иммунитета. Различают раннюю реакцию (48 ч) – гиперемия, небольшая папула и позднюю реакцию, которая появляется через 2-4 недели в виде бугорка, узелка, иногда с некрозом.

Микробиологическая диагностика.

Исследуемый материал – соскоб слизистой оболочки носа, тканевой сок, пунктат лимфатического узла, кусочки органов.

1.Бактериоскопический метод – окраска по Цилю-Нильсену, Граму.

2.Биологический метод – заражение броненосцев, белых мышей, вскрытие, мазки-отпечатки, посев на питательные среды.

3.Аллергологический метод – реакция Мицуду.

4.Биохимический и молекулярно-биологический метод – ПЦР, ДНК-гибридизация.

Профилактика и лечение.

Специфической профилактики и лечения нет.

Основные мероприятия неспецифической профилактики:

·Раннее выявление больных и изоляция их в лепрозории, где они пребывают до излечения;

·Наблюдение за членами семьи больного и их обследование первые 10 лет – 2 раза в год; а

вдальнейшем 1 раз в год;

· Новорожденные дети сразу же изолируются от больной матери и вскармливаются искусственно; затем здоровые дети воспитываются в детском доме при лепрозории;

·Применяется превентивное введение вакцины БЦЖ населению тех районов, где часто встречается лепра.

Для лечения проказы испробовано огромное количество различных способов, включая и препараты золота (золото в разных соединениях убивает кислотоустойчивые бактерии) – кризолган, сольганол, санакризин; подсадки растительных и животных тканей с целью стимуляции иммунитета (йодистый калий).

Издавна применяется чаульмугровое (хаульмугровое) масло, добываемое из тропических бобовых растений. Масло содержит ненасыщенные жирные кислоты, которые влияют на содержание в крови липазы, разрушающей клеточную оболочку бактерий.

В настоящее время основными средствами лечения проказы являются:

·Препараты сульфонового ряда (ДДС – 4,4-диаминодифенилсульфон);

·Противотуберкулезные препараты (фтивазид, тибон);

·Чаульмугровое (хаульмугровое) масло и его препараты (мигрол, интилепрол).

·Препаратами выбора считают дапсон, рифампицин, клофазимин, применяемые отдельно или в комбинации.

Лечение проводится комплексное, длительными курсами.

Student TJ

Микробиологическая диагностика столбняка, анаэробной инфекции, ботулизма.

1. Общая характеристика спорообразующих анаэробы.

В группу спорообразующих входят бактерии разной морфологии (клетки в форме палочек, кокков и иногда нитей), большинство из них окрашивается по Граму положительно. Клетки обычно подвижные за счет перитрихиальных жгутиков, образуют устойчивые к нагреванию, сильно преломляющие свет эндоспоры. В группу входят 15 родов, из них пять основных: Bacillus,

Sporosarcina, Sporolactobacillus, Clostridium и Desulfotomaculum.

Анаэробные спорообразующие бактерии рода Clostridium – палочки с закругленными или иногда заостренными концами, часто расположенные в парах или коротких цепочках. Большинство из

них подвижны за счет перитрихиальных жгутиков. Образуют овальные или сферические эндоспоры, располагающиеся субтерминально, центрально или терминально. Как правило, диаметр спор больше диаметра вегетативной клетки, поэтому палочка со спорой приобретает сходство с веретеном, отсюда и произошло название рода. Клостридии сбраживают большое число субстратов, включая полисахариды, белки, аминокислоты и пурины. В зависимости от вида сбраживаемого субстрата выделяют несколько физиологических групп клостридий.

• сахаролитические, использующие в качестве субстратов моносахара, крахмал,пектин, целлюлозу и другие вещества углеводной природы (C. pasteurianum, C. butyricum, C. acetobutyricum);

•протеолитические, сбраживающие белки, пептиды, аминокислоты

(C. botulinum, C. tetani, C. putribicum, C. sporogenes, C. histolyticum и др.);

•пуринолитические, сбраживающие гетероциклические азотсодержащие соединения – пурины и пиримидины (C. acidiurici, C. cylindrosporum).

Потребности клостридий в питательных веществах весьма разнообразны. Как правило, они могут расти только на сложных, богатых органическими соединениями средах. Для них выявлена потребность в определенных витаминах и наборе аминокислот.

Клостридии широко распространены в природе. Естественной средой их обитания является почва, особенно ее глубокие слои, ил различных водоемов, сточные воды, кишечный тракт травоядных животных и человека. Среди клостридий выделяют как сапрофитные, так и патогенные формы. К

сапрофитным относятся C. pasteurianum, C. acetobutyricum, C. butyricum (типовой вид).

