2 курс / Гистология / Эндокринная_регуляция_роста_и_развития_организма_оленевых_Овчаренко

заметно, что она уменьшается по сравнению с предыдущими возрастными группами. Количество интерфолликулярных островков также уменьшается (рис. 57). Средний диаметр фолликулов рогачей достоверно выше аналогичного показателя у перворожек. В этом возрасте резко снижается число мелких фолликулов, их встречаемость – 40±3%. Относительное количество средних фолликулов с диаметром 172,58±8,520 мкм составляет 34±3%. Причем их диаметр, как и количество, достоверно больше, чем у перворожек. Количество крупных фолликулов и их диаметр также достоверно увеличиваются (28±2%), а количество фолликулов в поле зрения, соответственно, уменьшается.

Мелкие и средние фолликулы выстланы кубическим эпителием, а крупные – кубическим и плоским эпителием, но преобладают кубические клетки. Внутри кубических тиреоцитов находятся ядра округлой формы, ярко базофильные, окруженные однородной цитоплазмой. Плоские тиреоциты также характеризуются базофильными ядрами. Ядра здесь плотные, веретеновидной формы, расположены параллельно поверхности фолликула. Значение ЯЦС – 0,58±0,01.

По краю железы фолликулы мелких размеров выстланы кубическим эпителием, и коллоид их более оксифильный. Крупные фолликулы, расположенные в центре железы, выстланы преимущественно плоским эпителием, и их коллоид более базофильный плотный, окрашивается однородно, вакуоли крайне редки.

Индекс Брауна в этот возрастной период резко увеличивается. Па- ренхимо-стромальный коэффициент достоверно меньше (Р < 0,001), чем у перворожек, и составляет 10,19±0,79. Это указывает на увеличение объема стромы по отношению к паренхиме у рогачей по сравнению с маралами в возрасте 2 лет 6 месяцев.

Уживотных этого возраста С-клетки выявляются в меньшем количестве, чем у молодых (рис. 57). При этом они обнаруживаются только в межфолликулярном пространстве, чаще единично или по 2-3 клетки и имеют овальную форму и овальное светлое ядро.

Устарых животных масса железы мало отличается от предыду-

щей и составляет 9,10±0,510 г. Ширина соединительнотканной капсулы максимальна по сравнению с животными всех возрастных групп и составляет 19,44±2,070 мкм. Зона мелких фолликулов по-прежнему хорошо видна. Количество интерфолликулярной ткани резко уменьшается. Фолликулы плотно прилегают друг к другу, имеют четкие границы (рис. 58). Между ними хорошо видна соединительная ткань. Средний диаметр фолликулов животных данной возрастной группы достоверно увеличивается по сравнению с рогачами и достигает максимального значения (189,90±8,05 мкм) в возрастном ряду. Соответ-

111

ственно, и количество фолликулов в поле зрения у старых животных минимально. Показательным является и тот факт, что количество мелких фолликулов в этой группе минимально – 30±6%, и их диаметр

– 100,00±6,08; а количество крупных фолликулов максимально по сравнению с другими группами и составляет 30±1%, их диаметр – 295,92±14,96 мкм. Динамика увеличения диаметра фолликкулов с возрастом представлена на рисунках 58-59.

Мелкие и средние аденомеры выстланы кубическим, а крупные – кубическим и плоским эпителием, но преобладают плоские тиреоциты. Ядра их плотные, веретеновидные, ярко окрашенные, с хорошо заметными глыбками хроматина, расположенные параллельно поверхности фолликула. Коллоид плотный, без резорбционных вакуолей. Но наряду с такой морфологической картиной можно обнаружить другую – фолликулы, расположенные с краю железы или ближе к нему, выстланы кубическим эпителием, коллоид в них окрашивается слабее, он не трескается, а по краю его встречаются единичные резорбционные вакуоли.

Рис. 56. Структура щитовидной железы. Марал. 1,5 года. Зима. Формалин. Гематоксилин-эозин. Об. 10, ок. 7

Рис. 57. Структура щитовидной железы. Марал. 7 лет. Зима. Формалин. Гематоксилин-эозин. Об. 10, ок. 7

112

Из приведенной таблицы следует, что имеет место экспоненциальная зависимость диаметра фолликулов от возраста, и характеризуется она тем, что этот показатель мало изменяется в первые годы жизни.

