6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Лабораторный справочник СИНЭВО

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

(РФ), хотя признан факт, что этот тест имеет сниженную специфичность, и иногда является негативным при этом заболевании (серонегативный ревма5 тоидный артрит). В 1998 году впервые был описан новый тип антител, кото5 рые, что доказано, имеют высокую специфичность более 95% и чувстви5 тельность 80% для ревматоидного артрита. Идет речь об антителах к цикли5 ческому цитрулиновому пептиду (А5ССР) с ключевой ролью в патогенезе этого заболевания.

Многочисленные исследования показали, что:

•Существует тесная взаимосвязь между HLA5DR4 и положительным ре5 зультатом А5ССР.

•Цитрулиновые антигены присутствуют в воспаленной синовиальной оболочке.

•А5ССР антитела вырабатываются локально в синовиальной оболочке, а

плазмоциты, секретирующие эти антитела, выделяются от пациентов с ревматоидным артритом.

Материал: венозная кровь.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 7 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: иммунохимический с электрохемилюминесцентной детекцией (ECLIA).

Анализатор: Cobas 6000 (е 601 модуль). Тест#системы: Roche Diagnostics (Швейцария).

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина»:

до 7,0 нг/мл.

Основные показания к назначению анализа:

•Диагностика ревматоидного полиартрита на ранних стадиях.

•Дифференциальная диагностика воспалительных процессов в суставах.

•Дифференциальная диагностика РН с другими коллагеновыми заболе5 ваниями, такими как эрозивная СКВ.

•Подтверждение диагноза при негативных РП.

•Прогностические цели (высоки титры, связанные с эрозионными забо5 леваниями).

•Формирование терапевтических стратегий.

КОД 2079. Антитела к кардиолипину Ig G КОД 2080. Антитела к кардиолипину Ig М

Кардиолипидные антитела относятся к группе антикардиолипидных анти5 фосфолипидных антител, специфичных для отрицательно заряженных фо5 сфолипидов, компонентов клеточных мембран. Кардиолипин – это фосфо5 липидная кислота, полученная из глицерина, была выделена в 1941 году из бычьего сердца, откуда и происходит название. Антикардиолипидные анти5 тела часто присутствуют у лиц с антифосфолипидным синдромом (АФС). Является аутоиммунным заболеванием, характеризующимся повторными артериальными и венозными тромбозами, рецидивирующими потерями бе5 ременности и/или тромбоцитопенией, связанными с наличием антикардио5 липидных антител, волчаночного антикоагулянта или анти5β2 гликопротеин5 I антител. Существуют несколько клинических форм антифосфолипидного синдрома: первичный (53% случаев), или в сочетании с другими аутоиммун5

ными заболеваниями (СКВ, синдром Шегрена, склеродермия, смешанное заболевание соединительной ткани, ревматоидный артрит, псориатический артрит, васкулит, болезнь Крона и т.д.). Большинство антикардиолипидных антител распознают антигенные мишени β25гликопротеин5I, выраженные на поверхности эндотелиальных клеток и тромбоцитов. Анти5β2 гликопротеин5I антитела активируют эндотелиальные клетки, моноциты и тромбоциты, ха5 рактеризуясь прокоагулянтными свойствами. Антикардиолипидные антите5 ла являются более чувствительными, чем волчаночный антикоагулянт, в об5 наружении антифосфолипидного синдрома. Антитела присутствуют у 80590% пациентов с антифосфолипидным синдромом, встречаясь в пять раз чаще при этом заболевании, чем волчаночные антикоагулянты. Однако вол5 чаночный антикоагулянт считается более специфическим, чем антикардио5 липидные антитела. Таким образом, когда возникают подозрения антифо5 сфолипидного синдрома, то рекомендуется проведение обоих тестов.

Материал: венозная кровь.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 5 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: непрямой 25ступенчатый хемилюминесцентный иммуноанализ (CLIA).

Анализатор: Liaison.

Тест#системы: DiaSorin (Италия).

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина» Антитела к кардиолипину Ig М, MPL Ед/мл:

<13 – отрицательный результат.

13514,9 – сомнительный результат.

15539,9 – низко положительный результат.

40579,9 – умеренно положительный результат. > 80 – высоко положительный результат.

Антитела к кардиолипину Ig G, GPL Ед/мл:

<20 – отрицательный результат.

20539,9 – низко положительный результат.

40579,9 – умеренно положительный результат. > 80 – высоко положительный результат.

Основные показания к назначению анализа:

1.Венозный или артериальный тромбозы, происходящие у молодых людей.

2.Спонтанные аборты.

3.Преждевременные роды.

4.Рождение мертвого ребенка или недоношенных детей.

5.Оценка рисков тромбообразования больных с диагнозом заболеваний соединительной ткани.

6.Оценка необъяснимых тромбоцитопений.

Интерпретация результатов: Кардиолипиновые антитела могут быть об5 наружены и у здоровых людей из общей популяции (256,5% от антител IgG). Уровень этих антител еще выше при нормальной беременности, где процент обнаружения для IgG может достигать 10%. Многие из этих антител являют5 ся транзиторными и не связаны с антифосфолипидным синдромом. Кроме того, эти антитела могут присутствовать при инфекциях типа гепатита С, малярии, болезни Лайма, сифилисе, ВИЧ5инфекции, лейкемии, солидных опухолях и нередко – при алкогольном циррозе печени. В связи с этими фак5

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

торами, диагноз антифосфолипидного синдрома должен основываться не на единственном определении, а в сочетании с клиническим анамнезом и дополнительными видами диагностики.

