Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Лабораторный справочник СИНЭВО

.pdf
Скачиваний:
9
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
31.17 Mб
Скачать

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

Этапы проведения антибиотикограммы являются стандартными: состав среды, рН среды, плотность посевного материала, длительность и темпера5 тура инкубации, стабильность и концентрация микробиального вещества. Лаборатория имеет автоматический «расшифровщик» антибиотикограммы (по диффузиметрическому методу), который имеет встроенную в софт5про5 грамму «эксперт», которая соответствует этому стандарту, со способностью выявлять штаммы, продуцирующие пенициллиназу и бета5лактамазу широ5 кого спектра, и также другие резистентные фенотипы. Кроме классического метода, используемого во всех лабораториях, проводится и автоматизиро5 ванная антибиотикограмма. Автоматический анализатор, находящийся в ра5 боте, может идентифицировать микроорганизмы и тестировать их на чув5 ствительность к антибиотикам в течение нескольких часов (от 2 до 12 часов). Длительность изменяется, в зависимости от семейства, к которому относят5 ся изучаемые колонии. Типы идентифицируемых микроорганизмов много5 численны и включают в себя как грамположительные, так и грамотрицатель5 ные бактерии. Выделение патогенного микроорганизма в чистой культуре (необходимое условие для получения правильного результата) позволяет идентифицировать и одновременно тестировать на чувствительность к анти5 биотикам на этом автоматическом анализаторе. Таким образом, имеется возможность обнаружения ферментов, которые ингибируют действие анти5 биотиков in vivo и автоматическая интерпретация результата антибиотиког5 раммы, в зависимости от наличия или отсутствия этих ферментов.

40

ОСНОВНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ В ИНТЕРПРЕТАЦИИ РЕЗУЛЬТАТОВ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ В ЛАБОРАТОРИИ «СИНЭВО»

Медицинская оценка результатов лабораторных исследований включает обычно два этапа:

5 вертикальная оценка: сравнение полученных результатов со стандартными значениями, терапевтический диапазон или граница клинического решения;

5 горизонтальный мониторинг: сравнение настоящих результатов пациен5 та с предыдущими.

Для правильной интерпретации полученных результатов по определению различных исследуемых веществ лаборатория указывает в окончательном результате референс5значения, характерные для пола и возрастной группы тестируемого пациента.

Референс5значения могут быть из следующих источников:

5 от производителя реагентов для соответствующего метода на основании исследований, проведенных на соответствующем выбранном популяцион5 ном уровне;

5 из литературы по специальности (справочные материалы в области ла5 бораторной медицины), реже – в случае определенных возрастных групп (новорожденные дети, пожилые);

5 собственные исследования лаборатории, по мере доступа лаборатории к клиническим данным исследуемой популяции.

Важное примечание относительно референс5значений – это то, что они ис5 пользуются, в основном, в 95% исследуемой популяции, поэтому должен сущес5 твовать постоянно пониженный процент здоровых лиц, у которых значения опре5 деленных исследуемых веществ находятся вне установленного референс5ин5 тервала. Поэтому для избежания недоразумений в диагностике и бесполезных исследований рекомендуется, чтобы интерпретация результатов лабораторных исследований всегда проводилась в контексте клинической картины, наблюдае5 мой у пациента. Наряду с возрастом и полом, важно учитывать, в случае опре5 деленных исследуемых веществ, наличие других факторов, которые могут вли5 ять на результаты или интерферировать с ними.

Таким образом, описаны две категории факторов:

# биологические факторы воздействия: определяют модификации in vivo

одного исследуемого вещества, независимо от используемого метода. Эти мо5 дификации являются обычно транзиторными и временно влияют на результат; 5 интерферирующие факторы: воздействуют после отбора пробы (in vitro) и ведут к результату, который не соответствует действительному уровню ис5

следуемого вещества в организме (ложный рост или спад).

Вдальнейшем должны быть представлены коротко биологические факторы, медикаментозные интерференциальные факторы, преданалитические пере5 менные, связанные со способом отбора, обработки, хранения и транспорти5 ровки проб и интерференциями, вызванными наличием эндогенных антител.

Биологические факторы

Втаблице, расположенной ниже, собраны биологические факторы (пере5 менные и постоянные), которые могут оказывать влияние и подверженные воздействию основные лабораторные тесты:

43

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

Биологические факторы

Лабораторные исследования

воздействия

 

Этническое происхождение

Двойной и тройной тест на беременность

 

↑ C5реактивный белок (до 65%), Hb и Ht

 

(до 8%), мочевая кислота

 

↓ креатинин мочи, клиренс креатинина,

 

эстриол, трансферрин

Циркадный ритм

Кортизол (↑ в течение дня и ↓ ночи)

 

Калий (концентрация ↓ после обеда

 

относительно утренних значений)

Вес тела

Лица с избыточным весом имеют более

 

высокие концентрации мочевой кислоты,

 

холестерина, ЛНПП и глюкозы

Сезонные колебания

T3 ↓ на 20% летом

Менструальный цикл

ФСГ, ЛГ, эстрадиол и прогестерон

 

представляют циклические колебания

 

Fe и фосфор ↓ при менструации

 

Холестерол ↓ при овуляции

Питание

Высокобелковая диета: ↑ мочевина и

 

мочевая кислота

 

Диета, обогащенная жирами: ↑

 

холестерола и триглицеридов

 

Голодание: ↓ холестерин, триглицериды,

 

