ-соединения. Т.о. брадикардия, индуцированная у рыб гипертермией, может являться результатом неспособности миокардиальной ткани АВ-сое- динения деполяризовать проксимальную часть желудочкового миокарда.

Работа поддержана грантом Российского научного фонда № 22 14 00075.

ИССЛЕДОВАНИЕ СЕРДЦА ЛИЧИНОК ДАНИО РЕРИО МЕТОДОМ ВЫСОКОЧАСТОТНОЙ СОНОГРАФИИ

Мачихин А. С.1, Зыкова Л. А., Бурлаков А. Б.2, Титов С. А.1*, Богаченков А. Н.3

1Научно-технологический центр уникального приборостроения РАН, г. Москва 2Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова, г. Москва 3Институт биохимической физики РАН им. Н. М. Эмануэля, г. Москва

*e-mail: titov.sa@ntcup.ru

Внастоящеевремянизшиепозвоночныестановятсявсеболеепопулярнымимодельнымиорганизмами,широко используемыми для исследований в области медицины, биологии развития, генетики, и экологии. Весьма перспективнымявляетсяиспользованиемодельныхобъектовнараннихэтапахихразвития,вследствиеихвысокойчувствительности к нарушениям развития и появлению аномалий вследствие внешних воздействий различного характера. Методы оптической микроскопии являются наиболее востребованными при исследовании эмбрионов рыб, что обуславливается их прозрачностью в видимом диапазоне, достаточной для визуализации их внутренней структуры,

131

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

изучения параметров сердечно сосудистой и мышечных систем. Вместе с тем, методы ультразвуковой визуализации, являясь в высшей мере неинвазивными, позволяют получить высокий контраст изображений органов без их окрашивания, проникать в области объекта, непрозрачные для оптического наблюдения и регистрировать быстрые движения структурных элементов. Известны успешные применения сонографических установок для исследования сердечно сосудистой системы и измерения параметров кровотока взрослых особей рыб. Однако их пространственного разрешения оказывается недостаточным для исследования организмов на ранних стадиях развития. В данной работе представлены результаты исследования работы сердца личинки Danio rerio с помощью высокочастотного сонографического сканера, созданного на базе импульсного сканирующего акустического микроскопа. Принцип работы прибора основан на записи эхо-сигналов, отраженных от структурных неоднородностей организма. Регистрация таких сигналов на протяжении нескольких периодов сердцебиения позволяет формировать сканы, демонстрирующие движения стенок сердечных камер и элементов крови. Повторение записи таких сканов в различных точках области сердца дает пространственное представление о происходящих процессах. Путем цифровой обработки полученных пространственно-временных сигналов были получены анимационные двухмерные изображения работающего сердца, построены карты скоростей движения стенок сердца и элементов крови в зависимости от фазы сердечного ритма. Таким образом, на примере личинки Danio rerio показано, что метод высокочастотной сонографии позволяет проводить визуализацию области сердца низших позвоночных на ранних стадиях развития. Пространственно-временное разрешение, достигнутое в эксперименте, является достаточным для количественной характеризации параметров деятельности их сердечно сосудистой системы.

ВЛИЯНИЕ ФЛЮОРЕНА НА ЭЛЕКТРИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ СЕРДЦА РЫБ

Филатова Т. С.*, Абрамочкин Д. В.

Биологический факультет МГУ им. М. В. Ломоносова, г. Москва

*e-mail: filatova@mail.bio.msu.ru

Интенсивное развитие севера увеличивает риски для экосистем арктических морей, включая важные промысловые виды рыб. Особую угрозу создают разливы нефтепродуктов. Показано, что в первую очередь нефть вызывает

ворганизме рыб кардиотоксические эффекты. Наиболее токсичными компонентами оказались полициклические ароматические углеводороды (ПАУ) – ​и в наибольшей степени фенантрен. Однако, нефть включает множество ПАУ различной структуры. Данная работа ставила своей целью выявление ПАУ со сходным токсическим потенциалом и оценку их электрофизиологических эффектов в желудочковом миокарде наваги (Eleginus navaga).

Работа была выполнена на Беломорской биологической станции имени Н. А. Перцова. Животные были пойманывокрестностяхстанции(66°19›50»с. ш.,33°40›06»в. д.).Токиипотенциалыдействиярегистрироваливизолированных кардиомиоцитах методом whole-cell пэтч-кламп. Животных декапитировали, сердце вырезали и ретроградно перфузировали через аорту бескальциевым раствором, содержащим протеолитические ферменты (коллагеназа типа IА, трипсин типа IX). Спустя 15 20 мин. желудочек отрезали, разрезали на мелкие фрагменты и пипетировали длявысвобожденияотдельныхкардиомиоцитов.Сократительнуюактивностьжелудочкарегистрироваливизолированном сердце, перфузируемом ретроградно, с помощью вставленного внутрь резинового баллона, подсоединенного к механоэлектрическому преобразователю.

Сравнение эффектов 1 мкМ ПАУ на быстрый калиевый ток IKr показало, что в наибольшей степени IKr подавляют фенантрен (72,63±5,93 %) и флюорен (68,11±1,86 %), тогда как прочие протестированные вещества (нафталин, пирен, 3-метилфенантрен и 3,6-диметилфенантрен) подавляют ток менее, чем на 55 %. Концентрация полуингибирования (IC50) тока IKr флюореном составила 0,54 мкМ. В результате увеличивалась длительность регистрируемых

вкардиомиоцитах потенциалов действия (ПД): на 33,7 % в присутствии 3 мкМ флюорена. Флюорен подавлял бы-

стрый натриевый ток INa: 10 мкМ снижали INa на 20,16±2,77 %. В результате скорость нарастания переднего фронта ПД снижалась почти в 2 раза. Кроме того, флюорен снижал амплитуду кальциевого тока L-типа ICaL (10 мкМ снижали ток на 27,87±5,23 %, IC50=25,4 мкМ) и ускорял его инактивацию. В результате снижалось максимальное развиваемое давление, а также скорость расслабления желудочка.

Такимобразом,флюоренобладаетвысокимкардиотоксическимипроаритмическимпотенциалом,иегоэффекты аналогичны фенантрену. Это необходимо учитывать при оценке потенциальных эффектов разлива нефти.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 22 14 00075.