Патогенные клостридии: C. tetani – возбудитель столбняка; C. botulinum – возбудитель ботулизма; C. histolyticum, C. septicum, C. perfringens, C. novyi, C. sordelli – возбудители газовой гангрены. Патогенные клостридии, как правило, относятся к протеолитическим (белки, аминокислоты).

+Бактерии рода Clostridium играют важную роль в круговороте веществ в природе, особенно азота и углерода, осуществляя процессы гниения, брожения и фиксации молекулярного азота. Азотфиксирующая функция выявлена у многих представителей рода Clostridium: Cl. pasteurianum,

Cl. butyricum, Cl. butylicum, Cl. beijerinckia, Cl. pectinovorum, Cl. acetobutylicum и других видов.

Наиболее энергичный азотонакопитель — Cl. Pasteurianum.

1.Споры овальные, расположение их в материнской клетке центральное,растяжение клетки спорой не происходит. Таковы споры у большинства бацилл (B. subtilis, B. cereus, B. megaterium,

B. anthracis, B. thuringiensis).

2.Споры овальные, имеющие толстую оболочку с выростами, расположение их вматеринской клетке центральное. Они «растягивают» клетки изнутри в ходе споруляции (B. polymyxa, B.

stearothermophilus).

3. Споры сферические, расположение их в материнской клетке полярное.Эндоспоры «растягивают» клетку в ходе споруляции (B. pasteurii).

Большинство представителей рода Bacillus являются сапрофитами, широко распространены в природе, особенно в почвах, богатых органическими веществами (B. subtilis, B. megaterium, B. polymyxa, B. stearothermophilus, B. licheniformis). B. megaterium считаются «гигантами» среди эубактерий, так как их клетки имеют размеры 2 × 5 мкм. Вид B. subtilis является типовым для рода Bacillus, называется «сенной палочкой» (так как накопительные культуры данных бактерий получают из настоя сена). Бактерии B. polymyxa получили название из-за того, что они образуют большое количество слизи. B. stearothermophilus – выраженный термофил (температурный оптимум для роста 50–65 ºС).

Вкачестве одного из представителей патогенных бактерий можно назвать B. anthracis – возбудитель сибирской язвы.

Бактерии рода Bacillus являются активными продуцентами различных антибиотических веществ.

Внастоящее время известно около 200 антибиотиков, синтезируемых этими бактериями. Наиболее продуктивными являются бактерии вида B. subtilis – для них описано более 70 различных антибиотиков. Около 30 антибиотиков продуцируют культуры B. brevis. Различные антибиотики синтезируют также бактерии видов B. polymyxa, B. cereus, B. circulans, B. megaterium, B. licheniformis и др.

Некоторые антибиотики бактерий рода Bacillus широко используются в медицине, сельском хозяйстве и пищевой промышленности. К ним относятся полимиксины, колистин, бацитрацин, грамицидин С, эдеин, бутирозин и др.

2.МЕТОДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ АНАЭРОБОВ

Для культивирования анаэробов необходимо понизить окислительновосстановительный потенциал среды, создать условия анаэробиоза, т. е. пониженного содержания кислорода в сред окружающем ее пространстве. Это достигается применением физических, химических и би логических методов.

Физические методы.

Основаны на выращивании микроорганизмов в безвоздушной среде, что достигается:

1)посевом в среды, содержащие редуцирующие и легко окисляемые вещества;

2)посевом микроорганизмов в глубину плотных пи тательных сред;

3)механическим удалением воздуха из сосудов, в ко торых выращиваются анаэробные микроорганизмы;

4)заменой воздуха в сосудах каким-либо индиффе рентным газом.

Вкачестве редуцирующих веществ обычно использу ют кусочки (около 0,5 г) животных или растительных тканей (печень, мозг, почки, селезенка, кровь, картофель, вата). Эти ткани связывают растворенный в среде кис лород и адсорбируют бактерии. Чтобы уменьшить содер жание кислорода в питательной среде, ее перед посевом кипятят 10-15 мин, а затем быстро охлаждают и зали вают сверху небольшим количеством стерильного вазе линового масла. Высота слоя масла в пробирке около 1 см.

Вкачестве легко окисляемых веществ используют глюкоз у, лактозу и муравьинокислый натрий. Лучшей жидкой питательной средой с редуцирующи ми веществами является среда КиттаТароцци, кото рая используется с успехом для накопления анаэробов при первичном посеве из исследуемого материала и для поддержания роста выделенной чистой культуры анаэ робов.