мочевина, T4, T3 ↑ креатинин, мочевая кислота

Потребление кофе

Ванилилминдальная кислота, метанефрин

 

(необходимо избегать за 72 часа до отбора)

Потребление алкоголя

Острые состояния (254 часа): ↓ гликемия,

 

↑ мочевая кислота

 

Хронические состояния: ↑ ГГТ, АЛТ, АСТ

Потребление наркотиков

Морфин: ↑ амилаза, липаза, АСТ, АЛТ,

 

щелочная фосфатаза, пролактин, TСГ

 

↓ Инсулин

 

Героин: ↑ pCO2, T4, холестерин, калий;

 

↓ pO2, альбумин

 

Каннабис: ↑ натрий, калий, хлор,

 

мочевина, инсулин

 

↓ креатинин, глюкоза, мочевая кислота

Курение

Острые состояния (1 час): ↑ кортизол

 

Хронические состояния: ↑ количество

 

эритроцитов, Hb, Ht, количество

 

лейкоцитов и нейтрофилов, общий

 

холестерол и ЛПНП, Pb, Cd, Cu,

 

↓ пролактин, ЛПВП

Физическая нагрузка

↑ креатинкиназа, АСТ, мочевина, глюкоза,

 

альбумин, мочевая кислота, AКTГ,

 

кортизол, гормон роста ↓ инсулин

Эмоциональный стресс

↑ пролактин, кортизол, TТГ, гормон роста,

 

инсулин, альбумин, фибриноген, глюкоза,

 

холестерин, гормон роста

Хирургические

В постоперационной фазе сразу же:

вмешательства

↑ C5реактивный белок, фибриноген,

 

мочевина, количество лейкоцитов

 

↓ альбумин, холестерин

Медикаментозные интерференции

Интерференции, проявляемые медикаментами в отношении лаборатор5 ных исследований, являются многочисленными, поэтому необходимо учиты5

вать их при интерпретации результатов. Медикаменты могут проявлять эф5 фекты как in vivo (биологические воздействия), так и in vitro (физико5хими5 ческие интерференции).

В нижеуказанной таблице наведены некоторые примеры из основных ти5 пов медикаментозных интерференций:

Категория

Механизм

Пример

Пример модифициро#

 

 

медикамента

ванного определяемого

 

 

 

вещества

Биологическое

Энзиматическая

Фенитонин

↑ ГГТ

воздействие

индукция

 

 

in vivo

 

 

 

 

Энзиматическое

Аллопуринол

↓ Мочевая кислота

 

ингибирование

 

 

 

в печени

 

 

 

Энзиматическое

Циклофосфамид

↓ Холинэстераза

 

ингибирование

 

 

 

в сыворотке

 

 

 

Рост связанных

Оральные

↑ Сывороточная медь

 

белков

контрацептивы

 

 

Скачки

Новобиоцин

↑ Непрямой билирубин

 

глюкоронидазы

 

 

 

Антивитаминный

Зоокумарин

↓ С5реактивный белок

 

эффект

 

 

 

Цитотоксичность

Цисплатин

↑ Креатинин

Физико5

Интерференция с

Теофиллин

↑ Билирубин

химические

диазореакцией

 

 

интерференции

 

 

 

in vivo

 

 

 

 

Оптическая

Рифампицин

↓ Билирубин

 

интерференция

 

 

 

через желтый цвет

 

 

 

Интерференция

Метронидазол

↑ Билирубин

 

с методом

 

 

 

гексокиназы

 

 

Преаналитические переменные, связанные со способом отбора, об# работки, хранения и транспортировки проб

Положение

При переходе из клиностатического положения в ортостатическое происходит перераспределение воды из васкулярного пространства в интерстициальное примерно на 8%. Таким образом, регистрируется повышение на 358% уровня сы5 вороточных белков и компонентов, связанных с белками, если проба отобрана сразу же после продолжительного ортостатического положения и длится мини5 мум 10 минут в положении лежа на спине. Параметрами, при которых наблюда5 ется рост концентраций, являются: гемоглобин, гематокрит, количество эритро5 цитов, лейкоцитов, общий белок, альбумин, иммуноглобулины, холестерин и кальций. У пациентов с отеками изменения более ярко выражены.

Время венозного стаза

Венозная компрессия выражается такими же эффектами, как и посту5 ральные эффекты из ортостатического положения из5за гемоконцентрации. Таким образом, концентрация общего белка может возрастать до 20% пос5 ле венозного стаза за 10 минут. Из5за этого рекомендуется, чтобы продол5 жительность изменения положения не превышала 10 минут.

Последний прием пищи

Прием пищи перед отбором проб способствует росту уровня глюкозы, фо5

44

45

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

сфора и билирубина, более выраженному росту калия и АЛТ, а также умерен5 ному и легкому росту мочевой кислоты, общего белка, кальция и холестери5 на. Содержание жиров при приеме пищи определяет уровень триглицеридов.

