Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

4 курс / Дерматовенерология / Диссертация_Рауш_Е_Р_Особенности_возбудителей_внутрибольничного

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
23.03.2024
Размер:
4.19 Mб
Скачать

 

 

 

 

 

 

91

 

 

 

 

 

 

 

 

100

12.1

0.7

2.2

 

100

0.9

1.6

0

0.3

1.6

2.7

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

90

 

 

19

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

90

 

 

 

 

 

 

 

 

80

13.4

 

 

 

80

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

70

 

 

 

23

70

 

 

 

 

 

 

 

 

60

 

 

 

 

60

 

 

 

 

 

 

У

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

%

50

 

 

97.1

 

% 50

 

 

 

99.7

 

 

 

 

 

 

 

 

97.5

 

 

95.7

УЧ

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

40

74.5

 

 

 

40

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

30

 

 

 

58

30

 

 

 

 

 

 

Ч

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

20

 

 

 

 

20

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

10

 

 

 

 

10

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

0

 

 

 

 

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Candida spp.

C. albicans

C. не-albicans

 

Candida spp.

C. albicans

C. не-albicans

 

а

б

 

Рисунок 39 - Чувствительность возбудителей инвазивного кандидоза к флуконазолу (а) и

вориконазолу (б) (метод CLSI М27-А3, n=322); У – устойчивый, УЧ умеренно-

чувствительный, Ч чувствительный

Установлено распределение Candida spp. по категориям чувствительности к вориконазолу (рисунок 39б): чувствительные - 97,5%,

умеренно чувствительные 0,9% штаммов, устойчивые 1,6%. Следует отметить, что C. albicans были чувствительны в 99,7% случаев, устойчивыми

– 0,3%. Среди C. не-albicans видов были чувствительными к вориконазолу

95,7% штаммов, умеренно чувствительными 1,6% и устойчивыми 2,7%.

Сниженной чувствительностью к вориконазолу C. parapsilosis 0,6% (2), C. tropicalis 0,6% (2) и C. krusei 0,3% (1).

Наряду с этим, 6 штаммов C. guilliermondii (2), C. parapsilosis (2), C. tropicalis (1), C. albicans (1) были устойчивы к флуконазолу и к вориконазолу.

Таким образом, полирезистентных к азолам штаммов среди Candida spp.

было 1,9% (C.albicans 0,3%, C. не-albicans видов 1,5 %).

Среди Candida spp. – возбудителей ИК, 2,5% были устойчивы к вориконазолу.

В период проведения исследований (2011 2014 гг.), не было выявлено

(р=0,6) достоверного возрастания штаммов со сниженной чувствительностью.

92

4.1.1 МПК противогрибковых препаратов для различных видов Candida

spp.

C. albicans (n=139)

C. parapsilosis (n=65)

C.glabrata (n=37)

C. tropicalis (n=31)

C.guilliermondii (n=17)

C. krusei (n=20)

Рисунок 40 – МПК противогрибковых препаратов для 6 основных видов

Candida spp.

При определении МПК противогрибковых препаратов для 6

основных возбудителей ВБИК обнаружена наибольшая гетерогенность по этому показателю штаммов C. guilliermondii и C. parapsilosis

(рисунок 40).

93

Далее мы определили МПК50, МПК90 и диапазоны МПК анти-

микотиков у различных видов Candida. (таблица 14).

Таблица 14 – Особенности распределения МПК у различных видов Candida

Виды

Противогриб-

Диапазоны

МПК50

МПК90

Критерии

Среднее

Candida

ковые

МПК

(мкг/мл)

(мкг/м

чувствительности

геометри-

 

препараты

(мкг/мл)

 

л)

CLSI M27-S3 и

ческое

 

 

 

 

 

CLSI M27-S4 (мкг

МПК

 

 

 

 

 

/мл)

(мкг/мл)

C.

флуконазол

0.06-32

0.5

2

<2

0,6

 

 

 

 

 

 

вориконазол

0,015-8

0,03

0,125

<0,12

0,03

albicans

 

 

 

 

 

 

каспофунгин

0,015-0,5

0,125

0,25

<0,25

0,1

(n=139)

 

 

 

 

 

 

позаконазол

0,008-0,25

0,03

0,06

Не установлен

0,02

 

 

 

 

 

 

 

 

 

флуконазол

0.5-32

16

16

<32 (УЧ*)

11,9

 

 

 

 

 

 

 

C.