132

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

Симпозиум Проблемы боли: механизмы регуляции ноцицептивной системы

ОЦЕНКА ФОРМИРОВАНИЯ МЕХАНИЧЕСКОЙ ГИПЕРАЛГЕЗИИ В МОДЕЛЯХ НЕЙРОПАТИЧЕСКОЙ БОЛИ У КРЫС

Аглиуллов И. Ш.1,*, Балтин М. Э.1, Федянин А. О.1, Балтина Т. В.1, Горовая А. Ю.2

1Институт фундаментальной медицины и биологии, Казанский Федеральный Университет, г. Казань 2Сколковский институт науки и технологий, г. Москва

*e-mail: katoncensorius@gmail.com

Диагностику нейропатической боли (НБ) осложняет отсутствие единых диагностических критериев, единой этиологии, что негативно влияет на анализ эпидемиологии данного осложнения, ухудшает определение ее естественного течения, факторов риска и оценку стоимости ее лечения. НБ приводит к сопутствующим заболеваниям (депрессии, тревоги, нарушений сна), что влияет на качество жизни.

Исходяизэтого,былапоставленацель:оценкааллодиниистопыкрысвмоделиконтузионнойтравмыспинного мозга (ТСМ) и в модели компрессионного повреждения седалищного нерва на адекватность воспроизведения болевого синдрома при нейропатической боли.

Позвоночно-спинномозговая травма наносилась на уровне T8-T9 по модифицированной методикеAllen (1911). Модель компрессионноого повреждения седалищного нерва осуществлялось по методикеAngelis (1994). Для оценки аллодинии проводили тест чувствительности с помощью волосков Фрея.

Результаты показали, что при ТСМ, по сравнению с контрольной группой, порог на механическое раздражение через 2 недели был значительно выше и составил 400±105 % (p<0,05) у крыс без аллодинии. Через 6 недель после ТСМ порог на механическое раздражение снижался (287±116 %), но был выше, чем до операции. У животных с развивающейся тактильной аллодинией порог достоверно снизился к 6 недели с составил 47±10 %. Через 2 недели после ТСМ у 9 крыс пороги были выше, чем в контроле, у 7 животных чувствительность лап отсутствовала, через 6 недель восстанавливалась, у 8 крыс порог был выше, чем до операции, а у 2 крыс – ​порог снижался и их рассматривали как животных с развивающейся тактильной аллодинией (НБ). У крыс с травмой седалищного нерва (денервация) через 2 недели у 4 крыс пороги были выше, чем в контроле, у 6 – ​ниже и их рассматривали как животных с развивающейся тактильной аллодинией (НБ). Через 6 недель чувствительность восстанавливалась у 4 крыс без боли, но порог был выше, чем до операции, а у 6 крыс с НБ порог снижался. У крыс без боли порог на механическое раздражение через 2 недели был значительно выше и составил 395±98 % (p<0,05). Через 6 недель после операции порог на механическое раздражение снижался (286±108 %), но был выше, чем до операции. У животных с аллодинией порог достоверно снизился к 6 неделе и составил 15±5 %.

В группе денервации наблюдалось большее количество проявления НБ, чем при ТСМ. Наши данные демонстрируют денервацию как эффективную модель нейропатической боли.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 21 75 30024.

ПЕПТИДНЫЕ МОДУЛЯТОРЫ TRP КАНАЛОВ С АНАЛЬГЕТИЧЕСКИМИ И НЕЙРОПРОТЕКТОРНЫМИ СВОЙСТВАМИ

Андреев Я. А.1,2*

1Институт биоорганической химии им. академиков М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН, г. Москва 2Первый МГМУ им. И. М. Сеченова Минздрава России, г. Москва

*e-mail: aya@ibch.ru

Боль и воспаление играют важную роль в инициации защитных и регенеративных процессов. Каналы TRPV1

иTRPA1 играют важную роль в процессах восприятия ноцицептивных сигналов и развитии нейрогенного воспаления практически во всех органах человека. Нами были найдены пептиды морских анемон, модулирующие активность каналов TRPV1 и TRPA1. Полипептид APHC3, выделенный из морской анемоны Heteractis crispa, модулирует активность канала TRPV1 в зависимости от прилагаемого стимула. Из морской анемоны Metridium senile был выделен пептид Ms9a 1, который усиливает активацию TRPA1 канала при действии прямых агонистов в тестах in vitro. Оба этих пептида обладают анальгетическими и противовоспалительными свойствами в синтетических моделях боли (горячая пластина, воспалительная гиперчувствительность, ответ на селективный агонист). ТакжеAPHC3

иMs9a 1 эффективно уменьшает симптомы экспериментального артрита у крыс. При интраназальном введении АРНС3 способен изменять ответ микроглии на провоспалительный стресс и цитокиновый профиль гиппокампа. Поскольку каналы TRPV1 и TRPA1 играют важную роль в инициации и развитии нейрогенного воспаления, эти пептиды представляет огромный интерес для изучения их влияния на процессы нейродегенерации под влиянием различных стрессовых факторов. Был проведен анализ ранее обнаруженных пептидных модуляторов TRPV1

иTRPA1каналоввмоделииболезниПаркинсонаinvitro.Висследованияхиспользоваликлеточнуюмодельболезни

133

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

Паркинсона на клеточных линиях с повышенной экспрессией альфа-синуклеина и/или его склонного к амилоидной агрегации мутанта А53Т на основе клеток нейробластомы SH-SY5Y. Дифференцированные в дофаминергические нейроны клетки нейробластомы исследовали на выживаемость, экспрессию каналов TRPV1, TRPA1 иASIC1a, а также про-апототических и анти-апоптотических генов. Добавление в среду культивированияAPHC3 или Ms9a 1 увеличивало выживаемость клеток, изменяло соотношение про- и анти-апоптотических факторов, экспрессию TRP каналов. Таким образом, модуляция активности TRPV1 и TRPA1 каналов может уменьшать процессы нейродегенерации вызываемой, в том числе, и агрегацией мутантного альфа-синуклеина (А53Т). Следовательно, модуляторы TRPV1 иTRPA1 каналов можно рассматривать не только как анальгетические и противовоспалительные агенты, но для разработки новых лекарственных средств для уменьшения нейродегенерации при болезни Паркинсона.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 21 15 00322.