Диагностические и терапевтические процедуры

Взятие проб после массажа или пункции простаты может вести к повышен5 ным значениям простатоспецифического антигена и кислой фосфатазы. Вну5 тримышечные инъекции с определенными веществами (бензодиазепины, хлорпромазины, лидокаин, фенобарбитал) могут определять рост кретинки5 назы. Контаминация лабораторных проб растворами для внутривенных инъекций является наиболее часто распространенным видом преаналитичес5 кой интерференции в больнице. Поэтому взятие проб крови никогда не долж5 но проводиться вблизи от места перфузии и рекомендуется информировать лабораторию о виде назначенных веществ и времени, когда проводился от5 бор проб. Особое внимание уделяется при взятии проб из внутривенных и внутриартериальных катетеров. Канюля должна предварительно быть промы5 та физиологическим раствором, а первые 5 мл крови должны быть удалены до фактического взятия пробы крови. Отбор для проведения коагуляции проб из загрязненных катетеров гепарином является особо критическим, поэтому чтобы определить AЧТВ и тромбиновое время рекомендуется, чтобы количе5 ство крови, равное двойному объему катетера, было удалено до отбора проб.

Гемолиз

Определяется как высвобождение в сыворотку или плазму внутриклеточ5 ных компонентов эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов. Гемолиз обычно распознается за счет появления красноватого цвета, более или менее ин5 тенсивного, сыворотки или плазмы после центрифугирования пробы. Гемо5 лиз может вызывать некоторые изменения параметров в исследуемом ма5 териале. Это является важным биологическим фактором, если высвобожде5 ние внутриклеточных компонентов произошло in vivo или является интерфе5 рирующим фактором in vitro, если высвобождение компонентов произошло после взятия пробы. Пробы, подвергшиеся сильному гемолизу, обычно сра5 зу же оформляются в перезабор лабораторией на преаналитическом этапе. Хотя частота его возникновения низкая, всё же необходимо учитывать и возможность наличия внутрисосудистого гемолиза (in vivo), поэтому откло5 нение подобных проб является доказательством некомпетентности персо5 нала. Если в случае видимого внутрисосудистого гемолиза уровень гаптог5 лобина в сыворотке крови является очень низким или неопределяемым, а непрямой билирубин повышен, то при гемолизе in vitro эти показатели в пре5 делах нормы, а показатель содержания калия значительно увеличился.

Гемолиз in vitro может произойти в следующих случаях:

5 в случае пунктирования поверхностных вен, а чаще – при использова5 нии толстых игл;

5 частичная обструкция венозного или артериального катетера; в ре5 зультате этого забор является более затруднительным, если отбор пробы осуществляется с помощью шприца;

5 взятие пробы с помощью шприца и распределение его в несколько про5 бирок;

5 энергичные сотрясения пробирки;

5 предварительное центрифугирование пробы, до начала процесса коа5 гуляции;

5 центрифугирование пробы с частичной коагуляцией, отобранной у па5 циентов, получающих антикоагулянты перорально;

5 положительное или отрицательное давление в трубках для отбора проб; 5 разведение крови гипотоническим раствором; 5 полное замораживание5размораживание крови;

5 хранение или транспортировка цельной крови в течение нескольких дней, в условиях окружающей среды.

Эффекты гемолиза могут быть классифицированы, в зависимости от ме5 ханизма:

5 увеличение содержания внутриклеточных компонентов во внеклеточ5 ной жидкости; отмечается также повышенный уровень ЛДГ калия, АСТ, железа сывороточного;

5 оптическая интерференция по цвету гемоглобина; степень интерфе5 ренции зависит от длины волны, на которой происходит распознава5 ние определяемого вещества, от типа бланков и реагентов;

5 взаимодействие внутриклеточных компонентов с химическими реакци5 ями для анализа компонентов сыворотки/плазмы: например, перокси5 дазная активность гемоглобина интерферирует с диазометодами опре5 деления билирубина и приводит к ложно сниженным результатам, а вы5 свобожденная аденилкиназа интерферирует при определении КФК.

Интерпретация биохимических тестов, в зависимости от степени ге# молиза

Степень гемолиза

Интерпретация результатов

Легкая степень гемолиза

5

Не удается обработка и интерпретация

 

результата для ЛДГ

 

5

Для других параметров используются

 

следующие формулировки: частичный

 

гемолиз сыворотки

 

Показатели КФК, К+, АСТ и другие могут

 

быть изменены

Умеренная степень гемолиза

5

Не интерпретируется результат по

 

данным параметрам

Выраженная степень гемолиза

5

Не удается обработка и рекомендуется

 

повторный отбор проб

В случае тестов на коагуляцию, гемолизированные пробы не обрабатываются. Иммунохимические тесты оцениваются производителем для аналитичес5 кой интерференции, вызванной гемолизом. В инструкциях к реагентам оп5 ределяется лимит сывороточного гемоглобина, превышение уровня которо5

го приводит к интерференции.

Липидемия

Пробы сыворотки и плазмы иногда могут быть хилезными (мутными) за счет повышения уровня липопротеинов. В большинстве случаев, турбид5 ность вызвана повышением уровня триглицеридов из5за повышения коли5 чества хиломикрон как за счет ЛПОНП, так и за счет обеих фракций липо5 протеидов. Таким образом, в норме пробы не должны быть ни в какой сте5 пени мутными, как в случае взятия крови, осуществленного после приема пищи, богатой жирами. Липидемический аспект всегда отмечается в лабо5 ратории и отражается в конечном протоколе анализов. Хотя гиперлипиде5 мия имеет диагностическое значение, наличие липопротеинов в повышен5 ных концентрациях в пробе может оказаться интерферентным фактором для определения некоторых исследуемых веществ:

5 оптическая интерференция (нарушается измерение абсорбции);

5 биохимическая интерференция (нарушается определение общего белка);

5 физическая интерференция (нарушается определение электролитов). Опалесценция или мутность липидемической плазмы/сыворотки легко за5

46

47

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

метить визуально невооруженным глазом. С другой стороны, определить турбидность пробы можно путем использования анализатора с длиной вол5 ны 6605700 нм. Степень интерференции каждого метода можно определить количественным образом путем добавления определенного количества ги5 перлипидемической сыворотки в прозрачную пробу, анализируя затем от5 дельно концентрацию обеих проб. Зная, что на некоторые тесты оказывает влияние липидемическая сыворотка/плазма, триглицериды из пробы могут быть устранены при помощи ультрацентрифугирования или преципитирова5 ния, затем проба повторно исследуется после элиминации жиров.