вориконазол

0.008-0.5

0.03

0.125

<1

0,04

glabrata

 

 

 

 

 

 

каспофунгин

0,015-0,25

0,06

0,125

<0,12

0,15

(n=37)

 

 

 

 

 

 

позаконазол

0,008-

0,03

0,06

Не установлен

0,03

 

 

0,125

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

флуконазол

32-128

64

64

Природно устой-

61,8

C. krusei

 

 

 

 

чивый вид

 

 

 

 

 

 

 

вориконазол

0.06-1

0.125

0.5

0.5

0,15

(n=20)

 

 

 

 

 

 

каспофунгин

0.03-0.25

0.25

0.25

<0,25

0,13

 

 

 

 

 

 

 

 

 

позаконазол

0.015-0.25

0,06

0,25

Не установлен

0,03

 

 

 

 

 

 

 

C. guillie-

флуконазол

0.25-64

4

64

<8

4,17

 

 

 

 

 

 

вориконазол

0.03-8

0.06

1

<1

0,1

rmondii

 

 

 

 

 

 

каспофунгин

0.06-1

0.5

1

<2

0,19

(n=17)

 

 

 

 

 

 

позаконазол

0.015-0.25

0,03

0,25

Не установлен

0,03

 

 

 

 

 

 

 

 

 

флуконазол

0.125-16

1

2

<2

1,09

 

 

 

 

 

 

 

C.

вориконазол

0.015-0.25

0.06

0.125

<0,12

0,05

tropicalis

 

 

 

 

 

 

каспофунгин

0.03-0.25

0.125

0.25

<0,25

0,14

(n=31)

 

 

 

 

 

 

позаконазол

0.015-

0,03

0,06

Не установлен

0,03

 

 

0.125

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C.

флуконазол

0.125-64

0.5

16

<2

1,33

 

 

 

 

 

 

вориконазол

0.015-1

0.03

0.125

<0,12

0,03

parapsilos

 

 

 

 

 

 

каспофунгин

0.03-2

1

2

<2

0,15

is (n=65)

 

 

 

 

 

 

позаконазол

0,015-0,06

0,03

0,06

Не установлен

0,03

 

 

 

 

 

 

 

 

Обнаружено, что для C. parapsilosis и C. guilliermondii значения МПК90,

выходят за пределы категории чувствительности, а это есть тенденция на к формированию устойчивости к флуконазолу у этих видов Candida .

94

Таблица 15 – Чувствительность изолятов C. parapsilosis к

противогрибковым препаратам в различных биосубстратах

Биосубстрат (все

Противогрибковые

n исследуемых

%

% категорий

исследуемых

 

 

 

изоляты)

препараты

изолятов

 

 

 

изолятов

Ч

УЧ

У

 

 

 

Периферическая

Флуконазол

 

 

85

0

15

кровь (268)

Вориконазол

60

22,3

98,3

0

1,7

 

Каспофунгин

 

 

100

0

0

Перитонеальная

Флуконазол

 

 

100

0

0

жидкость (24)

Вориконазол

1

4,2

100

0

0

 

Каспофунгин

 

 

100

0

0

Содержимое

Флуконазол

 

 

67

0

33

Вориконазол

3

37,5

67

0

33

абсцесса (8)

Каспофунгин

 

 

100

0

0

 

 

 

Плевральная

Флуконазол

 

 

100

 

0

Вориконазол

1

16,7

100

0

0

жидкость (6)

Каспофунгин

 

 

100

0

0

 

 

 

Таблица 16 – Географическое разнообразие C. parapsilosis по чувствительности к противогрибковым препаратам

Федеральный

n

Флуконазол

 

Вориконазол

 

Каспофунгин

 

округ

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Ч

УЧ

У

Ч

УЧ

У

Ч

УЧ

У

Северо-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Западный

31

90

0

10

97

0

3

100

0

0

Центральный

16

75

0

25

100

0

0

100

0

0

Южный

9

89

0

11

100

0

0

100

0

0

Уральский

6

100

0

0

100

0

0

100

0

0

Приволжский

3

67

0

33

67

0

33

100

0

0

Сибирский

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Всего (%)

65

88

0

12

97

0

3

100

0

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Наряду с этим, выявлено, что штаммы C. parapsilosis, выделенные из крови,

чувствительны к флуконазолу – 85% случаев, к вориконазолу (98,3%), к

каспофунгину (100%). Среди них наибольшее количество штаммов C. parapsilosis (31 штамм), были выделены в Северо-Западном ФО, были чувствительными к флуконазолу – 90%, к вориконазолу – 97%, к

каспофунгину – все штаммы (таблица 15 и 16).