МЕХАНИЗМЫ ПРОТИВОБОЛЕВОГО ДЕЙСТВИЯ КОМБИНИРОВАННОГО ПРЕПАРАТА НА БАЗЕ ЯДА ГЮРЗЫ И ЭФИРНОГО МАСЛА ДУШИЦЫ

Восканян А. В.*, Парсегян Л. М., Могровян А. В., Дарбинян А. А.

Институт физиологии им. акад. Л. А. Орбели НАН РА, г. Ереван, Армения

* e-mail: arminvosking@gmail.com

Введение. Известно большое количество противоболевых препаратов растительного и животного происхождения (морфин, кокаин, яды змей, моллюсков и т. п.). Антиноцицептивные механизмы организма с участием опиоидной, каннабиноидной, орексиновой и других систем, контролируют сигнальные потоки от поврежденных тканей. Вкачествеобезболивающегоагентамогутбытьиспользованыбета-кариофиллен(BCP),активаторканнабиноидных СВ2 рецепторов и эфирные масла с его высоким содержанием. С другой стороны, известно противоболевое действие малых доз яда гюрзы и мази на его основе.

Цель работы. Изучались механизмы действия комбинированного препарата, приготовленного на базе яда гюрзы (M. L. obtusa) и эфирного масла душицы (O. vulgaris). Исследовалось участие двух разных механизмов противоболевого действия – изменение​ проводимости болевых афферентов, и активация каннабиноидной системы. Целью комбинации было усиление и пролонгация анальгетического действия препарата.

Материал и методы. Исследовалось болевое поведение белых мышей как при внутрибрюшинном введении комбинированного препарата, так и накожном нанесении мази в формалиновом и каррагинановом тестах. Использовались стандарты противоболевых препаратов – ​морфин, анальгин, диклофенак и блокаторов – ​опиодных (налоксон), каннабинноидных (BСР) и пьезо (GsMTx 4) рецепторов.

Результаты. Комбинированный препарат на основе яда и эфирного масла показал высокий анальгетический потенциал.Вчастности,мазьснижаетвоспалительнуюбольболеечемна50 %вовторойфазеформалиновоготеста. При блокировании опиатных рецепторов налоксоном, эффективное действие мази снижается на более чем 60 %. При блокировании каннабиноидных рецепторов с помощью SR144528, эффективное действие мази ослабляется на

73 %.

Обсуждение. Гидрофильно-липофильный состав препарата проявляет противоболевой потенциал как при внутрибрюшинном введении, так и при накожном нанесении в виде мази. Анальгезия обеспечивалась при значимом участии каннабиноидной и опиоидной систем. Механизм же обезболивающего эффекта яда гюрзы с Asp49 PLA2 изучен недостаточно. Возможно, что это действие основано на десенситизирующем влиянии фосфолипазы А2 яда на болевые афферентные волокна путем изменения функционирования трансмембранных Na+- и К+- потенциал-за- висимых каналов.

Финансовая поддержка: грант № 21APP 1F003 Комитета по науке МОНКС РА.

ИЗМЕНЕНИЕ ПРОДУКЦИИ МОНООКСИДА АЗОТА И СОДЕРЖАНИЯ МЕДИ В ГИППОКАМПЕ КРЫС ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ КРАТКОВРЕМЕННОЙ ИШЕМИИ

ГОЛОВНОГО МОЗГА С ПОСЛЕДУЮЩЕЙ РЕПЕРФУЗИЕЙ МОЗГА

Гайнутдинов Х. Л.1,2,*, Андрианов В. В.1,2, Яфарова Г. Г.2, Базан Л. В.1, Богодвид Т. Х.2,3, Дерябина И. Б.2, Муранова Л. Н.2, Силантьева Д. И.2, Иванова Е. С.3, Тарасова Е. В.3, Филипович Т. А.4, Федорова Е. В.4, Нагибов А. В.4, Кульчицкий В. А.4

1КФТИ им. Е. К. Завойского ФИЦ КазНЦ РАН, г. Казань 2Казанский (Приволжский) федеральный университет, г. Казань 3Поволжский университет физической культуры, спорта и туризма, г. Казань 4Центр мозга, Институт физиологии НАН Беларуси, г. Минск, Беларусь

*e-mail: kh_gainutdinov@mail.ru

Поскольку монооксид азота (NO) является химически высокореактивным свободным радикалом, способным выступать как в роли окислителя, так и в роли восстановителя, то возникает предположение об его многообразных эффектах в биологических тканях. Таким образом, уточнение закономерностей изменений содержания NO в мозге

134

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

при ишемических процессах в головном мозге является актуальным.

Моделирование ишемии и ишемии-реперфузии проводили в Институте физиологии НАН Беларуси, г. Минск. Экспериментальные группы: 10-минутное нарушение кровотока путем перевязки обеих сонных артерий и крысы, у которых дополнительно через две минуты из левой общей сонной артерии взяли 3 мл крови. Анализ ЭПР спектров проводились с применением методики спиновых ловушек. Измерения спектров комплексов (ДЭТК)2-Fe2+-NO и Cu(ДЭТК)2 проводили на спектрометре фирмы Брукер Х диапазона (9.50 GHz) EMX/plus. Масса образцов составляла около 100 мг. Амплитуду спектров ЭПР всегда нормировали на вес образца.

Установлено достоверное снижение продукции NO в гиппокампе в среднем на 28 % через 1 сутки после моделирования ишемического инсульта, вызванного перевязкой сонных артерий, и на 56 % – при​ перевязке сонных артерийспоследующимвзятиемизобщейсоннойартерии3млкрови.Содержаниемедивгиппокампечерез1сутки после моделирования ишемии перевязкой сонных артерий достоверно снизилось в среднем на 20 %.

Заключение. Гипоксия головного мозга, вызываемая перевязкой сонных артерий, сопровождается снижением продукции NO в гиппокампе, а также признаками ослабления антиоксидантной системы, что дополнительно ухудшает функциональное состояние системы гомеостазиса.

Работа поддержана Белорусским РФФИ (грант М23РНФ 067) и грантом Российского научного фонда № 23 45 10004.

ВОЗМОЖНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ЛИГАНД-РЕЦЕПТОРНОГО СВЯЗЫВАНИЯ СИНТЕТИЧЕСКИХ КОРОТКИХ АРГИНИНСОДЕРЖАЩИХ ПЕПТИДОВ С МЕДЛЕННЫМИ НАТРИЕВЫМИ КАНАЛАМИ

Калинина А. Д.*, Бойченко Н. А., Рогачевский И. В., Плахова В. Б.