В некоторых случаях изменение методологии работы может быть полез5 ным в устранении некоторых интерференций липидемической сыворотки с лабораторными параметрами. Таким образом, чтение результатов на длине вторичной волны может компенсировать мутность, измеряя концентрацию путем сравнения с контрольной пробой.

Степень липидемии

Интерпретация результатов

Умеренная степень

5 Для общего билирубина и мочевой

 

 

кислоты применяются следующие

 

 

интерпретации: умеренный уровень

 

 

липидемии сыворотки. Уровень общего

 

 

билирубина и мочевой кислоты могут быть

 

 

изменены

 

 

5 Для определения магния используют

 

 

разведение пробы и интерпретируют

 

 

полученный результат

 

Выраженная степень

5 Для триглицеридов, общего холестерина

 

 

и ЛПВП холестерин является основой

 

 

интерпретации полученных результатов

 

 

5 Остальные тесты проводятся при

 

 

помощи разведения проб и

 

 

интерпретируют полученные результаты

Иктеричность (желтуха)

В лаборатории «СИНЭВО» существует следующая процедура интерпре5 тации результатов при желтухе:

5 сыворотка легкой или умеренной степени иктеричности: не изменен ни один из параметров;

5 выраженная степень иктеричности сыворотки: изменяемые параметры: снижен уровень – АЛТ, АСТ, общий холестерин, креатинин, ГГТ, триглице5 риды, и повышен уровень общего билирубина, магния; для триглицеридов, общего холестерина, магния и креатинина не проводится интерпретация ре5 зультатов; для показателей АЛТ, АСТ, общего билирубина, ГГТ проводится интерпретация со следующими замечаниями: сыворотка высокой степени иктеричности. Показатели АЛТ, АСТ, общий билирубин и ГГТ могут быть подвержены изменениям.

Контаминация проб эритроцитами

Такая ситуация возникает при длительном хранении или транспортировке проб цельной крови, центрифугирование которых проводится несвоевременно.

При получении таких результатов лаборатории необходимо связываться с врачом/лабораторией, которые проводили обработку проб крови для выяс5 нения своевременности выполнения процедуры центрифугирования.

Интерференции, вызванные присутствием эндогенных антител

Аналитические исследования в области гематологии, клинической химии и иммунной гематологии могут быть искажены наличием эндогенных антител.

Холодовая агглютинация

Повышенные титры агглютинина на холоде к эритроцитам, приводят к их агглютинации и влияют на электронный подсчет клеток следующим образом:

5 количество эритроцитов снижается в присутствии нормальной концент5 рации гемоглобина;

5 значительное повышение СОЭ;

5 число лейкоцитов и тромбоцитов ложно повышено.

Мазок крови выявляет агглютинацию эритроцитов. Подсчет клеток повто5 ряется после инкубации пробы при 37 °С в течение 30 минут. Холодовые аг5 глютинины могут интерферировать при определении группы крови.

Криоглобулины

Криоглобулины кристаллизуются в исследуемой пробе при комнатной температуре, в результате чего образуются частицы различной формы, ко5 торые могут имитировать лейкоциты и способствуют ложному повышению количества лейкоцитов. Кроме того, повышенные концентрации криоглобу5 линов могут повлиять на подсчет количества эритроцитов, определение ге5 моглобина (феномен флокуляции) и подсчет тромбоцитов (псевдотромбоци5 тоз). Исследование мазка крови выявляет кристаллы флокуляции, окрашен5 ные в синий цвет в присутствии нормального количества лейкоцитов.

ЭДТА#зависимые антитела

Холодовые агглютинины или другие активные антитела в присутствии ЭДТА могут вызвать ложное снижение количества тромбоцитов (псевдо5 тромбоцитопению). Насколько определение количества тромбоцитов прово5 дится позже, по сравнению от момента отбора проб, настолько тромбоцито5 пения будет более выраженной. В зависимости от их размера и формы, аг5 регации тромбоцитов могут быть подсчитаны как лейкоциты, что приводит, таким образом, к ложному увеличению числа лейкоцитов. Мазок крови по5 зволяет проводить учет агрегатов тромбоцитов.

Макроэнзимы

Возможности образования комплексов с иммуноглобулинами (макроэнзи5 мы) была продемонстрирована для всех ферментов, которые имеют диагно5 стическое значение. В результате этого происходит повышение периода по5 лураспада этих ферментов, что связано с повышенной ферментной актив5 ностью. Это явление встречается обычно у пожилых пациентов, и является показателем хронических заболеваний. Например:

5 КФК тип I и II определяет ложно завышенные значения КФК5MB;

5 альфа5амилаза проявляется повышенной активностью сыворотки крови, не сопровождаясь увеличением мочевой экскреции.