95

При определении чувствительности возбудителей ИК к противогрибковому препарату триазоловой группы нового поколения – позаконазолу, установлено, что все исследуемые штаммы Candida spp. были чувствительны.

К настоящему времени для позаконазола критерии интепретации не определили, однако, по литературным данным признано, что МПК для чувствительных штаммов составляет 1мкг/мл (таблица 17).

Таблица 17 – МПК позаконазола для Candida spp.

Вид Candida spp. (n=322)

Количество штаммов с соответствующими МПК

 

 

 

(мкг/мл)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

0,008

0,015

0,03

0,06

0,125

0,25

 

 

 

 

 

 

 

C. albicans (n = 139)

1

52

43

30

12

1

 

 

 

 

 

 

 

C. parapsilosis (n=65)

 

27

27

9

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. glabrata ( n= 37)

1

10

15

8

3

 

 

 

 

 

 

 

 

C. tropicalis ( n= 32)

 

5

17

6

4

 

 

 

 

 

 

 

 

C. krusei( n= 21)

 

1

2

7

7

1

 

 

 

 

 

 

 

C. guilliermondii ( n= 17)

 

2

9

2

1

3

 

 

 

 

 

 

 

C. dubliniensis (n= 2)

 

2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. lusitaniae ( n= 3)

 

1

 

2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. pararugosa ( n= 2)

 

 

2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. lipolytica ( n= 1)

 

 

 

 

 

1

 

 

 

 

 

 

 

C. kefyr ( n= 1)

 

 

 

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

C. utilis ( n= 1)

 

 

 

 

 

1

 

 

 

 

 

 

 

C. inconspicua ( n= 1)

 

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Отмечено, что большинство исследуемых штаммов Candida spp. имели МПК

0,015-0,03 мкг/мл. и соответствуют категории «чувствительные» (рисунок 41).

96

Рисунок 41 – МПК позаконазола для различных видов Candida spp.

Следует отметить, что 258 исследуемых клинических изолятов Candida spp. были выделены от пациентов при однократном заборе биосубстрата и 64

изолята - при повторных заборах. Выявление нескольких видов Candida у

одних и тех же пациентов отмечали в 6 случаях.

97

Сведения о повторно выделеных клинических изолятах Candida приведены в таблице 18.

Таблица 18 – Случаи повторного выделения Candida spp. от пациентов с инвазивным кандидозом

Пациент

Биосубстрат

Количест

Вид Candida

МПК флуконазола,

 

 

во

spp.

вориконазола, каспофунгина,

 

 

повторов

 

позаконазола (CLSI M27-A3),

 

 

 

 

мкг/мл

1

кровь

3

C. glabrata

16;0.125;0.06;0.06

 

 

 

 

16;0.06;0.06;0.06

 

 

 

 

16;0.06;0.06;0.06

2

кровь

2

C. albicans

2;0.06;0.25;0.03

 

 

 

 

2;0.06;0.25;0.015

3

кровь

2

C. albicans

1;0.06;0.06;0.03

 

 

 

 

1;0.06;0.015;0.015

4

кровь

3

C. albicans

0.25;0.015;0.25;0.015

 

 

 

 

0.5;0.06;0.125;0.015

 

 

 

 

0.5;0.125;0.125;0.015

5

кровь

2

C. albicans

0.5;0.03;0.125;0.03

 

 

 

 

0.5;0.03;0.125;0.015

6

кровь

3

C. parapsilosis

2.0;0.06;1.0;0.03 (13.03.2013)

 

 

 

 

0.5;0.015;0.5;0.015 (14.03.2013)

 

 

 

 

16;0.06;1.0;0.015 (30.03.2013)

7

ЦСЖ, перитоне-

1

C. albicans

1.0;0.06;0.015;0.06

 

альная жидкость

 

 

1.0;0.06;0.03;0.03

8

кровь, биопсия

1

C. albicans

0.5;0.06;0.25;0.06

 