КОД 2044. Антимикросомальные антитела (АМС гепато# логические, LKM1 антитела)

АМС гепатологические вырабатываются к микросомальным антигенам пе5 чени и почек и представляют собой серологический маркер для аутоиммун5 ного хронического гепатита. Эта форма аутоиммунного гепатита обычно на5 чинается в детском возрасте и характерна для возрастной группы от 2 до 14 лет. Главным эпитопом для АМС гепатологических является энзим5ком5 плекс P450. Эти антитела могут возникать также при хроническом вирусном гепатите С в 8% случаев. Их присутствие при вирусном гепатите указывает на аутоиммунный процесс, вызываемый вирусом. Лечение препаратами ин5 терферона у этих пациентов необходимо проводить под пристальным конт5 ролем, так как существует риск усугубления развития болезни.

Материал: венозная кровь.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 5 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: ИФА. Анализатор: ELISA.

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина», МЕ/мл:

до 20,0 – отрицательный результат. 20,0525,0 – сомнительный результат. более 25,0 – положительный результат.

Интерпретация результатов: получение отрицательного результата не исключает наличия аутоиммунного гепатита.

КОД 2050. Антиспермальные антитела

Систематические исследования показали наличие иммуногенных свойств у семенных клеток в ходе выявления выработки аутоантител у мужчин или антител у женщин. Согласно литературным данным показано, что как у муж5 чин, так и у женщин могут вырабатываться антитела к человеческим спер5 матозоидам. Этот нарушенный иммунологический статус может значитель5 но влиять на фертильность. Хотя причины возникновения этих антител не были до конца установлены, антиспермальные антитела выступают в каче5 стве важного фактора, вызывающего бесплодие за счет иммунологическо5 го механизма. Таким образом, антиспермальные антитела обнаруживаются в 30% у пациентов с бесплодием по неясной этиологии. Сперматозоиды от5 делены от иммунной системы человека так называемым гематотестикуляр5 ным барьером. Когда возникает нарушение этого барьера, как это происхо5 дит в случае травмы яичек, вазэктомии, обструкции или инфекции придат5 ка яичка, сперматозоиды проникают в кровоток и действуют как иммуноге5 ны. Механизм, с помощью которого происходит проникновение антител в сыворотку крови в организме женщины, известен не до конца. Подтвержде5 но, что вирусные инфекции или неспецифические бактериальные инфекции вызывают выработку антител, которые путем перекрестной реакции вза5 имодействуют с антигенами сперматозоидов. Недавно была принята во вни5

мание возможность наличия аутоиммунного процесса, связанного с анти5 спермальными антителами. Только клинически значимые антитела являют5 ся специфическими антителами для плазматической мембраны спермато5 зоидов. Эти антитела способны влиять на подвижность сперматозоидов и их участие в процессе оплодотворения. Таким образом, наличие антител ин5 терферируют с акросомальной реакцией, активностью, пенетрацией через цервикальную слизь, прикреплением сперматозоидов к яйцеклетке, эффек5 тивным проникновением сперматозоидов и оплодотворением яйцеклетки.

Материал: венозная кровь.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 5 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: ИФА. Анализатор: ELISA.

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина», Ед/мл:

до 55,0 – отрицательный результат. 55,0565,0 – серая зона.

более 65,0 – положительный результат.

Основные показания к назначению анализа:

Умужчин: агглютинация сперматозоидов в эякуляте, перенесенная трав5 ма яичек или биопсия, вазэктомия; генитальные инфекции, обструктивные поражения протоков.

Уженщин: анормальный посткоитальный тест, перенесенные половые инфекции, отсутствие других причин бесплодия.

КОД 1062. Ревматоидный фактор, РФ (RF)

Ревматоидные факторы представляют собой гетерогенную группу аутоан5 тител к антигенным детерминантам Fс5области IgG5молекул, которые обра5 зуют IgG5анти5IgG комплексы в кровотоке или синовиальной жидкости. Они, как правило, являются антителами типа IgM, но могут быть типа IgG и IgA. Сывороточный уровень ревматоидного фактора повышается более чем у 70% больных ревматоидным полиартритом, играя важную роль в формиро5 вании внесуставной симптоматики. Ревматоидный фактор появляется зара5 нее до начала заболевания и иногда опережает клинические проявления за5 болевания на несколько лет. При выявлении ревматоидного фактора риск возникновения ревматоидного артрита повышается в 5540 раз выше, в срав5 нении с таким у серонегативных лиц. РФ не участвует в инициировании вос5 палительного процесса, который вызывает ревматоидный артрит, но, веро5 ятно, обуславливает его сохранение и обострение. В зависимости от нали5 чия или отсутствия ревматоидного фактора, ревматоидный полиартрит по5 дразделяется на 2 категории: серопозитивный и серонегативный. У пациен5 тов с серопозитивным РА в несколько раз выше, по сравнению с пациента5 ми с серонегативным РА, риск развития эрозивного артрита с потерей функ5 циональной способности суставов и внесуставными проявлениями, такими как ревматоидные узлы, поражение легочной ткани, васкулиты, синдром Фелти (спленомегалия и нейтропения ассоциированные с ревматоидным артритом), полинейропатией, серозиты и вторичным синдромом Шегрена. Ревматоидный фактор не является специфичным для ревматоидного артри5 та, и определяется также и при других заболеваниях соединительной ткани, а также при хронических инфекциях (эндокардит, туберкулез, гепатит В).

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

Материал: венозная кровь.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 7 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: латекс5иммунотурбидиметрический. Анализатор: Cobas 6000 (с 501 модуль). Тест#системы: Roche Diagnostics (Швейцария).

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина»:

до 14,0 МЕ/мл

Основные показания к назначению анализа:

1.Дифференциальная диагностика и прогнозирование воспалительных заболеваний суставов (артриты).

2.Тест5скрининг применяется в случае предположения смешанной крио5 глобулинемии II типа или синдрома Шегрена.