Парапротеины

Если исследуется проба, содержащая парапротеины, то нужно учитывать возможные интерференции, вытекающие из этого путем одного из следую5 щих механизмов:

5 действие антител;

5псевдогипонатриемия;

5повышенная вязкость;

5активность криоглобулинов и образование геля.

Преципитация парапротеинов ведет к увеличению мутности сыворотки крови и росту очевидных причин увеличения абсорбции света в каждом ди5 апазоне длины волны. В результате этого могут возникать как ложно завы5 шенные результаты, так и ложно заниженные по некоторым параметрам: билирубин, креатинин, фосфор, сидеремия, мочевина, мочевая кислота.

Аутоантитела

Циркулирующие аутоантитела, особенно к гормонам щитовидной железы, могут стать важным фактором искажения результатов в определении гор5 монов Т3 и Т4. Помеченный гормон щитовидной железы свяжется с аутоан5

48

49

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

тителами, что будет причиной выдачи неверных результатов (в сравнитель5 ных тестах будут получены ложно заниженные значения).

Гетерофильные антитела

Являются антителами, направленными к иммуноглобулинам от различных видов животных. Сюда входят человеческие противомышиные антитела, ко5 торые взаимодействуют с моноклональными антителами мышей в иммуно5 химических тестах. Гетерофильные антитела интерферируют путем следу5 ющих механизмов:

5 из5за присоединения захваченных антител определяют изменение структуры места прикрепления или стерически ингибируется связывание антигена с захва5 ченным антителом, выдавая, таким образом, ложно заниженные результаты;

5 способствуют агрегации между захваченными антителами и меченными антителами даже в отсутствие антигена, что приводит к ложно завышенным результатам.

Ревматоидные факторы

Ревматоидными факторами являются антитела типа IgM, специфичные к фрагментам иммуноглобулина G человека. Они интерферируют с иммуно5 химическими тестами по аналогии, как и с гетерофильными антителами.

В данной схеме пример некоторых лабораторных параметров, которые оп5 ределяются в ходе нормально развивающейся беременности, в зависимос5 ти от триместра.

Название исследования

I триместр

II триместр

III триместр

 

 

 

 

 

 

 

Калий

Кальций

Магний

↓↓

Креатинин

↓↓

↓↓

↓↓

Мочевина

↓↓

↓↓

↓↓↓

Мочевая кислота

↓↓

↑/↑↑

Билирубин

↓↓↓

↓↓↓

↓↓

Глюкоза (натощак)

↓↓

↓↓

Общий белок

 

 

↓↓

↓↓

Альбумин

↓↓

↓↓

IgG

↓↓

↓↓↓

↓↓↓

IgM

↓↓

↓↓

↓↓

Щелочная фосфатаза

↑↑

↑↑↑

АЛТ

 

 

 

 

 

 

 

 

 

АСТ

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Альфа5амилаза

↑↑

ГГТ

ЛДГ

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Холестерин

 

 

↑↑

 

 

 

 

 

 

 

ЛПВП

↑↑

↑↑

↑↑

Триглицериды

↑↑↑

↑↑↑↑

↑↑↑↑

Трансферрин

 

 

Ферритин

↓↓

↓↓↓

↓↓↓↓

Гемоглобин

↓/↓↓

↓/↓↓

Гематокрит

↓/↓↓

↓/↓↓

Количество

↓/↓↓

↓/↓↓

эритроцитов

 

 

 

 

 

 

Лейкоциты

↑↑↑

↑↑↑

Моноциты

↑↑↑

↑↑↑

↑↑↑

Нейтрофилы

↑↑↑

↑↑↑↑

↑↑↑↑

50

ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

КОД 4001. АНАЛИЗ КРОВИ РАЗВЕРНУТЫЙ

Развернутый анализ крови является основным тестом и является одним из первых в определении гематологического статуса и диагностики различ5 ных гематологических и не гематологических патологий. Это количествен5 ное определение гематологических параметров, связанное и с исследова5 нием мазка крови, которое дает ценную информацию, ориентируя на пра5 вильное проведение дальнейших целенаправленных специфических лабо5 раторных тестов.

Развернутый анализ крови в лаборатории «СИНЭВО Украина» заключа5 ется в измерении следующих параметров:

Количество лейкоцитов (WBC).

Количество эритроцитов (RBC).

Концентрация гемоглобина (HGB).

Гематокрит (HCT).

Эритроцитарные индексы:

5 средний объем эритроцитов (MCV),

5 среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH),

5 средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC),

5 ширина распределения эритроцитов (RDW5CV).

Количество тромбоцитов (PLT).

Тромбокрит (PCT).

Тромбоцитарные индексы:

5 средний объем тромбоцитов (MPV),

5 ширина распределения тромбоцитов по объемам (PDW).

• Лейкоцитарная формула:

5 нейтрофильные гранулоциты (NEUT),

5 лимфоциты (LYMPH),

5 моноциты (MONO),

5 эозинофилы (EO),

5 базофилы (BASO).

Подготовка пациента: натощак.

Материал: венозная кровь.

Пробирка: вакутайнер с антикоагулянтом K35ЭДТА.

У маленьких детей можно производить взятие капиллярной крови с безы5 мянного пальчика руки в микроконтейнер с антикоагулянтом.

Условия обработки и стабильность пробы: 36548 часов при комнатной температуре 18526 °С или в холодильнике (258 °C). Рекомендуется исследо5 вать пробы в течение 6 первых часов после взятия. Если проба была охлаж5 дена, то необходимо ее оставить при комнатной температуре в течение 205 30 минут, прежде чем проводить исследование.