 

 

 

0.25;0.06;0.125;0.03

9

кровь

2

C. albicans

0.25;0.06;0.25;0.03

 

 

 

 

0.125;0.015;0.25;0.015

10

кровь

2

C. lusitaniae

1.0;0.015;1.0;0.06

 

 

 

 

1.0;0.015;1.0;0.06

11

кровь

3

C. krusei

64.0;0.125;0.25;0.06

 

 

 

 

64.0;0.125;0.25;0.125

 

 

 

 

64.0;0.125;0.25;0.125

12

кровь

2

C. albicans

0.125;0.03;0.06;0.03

 

 

 

 

0.125;0.015;0.25;0.03

13

кровь

3

C. albicans

0.5;0.03;0.06;0.06

 

 

 

 

0.5;0.03;0.125;0.06

 

 

 

 

0.25;0.03;0.06;0.03

14

кровь, содержи-

1

C. parapsilosis

0.5;0.06;0.125;0.03

 

мое абсцесса

 

 

2.0;0.125;0.06;0.015

 

 

 

 

2.0;0.125;0.125;0.03

15

кровь,

1

C. parapsilosis

0.5;0.015;0.5;0.015

 

содержимое

 

 

0.25;0.015;2.0;0.015

 

абсцесса

 

 

 

98

Продолжение таблицы 18

Пациент

Биосубстрат

Количество

Вид Candida

МПК флуконазола,

 

 

повторов

spp.

вориконазола, каспофунгина,

 

 

 

 

позаконазола (CLSI M27-A3),

 

 

 

 

мкг/мл

16

кровь, перитоне-

1

C. albicans

0.5;0.03;0.5;0.015

 

альная жидкость

 

 

0.5;0.125;0.5;0.015

17

кровь

3

C. albicans

0.25;0.06;0.125;0.125

 

 

 

 

0.5;0.03;0.125;0.06

 

 

 

 

1.0;0.03;0.125;0.06

18

кровь

2

C. glabrata

32.0;0.03;0.015;0.03

 

 

 

 

16.0;0.03;0.015;0.03

19

кровь

2

C. guillier-

64.0;1.0;0.5;0.25

 

 

 

mondii

64.0;1.0;0.5;0.25

20

кровь

2

C. tropicalis

1.0;0.06;0.06;0.03

 

 

 

 

0.5;0.06;0.06;0.03

Из 20 приведенных случаев повторного выделения биосубстрата от одного больного отмечено, что в 1 случае произошло выделение устойчивого к флуконазолу штамма C. parapsilosis, ранее чувствительного к данному антимикотику.

Среди исследованных культур также было отмечено, что от одного пациента были случаи выделения нескольких видов Candida,

характеризующимся различными МИК к противогрибковым препаратам

(таблица 19).

Таблица 19 – Случаи выделения нескольких видов Candida spp. от одного пациента

Пациент

Биосубстрат

Вид Candida

Даты

МИК флуконазола,вориконазола,

 

 

 

выделения

каспофунгина, позаконазола (CLSI

 

 

 

 

M27-A3), мкг/мл

1

кровь

C. lipolytica

17.02.2012

8;0.125;0.25;0.25

 

C. parapsilosis

0.5;0.015;2.0;0.06

 

 

 

2

кровь 1

C. albicans

11.03.2013

0.25;0.03;0.125;0.015

 

кровь 2

C. parapsilosis

14.03.2013

2.0;0.03;0.125;0.015

3

кровь 1

C. albicans

05.06.2012

0.5;0.03;0.125;0.06

 

C. krusei

64.0;0.06;0.25;0.25

 

 

 

 

кровь 2

C. albicans

11.06.2012

0.5;0.03;0.125;0.03

 

C. krusei

64.0;0.06;0.25;0.06

 

 

 

4

кровь 1

C. albicans

29.07.2013

1.0;0.06;0.125;0.03

 

кровь 2

C. parapsilosis

 

0.5;0.03;0.125;0.015

 

содержимое

C. albicans

12.08.2013

1.0;0.06;0.25;0.03

 

абсцесса

 

 

 

 

кровь 3

C. parapsilosis

13.08.2013

0.5;0.015;1.0;0.015

99

Продолжение таблицы 19

5

кровь 1

C. albicans

02.08.2013

0.5;0.03;0.25;0.03

 

содержимое

C. glabrata

08.08.2013

16.0;0.03;0.06;0.03

 

абсцесса

 

 

 

 

кровь 2

C.