3.Последовательный мониторинг состояния больных с синдромом Шегре5 на (исчезновение ревматоидного фактора может стать сигналом начала возникновения лимфомы).

Интерпретация результатов

Обнаружение РФ является одним из критериев ACR (Американский кол5 ледж ревматологии) диагностики ревматоидного артрита. Высокие титры являются более специфичными для диагностики ревматоидного артрита. В таблице ниже представлены другие состояния, сопровождающиеся появле5 нием ревматоидного фактора:

Также наблюдаются и при других состояниях:

1.Бактериальные инфекции: подострый бактериальный эндокардит, сальмонеллез, бруцеллез, туберкулез, сифилис.

2.Вирусные инфекции: эпидемический паротит, краснуха, грипп, хрониче5 ский гепатит.

3.Паразитарные инфекции.

4.Заболевания легких: саркоидоз, интерстициальный фиброз, силикоз, асбестоз.

5.Первичный билиарный цирроз.

6.Злокачественные новообразования (особенно лейкемия и рак толстой кишки).

Интерферирующие факторы: общепринятые аналитические методы имеют определенные ограничения в обнаружении ревматоидного фактора типа IgM, тогда как тип IgG или IgA обнаруживается только частично. Одна5 ко существует лишь небольшое число пациентов с ревматоидным артритом с ревматоидным фактором IgA или IgG типов без наличия ревматоидного фактора IgM. С другой стороны, положительный результат для всех трех ти5 пов иммуноглобулинов считается специфическим для лечения ревматоид5 ного артрита. Кроме того, во многих случаях высокие титры ревматоидного фактора IgG или IgA связаны с прогрессированием эрозивных поврежде5 ний. Внесуставные проявления РА, считаются ассоциированными, прежде всего, с ревматоидным фактором типа IgA. Отсутствие РФ не исключает ди5 агноза ревматоидного артрита, особенно если проведено единичное иссле5 дование. Более чувствительным и более специфическим маркером являет5 ся А5ССР. Слегка повышенные уровни РФ можно наблюдать с определен5 ным процентным повышением (до 20%) среди лиц старше 60 лет при отсут5 ствии болезни. После некоторых вакцинаций может возникать транзиторное повышение ревматоидного фактора.

КОД 9168. Антитела IgA к глиадину КОД 9169. Антитела IgG к глиадину

Заболевание целиакия характеризуется хронической непереносимостью спирторастворимых фракций глютена пшеницы и ячменя, ржи и овса. Из них глиадин является наиболее токсичным компонентом клейковины. Гисто5 патологические изменения тонкого кишечника представлены в виде: лим5 фоцитарного инфильтрата, гиперплазии крипт и атрофии кишечных ворси5 нок. Клиническая картина заболевания весьма разнообразна, от классиче5 ской формы с тяжелыми желудочно5кишечными расстройствами и синдро5 мом мальабсорбции до бессимптомных или латентных форм, среди которых последние способны перейти в манифестные формы с течением времени. Герпетиформный дерматит является частным внекишечным проявлением непереносимости клейковины. Среди категорий пациентов с высоким рис5 ком развития целиакии учитываются родственники первого поколения, страдающих данным заболеванием, пациенты с сахарным диабетом, синд5 ромом Шегрена, синдромом Дауна, селективным дефицитом IgA. Целиакия была также описана и у некоторых людей с неврологическими проявления5 ми неизвестного генеза, такими как мозжечковая атаксия, невропатия, эпи5 лепсия, мигрень. Нелеченную целиакию связывают с повышенным уровнем заболеваемости и смертности из5за развития злокачественных новообразо5 ваний желудочно5кишечного тракта. Как гистологические изменения, так и симптомы ремитируют после введения безглютеновой диеты.

Материал: венозная кровь.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 7 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: ИФА. Анализатор: ELISA.

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина», Ед/мл:

менее 12.0 – отрицательный результат более или равно 12.0 – положительный результат

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

Основные показания к назначению анализа:

1.Диагностика целиакии.

2.Мониторинг проводимой терапии.

Интерпретация результатов: определение в сыворотке крови антител, разных к глиадину, в комбинации с антителами к тканевой трансглутамина5 зе является неинвазивным инструментальным методом как для скрининга целиакии, так и для мониторинга пищевой совместимости. Особенно такая комбинация касается пациентов с селективной недостаточностью антител класса IgA, ассоциированной с целиакией, при которой обычно первый тест показывает отрицательный результат. Нормализация уровня антител IgG к глиадину регистрируется через 6512 месяцев после введения антиглютено5 вой диеты, и четко показывают стойкую взаимосвязь с режимом питания. С другой стороны, сохранение высокого уровня антител в крови свидетельст5 вует о неэффективности назначаемого лечения или несоблюдения пациен5 том режима лечения.

Интерферирующие факторы: возможно получение ложноположитель5 ных результатов уровня антител без наличия гистопатологических пораже5 ний, особенно у пациентов с болезнью Крона, мальабсорбцией, вызванной кишечными инфекциями или непереносимостью некоторых алиментарных белков (например, коровье молоко). По этой причине данный результат сле5 дует интерпретировать в комплексе с другими клиническими данными, и уточнение диагноза может быть сделано только на основании биопсии сли5 зистой оболочки кишечника.