Метод: поточная цитофлуорометрия с использованием лазерных полу5 проводников и гидродинамической фокусировки.

Анализатор: Sysmex ХТ52000i. Тест#системы: Sysmex (Япония).

Основные показания к назначению анализа:

1.Дифференциальная диагностика заболеваний крови.

2.Мониторирование проводимого медикаментозного лечения.

53

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

Эритроциты (количество «красных клеток», Red blood cells, RBC)

Определение количества эритроцитов лежит в основе оценки эритропо5 эза. Эритроциты являются предметом дальнейшего исследования для опре5 деления концентрации гемоглобина и гематокрита, а уже на основании их анализатор рассчитывает эритроцитарные индексы, которые качественно характеризуют эритроциты в организме:

5 средний объем эритроцитов (MCV),

5 среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH),

5 средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC),

5 ширина распределения эритроцитов (RDW5CV).

Эритроциты являются наиболее многочисленными клетками крови, кото5 рые не содержат ядер и являются наиболее особенными клетками в орга5 низме, главная функция которых состоит в транспорте кислорода из легких

вткани и передачи СО2 из тканей в легкие. Этот процесс осуществляется с помощью гемоглобина, содержащегося в эритроцитах. Форма эритроцитов

ввиде двояковогнутого диска придает оптимальное соотношение объ5 ема/поверхности для обмена газами, и обеспечивает им способность де5 формироваться в ходе микроциркуляции.

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина», 1012 клеток/л:

Дети:

до 1 года: 3,354,9, 156 лет: 3,554,5, 6512 лет: 3,554,7, 12516 лет: 3,655,1. Взрослые:

М: 4,055,0, Ж: 3,754,7.

Коэффициент пересчета:

1012 клеток/л = 106 клеток/мкл = млн/мкл.

Интерпретация результатов Повышенный уровень гемоглобина и/или гематокрита определяет эрит5

роцитоз. Эритроцитоз может возникнуть в результате увеличения общей эритроцитарной массы (полицитемия/абсолютный эритроцитоз) или может быть следствием снижения объема плазмы (относительный эритроци5 тоз/псевдоцитоз).

Сниженный уровень числа эритроцитов определяет анемию. Анемия оп5 ределяется с функциональной точки зрения недостаточной массой эритро5 цитов для обеспечения достаточного количества кислорода в периферичес5 кие ткани. При острой анемии, вызванной кровотечением, количество эрит5 роцитов и концентрация гемоглобина остаются неизменными в первые ча5 сы, в связи с одновременной потерей плазмы. При этом количество эритро5 цитов начинает уменьшаться, по мере осуществления экстренных лечебных мероприятий, направленных на устранение волемического дефицита.

При хронической анемии объем крови остается нормальным из5за ком5 пенсаторного увеличения объема плазмы, а количество эритроцитов и гема5 токрит, как правило, будут низкими. Однако, при выраженном микроцитозе (тяжелая железодефицитная анемия, талассемия) число эритроцитов может оставаться нормальным или даже увеличиться.

Относительная анемия – это состояние, которое характеризуется нор5 мальной массой эритроцитов, но характеризуется увеличенным объемом крови за счет увеличения объема плазмы, например, при беременности,

массивной спленомегалии. В этой ситуации общий белок плазмы находится на нижней границе нормы, в отличие от хронической анемии, когда общий белок находится в пределах нормы.

Для диагностики причин анемии необходимо дополнительное лаборатор5 ное исследование – определение количества ретикулоцитов, исследование окрашенного мазка крови и, возможно, костного мозга.

Классификация анемий

По этиологии

Наследственная

 

 

Приобретенная

По патогенезу

Анемия вследствие кровопотери

 

 

(постгеморрагическая)

 

Анемия вследствие повышенного

 

кроворазрушения (гемолитическая)

 

Анемия вследствие нарушения эритропоэза

По типу кроветворения

Анемия с эритробластическим типом

 

 

кроветворения

 

Анемия с мегалобластическим типом

 

кроветворения

По способности костного

Регенераторная

 

мозга к регенерации

Гиперрегенераторная

 

Гипорегенераторная

 

Арегенераторная

По цветовому показателю

Нормохромная (ЦП = 0,85 5 1,15)

 

 

Гипохромная (ЦП < 0,85)

 

Гиперхромная (ЦП > 1,15)

По размеру эритроцитов

Нормоцитарная (средний диаметр 7,2 мкм)

 

 

Микроцитарная (< 6,5 мкм)

 

Макроцитарная (> 8 мкм)

По клиническому течению

Острая

 

 

Хроническая

 

Интерферирующие факторы:

1.Проведение взятия биологического материала у пациента в положении лежа способствует уменьшению числа эритроцитов и гематокрита на 5510% за счет перераспределения жидкости из интерстициального пространства путем циркуляции, в связи с изменением гидростатического давления на уровне нижних конечностей.

2.Стресс может обуславливать увеличение числа эритроцитов.

3.Длительный венозный застой более 2 минут при проведении венопунк5 ции обуславливает увеличение количества эритроцитов до 10% и значи5 тельное увеличение гематокрита.

4.Дегидратация с последующей гемоконцентрацией (шок, тяжелые ожо5 ги, кишечная непроходимость, рвота и диарея, передозировки диуретиками) может «завуалировать» клинические признаки анемии.

