6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Внутренние_болезни_Лабораторная_и_инструментальная_диагностика_Ройтберг

Рис. 1.44. Состав белков плазмы крови (схема)

Альбумины — это наиболее гомогенная фракция простых белков, почти исключительно синтезирующихся в печени. Около 40% альбуминов находится в плазме, а 60% — в межклеточной жидкости. Основные функции альбуминов — поддержание коллоидно-осмотического (онкотического) давления, а также участие в транспорте многих эндогенных и экзогенных веществ (свободных жирных кислот, билирубина, стероидных гормонов, ионов магния, кальция, антибиотиков, сердечных гликозидов, барбитуратов, ацетилсалициловой кислоты и др.).

Глобулины сыворотки крови представлены четырьмя фракциями (α1, α2, β и γ), каждая из которых не является однородной и содержит несколько белков, отличающихся по своим функциям.

В состав α1-глобулинов в норме входят два белка, имеющих наибольшее клинической значение:

1.α1-антитрипсин, являющийся ингибитором ряда протеаз (трипсина, химотрипсина, калликреина, плазмина);

2.α1-гликопротеид, участвующий в транспорте прогестерона и тестостерона и связывающий небольшие количества этих гормонов.

α2-глобулины представлены следующими белками:

1.α2-макроглобулин — ингибитор ряда протеолитических ферментов (трипсина, химотрипсина,

тромбина, плазмина, калликреина), синтезируется вне печени;

2.гаптоглобин — белок, связывающий и

транспортирующий свободный гемоглобин А в клетки ретикулоэдотелиальной системы; 3. церулоплазмин — обладает оксидазной активностью и

окисляет двухвалентное железо в трехвалентное, что обеспечивает его транспорт трансферрином;

4.апопротеиды А, В и С, входящие в состав липопротеидов. Фракция β-глобулинов также содержит несколько белков:

1.трансферрин — белок, участвующий в транспорте трехвалентного железа;

2.гемопексин — переносчик свободного гема и порфирина, связывает геминсодержащие хромопротеиды (гемоглобин, миоглобин, каталазу) и доставляет их в клетки РЭСпечени;

3.липопротеиды;

4.часть иммуноглобулинов;

5.некоторые белковые компоненты комплемента.

γ-глобулины — это иммуноглобулины, которым свойственна функция антител, вырабатываемых в организме в ответ на внедрение различных веществ, обладающих антигенной активностью; современные методы позволяют

выделить несколько классов иммуноглобулинов (IgG, IgA, IgM,

IgD и IgE).

Фибриноген является важнейшим компонентом системы свертывания крови (фактор I). Он образует основу кровяного сгустка в виде трехмерной сети, в которой задерживаются клетки крови (подробнее см. ниже).

Методы исследования

Стандартный набор биохимических показателей, отражающий состояние белкового обмена, чаще ограничивается определением содержания общего белка, белковых фракций (альбумина, α1-, α2-, β- и γ-глобулинов) и фибриногена. При необходимости определяют также С-реактивный белок (CRP), содержание серомукоида и других белков сыворотки крови.

Общий белок. Наиболее распространенным методом определения общего белка сыворотки крови является так называемый биуретовый метод. В состав биуретового реактива входит сульфат меди, который в щелочной среде реагирует с белками сыворотки и образует соединения, окрашенные в фиолетовый цвет. Интенсивность окраски, зависящую

от концентрации белка в сыворотке, определяют на фотометре и сопоставляют с интенсивностью калибровочного раствора с известной концентрацией альбумина (фотометрический метод). Существует также рефрактометрический способ определения общего белка, основанный на принципе измерения показателей преломления света, проходящего через окрашенные соединения.

Альбумин. Количество альбумина в сыворотке крови определяютфотометрическим методом с использованием красителя бромкрезолового зеленого, который при взаимодействии с альбумином в слабокислой среде образует окрашенный комплекс синего цвета.

Белковые фракции. В клинической практике для определения различных фракций белка ( в том числе альбуминов, α1-, α2-, β- и γ-глобулинов) чаще используют метод электрофореза. При электрофоретическом разделении белков сыворотки крови на отдельные фракции через исследуемую сыворотку, нанесенную на

поддерживающую среду (бумагу, пленки ацетатцеллюлозы, полиакриламидный гель и др.) пропускают электрический ток (рис. 1.45). Скорость движения отдельных белковых фракций по направлению к аноду (+) зависит от их электрического заряда и других физико-химических свойств. Наиболее быстро движется к аноду фракция альбумина, затем α1-, α2-, β- и γ-глобулинов. После окончания электрофоретического разделения белковых фракций пленки из ацетата или полоски бумаги высушивают на

воздухе и в сушильном шкафу и окрашивают одним из красителей (бромфеноловым синим, пунцовым С и др.).