КОД 2046. Антитела IgG к двухспиральной ДНК (ADNA 2, anti#ds#DNA)

Общей отличительной чертой системных ревматоидных заболеваний яв5 ляется присутствие в кровотоке аутоантител к различным клеточным анти5 генам. Антитела к дцДНК относятся к антиядерным антителам (АЯА), на5 правленным против различных структур клеточного ядра. Антитела к дцДНК являются маркером больных активной формой системной красной волчан5 ки, их появление коррелирует с началом волчаночного нефрита. Наличие антител к дцДНК строго указывает на данное заболевание, однако их отсут5 ствие не во всех случаях позволяет исключить заболевание системной крас5 ной волчанкой. Низкие титры антител к дцДНК обнаруживаются в крови в случае других ревматоидных заболеваний и, с меньшей частотой, у людей без симптомов ревматоидных заболеваний. Согласно ряду исследований существует корреляция между степенью заболевания и флуктуациями кон5 центрации антител. Следовательно, количественное определение аутоанти5 тел к дцДНК имеет большое значение для терапии больных ревматоидными заболеваниями, например, для контроля над течением болезни, оценки ак5 тивности болезни (которая находится в прямой зависимости от титра анти5 тел в кровотоке) и результата лечения. Для определения антител к дцДНК был разработан ряд методов. Наибольшее распространение получил метод непрямой иммунофлуоресценции с использованием в качестве субстрата простейшего жгутикового микроорганизма Crithidia luciliae, радиоиммуно5 анализ по Фарру и, в последнее время, твердофазный иммуноферментный анализ ELISA. Чувствительность, специфичность, трудоемкость и объектив5 ность методик может существенно варьировать.

Материал: венозная кровь.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 7 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: непрямой 25ступенчатый хемилюминесцентный иммуноанализ (CLIA).

Анализатор: Liaison.

Тест#системы: DiaSorin (Италия).

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина», Ед/мл:

менее 20,0 – отрицательный результат. от 20,0 до 25,0 – сомнительный результат. более 25,0 – положительный результат.

Основные показания к назначению анализа:

1.Диагностика системной красной волчанки (СКВ).

2.Оценка клинической фазы течения заболевания.

3.Мониторинг проводимой терапии.

Интерпретация результатов: при эффективной и успешной терапии кон5 центрация ADNA 2 значительно снижается. Ежемесячный мониторинг уров5 ня антител в крови позволяет предсказать возможный рецидив заболевания и прогноз. Уровень ADNA 2 тесно коррелируют с концентрацией IgG5содер5 жащих циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови больных СКВ. Выявление ADNA 2 и гипокомплементемии представляют со5 бой дополнительно диагностические тесты, выявляющие категорию боль5 ных с высоким риском развития волчаночного гломерулонефрита.

КОД 2047. Антитела IgG к фосфолипидам КОД 2048. Антитела IgM к фосфолипидам

Антитела классов IgG и IgМ – показатель наличия антител к фосфолипидам клеточных мембран, а также одни из маркеров антифосфолипидного синдрома (АФС). В 1986 года английский ученый Хьюз обнаружил существование синдро5 ма, в основе которого лежит развитие аутоиммунной (аллергия к собственным тканям) реакции к фосфолипидным комплексам, присутствующим на мембранах тромбоцитов, внутренней оболочки кровеносных сосудов и клетках нервной тка5 ни. Этот сидром был назван антифосфолипидным (АФС) или синдромом Хьюза. Было установлено, что при некоторых системных, поражающих все аналогичные ткани в организме, заболеваниях в организме происходит дисбаланс и антитела начинают вырабатываться по отношению к собственным тканям, в данном слу5 чае – к фосфолипидам. Прикрепляясь к стенкам сосудов, тромбоцитам, непо5 средственно вступая в реакции свертывания крови, комплексы антиген5антитело приводят к развитию тромбозов. Широкое распространение фосфолипидов опре5 деляет системный характер проявлений заболевания при антифосфолипидном синдроме. Признаки заболевания зависят от того, какой именно кровеносный со5 суд поражен и какие при этом появляются проявления. Большое значение имеет и скорость закупорки сосуда: он может закрываться медленно формирующимся тромбом или быстро – тромбом, который оторвался от стенки другого, более крупного кровеносного сосуда. В последнем случае будет картина острого вне5 запного заболевания, например, инфаркта миокарда или инсульта. Если же тромб формируется постепенно, то часто успевают развиться новые веточки кро5 веносных сосудов (коллатерали) в обход пораженного, и заболевание может про5 текать незаметно. При беременности такая закупорка кровеносных сосудов мо5 жет стать причиной плацентарной недостаточности и невынашивания беремен5 ности. У людей с АФС могут быть и общие визуальные признаки заболевания, на5 пример, тоненькая кружевная сеточка сосудов на поверхности кожи (ливедо, ча5

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

сто бывает на щеках), которая особенно отчетливо видна на холоде. Другим об5 щим признаком АФС являются трудно поддающиеся лечению язвы в области го5 лени, а также гангрена (отмирание тканей) пальцев рук и ног. У мужчин проявле5 нием АФС чаще бывает инфаркт миокарда, а также часто поражаются сосуды пе5 чени и почек. Иногда АФС проявляется тромбозом кровеносных сосудов, снабжа5 ющих кровью желудочно5кишечный тракт. В этом случае у больных после еды по5 являются сильные приступообразные боли в области живота («ложный острый живот»).

Материал: венозная кровь.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 7 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: ИФА. Анализатор: ELISA.

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина»:

до 10,0 Ед/мл.

Основные показания к назначению анализа:

1.Необъяснимые тромбозы.

2.Бесплодие.

3.Повторное или привычное невынашивание плода.

4.Тромбоцитопения.

Интерпретация результатов: увеличение концентрации антител IgM сви5 детельствует об остром развитии антифосфолипидного синдрома. Низкая концентрация антител класса IgМ наблюдается при ревматоидном артрите, синдроме Шегрена, лекарственно5индуцированной красной волчанке, бо5 лезни Лайма и сифилисе.

В данной таблице представлена краткая информация о специфичес# ких показателях при некоторых ревматических заболеваниях:

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

ротки, так как мешающие проведению теста перекрестно5реагирующие ан5 титела в спинномозговой жидкости присутствуют реже, чем в сыворотке, в связи с чем положительная реакция ожидается только в случае наличия нейроборрелиоза.