Институт физиологии им. И. П. Павлова РАН, г. Санкт-Петербург

*e-mail: kalininaad@infran.ru

МедленныенатриевыеканалыNaV1.8 – ключевое​ физиологическоезвеновкодированииипередаченоцицептивнои информации. Субстанции, которые способны специфически модулировать активационное воротное устройство каналов NaV1.8, могут быть рассмотрены в качестве действующего вещества новых безопасных анальгетических лекарственных препаратов.

Нами были определены и синтезированы короткие аргининсодержащие пептиды, потенциально оказывающие модулирующии эффект на каналы NaV1.8. В настоящей работе был исследован механизм лиганд-рецептор- ного связывания ряда вновь синтезированных коротких аргининсодержащих пептидов Ac-RAR-NH2, Ac-RER-NH2, Ac-RAAR-NH2, Ac-REAR-NH2, Ac-RERR-NH2, Ac-REAAR-NH2, Ac-PRERRA-NH2 и Ac-PRARRA-NH2 (R – ​аргинин, A – ​аланин, E – ​глутаминовая кислота) с медленными натриевыми каналами NaV1.8.

Эксперименты проводились методом локальнои фиксации потенциала «patch-clamp» в конфигурации «регистрация активности целой клетки». Объектом исследования являлись изолированные сенсорные неироны, полученные методом краткосрочного культивирования из дорзальных ганглиев L5-S1 новорожденных крысят линии Wistar. В ходе электрофизиологических экспериментов было показано, что воздействие некоторых коротких аргининсодержащих пептидов на мембрану сенсорных нейронов приводит к снижению эффективного заряда активационного воротного устройства каналов NaV1.8. Конформационныи анализ изученных пептидов показал, что лиганд-рецеп- торное связывание пептида с молекулой канала возможен лишь в тех случаях, когда расстояние между положительно заряженными гуанидиновыми группами боковых цепеи аргинильных остатков находится в определенном диапазоне, составляющем примерно 9 12 Å. Дальнеишие исследования обнаруженного механизма представляют интерес для разработки эффективных и безопасных анальгетических препаратов, не являющихся лигандами опиоидных рецепторов.

Финансовая поддержка: Минобнауки РФ (Соглашение № 075 15 2022 303 от 21.04.2022 г.) в форме гранта на реализацию Программы НЦМУ Павловский Центр «Интегративная физиология – ​медицине, высокотехнологичному здравоохранению и технологиям стрессоустойчивости».

НЕЙРОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ЦЕНТРАЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ ПРОИЗВОДНОГО БЕНЗИМИДАЗОЛА РУ 1205 С КАППА-ОПИОИДНОЙ АГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Калитин К. Ю.1, 2, *, Елисеева Н. В.1, Спасов А. А.1, 2, Муха О. Ю.1

1ФГБОУ ВО Волгоградский Государственный Медицинский Университет, г. Волгоград 2ГБУ Волгоградский медицинский научный центр, г. Волгоград.

*e-mail: kkonst8@ya.ru

Применение каппа-опиоидных анальгетиков в клинической практике ограничено рядом причин, включая развитие побочных эффектов (дисфории, психотомиметического действия, седации). Соединение РУ 1205 с ранее установленным каппа-опиоидным механизмом действия лишено данных недостатков. Подобные свойства присущи

135

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

соединениям со смещенной агонистической активностью, которые преимущественно активируют G-белок-опосре- дованный пострецепторный сигналинг, при этом не задействуя бета-аррестиновый путь, обуславливающий побочные эффекты, свойственные для многих каппа-опиоидных агонистов. Одним из важных центров обработки эмоциональной информации является префронтальная кора. В рамках данного исследования были изучены изменения суммарной биоэлектрической активности в данной области для выявления различий в действии каппа-опиоидных агонистов – ​буторфанола и соединения РУ 1205.

Крысы были разделены на 3 группы по 8 животных в каждой: 1 – группа​ контроля, животные внутрибрюшинно получали физиологический раствор 1 мл/кг; 2 – группа​ получала РУ 1205 (НИИ физической и органической химии Южного федерального университета, Россия) 5 мг/кг в/б; 3 – группа​ получала препарат сравнения буторфанол (ФГУП “Московский эндокринный завод”) в дозе 2,5 мг/кг в/б. Для изучения нейрофизиологических особенностей действия соединения РУ 1205 у крыс выполнялась регистрация LFP-активности зоны медиальной префронтальной коры (мПФК) (AP= +3.4 мм; ML= ±0.5 мм; DV = 5 мм) с помощью глубокого биполярного электрода из нержавеющей стали. Удаление артефактов проводилось с применением метода независимых компонент, для оценки сигналов выполнялся спектральный анализ (Matlab v. R2023a, EEGLAB v. 2023.0).

В результате анализа спектральной плотности мощности сигналов обнаружено достоверное (p<0,05) повышение мощности LFP крыс в тета-диапазоне на 14,6 % после введения соединения РУ 1205. В группе животных, которым вводился буторфанол, наблюдалось повышение мощности сигналов в дельта- и тетадиапазонах на 11,0 % и 18,3 % соответственно (p<0,05), наряду с этим мощность LFPв альфа- и бета-диапазонах имела тенденцию к снижению без выявления статистически значимых различий.

Префронтальнаякораиграетважнуюрольввосприятииэмоций.Какполагают,активацияпрефронтальнойкоры может лежать в основе осознания негативных эмоций и аверсивных реакций. Проведенный эксперимент показал, что после введения буторфанола наблюдаются более выраженные изменения биоэлектрической активности в области префронтальной коры, что обусловливать развитие побочных эффектов, неприсущих соединению РУ 1205.).