Между количеством фолликулов в поле зрения и возрастом также имеет место экспоненциальная зависимость.

Рис. 59. Зависимость количества фолликулов (в поле зрения) в щитовидной железе марала от возраста

Рис. 60. Зависимость высоты тиреоцитов щитовидной железы марала от возраста

Однако коэффициент корреляции имеет отрицательное значение. Из графика следует, что этот показатель с возрастом плавно снижается, а наиболее заметное снижение наблюдается после 12 лет (рис. 59).

114

Связь высоты эпителия с возрастом выражается уравнением 1/y = 0,16 + 0,0053x. На рисунке 60 видно, что с возрастом происходит постепенное снижение этого показателя.

Зависимость объема ядер от возраста описывается линейным уравнением. Коэффициент корреляции имеет отрицательное значение. Из графика, приведенного на рисунке 61, следует, что происходит постепенное снижение данного показателя с возрастом.

Рис. 61. Зависимость объема ядер тиреоцитов щитовидной железы марала от возраста

Между ЯЦС и возрастом имеет место линейная зависимость, но коэффициент корреляции показывает, что связь данного показателя с возрастом слабая. Связь ПСК с возрастом характеризуется обратным уравнением. Коэффициент корреляции также отрицательный.

Между индексом Брауна и возрастом имеет место экспоненциальная зависимость. График данного уравнения имеет хорошо выраженный изгиб. Это связано с тем, что динамика этого показателя наиболее выражена после периода полового созревания (рис. 62).

Использование альцианового синего – сафранина Т для оценки функционального состояния ядер тиреоцитов показало, что у молодых животных в большом количестве встречаются ядра промежуточной окраски (сине-красное окрашивание), у взрослых и старых животных преобладают ядра, в которых отмечается эухроматин (синее окрашивание).

Интенсивность окраски на РНК максимальна у молодых животных (6 месяцев, 1,5 года, 2,5 года). РНК рассеяна по цитоплазме тиреоцитов, выявляется в ядрах, а у телят она сконцентрирована на апикальных частях клеток в виде апикальной полоски. В коллоиде интенсивность окраски на РНК слабая. У взрослых животных интенсив-

115

ность окраски нормальная, РНК встречается в небольшом количестве, рассеяна по цитоплазме. В коллоиде интенсивность окраски на РНК слабая. У старых животных количество РНК минимально, встречается лишь в следовых количествах в цитоплазме тиреоцитов.

Рис. 62. Зависимость индекса Брауна щитовидной железы марала от возраста

У половозрелых и особенно старых животных обнаруживается в коллоиде гликоген.

Динамика окраски на нейтральные гликопротеины в коллоиде и тиреоцитах имеет обратное соотношение. У молодых животных окрашивание коллоида слабое, у половозрелых – средняя интенсивность, а у старых животных коллоид наиболее интенсивно окрашивается. В тиреоцитах же – наоборот. У молодых окраска наиболее интенсивная, а с возрастом наблюдается снижение степени окраски. Таким образом, видно, что уменьшение их количества идет параллельно содержанию коллоида в просвете фолликулов.

Интенсивность реакции на тирозин у молодых животных в коллоиде и тиреоцитах высока, с возрастом в эпителии она снижается, и слабое окрашивание наблюдается у старых, а в коллоиде – усиливается.

Интенсивность окраски на общий белок клеточных мембран, цитоплазмы, ядер тиреоцитов и соединительнотканных элементов не демонстрировала резких возрастных изменений. Степень окраски коллоида изменяется, усиливаясь в ряду «молодые – взрослые – старые», и максимальна у старых маралов. Изучение динамики содержания кислых и основных белков по реакции Микель-Кальво показало, что вышеописанные изменения касаются только основных белков, находящихся в коллоиде. Интенсивность окраски на кислые белки, содержащиеся в ядрах и мембранах тиреоцитов, с возрастом не изменяется.

116

С возрастом наблюдается увеличение содержания сульфгидрильных групп в коллоиде, и уменьшение – в цитоплазме тиреоцитов. Такая же динамика выявляется при изучении изменения интенсивности окраски на дисульфидные группы.

Явной динамики липидов в структурах железы по возрастам не выявлено.