Материал: венозная кровь.

Пробирка: вакутайнер с/без антикоагулянта с/без гелевой фазы.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 7 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: непрямой 25ступенчатый хемилюминесцентный иммуноанализ (CLIA).

Анализатор: Liaison.

Тест#системы: DiaSorin (Италия).

Референтные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина», ОЕ/мл Антитела класса Ig M:

менее 18 ОЕ/мл – отрицательный результат. от 18 до 22 ОЕ/мл – сомнительный результат. более 22 ОЕ/мл – положительный результат.

Антитела класса IgG:

менее 10 ОЕ/мл – отрицательный результат. от 10 до 15 ОЕ/мл – сомнительный результат. более 15 ОЕ/мл – положительный результат.

Интерпретация результатов: на ранних стадиях заболевания у 50% па5 циентов наблюдается уровень антител ниже порога позитивных значений, поэтому отрицательный результат не исключает диагноза заболевания. Мо5 гут быть и бессимптомные носители B.burgdorferi, поэтому у них наблюдают5 ся и положительные иммунологические значения.

ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ

КОД 2019 Антитела IgG к цитомегаловирусу (CMV) КОД 2020 Антитела IgМ к цитомегаловирусу (CMV) КОД 2070 Авидность IgG цитомегаловирус

Цитомегаловирус является частью того же семейства, что и вирус просто5 го герпеса и вирус ветряной оспы. Помимо вируса человека, существует ци5 томегаловирус животных, совершенно отличающийся от вируса человека. Цитомегаловирус был выделен в 1956 году и назван из5за характерного ци5 топатологического эффекта: клетки, пораженные вирусом, гипертрофиру5 ются и содержат объемные эозинофильные внутриядерные включения со специфическим аспектом «совиные глаза». Цитомегаловирусная инфекция является чрезвычайно распространенной, в то время как клиническое забо5 левание является более редким следствием данной общей инфекции (805 100% взрослых имеют специфические антитела как доминирующий резуль5 тат бессимптомных инфекций). В настоящее время цитомегаловирусная ин5 фекция считается основной проблемой общественного здравоохранения по следующим причинам:

•повышенная частота врожденных инфекций,

•характер персистирующей вирусной инфекции с возможностью реакти5 вации, особенно у иммуноослабленных лиц и лиц, перенесших транс5

плантацию органов, и с вовлечением вируса в посттрансфузионной па5 тологии (посттрансфузионный синдром, посттрансфузионный цитоме5 галовирусный гепатит).

Человек является единственным природным резервуаром человеческого цитомегаловируса (цитомегаловирусы животных не являются заразными для человека). Путь передачи инфекции является различным. Вирус нахо5 дится в моче и слюне инфицированных людей, во влагалищных выделени5 ях, сперме и грудном молоке. Плод может инфицироваться в утробе матери, но чаще происходит за счет перинатального инфицирования, в результате соприкосновения новорожденного с секретирующейся цервикальной сли5 зью, после родов в результате контакта с инфицированными продуктами, выделениями матери (слюна, молоко и т.д.). Другой распространенный спо5 соб (более 50% инфекций) передачи происходит через поцелуи и сексуаль5 ные контакты. Также возможны и ятрогенные пути передачи при перелива5 нии крови (вирус находится в лейкоцитах), либо при трансплантации орга5 нов (например, почки) от практически здоровых людей. Вирус персистирует в организме в латентной форме в течение длительного времени. Инфекция не вызывает стойкого иммунитета. При этом вирус продолжает элиминиро5 ваться из организма даже в присутствии специфических антител. Тогда, ко5 гда наблюдается снижение резистентности организма (длительная иммуно5 супрессивная терапия, истощающие заболевания, включая СПИД), латент5 ная инфекция может клинически проявляться (гепатит, пневмония, энцефа5 лит), иногда – со смертельным исходом. Период заразности длится (череду5 ясь с безопасными периодами) месяцами, годами или всю жизнь, когда ви5 рус выделяется с мочой или слюной у 5% детей, у 152% взрослых и у 10% беременных женщин. Первичная инфекция у взрослых протекает бессимп5 томно в большинстве случаев; когда появляются симптоматика, то возмож5 ны различные клинические картины: лихорадочное состояние неясной эти5 ологии, картина инфекционного мононуклеоза с гетерофильными негатив5 ными антителами, гепатит с желтухой. Беременные женщины имеют повы5 шенную реактивность к цитомегаловирусной инфекции (в 6 раз выше, по сравнению с остальной частью взрослого населения). Инфекция передает5 ся половым путем, при переливании крови или за счет реактивации латент5 ной инфекции. При первичной инфекции беременной (около 10560% подвер5 жены во взрослом возрасте) риск инфицирования плода является наиболь5 шим (до 50%). Вертикальная передача инфекции в течение первых 4 меся5 цев беременности несет наиболее серьезные последствия (гепатит, глухота, микроцефалия). В случае реактивации латентной инфекции (0,750,9% бере5 менных) риск инфицирования плода является очень низким или даже отсут5 ствует (дети соответственно остаются без патологий или с субклинической инфекцией). Посттрансфузионый синдром возникает в 356% после перели5 вания крови и проявляется лихорадкой, аденопатией, гепатоспленомегали5 ей, высыпаниями и иммунопатологическими нарушениями (ревматоидный фактор, антиядерные антитела, холодовые агглютинины, криоглобулины, положительная реакция Кумбса). Пациенты характеризуются повышенным титром антител, специфичных для цитомегаловирусной инфекции, тем са5 мым подтверждая цитомегаловирусную природу инфекции, занесенной при переливании крови. Иммунный ответ на цитомегаловирус предполагает синтез специфических антител класса IgM в течение нескольких недель пос5 ле заражения этой инфекцией, а через неделю – образование IgG антител. Уровни антител IgM достигают пика через несколько недель, после чего про5

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

исходит падение в течение 456 месяцев, а иногда они могут сохраняться в течение многих лет.