НОВЫЕ МОЛЕКУЛЯРНЫЕ КАСКАДНЫЕ ПРОЦЕССЫ В НОЦИЦЕПТИВНОМ НЕЙРОНЕ: КАНАЛЫ NAV1.8 КАК МИШЕНЬ БЕЗОПАСНЫХ И ЭФФЕКТИВНЫХ АНАЛЬГЕТИКОВ

Крылов Б. В.*

Институт физиологии им. И. П. Павлова РАН, г. Санкт-Петербург

*e-mail: krylovbv@yandex.ru

Натриевые каналы NaV1.8 ноцицепторов участвуют преобразовании градуального по своей природе рецепторного тока в код нервных импульсов. Только высокочастотная составляющая этого импульсного ответа полимодальных рецепторов несет информацию о болевом повреждающем воздействии. К сожалению, в арсенале практической медицины отсутствуют безопасные анальгетики, которые «выключали» бы только эту компоненту. Наш подход основан на использовании комплекса экспериментальных и теоретических методов исследования ноцицептивных нейронов, что позволило обнаружить молекулярные механизмы модуляции активационного воротного устройства каналов NaV1.8. Мы показали, что указанные каналы связаны с двумя «соседними» молекулами: с опиоидоподобным рецептором и с комплексом Na, K-АТФаза/Src, выполняющим здесь функции как трансдуктора сигнала, так и рецептора эндогенного уабаина [Krylov et al., 2017; Rogachevskii, et al, 2022]. В результате были обнаружены новые анальгетические субстанции, способные модулировать каналы NaV1.8. Это коменовая кислота, специфически связывающаяся с опиоидоподобным рецептором, которая стала основой неопиоидного анальгетика «Аноцептина®», успешно прошедшего первую фазу клинических исследований. Вторую мишень, комплекс K-АТФаза/Src, эффективно активирует эндогенный (примененный в наномолярных концентрациях) уабаин. Третью мишень, активационное воротное устройство каналов NaV1.8, специфически модулируют аргинин- и лизинсодержащие пептиды.

Полученные результаты стали основой разработки новых эффективных и безопасных анальгетиков, способных по ряду показаний заменить опиаты при лечении хронической боли.

Финансовая поддержка: Минобнауки РФ (Соглашение № 075 15 2022 303 от 21.04.2022 г.) в форме гранта на реализацию Программы НЦМУ «Павловский Центр Интегративная физиология – ​медицине, высокотехнологичному здравоохранению и технологиям стрессоустойчивости».

КОНТРОЛЬ НОЦИЦЕПТИВНЫХ РЕАКЦИЙ ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ СОЧЕТАННЫХ ПОВРЕЖДЕНИЙ ГОЛОВНОГО И СПИННОГО МОЗГА

Кульчицкий В. А.*, Филипович Т. В.

Институт физиологии НАН Беларуси, г. Минск, Республика Беларусь

*e-mail: vladi@fizio.bas-net.by

Проблема терапии сочетанных травм головного и спинного мозга не решена до сих пор. Такие повреждения мозга являются одной из основных причин смертности населения (Seblani et al., 2023; Boccia et al., 2022). После травм мозга у пациентов нарушается контроль ноцицептивных реакций. Актуальность проблемы инициировала

136

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

исследования на 20 наркотизированных (кетамин-ксилазин, 75 и 5 мг\кг в/б) лабораторных крысах самцах массой 350 400 грамм. Осуществляли трепанацию черепа с помощью бор-машины и разрушение мозга во фронтальной области слева (объем 2,5 мм3) и на уровне первого поясничного позвонка после введения с помощью шприца Гамильтона в спинной мозг крыс 5 мкл крови. Под слизистую оболочку полости носа у 10 крыс однократно вводили в 50 мкл 50 тысяч мезенхимальных стволовых клеток (МСК) и в 10 мкл 10 тысяч МСК под твердую мозговую оболочку на уровне первого поясничного позвонка (Kulchitsky et al., Biomed, 2018; Kulchitsky et al., J. Neurol. Stroke., 2018).

Сопоставляли ноцицептивные реакции у крыс (hot plate, tail flick reflex) до и после моделирования сочетанных повреждений головного и спинного мозга у животных двух групп. В группе крыс с введением МСК после моделирования сочетанной травмы мозга отмечена тенденция к укорочению латентных периодов ноцицептивных реакций, а у крыс без введения МСК латентные периоды ноцицептивных реакций были увеличены.

Результаты свидетельствуют о целесообразности акцентирования внимания клиницистов на применении кле-

точных технологий (Kulchitsky et al., Biomed, 2018; Kulchitsky et al., J. Neurol. Stroke., 2018). в терапии пациентов с травмами головного и спинного мозга с целью улучшения статистических данных о высокой смертности пациентов при сочетанных травмах головного и спинного мозга.

РОЛЬ МЕЖМОЛЕКУЛЯРНЫХ ИОН-ИОННЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ И ВОДОРОДНЫХ СВЯЗЕЙ В МЕХАНИЗМЕ АКТИВАЦИИ ЭНДОГЕННЫМ УАБАИНОМ СИГНАЛЬНОЙ ФУНКЦИИ NA, K-АТФАЗЫ В МЕМБРАНЕ НОЦИЦЕПТИВНОГО НЕЙРОНА

Рогачевский И. В.*, Плахова В. Б.

Институт физиологии им. И. П. Павлова РАН, г. Санкт-Петербург

*e-mail: roggie_spb_ru@yahoo.com

В мембране ноцицептивного нейрона Na, K-АТФаза (NKA) выполняет, помимо своей классической функции ионного насоса, также и сигнальную функцию. Специфическая активация сигнальной функции NKA осуществляется кальциевым хелатным комплексом молекулы уабаина (эндогенный уабаин, ЭУ) в наномолярном диапазоне концентраций и вызывает антиноцицептивный эффект за счет модуляции активационного воротного устройства натриевых каналов NaV1.8, кодирующих болевые импульсы в периферической нервной системе (Plakhova et al., 2020).Длявыяснениямолекулярногомеханизмалиганд-рецепторногосвязыванияЭУбылпроведендокингмолекул свободного уабаина, ЭУ и их агликона уабагенина в сайт связывания кардиотонических стероидов на α-субъеди- нице NKA. Сопоставление результатов докинга, проведенного в программе AutoDock Vina, с экспериментальными данными, полученными методами пэтч-кламп и органотипической культуры ткани, позволило выявить вклады отдельных структурных фрагментов молекулы ЭУ (стероидный скелет, рамнозильный остаток и хелатированный катион Ca2+) в лиганд-рецепторные межмолекулярные взаимодействия и определить набор аминокислотных остатков NKA, участвующих в связывании ЭУ. Основной вклад в энергию образования лиганд-рецепторного комплекса вносит связывание стероидного скелета молекулы ЭУ за счет 5 7 водородных связей (в зависимости от используемой модели NKA) и большого числа гидрофобных контактов. Показано, что активация сигнальной функции NKA молекулойЭУнеосуществляетсяприудаленииизданноймолекулырамнозильногоостатка,образующего5межмолекулярных водородных связей с NKA, равно как и при удалении хелатированного катиона Ca2+, заряд которого компенсируется образованием двух ион-ионных лиганд-рецепторных связей с участием отрицательно заряженных карбоксилат-анионов боковых цепей остатков Glu116 и Glu117 молекулы NKA. Вклад обоих указанных структурных фрагментов молекулы ЭУ в энергию связывания ЭУ с молекулой NKA необходим для активации сигнальной функции последней.