Таким образом, нами установлено, что щитовидная железа марала структурно полностью сформирована к моменту рождения и проявляет признаки функциональной активности, о чем свидетельствуют: характерное, как и у взрослых, расположение разномерных фолликулов, кубической формы тиреоциты, наличие коллоида с единичными резорбционными вакуолями, умеренная реакция на ДНК, РНК в тиреоцитах и на нейтральные и сульфатированные гликопротеины, тирозин, дисульфидные и сульфгидрильные группы в тиреоцитах и коллоиде.

Шестимесячный возраст у маралов в возрастном ряду характеризуется минимальным средним диаметром фолликулов, а соответственно, и максимальным числом их в поле зрения. Это обстоятельство объясняется тем, что мелкие формы в этой возрастной группе составляют максимальный процент от общего числа – 86±2%. Именно эти формы считаются и наиболее функционально активными. Максимальной является в возрастном ряду и высота тиреоцитов, что обусловлено наличием тиреоидного эпителия как кубической, так и цилиндрической формы. Результатом является минимальный показатель индекса Брауна при относительно неизменном ЯЦС – это свидетельствует о росте функциональной активности тиреоцитов. Коллоид внутри фолликулов сильно вакуолизирован, в связи с чем имеет пенистый вид и является признаком активной резорбции.

Цитоплазма тиреоцитов и ядрышки демонстрируют максимальную по интенсивности окраску на РНК, что говорит о высокой активности происходящих синтетических процессов. Максимально содержание в возрастном ряду в цитоплазме тиоловых групп и тирозина.

Таким образом, анализ полученных морфологических, морфометрических и гистохимических показателей позволил нам характеризовать функциональное состояние щитовидной железы у шестимесячных маралов как максимально активное во всем возрастном ряду.

У маралов 1,5 года (сайки) показатели активности следующие. Диаметр фолликулов возрастает, а высота тиреоцитов при неизменном ЯЦС уменьшается. В связи с чем индекс Брауна (21,11) имеет большее значение, чем у телят. В тиреоцитах снижается содержание РНК, дисульфидных и сульфгидрильных групп, но остается выше, чем в коллоиде. Одновременно в коллоиде увеличивается содержание нейтральных гликопротеинов, по сравнению с предыдущей группой, и общего белка.

117

На основании такой динамики показателей мы считаем, что функция щитовидной железы в этой возрастной группе снижается в сравнении с предыдущей, хотя и незначительно.

В возрасте 2,5 года, хотя абсолютная величина ПСК, средний диаметр фолликулов, объем ядер тиреоцитов, индекс Брауна увеличиваются, по большинству показателей достоверных отличий с данными предыдущей группы нет. Не установлено нами и явных различий в характеристике гистохимических показателей. На основании чего мы характеризовали активность щитовидной железы примерно одинаковой с сайками. Тем не менее, судя по показателю индекса Брауна и графическому анализу ядерных популяций, можно говорить о наличии тенденции в сторону понижения функциональной активности железы в этом возрасте.

Увзрослых маралов имеет место дальнейшее снижение функциональной активности железы, о чем свидетельствуют следующие морфологические и гистохимические показатели: средний диаметр фолликулов достоверно выше такового у перворожек, это происходит за счет резкого сокращения количества мелких форм фолликулов (40±3% против 86±2% – у телят). В крупных фолликулах наряду с кубической формой тиреоцитов встречается и плоский эпителий. Коллоид довольно плотный. В крупных фолликулах вакуоли крайне редки. Резко возрастает по сравнению с предыдущими группами индекс Брауна и уменьшается ПСК. Кривая логарифмов объемов ядер сдвинута вправо относительно этого показателя у перворожков, анализ показывает, что крупные ядра встречаются чаще, чем в других группах (составляют 10%), а их количество со средними значениями уменьшается. Если учесть, что среднее значение ЯЦС не изменяется, то это явление можно рассматривать как функциональную напряженность отдельных клеток. Одновременно по сравнению с молодыми животными снижается интенсивность реакций на РНК в цитоплазме тиреоцитов и усиливается реакция на нейтральные гликопротеины и общий белок, в том числе на тирозин в коллоиде. Одновременно имеет место снижение интенсивности реакции на дисульфидные и сульфгидрильные группы в тиреоцитах и увеличение – в коллоиде.