Материал: венозная кровь.

Пробирка: вакутайнер с/без антикоагулянта с/без гелевой фазы.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 7 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: непрямой 25ступенчатый хемилюминесцентный иммуноанализ (CLIA).

Анализатор: Liaison.

Тест#системы: DiaSorin (Италия).

Интерпретация результатов:

менее 0.4 – отрицательный Рефересные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина»:

Антитела IgG к CMV (МЕ/мл):

менее 0.4 – отрицательный результат. от 0.4 до 0.6 – сомнительный результат. более 0.6 – положительный результат.

Антитела IgМ к CMV (ОЕ/мл):

менее 15 – отрицательный результат. от 15 до 30 – сомнительный результат. более 30 – положительный результат.

Авидность IgG (Индекс):

менее 0.2 – низкая авидность. от 0.2 5 0.3 – средняя авидность. более 0.3 – высокая авидность.

5 отрицательный результат – отсутствие первичного инфицирования. В случае пренатального скрининга беременных женщин – повторить опреде5 ление антител класса IgG на 4 месяце беременности;

5 слабоположительный результат – рекомендуется повторить определение через 152 недели;

5 положительный результат указывает на перенесенное воздействие цито5 мегаловируса и рекомендуется провести исследование на определение авидности к ЦМВ.

Получение отрицательного результата исключает первичную инфекцию и считается, что у беременных женщин существует минимальный риск врож5 денных инфекций у плода, и нет необходимости в проведении дальнейших исследований, но данное решение принимается только лечащим врачом акушером5гинекологом. Обнаружение IgM антител в течение первой недели жизни у новорожденного ребенка может использоваться как наличие иссле5 дования в диагностике врожденной ЦМВ инфекции.

Интерферирующие факторы: на ранней стадии острого инфицирования цитомегаловирусом возможно получение отрицательного результата по на5 личию IgG антител. Для диагностики реактивации инфекции у иммуноослаб5 ленных пациентов необходимо использовать молекулярные методы (ПЦР). Образцы, содержащие антиядерные антитела или другие типы антиткане5 вых антител, могут выдать положительные неспецифические результаты, а гетерофильные антитела в сыворотке крови больных могут взаимодейство5 вать с иммуноглобулинами, входящими в комплект компонентов, и давать неубедительные результаты в определении с помощью хемилюминесцен5

ции. Увеличение уровня антицитомегаловирусных антител IgG и IgM конста5 тировалось и у пациентов, инфицированных вирусом кори, герпеса и виру5 сом ветряной оспы, в связи с перекрестной реактивностью, характерной се5 мейству вирусов герпеса. Кроме того, пациенты с острой инфекцией виру5 са Эпштейна5Барр подвержены возможности давать перекрестную реакцию с цитомегаловирусом. Отсутствие антител IgM не исключает возможности врожденной инфекции (10530% инфицированных новорожденных не выра5 батывают специфических антител IgM), тем самым выделение вируса с мо5 чой в течение первой недели жизни остается лучшим способом диагности5 ки врожденных инфекций.

КРАСНУХА

КОД 2032 Антитела IgG к вирусу краснухи КОД 2033 Антитела IgМ к вирусу краснухи

Вирусом краснухи является тогавирус с одноцепочной РНК, вызывающий одну из детских инфекций с кожными высыпаниями. Заражение происходит преимущественно зимой и весной, люди являются единственным извест5 ным носителем вируса. Способ передачи заболевания является прямой и воздушно5капельный (через назофарингеальные выделения). Инкубацион5 ный период длится 253 недели. Инфекция, как правило, доброкачественная и часто протекает с субклинической симптоматикой. При случаях с наличи5 ем симптоматики клиническая картина включает лихорадку, макулопапу5 лезную сыпь (часто – едва заметную) и с коротким периодом высыпания, лимфаденопатии, возможно, насморк и конъюнктивит. Аденопатия при краснухе (обычно в затылочной области, позади и ниже сосцевидного от5 ростка, сбоку на шеи и под нижней челюстью) является постоянным призна5 ком болезни, являясь часто единственным проявлением. Полный анализ крови обычно указывает нейтропению, а в лейкоцитарной формуле харак5 терно появление плазмоцитов и клеток Тюрка, и их пропорция может дости5 гать 5519%. Инфекция оставляет пожизненный иммунитет. Инфицирование вирусом краснухи оставляет очень серьезные последствия, если заболева5 ние происходит в течение первых четырех месяцев беременности. Если бе5 ременная не имеет иммунитета, то существует высокий риск поражения эм5 бриона плода. Врожденная краснуха вызывает тяжелые нарушения, многие из которых необратимы: катаракту, глухоту, гепатоспленомегалию, задерж5 ку психомоторного развития, скелетные аномалии костей, кардиопатии, не5 вропатии. Последствия патологии плода и новорожденного зависят от тера5 тогенности вируса и гестационного возраста, при котором была приобрете5 на инфекция. Общепризнан факт, что риск уменьшается с увеличением сро5 ка беременности; поэтому риск является наибольшим в течение первых двух месяцев беременности (40560%) и постепенно снижается в ходе чет5 вертого и пятого месяца (10520%). Исследования показали, что инфициро5 вание плода происходит редко после второго триместра беременности. В ходе острой инфекции вирус заражает плаценту и может передаваться пло5 ду. Вторичное воздействие вируса или реинфекция редко ассоциируются с внутриутробной передачей вируса, указывая на факт, что материнский им5 мунитет (приобретенный естественно или за счет вакцинации) обеспечива5 ет защиту от инфекции в период внутриутробного развития. Первичное ин5 фицирование матери может привести к:

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

а) отсутствию инфекции у эмбриона, б) рассасыванию эмбриона (только в ходе первой недели беременности),

в) спонтанному прерыванию беременности, г) внутриутробной гибели плода,

д) заражению через плаценту без поражения плода, е) сопутствующим патологиям плаценты и плода.