Финансовая поддержка: Минобрнауки РФ (Соглашение № 075 15 2022 303 от 21.04.2022) в форме гранта на реализацию Программы НЦМУ «Павловский Центр Интегративная физиология – ​медицине, высокотехнологичному здравоохранению и технологиям стрессоустойчивости».

ВОЗБУДИМОСТЬ НЕЙРОНОВ ТРОЙНИЧНОГО ГАНГЛИЯ КРЫСЫ В МОДЕЛИ ПРЕНАТАЛЬНОЙ ГИПЕРГОМОЦИСТЕИНЕМИИ

Ситдикова Г. Ф.*, Ермакова Е. В., Королева К. С., Кабирова А. А.

Казанский Федеральный Университет, г. Казань

*e-mail: sitdikovaguzel@gmail.com

Мигрень – ​неврологическое заболевание, которым страдают 15 20 % населения. Приступы мигрени характеризуются односторонней головной болью, которой могут предшествовать такие симптомы как чувствительность к свету, звукам, нарушение зрения и общая слабость. Эти сенсорные нарушения называются аурой, электрофизиологическим коррелятом которой является распространяющаяся корковая депрессия (РКД). Известно, что повышение уровня гомоцистеина у человека является фактором риска развития мигрени. Ранее нами было показано, что гипергомоцистеинемия (гГЦ) повышает чувствительность крыс к развитию РКД, также усиливает фотофобию имеханическуюаллодиниюукрысвмоделихроническоймигрени,вызваннойнитроглицерином.Цельюнастоящей

137

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

работы был анализ возбудимости периферического звена системы тройничного нерва, ответственного за генерацию

ипроведение ноцицептивной информации. В работе анализировали частоту спайкования аффрентов тройничного нерва в препарате получерепа крысы, возбудимость нейронов тройничного ганглия, состояние тучных клеток у крыс с пренатальной гГЦ. Пренатальную гГЦ у крыс индуцировали диетой с повышенным уровнем метионина до и во время беременности у самок. В результате наших исследований было показано, что у крыс с пренатальной гГЦ: а) меньшие концентрации KCl вызывали усиление частоты спайкования тройничного нерва; б) уменьшалась сила тока, вызывающая генерацию потенциалов действия, и отсутствовала аккомодации при генерации повторных спайков в нейронах тройничного ганглия; в) усиливалась дегрануляции тучных клеток в менингеальных оболочках. В контроле кратковременная аппликация гомоцистеина приводила к усилению частоты спайкования тройничного нерва и Са2+-ответы в нейронах тройничного ганглия, что связано с активацией НМДА рецепторов, без изменения состояниятучныхклеток.Однако,вмоделипренатальнойгГЦмыненаблюдалиусилениеответатройничногонерва

ипараметров кальциевых сигналов в ответ на аппликацию НМДА.

Таким образом, в условиях пренатальной гГЦ помимо усиления чувствительности к РКД, наблюдали повышение возбудимости периферического звена тройничного нерва и усиление дегрануляции тучных клеток. Полученные данные являются экспериментальным доказательством клинических данных о связи высокого уровня гомоцистеина и риска развития мигрени.

Финансовая поддержка: грант Российского научного фонда № 20 15 00100.

ИНГИБИТОРЫ НАТРИЙ-КАЛЬЦИЕВОГО ОБМЕННИКА КАК ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ ПРОТИВОБОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ПАЦИЕНТОВ С ДИАБЕТИЧЕСКОЙ НЕВРОПАТИЕЙ

Шестакова Н. Н.1*, Белинская Д. А.1, Сухов И. Б.1, Спасова А. П.2, Беляков М. В.3, Gateva P.4

1Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова РАН, г. Санкт-Петербург 2Медицинский институт Петрозаводского государственного университета, г. Петрозаводск 3ФГУП «НИИ ГПЭЧ», Ленинградская обл., гп Кузьмоловский

4Medical University, Sofia, Bulgaria

*e-mail: n_shestakova@list.ru

Нейропатическаяболь(НБ)возникаетприпораженииилидисфункциинервнойсистемы,сопровождаетсяпатологическим возбуждением нейронов, гиперактивацией глутаматергической системы, развитию центральной сенситизации и НБ. Рецепторы NMDA(NMDAR) играют определяющую роль в развитии синдрома НБ. Прямая блокада NMDAR приводит к обезболиванию, но сопровождается негативными побочными эффектами. Опосредованным влиянием на NMDAR, приводящим к купированию НБ, является кальций-зависимая десенсибилизация NMDAR, возникающая при ингибировании натрий-кальциевого обменника (CNX).

Наживотноймоделипроведенокомплексноехимико-фармакологическоеисследованиеселективногоингибито- раNCXKB-R7943какпрепаратадлякупированияНБ,вызваннойсахарнымдиабетом1типа,всравнениисдействи- ем амитриптилина (ATL), противоболевого препарата первой линии при диабетической нейропатии (ДН). Методом ВЭЖХ МС/МС установлено, что KB-R7943 и ATL проникают через гематоэнцефалический барьер; количественно описана динамика распределения препаратов и их метаболитов в плазме крови, отделах мозга, сердце и моче.

Поведенческие тесты Рэндл-Стеллито, формалиновый, Cold plate и принудительного плавания продемонстрировали противоболевой эффект KB-R7943, сопоставимый со стандартной терапией ATL, что выражается в снижении интенсивности термической, механической и химической аллодинии; KB-R7943 проявляет эффект как антидепрессант.