5.Наличие гипергидратации организма (обильные приемы жидкостей) может также обуславливать «ложносниженный» уровень эритроцитов.

Медикаменты Повышают: кортикотропин, кортикостероиды, эритропоэтин, антистеро5

идные препараты, гидрохлоротиазид.

Снижают количество эритроцитов практически все классы лекарствен5 ных средств.

54

55

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

Гематокрит (объем клеточной концентрации, HCT)

Гематокрит измеряет отношение объема, занимаемого эритроцитами и общим объемом крови.

Показания: обнаружение и мониторинг анемии и полицитемии.

Метод определения: автоматический прибор5анализатор рассчитывает гематокрит путем определения числа эритроцитов/л крови и при помощи из5 мерения амплитуды импульсов в эритроцитах методом рассеянного света.

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина», %:

Дети:

до 1 года: 32549. 1516 лет: 32545. Взрослые: 35554.

Интерпретация результатов: гематокрит зависит от массы эритроцитов, среднего объема эритроцитов и объема плазмы. Обычно, когда эритроциты нормальных размеров, то изменения гематокрита обычно распространяются на те же количества эритроцитов. При наличии микро5/макроцитарной ане5 мии соотношение может и не сохраняться. Например, при талассемии гема5 токрит снижается, хотя эритроциты занимают меньший объем, в то время как количество эритроцитов может оставаться нормальным/увеличенным.

Повышенный уровень:

5эритроцитоз,

5полицитемия,

5шок,

5недостаточное потребление жидкости,

5полиурия.

Сниженный уровень:

5 анемии при уровне гематокрита < 30% (0,30),

5 увеличение объема плазмы (например, при беременности). Интерферирующие факторы: физиологически повышенный уровень ге5

матокрита может наблюдаться у новорожденных детей и у людей пожилого возраста. При уровне гематокрита меньше 20% наблюдается развитие ост5 рой сердечной недостаточности. При уровне гематокрита выше 60% наблю5 дается непрогнозируемый процесс свертывания крови. В артериальной кро5 ви уровень гематокрита на 2% выше, чем в венозной крови. Чрезмерное введение антикоагулянтов обуславливает уменьшение объема эритроцитов и, соответственно, снижение гематокрита.

Гемоглобин (HGB)

Гемоглобин является основным составляющим компонентом эритроцита (95% эритроцитарных цитоплазматических белков) и выполняет роль в транспорте O2 и CO2. Гемоглобин – это сложный белок, состоящий из тет5 рамерной молекулы, которая образована из 2 пар полипептидных цепей глобинов, каждая из которых включает группу гемма – комплекс ион5желе5 за с красным пигментом (порфирин), который придает красный цвет крови. Один грамм гемоглобина может переносить 1,34 мл О2 на 100 мл крови. Ге5 моглобин также служит и буфером во внеклеточной жидкости. В тканях, при низких значениях рН, O2 отделяется от гемоглобина и связывается с иона5 ми водорода; в эритроцитах карбоангидраза превращает СО2 в бикарбонат и ионы водорода. По мере связывания ионами водорода с гемоглобином, бикарбонат5ионы выходят во внеклеточное пространство и, вместо каждого бикарбоната иона, соединяются с ионом хлора.

Формы гемоглобина при нормальной циркуляции: 5 диоксигемоглобин (HHb),

5 оксигемоглобин (O2Hb),

5 карбоксигемоглобин (COHb),

5 метгемоглобин (MetHb), которые могут определяться в кровяном русле. Показания: вместе с гематокритом и числом эритроцитов используется

для обнаружения и контроля динамики анемии и полицитемии.

Метод определения: гемоглобин определяется автоматически, с помо5 щью фотометрического метода, вследствие преобразования в SLS5Hb при помощи лаурилсульфат натрия.

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина», г/л:

Дети:

до 1 года: 1005140. 156 лет: 1105145. 6516 лет: 1155150. Ж: 1205140.

М: 1305160.

Коэффициент пересчета:

ммоль/л = г/л х 0,0621 ммоль/л = г/дл х 0621 г/дл = ммоль/л х 1,61 г/л = ммоль/л х 16,1

Интерпретация результатов: при беременности концентрация гемогло5 бина уменьшается на 253 г/л за счет непропорционального роста объема плазмы относительно эритроцитарной массы. У новорожденных детей эри5 троцитарная масса при рождении выше, чем у взрослых, и постоянно умень5 шается в первую неделю жизни, а уровень гемоглобина может доходить до 9 г/дл на 11512 неделе жизни (физиологическая анемия). Уменьшение кон5 центрации гемоглобина происходит гораздо раньше и является более выра5 женным у недоношенных детей. При концентрации гемоглобина меньше 5 г/дл появляются признаки острой сердечной недостаточности. При концен5 трации гемоглобина выше 20 г/дл наблюдается закупорка капилляров вследствие сгущения крови.

Повышенный уровень происходит при эритроцитозе/полицитемии. Пос5 ле длительного нахождения на высоте происходит соответствующее увели5 чение гемоглобина на 1 г/л на высоте 2000 м над уровнем моря.

Сниженный уровень гемоглобина обуславливает возникновение ане5 мии. Гемоглобин следует оценивать вместе с показателем гематокрита, ко5 личеством эритроцитов, эритроцитарными показателями и клеточной мор5 фологией в мазке для классификации анемий.