19.08.2013

0.5;0.03;0.06;0.015

 

 

guilliermondii

 

 

6

плевральная

C. albicans

30.08.2013

0.25;0.03;0.25;0.03

 

жидкость

 

 

 

 

кровь

C. glabrata

17.09.2013

16.0; 0.015; 0.015; 0.015

Следовательно, выявление нескольких видов Candida spp. у одного пациента является серьезной причиной для тщательного мониторирования чувствительности к противогрибковым препаратам.

4.2 Результаты определения чувствительности возбудителей

инвазивного кандидоза методом CLSI M44 - A

Учитывая что, метод серийных разведений (CLSI M27–A3) отличается трудозатратностью, высокой себестоимостью и его использование в рутинной практике затруднено, для определения чувствительности Candida spp. к противогрибковым препаратам мы использовали метод CLSI M44 – A,

несложеный в исполнении и обладающий невысокой себестоимостью.

Определение чувствительности проводили в отношении флуконазола и вориконазола (таблицы 20, 21).

Таблица 20 – Результаты определения чувствительности штаммов

Candida spp. к флуконазолу методом М44-А (n=141)

Виды Candida

Кол-во штаммов, распределенных в соответствии с диаметром

 

зон задержки роста (мм)/МПК (мкг/мл) к флуконазолу

 

 

 

 

 

>19 / <8

15-18/16-32

<14/ >64

 

 

 

 

C. albicans (n=54)

53

-

1

 

 

 

 

C. parapsilosis (n=34)

26

1

7

 

 

 

 

C. glabrata (n=16)

2

13

1

 

 

 

 

C. tropicalis (n=11)

7

3

1

 

 

 

 

C. guilliermondii (n=11)

2

4

5

 

 

 

 

C. krusei (n=10)

-

-

10

 

 

 

 

100

Продолжение таблицы 20

Виды Candida

Кол-во штаммов, распределенных в соответствии с диаметром зон

 

задержки роста (мм)/МПК (мкг/мл) к флуконазолу

 

 

 

 

 

>19 / <8

15-18/16-32

<14/ >64

 

 

 

 

C. pararugosa (n=2)

2

-

-

 

 

 

 

C. utilis (n=1)

1

-

-

 

 

 

 

C. lipolytica (n=1)

1

-

-

 

 

 

 

C. kefyr (n=1)

1

-

-

 

 

 

 

На основании полученных результатов выявлено, что 32,6% штаммов

Candida spp. обладали сниженной чувствительностью к флуконазолу: 14,9%

(21) штаммов – умеренной чувствительностью и 17,7% (25) штаммов – устойчивые.

Изоляты C. albicans были чувствительны к флуконазолу – 98,2% (53) и 1,8% (1) устойчивы. Среди 34 штаммов C. parapsilosis 20,5% (7) были устойчивы к флуконазолу и 2,9% (1) – обладал умеренной чувствительностью; 45,5% (5) штаммов C. guilliermondii были устойчивы и

36,3% (4) – умеренно чувствительными к флуконазолу.

Таблица 21 – Результаты определения чувствительности штаммов

Candida spp. к вориконазолу методом М44-А (n=141)

Вид Candida

Кол-во штаммов, распределенных в соответствии с диаметром

 

зон задержки роста (мм)/МПК (мкг/мл) к вориконазолу

 

 

 

 

 

>17 / <1

14-16/2-4

<13/ >6

 

 

 

 

C. albicans (n=54)

54

-

-

 

 

 

 

C. parapsilosis (n=34)

28

3

3

 

 

 

 

C. glabrata (n=16)

15

1

-

 

 

 

 

C. tropicalis (n=11)

10

-

1

 

 

 

 

C. guilliermondii (n=11)

8

1

2

 

 

 

 

C. krusei (n=10)

7

3

-

 

 

 

 

C. pararugosa (n=2)

2

-

-

 

 

 

 

C. utilis (n=1)

1

-

-

 

 

 

 

C. lipolytica (n=1)

1

-

-

 

 

 

 

C. kefyr (n=1)

1

-

-

 

 

 

 

Соседние файлы в папке Дерматовенерология