На основании результатов ЭКГ и тестирования в Открытом поле доказано, что KB-R7943 безопасен: введение KB-R7943 контрольным и диабетическим крысам не оказывает воздействия на работу сердца и не изменяет локомоторную активность. Напротив,ATL негативно влияет на проводящую систему сердца, что продемонстрировано как на животной модели, так и клиническими испытаниями.

Проверена безопасность терапии KB-R7943 на молекулярном уровне: проведена оценка уровня экспрессии генов, кодирующих белки ионных каналов, участвующих в патогенезе ДН и белков, регулирующих апоптоз, в образцах тканей отделов головного мозга. Выявлены гены, потенциальные маркеры ДН в гипоталамусе и гиппокампе: SCN9A, CACNA2D1, соотношение Bax/Bcl 2, показано положительное влияние на них терапии KB-R7943. Методами молекулярного моделирования изучен механизм взаимодействия KB-R7943 и NCX человека.

Сделан вывод, что поиск анальгетиков среди селективных ингибиторов NCX является новым перспективным направлением для разработки противоболевой терапии у пациентов с ДН.

Работа поддержана государственным заданием ИЭФБ РАН № 075 00967 23 00.

138

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

Постерная секция: Проблемы боли: механизмы регуляции ноцицептивной системы

ПРИМЕНЕНИЕ КОНФОКАЛЬНОЙ И АТОМНО-СИЛОВОЙ МИКРОСКОПИИ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ КАНАЛОВ NAV1.8 НОЦИЦЕПТИВНОГО НЕЙРОНА

Беринцева А. В.*, Подзорова С. А., Халисов М. М., Пеннияйнен В. А.

ФГБУН Институт физиологии им. И. П. Павлова РАН, г. Санкт-Петербург

*e-mail: berintsevaav@infran.ru

Na, K-АТФаза помимо хорошо известной насосной функции выполняет функцию трансдуктора сигнала, активируемая уабаином в эндогенной концентрации (ЭУ). В литературе практически нет данных о внутриклеточных сигнальных путях, запускаемых уабаином в ноцицептивном нейроне. Мы предполагаем, что в мембране сенсорного нейрона Na, K-ATФаза выполняет особую функцию, выступая в качестве мишени ЭУ и одновременно трансдуктора сигнала, участвуя в переработке ноцицептивной информации. Наши данные свидетельствуют, что ЭУ запускает два разных сигнальных процесса. Первый, быстрый процесс, приводит к модуляции активационного воротного устройства каналов NaV1.8, ответственных за первичное сенсорное кодирование ноцицептивных сигналов, что снижает их функциональную активность. Второй, медленный процесс, ведет к снижению плотности каналов NaV1.8 в мембраненоцицептивногонейрона.Мыпредполагаем,впоследнемслучаеЭУактивируятрансдукторнуюфункциюNa, K-ATФазы запускает Src-р38 MAPК путь, ведущий к снижению экспрессии гена SCN10A, экспрессирующего каналы NaV1.8. Цель работы: выяснить роль Na, K-АТФаза/Src-зависимой активации p38 MAPK каскада, запускаемого трансдуктор-опосредованно ЭУ, в регуляции экспрессии каналов Nav1.8.

Работа выполнена на ноцицептивных нейронах с применением методов диссоциированной культуры клеток, иммунофлуоресценции, конфокальной и атомно-силовой микроскопии (АСМ). Данные иммунофлуоресцентного анализа свидетельствуют о снижении уровня флуоресценции антител к каналам NaV1.8. Установлено, что ЭУ, активируя р38 MAPК каскад, вызывает снижение плотности каналов NaV1.8 в мембране ноцицептивного нейрона, что является следствием снижения экспрессии гена SCN10A. Применение метода АСМ позволило подтвердить вывод о том, что после воздействия ЭУ снижается плотность NaV1.8 каналов в мембране ноцицептивного нейрона.

Было обнаружено, что действие ЭУ приводит к увеличению жесткости мембраны сенсорных нейронов. Очевидно, снижение плотности встроенных в мембрану нейрона каналов NaV1.8 приводит к большей однородности мембраны и, как следствие к увеличению жесткости нейрона. Таким образом, ЭУ выполняет важнейшую функцию модуляции функциональной активности каналов NaV1.8 при взаимодействии с ноцицептивным нейроном.

РаботавыполняласьнаоборудованииЦКП«Конфокальнаямикроскопия»Институтафизиологииим.И. П. Павлова РАН.

Финансовая поддержка: Минобрнауки РФ (Соглашение № 075 15 2022 303 от 21.04.2022 г). в форме гранта на реализацию Программы НЦМУ «Павловский Центр «Интегративная физиология – ​медицине, высокотехнологичному здравоохранению и технологиям стрессоустойчивости».

НЕОДНОРОДНОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ПОРОГОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ ГЛУБОКОЙ БОЛИ, ИЗМЕРЕННЫХ НА ТЫЛЬНОЙ ПОВЕРХНОСТИ СТОПЫ ЧЕЛОВЕКА

Добрецов М. Г.1,*, Карнишкина О. Ю.1, Буханцева Д. С.2, Бабенко А. Ю.2

1Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И. М. Сеченова РАН, г. Санкт-Петербург 2 ФГБУ «НМИЦ им. В. А. Алмазова» Минздрава России, г. Санкт-Петербург

*e-mail: dobretsovmaxim@gmail.com

В ряде исследований (Добрецов и соавт., 2010) было показано, что измерения порога периферической глубокой боли (ППГБ) является простым и чувствительным методом определения инсулинопении. У диабетических и «преддиабетических» крыс этот порог оказался снижен. Однако, подобные исследования с участием человека не проводились и возможность раннего детектирования нарушений в выработке или действии инсулина у человека неизвестна. В качестве первого шага для решения этой проблемы нами было проведено клиническое исследование, целью которого было проанализировать распределение ППГБ среди «условно здоровых» лиц.