Интерферирующие факторы: интенсивные физические нагрузки могут обуславливать увеличение концентрации гемоглобина в крови. Большин5 ство медикаментозных препаратов снижают уровень гемоглобина.

ЭРИТРОЦИТАРНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ

Оценка эритроцитов с точки зрения объема и содержания гемоглобина достигается путем измерения или расчета следующих параметров:

Средний объем эритроцита (MCV) – это объем, занимаемый одним эритроцитом.

Метод определения: расчет по формуле:

56

57

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

MCV =

гематокрит (%) х 10

кол5во эритроцитов x 106/мкл

 

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина», фемолитры (fL):

Дети:

до 1 года: 775100. 1516 лет: 78598. Взрослые: 76596.

Интерпретация результатов: совместно с другими эритроцитарными по5 казателями, расчет среднего объема эритроцита может помочь в раннем вы5 явлении некоторых процессов, вызывающих анемию. Показатель MCV во многом зависит от плазматической осмолярности и общего количества эри5 троцитов. При мегалобластной анемии морфологическим отличием является наличие анормальных предшественников эритроцитов в костном мозге, ко5 торые характеризуются увеличенными размерами и специфическими по5 вреждениями в хроматине ядер. Эти различные клетки представляют мор5 фологическое выражение одной биохимической патологии, как задержка синтеза ДНК. Процесс синтеза гемоглобина при этом не нарушается, в то время как скорость деления клеток снижается. Гемоглобин в этом случае об5 разуется в избытке, как следствие «запаздывания» процесса деления кле5 ток, что приводит к образованию эритроцитов увеличенных размеров. Обна5 ружение макроовалоцитов и нейтрофилов с гиперсегментированным ядром

вмазке крови позволяет дифференцировать мегалобластные анемии.

Виды нормоцитарных анемий:

1.Анемия, связанная с соответствующим эритропоэтическим отве#

том:

• постгеморрагическая анемия,

• гемолитическая анемия.

2.Анемия, связанная с пониженной секрецией эритропоэтина:

5почечная,

5печеночная,

5снижение потребности тканей в кислороде,

5анемия при заболеваниях эндокринной системы,

5при белково5калорийной мальнутриции,

5анемия при хронических заболеваниях.

3.Анемия, связанная с неадекватной медуллярной реакцией:

5апластическая анемия (панцитопения),

5медуллярно5инфильтративные заболевания (первичные или вторич5 ные гематологические),

5миелодиспластические анемии,

5дисэритропоэтические анемии,

5ранний дефицит железа.

Виды микроцитарных анемий 1. Патология метаболизма железа:

железодефицитная анемия,

анемия хронических заболеваний,

врожденная атрансферринемия,

микроцитарная врожденная гипохромная анемия с перегрузкой желе5 зом.

2.Патологии синтеза молекулы глобина:

альфа5 и бета5талассемии,

синдромы гемоглобина E (AE, EE, E5бета5талассемия),

синдромы гемоглобина C (AC, СC),

нестабильные гемоглобины.

3.Патологии синтеза гема и порфирина:

наследственные сидеробластные анемии (X5связанные, аутосомные),

приобретенные сидеробластные анемии (анемии идиопатические сиде5 робластные с кольцевидными сидеробластами, сидеробластные ане5 мии, связанные с миелопролиферативными заболеваниями или други5 ми злокачественными новообразованиями, при алкоголизме, лекар5 ственной зависимости, при отравлении свинцом),

железодефицитная анемия.

Патогенетическая классификация мегалобластных анемий 1. Дефицит витамина В12:

А.Белковая недостаточность (строгое и длительное вегетарианство, фе5 нилкетонурия).

Б. Нарушение всасывания:

• пернициозная анемия (аутоиммунное заболевание, характеризующее5 ся атрофией желудка и утратой внутреннего фактора),

• наследственный дефицит внутреннего фактора (злокачественная на5 следственная анемия),

• нарушение всасывания витамина В12 из пищи при оперативных вмеша5 тельствах на желудке, при гастрите и ахлоргидрии, инфицирование ви5 русом Helicobacter pylori),

• недостаточность функции поджелудочной железы,

• синдром Золлингера5Эллисона,

• при бактериальной пролиферации тонкого кишечника (структурные аномалии: дивертикулы, стриктуры, свищи), а также при заражении

Diphyllobothrium latum,

• заболевания кишечника: воспалительные заболевания кишечника, це5 лиакия, спру, резекции кишечника с наложением анастомозов, назна5 чение лучевой терапии при поражении подвздошной кишки, инфильт5 ративные заболевания кишечника,

• наследственная селективная мальабсорбция витамина В12,

• мальабсорбция витамина B12, вызванная токсинами и медикаментами (этиловый спирт, метформин, неомицин, холестирамин, парааминоса5 лициловая кислота).

C. Дефекты внутриклеточного транспорта и метаболизма витамина В12:

• наследственные заболевания, связанные с внутриклеточным метабо5 лизмом кобаламина (ацидурия метилмалоновой кислоты и гипергомо5 цистеинемия),

• дефицит транскобаламина.

2. Дефицит фолатов:

А.Белковая недостаточность (у недоношенных новорожденных, при фе5 нилкетонурии, злоупотреблении алкоголем).

Б. Повышенные потребности: беременность, период лактации, дети в пе5 риод роста и полового созревания, хроническая гемолитическая анемия, опухолевые заболевания, гипертиреоидизм.

В. Повышенные затраты: при проведении гемодиализа. Г. Мальабсорбция фолатов:

58

59