Посев микроорганизмов в глубину плотных сред про изводят по способу ВиньяльВейона, который состоит в механической защите посевов анаэробов от кислорода воздуха. Берут стеклянную трубку длиной 30 см и диа метром 3-6 мм. Один конец трубки вытягивают в ка пилляр в виде пастеровской пипетки, а у другого конца делают перетяжку. В оставшийся широкий конец трубки вставляют ватную пробку.

Впробирки с расплавленным и охлажденным до 50°С питательным агаром засевают исследуемый материал. Затем насасывают засеянный агар в стерильные трубки Виньяль-Вейона. Капилляр ный конец трубки запаивают в пламени горелки и трубки помещают в термостат. Так создаются благоприятные условия для роста самых строгих анаэробов. Для выде ления отдельной колонии трубку надрезают напильни ком, соблюдая правила асептики, на уровне колонии, ло мают, а колонию захватывают стерильной петлей и переносят в пробирку с питательной средой для дальней шего выращивания и изучения в чистом виде.

Удаление воздуха производят путем его механическо го откачивания из специальных приборов — анаэростатов, в которые помещают чашки с посевом анаэробов. Переносный анаэростат представляет собой толстостен ный металлический цилиндр с хорошо притертой крыш кой (с резиновой прокладкой), снабженный отводящим краном и вакуумметром. После размещения засеянных чашек или пробирок воздух из анаэростата удаляют с помощью вакуумного насоса.

Замену воздуха индифферентным газом (азотом, водородо м, аргоном, углекислым газом) можно производить в тех же анаэростатах путем вытеснения его газом из баллона.

Химические методы.

Основаны на поглощении кисло рода воздуха в герметически закрытом сосуде (анаэро-стате, эксикаторе) такими веществами, как пирогаллол или гидросульфит натрия Na2S204.

Биологические методы.

Основаны на совместном вы ращивании анаэробов со строгими аэробами. Для этого из застывшей агаровой пластинки по диаметру чашки вырезают стерильным скальпелем полоску агара шири ной около 1 см. Получается два агаровых полудиска в одной чашке. На одну сторону агаровой пластинки засе вают аэроб, например часто используют S. aureus или Serratia marcescens. На другую сторону засевают ана эроб. Края чашки заклеивают пластилином или заливают расплавленным парафином и помещают в термостат. При наличии подходящих условий в чашке начнут размно жаться аэробы. После того, как весь кислород в прост ранстве чашки будет ими использован, начнется рост анаэробов (через 3-4 сут). В целях сокращения воздушного пространства в чашке питательную среду наливают возможно более толстым слоем.

3. Клостриди столбняка. Экология. Свойства микроба ,токсины и их патогенетическое действие. Столбняк — тяжелая раневая инфекция, вызываемая Clostridium tetani, характеризуется по ражением нервной системы, приступами тоничес ких и клонических судорог.

Таксономия. С. tetani относится к отделу Firmicutes, роду Clostridium.

Морфологические свойства. Возбудитель - подвиж ная (перитрих) грамположительная палочка, об разует споры, чаще круглые, реже овальные, споры располо жены терминально. В культуре старше 24 ч бактерии становятся грамотрицательными. Капсул не образуют.

Культуральные свойства. Облигатный анаэроб. На жидких питательных средах бактерии растут придонно, продуцируя сильный экзотоксин. На плотных питательных средах образуют прозрачные или слегка сероватые колонии с шероховатой поверхностью. Не расщепляют углеводов, обладают слабым протеолитическим действием.

Антигенная структура и токсинообразование. По жгутиковому Н-антигену делится на 10 сероваров; О-антиген является общим для всех представителей вида. Воз будитель продуцирует два патогенных растворимых антигена — тетанолизин и тетаноспазмин, составляющих две фракции стол бнячного экзотоксина.

Факторы патогенности. Основным фактором патогенности является экзотоксин. Тетанолизин и тетаноспазмин оказы вают соответственно гемолитическое (вызывает лизис эритроцитов) и спастическое (вызывает непроизвольное сокращение мышц) действие.

Резистентность. Являясь нормальным обитателем кишечника живот ных, человека, клостридии попадают в окружающую среду, в почву с фекалиями, ще в виде спор могут сохраняться годами. Споры столбняч ной палочки отличаются термоустойчивостью: при кипячении погибают лишь через 50—60 мин..

Эпидемиология и патогенез. Заражение происходит при проникно вении возбудителя в организм через дефекты кожи и слизистых оболочек при ранениях (боевых, производственных, бытовых), ожогах, обморожениях, через операционные раны, после инъ екций. При инфицировании пуповины возможно развитие стол бняка у новорожденных («пупочный столбняк»).