Иммунологические тесты являются важным инструментальным исследо5 ванием в диагностике и мониторинге острой инфекции. Таким образом, пер5 вичный гуморальный ответ на инфекцию проявляется выработкой специфи5 ческих антител IgM, обнаруживаемых, в большинстве случаев, через не5 сколько дней после появления сыпи, достигающих максимума через 253 не5 дели от начала заболевания. Уровни IgM начинают снижаться в течение 365 70 дней, и редко выявляются после 180 дней (в отдельных случаях – до 1 го5 да). Специфические антитела IgG обычно появляются примерно через 1 не5 делю после формирования антител IgM; их уровень быстро увеличивается, достигая плато на 6510 неделе от начала заболевания, а затем постепенно снижаются до определенного титра (155200 МЕ/мл), который сохраняется на протяжении всей жизни. Реинфекция, которая протекает полностью без симптомов, сопровождается умеренным повышением IgG. Введение вакци5 ны от краснухи в 1969 г. оказало большое влияние на количество врожден5 ных инфекций, хотя эпидемии и вспышки краснухи еще наблюдаются в ми5 ре. Доля неиммунизированных женщин относительно вакцинированного на5 родонаселения составляет около 1,8%, в то время как относительно не при5 витого населения может составлять свыше 40%. Учитывая представленные данные, подчеркивается важность проведения скрининга для определения иммунного статуса матери. Так как вакцина против краснухи противопока5 зана беременным женщинам (теоретический риск, поскольку тератоген5 ность не была продемонстрирована в ослабленном вирусе, содержащимся в вакцине), и тем, кто планирует забеременеть в следующем месяце после вакцинации, то рекомендуется, чтобы скрининг проводился до зачатия, а не5 иммунизированным женщинам вакцина может быть полезна.

Материал: венозная кровь.

Пробирка: вакутайнер с/без антикоагулянта с/без гелевой фазы.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 7 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: иммунохимический с электрохемилюминесцентной детекцией (ECLIA).

Анализатор: Cobas 6000 (е 601 модуль). Тест#системы: Roche Diagnostics (Швейцария).

Референсные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина»: Антитела IgG к вирусу краснухи МЕ/мл):

менее 10,0 5 отрицательный результат более или равно 10,0 5 положительный результат

Антитела IgМ к вирусу краснухи (Индекс):

менее 0,8 5 отрицательный результат от 0,8 до 1,0 5 сомнительный результат

более или равно 1,0 5 положительный результат

Интерпретация результатов

Отрицательный результат – иммунитет отсутствует и, в случае беремен5 ных женщин, необходимо повторить взятие проб для определения IgG на 165 18 неделе беременности, даже при отсутствии известных контактов с виру5 сом краснухи.

Слабоположительный результат – рекомендуется повторить проведение определения через неделю.

Положительный результат – указывает на перенесенную инфекцию/вак5 цинацию/недавнюю инфекцию.

Врожденная инфекция

Так как сыворотка детей в норме содержит IgG, которые пассивно переда5 ются от матери, то диагноз врожденной краснухи устанавливается на осно5 ве наличия антител IgM. Они обнаруживаются в 100% случаев в первые 5 месяцев со дня рождения, в большинстве случаев, в первые 3 месяца. Их частота уменьшается следующим образом: 60% – в возрасте 6512 месяцев, 40% – в возрасте 12518 месяцев и редко обнаруживаются после достижения возраста 18 месяцев.

Поствакцинальный мониторинг

Антитела класса IgM появляются у 80% вакцинированных больных в пер5 вые 3 недели после вакцинации, а антитела IgG, как правило, обнаружива5 ются на 456 неделе после вакцинации и сохраняются на протяжении всей жизни.

Интерферирующие факторы: отсутствие антител IgM при рождении не исключает возможности диагноза врожденной краснухи. Краснуха у ново5 рожденных – редкое клиническое состояние, но должно учитываться, если результат на наличие IgM антител не становится положительным сразу же в послеродовом периоде, и даже позже. Ложноположительные результаты к антителам краснухи IgM могут возникнуть после перенесенного инфекцион5 ного мононуклеоза и, возможно, после других вирусных инфекций типа гер5 песа. Ложноположительные реакции к антителам краснухи IgM были заре5 гистрированы у беременных женщин из5за перекрестных реакций с другими вирусами, например, ЦМВ, кори.

ТОКСОПЛАЗМОЗ

КОД 2030 Антитела IgG к Toxoplasma gondii КОД 2031 Антитела IgM к Toxoplasma gondii КОД 2073 Авидность IgG Toxoplasma gondii

Toxoplasma gondii – это простейшее, принадлежащее к порядку кокцидий, класс Спорозоа, очень близких к роду Изоспора. Жизненный цикл токсо5 плазмы включает 3 типа форм:

5 трофозоит – инвазивная форма, отвечающая за острые проявления ин5 фекции;

5 киста – отвечает за персистентную и латентную инфекции;

5 оoциста – не встречается у людей, а только у кошек (главный хозяин), иг5 рая роль в эволюционном цикле токсоплазмы и передаче инфекции.