Рис. 1.45. Схема электрофоретического разделения белков сыворотки крови на отдельные фракции.

Красной стрелкой показано направление движения белковых фракций

Таким образом получают кусочки бумажной ленты или пленки из ацетата целлюлозы, содержащие отдельные белковые фракции — электрофореграммы (рис. 1.46). Интенсивность окраски, соответствующую концентрации отдельных белковых фракций, измеряют на фотометре или денситометре. Результаты выражают в процентах к содержанию общего белка сыворотки крови. Для наглядности строят графики количественного соотношения белковых фракций (рис. 1.47).

Рис. 1.46, 1.47. Фотометрический график соотношения белковых фракций

Для разделения белков сыворотки крови используют также другие, более тонкие методы исследования (ультрацентрифугирование, иммуноэлектрофорез

и т. д.), позволяющие выявлять отдельные белки сыворотки, входящие в состав той или иной белковой фракции, а также определять их физико-химические свойства.

Интерпретация результатов

Содержание общего белка сыворотки крови у здорового человека колеблется в пределах от 65 до 85 г/л, а альбумина — от 35 до 50 г/л. Нормальные величины белковых фракций, выраженные в процентах по отношению к содержанию общего белка, представлены в табл. 1.3.

Таблица 1.3 Нормальные значения белковых фракций сыворотки крови (%) (по

В.В. Меньшикову с соавт.)

Из таблицы видно, что у здорового человека наблюдаются колебания этих величин в достаточно широких пределах, что отчасти обусловлено методом определения белковых фракций,

в частности, видом красителя, используемого для окрашивания бумаги или пленок из ацетата целлюлозы с электрофореграммами.

Имеет значение также расчет альбуминовоглобулинового коэффициента (А/Г), который в норме равен примерно 1,5.

В табл. 1.4 представлены основные причины гипо- и гиперпротеинемии, а также некоторые механизмы нарушения содержания белка в сыворотке крови.

Таблица 1.4 Основные причины изменений содержания общего белка и

альбумина в сыворотке крови

Следует иметь в виду, что при многих патологических состояниях в основе этих нарушений лежит сочетание сразу нескольких механизмов. Например, при злокачественных новообразованиях желудочно-кишечного тракта в основе гипопротеинемии может лежать не только угнетение синтеза белка на уровне клеток, обусловленное раковой интоксикацией, снижением активности анаболических гормонов, недостатком витаминов и

нарушением функции печени при ее метастатическом поражении, но и недостаточное поступление белка с пищей вследствие характерной для этих заболеваний анорексии,

нарушение переваривания и всасывания пищевых белков в желудочно-кишечном тракте, увеличение катаболизма белков и потеря их через желудочно-кишечный тракт.

Любые причины, приводящие к белковой недостаточности (например белковое голодание), закономерно

вызывают усиление катаболизма собственных белков при их распаде, что сказывается на функции всех органов и систем. Наиболее важными клиническими следствиями гипопротеинемии любого происхождения являются: 1) похудание, вплоть до кахексии, 2) анемия, 3) гипопротеинемические отеки (при снижении альбумина ниже 20 г/л), 4) нарушение функции различных органов и систем.

В табл. 1.5 представлены основные причины изменения содержания фракций глобулинов и белки этих фракций, ответственные за нарушения.

Таблица 1.5 Наиболее частые причины изменения фракций глобулинов в сыворотке крови

Из таблицы видно, что увеличение содержания α1- и α2-

фракций глобулиновнаблюдается при нескольких патологических состояниях:

1.При острых воспалительных процессах, поскольку в состав α-

глобулинов входят так называемые белки острой фазы (α1- антитрипсин, α1-гликопротеид, α2-макроглобулин, гаптоглобулин, церулоплазмин, серомукоид, С-реактивный белок).

2.При значительном повреждении и

распаде тканей (дистрофические, некротические процессы), сопровождающемся деструкцией клеток и высвобождением тканевых протеаз, калликреина, тромбина, плазмина и т. д., что закономерно приводит к увеличению содержания их естественных ингибиторов (α1-

антитрипсина, α1-гликопротеида, α2-макроглобулина и др.). Повреждение тканей приводит также к высвобождению патологического С-реактивного белка,

являющегося продуктом распада клеток и входящего в состав α1- фракции глобулинов.

Значительная деструкция тканей наблюдается при злокачественных новообразованиях, метастазировании опухолей, тяжелых травмах, после оперативных вмешательств, при инфарктах различных органов (ишемический инсульт, инфаркт легкого, кишечника и др.).

3.При заболеваниях, сопровождающихся деполимеризацией гликопротеидов основного вещества соединительной ткани (коллагенозах), преимущественно за счет увеличения содержания гаптоглобулина и других белков.

4.При нефротическом синдроме, в частности за счет увеличения α2-макроглобулина.