Обследовано 15 человек, не имеющих диагноза диабета, невропатии и других острых и хронических заболеваний.Исследованиепроводилосьутромнатощак.ИзмерениеППГБпроводилиспомощьюмеханическогоальгометра Wagner Instruments FDK5 с полукруглым, гладким аппликатором (площадь аппликатора 20 мм2) на тыльной поверхности стопы, ниже арочной артерии между плюсневыми костями 3-го и 4-го пальцев. ППГБ определяли как силу давления аппликатора (кг/см2), при которой испытуемый сообщал о первых признаках дискомфорта. Для каждого исследуемого было проведено 4 измерения ППГБ правой и левой стоп попеременно с интервалом не менее 60 секунд. Всем участникам исследования был проведен забор крови на глюкозу и измерены рост, вес, окружность талии (ОТ) и произведен расчет индекса массы тела (ИМТ).

139

XXIV съезд физиологического общества им. И. П. Павлова

В ходе проведенного исследования было обнаружено существование двух групп испытуемых: группа I – c​ низким и группа II – ​с высоким ППГБ (среднее значение ППГБ 1.09±0.27 кг/см2 и 2.14±0.15 кг/см2, соответственно; р<0.05). В I группе преобладало количество женщин: 6 (75 %) женщин против 2 (25 %) мужчин, тогда как в II группе количество женщин – 3​ (43 %) и мужчин – 4​ (57 %). Однако, не было обнаружено статистически значимых отличий между этими группами ни по одному из других исследованных параметров: возраст, уровень глюкозы натощак, вес, рост, ОТ и ИМТ. Интересно, однако, что двое из испытуемых I группы имели в анамнезе подтвержденный COVID 19 и один из этих испытуемых имел эпизоды подтвержденной гипергликемии.

Проведенные исследования показывают неоднородное распределение ППГБ, измеренных на тыльной поверхности стопы «условно здоровых» лиц. Природа этой неоднородности нуждается в дальнейших исследованиях.

Финансовая поддержка: государственное задание ИЭФБ РАН № 075 00967 23 00.

ВЛИЯНИЕ NO И СО НА АКТИВНОСТЬ АФФЕРЕНТОВ ТРОЙНИЧНОГО НЕРВА ПРИ ДЕЙСТВИИ АТФ И КАПСАИЦИНА

Королёва К. С.*, Ананьев А. С., Буглинина А. Д., Свитко С. О., Ситдикова Г. Ф.

Казанский федеральный университет, г. Казань

*e-mail: k. s.koroleva@yandex.ru

Мигреньявляетсяширокораспространённымзаболеванием,характеризующимсясложнымпатогенезомитрудно поддающимся лечению. В связи с этим актуальным является исследование молекулярных механизмов, лежащих

воснове возникновения боли, для поиска новых, персонализированных, методов профилактики и лечения мигрени. Оксид азота (NO) и монооксид углерода (СО) является одной из эндогенных молекул, играющих ключевую роль

ввозникновении мигрени. АТФ и капсаицин являются классическими альгогенами и увеличение их внеклеточной концентрации приводит к активации P2X3 и TRPV1-рецепторов соответственно на афферентах тройничного нерва. Источником АТФ являются эндотелиальные клетки сосудов, тучные клетки, нервные окончания, повреждение тканей, тогда как TRPV1 рецепторы помимо капсаицина активируются повышением температуры, рН в пределах 5 6. Однако взаимодействие NO и СО с рецепторами TRPV1 и P2X3 – ​остается неизученным. В настоящем проекте изучали влияние NO и СО на активность рецепторов TRPV1 и P2X3 в периферических афферентах с помощью электрофизиологическойрегистрациипотенциаловдействиятройничногонервавпрепаратахполушариячерепакрысы. В качестве объекта исследования ex vivo использован препарат изолированного черепа крысы. Череп с внутренней стороны покрыт твердой оболочкой мозга, в которой проходят сосуды и нервные волокна. Данный объект является наиболее надежной моделью для исследования периферических отростков нейронов в механизмах боли при мигрени. Нашеисследованиепоказало,что экзогенноиэндогенно продуцируемыйNO,атакжеэкзогенныйСО(CORM 2) проявляет про-ноцицептивное возбуждение в менингеальных афферентах тройничного нерва крысы, и эти эффекты не зависели от активации рецепторов P2X3 или TRPV1. Экзогенный NO и СО не оказывали положительного моду- лирующеговлияниянапро-ноцицептивныйэффектАТФ.Втожевремяостроеилихроническое(нитроглицерин-ин- дуцированная мигрень у крыс) введение NO усиливало про-ноцицептивные эффекты капсаицина, что может быть связано с S-нитрозилированием TRPV1 или других мишеней, влияющих на вызванное капсаицином возбуждение. На фоне СОRM 2 наблюдается увеличение времени инактивации TRPV1 рецепторов по сравнению с контрольной группой экспериментов. Этот механизм может лежать в основе сенсибилизации афферентов тройничного нерва

вмодели мигрени, вызванной хроническим введением нитроглицерина. В связи с этим рецепторы TRPV1 можно рассматривать как привлекательную мишень для лекарственного вмешательства при хронической мигрени

Финансовая поддержка: грант № МК 4584.2022.1.4.

ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ НИТРОГЛИЦЕРИНА НА ТАКТИЛЬНУЮ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ И РАЗВИТИЕ ФОТОФОБИИ У КРЫС С РАЗЛИЧНЫМ УРОВНЕМ ДОФАМИНА

Кочнева А. А.*, Коновалова С. П., Герасимова Е. В.

Научно-технологический университет «Сириус», пгт. Сириус, Краснодарский край

*e-mail: kochneva.aa@talantiuspeh.ru

Мигрень – ​хорошо известное неврологическое заболевание, чьи центральные и периферические механизмы патогенеза до сих пор остаются малоизученными. Ряд симптомов, характеризующих данное заболевание, включает помимо головной боли также зевоту, сонливость, тошноту и рвоту, которые связывают с дофаминергической системой. Клинические исследования показали повышение уровня дофамина в крови у пациентов с мигренью (Gruber, 2010). Данное исследование проводили на крысах трех групп: линия Wistar (n=12), дикий тип (WT, n=9), гетерозиготы по нокауту транспортера дофамина (DAT-HET, n=10). Для моделирования острой мигрени крысам внутрибрюшинно вводили нитроглицерин (НТГ) 10 мг/кг. Через 10, 70 и 130 минут после укола НТГ оценивали пороги чувствительности плантарной зоны задних лап с использованием нитей Фон Фрея по методике «Up&Down». Исследование тактильной чувствительности выявило более низкий порог чувствительности у крыс групп WT и DAT-

140

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/