Токсоплазма встречается повсеместно в природе, и способна заразить любого млекопитающего, но полный эволюционный цикл происходит только в семействе кошачьих (к которой принадлежат и коты), где паразит размно5 жается и выделяется с фекалиями в форме ооцист. Токсоплазма является

ЛАБОРАТОРНЫЙ СПРАВОЧНИК СИНЭВО

обязательным внутриклеточным паразитом, который имеет тропность к ней5 ронам, микроглии, клеткам сосудистой оболочки и сетчатки, а также и к клеткам ретикулоэндотелиальной системы. Резервуаром инфекции являет5 ся кошка и многие другие виды животных (собаки, свиньи, крупный рогатый скот, овцы, полевые грызуны, дикие и домашние птицы и т.д.), которые мо5 гут служить источниками инфекции для людей. Человек может заразиться при потреблении недостаточно термически обработанного мяса (содержа5 щего цисты), при употреблении пищи, загрязненной почвой (содержащих зрелые цисты) или при контакте с экскрементами кошки (игровые площад5 ки для детей, геофагия, грязные овощи). Трансплацентарный путь передачи инфекции является одной из основных проблем, в связи с серьезными по5 следствиями для будущего плода. Заражение возможно и во время родов. Способы передачи от человека к человеку неизвестны, кроме как в период внутриутробного развития. Редкими путями передачи инфекции являются переливание крови от лиц, находящихся на стадии паразитемии, и зараже5 ние лабораторными инфекциями. Восприимчивость к инфекции повсемест5 ная. Не известны в достаточной мере данные о степени и продолжительно5 сти иммунитета. Известно, что специфические антитела IgG сохраняются в течение всей жизни. По мнению некоторых авторов, инфекция сохраняется в некоторых случаях; обычно устанавливается иммунитет с очищением ор5 ганизма от паразита. Лица с ослабленной иммунной системой (СПИД, дли5 тельная иммуносупрессивная терапия, трансплантация органов) чрезвычай5 но восприимчивы и заболевание у них протекает в тяжелой форме, возмож5 ны осложнения: энцефалит и сепсис. Инфекционная заболеваемость варь5 ирует, в зависимости от возрастной группы и популяции, в диапазоне от 20 до 80%, при этом процент заболеваемости увеличивается с возрастом, как результат положительных серологических тестов, растущих с возрас5 том. Инфекция развивается, в большинстве случаев, бессимптомно. Когда инфекция становится клинически выраженной, тогда больные приобретают синдром аутолюмитантного мононуклеоза с физической астенией и адено5 патией. Период паразитемии точно не определен, однако устанавливается до начала формирования сероконверсии. У ВИЧ5положительных пациентов и лиц с дефектами Т5лимфоцитов или лиц с длительной кортикостероидной терапией чаще встречается хроническая паразитемия. Инфицирование пло5 да во время первого триместра беременности встречается редко, но зато это связано с более высоким риском спонтанного аборта и возникновения аномалий плода. Инфекция, приобретенная в ранний период беременности, является более распространенной, но риск возникновения аномалий плода – ниже. Наибольший риск тяжелых врожденных заболеваний наблюдается в случае инфицирования на 10524 неделе беременности, и наибольший риск вертикальной передачи происходит в течение 26540 недели. Первичное ин5 фицирование матери сразу же после зачатия или в первые 10 недель бере5 менности составляет 2% процента вертикальной передачи, однако у более 80% инфицированных плодов развивается тяжелая болезнь с микроофталь5 мией, хориоретинитом, гидроцефалией и внутричерепными кальцификата5 ми. В период с 24 недели до 30 недели частота тяжелых инфекций снижает5 ся с 80 до 20%, а после 30 недели снижается до 6%. Хотя в этом периоде у более чем 80% беременных женщин с первичным инфицированием проис5 ходит заражение плода. Иммунный ответ на инфекцию в ранней стадии про5 является увеличением титра антител IgM в течение первой недели болезни, которые достигают пика за месяц, и постепенно снижаются в течение 356

месяцев, сохраняя возможность персистировать в низких титрах до 2 лет. Определение антител IgM применяется для диагностики недавно перене5 сенных инфекций. IgG антитела появляются позже и достигают максималь5 ного титра через 152 месяца, затем сохраняясь надолго. Они имеют практи5 ческую значимость для скрининга иммунного статуса, а определение в ди5 намике играет важную роль в диагностике первичной инфекции и реактива5 ции инфекции. Чтобы избежать осложнений во время беременности, реко5 мендуется провести оценку иммунного статуса до зачатия. Таким образом, считается, что серопозитивные женщины до наступления беременности за5 щищены с точки зрения будущего заражения плода. С другой стороны, се5 ронегативные женщины подвержены риску заражения инфекцией во время беременности, но для этого необходимо проводить профилактические ме5 ры.

Материал: венозная кровь.

Пробирка: вакутайнер с/без антикоагулянта с/без гелевой фазы.

Условия обработки и стабильность пробы: сыворотка остается ста5 бильной в течение 7 дней при 258 °C. Архивированная сыворотка может хра5 ниться при температуре 520 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод: иммунохимический с электрохемилюминесцентной детекцией (ECLIA).

Анализатор: Cobas 6000 (е 601 модуль). Тест#системы: Roche Diagnostics (Швейцария).

Референсные значения в лаборатории «СИНЭВО Украина»: Антитела IgG к Toxoplasma gondii (МЕ/мл):

менее 1,0 – отрицательный результат от 1,0 до 30,0 – сомнительный результат

более или равно 30,0 – положительный результат

Антитела IgM к Toxoplasma gondii (Индекс):

менее 0,80 – отрицательный результат от 0,8 до 1,0 – сомнительный результат более или 1,0 – положительный результат

Авидность IgG Toxoplasma gondii (Индекс):

менее 0,30 – низкая авидность от 0,3050,35 – средняя авидность более 0,35 – высокая авидность

Интерпретация результатов