Устарых животных средний диаметр фолликулов достигает максимального значения в возрастном ряду и достоверно различается с предыдущей группой. Количество мелких фолликулов в этой группе минимально, а крупных – максимально (30±1%). Уменьшается количество интерфолликулярных клеток. В крупных фолликулах преобладает плоский эпителий, в связи с чем индекс Брауна достигает максимального значения в возрастном ряду и составляет 49,86. Паренхимостромальный коэффициент достоверно уменьшается по сравнению с

118

предыдущей группой и тоже достигает минимального значения в сравнении со всеми другими группами, что свидетельствует об уменьшении паренхимы железы за счет разрастания стромальных элементов. Следует отметить, что максимальную толщину приобретает и капсула железы. Визуально снижается васкуляризация паренхимы. Коллоид в большинстве фолликулов плотный, без резорбционных вакуолей, что говорит об отсутствии процесса реабсорбции. Реакция на РНК и тирозин, SS- и SH-группы в тиреоцитах практически отсутствует, что также говорит о снижении синтетических процессов, об этом же свидетельствуют максимальная по интенсивности в возрастном ряду «молодые – взрослые – старые» реакция на нейтральные гликопротеины, общий белок в коллоиде, а также наличие гликогена, который рассматривают обычно как резервный углевод.

В стромальных элементах и капсуле также имеется динамика гистохимических показателей. В межклеточном веществе из углеводсодержащих полимеров преобладающими становятся сульфатированные протеогликаны, количество нейтральных гликопротеинов уменьшается по сравнению со всеми предыдущими группами.

Таким образом, анализируя совокупность морфологических гистохимических показателей, а также результаты регрессионного анализа морфометрических данных, можно утверждать, что у новорожденных маралят щитовидная железа к рождению вполне сформирована и функционирует. К шестимесячному возрасту происходит активизация ее функции. У животных в 1,5 и 2,5 года активность ее несколько снижается, но остается на довольно высоком уровне. У взрослых маралов происходит снижение активности щитовидной железы по сравнению с молодыми. У животных старше 13 лет морфометрические, кариометрические и гистохимические показатели указывают на дальнейшее понижение функциональной активности щитовидной железы. Уже у животных взрослой возрастной группы появляются компенсаторные изменения в структурных элементах щитовидной железы, которые еще в большей степени проявляются у стареющих животных, наряду с признаками старения.

119

8. ЗАКОНОМЕРНОСТИ ВОЗРАСТНОЙ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ПЕРЕСТРОЙКИ ЭНДОКРИННЫХ ЖЕЛЕЗ МАРАЛА

И ДРУГИХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ

Нами установлено, что структурно-функциональная перестройка периферических эндокринных желез марала в разные возрастные периоды специфична для каждой из них.

Возрастная динамика интегральных показателей состояния семенника марала, таких как толщина белочной оболочки и масса, имеет типичный характер: значения этих показателей увеличиваются с возрастом, что свойственно и представителям других видов (Тов-

стик О.В., 1953; Цаплюк О.Э., 1977, Васильев К.А., 1991).

Утелят интерстиций составляет более половины от общего объема семенника. Сходные соотношения объемов стромы и паренхимы обнаружены у домашнего быка. В первый месяц постнатального развития строма занимает около 62% всего объема семенника (По-

пов А.П., 1995).

Усайков объемная доля интерстиция в семеннике снижается более чем в 3 раза и достигает значений, характерных для половозрелых самцов (18-22%). У быков в соответствующем возрасте относитель-

ный объем интерстиция снижается в меньшей степени (почти в 2 раза) и составляет 33-37% (Попов А.П., 1995).

Интерстициальные эндокриноциты с признаками функциональной активности впервые нами обнаружены у новорожденных и затем у сайков, а их количество нарастает в семеннике до наступления половозрелости и сохраняется у старых животных. Сохраняется и количество клеточных элементов интерстиция в целом.

Наши данные по новорожденным и молодым животным согласуются с результатами исследований других ученых, отмечающих, что клетки Лейдига, встречающиеся у новорожденных, уже в ранний период постнатального периода перестают обнаруживаться (Волкова О.В., Пекарский М.И., 1976).

Сохранение количества активных эндокриноцитов у 17-18-летних животных отличает маралов от других млекопитающих, у которых в старости происходит либо увеличение числа клеток Лейдига в качестве компенсаторного явления в связи со снижением их функциональ-

ной активности, как у крыс и мышей (Pirke K.M. et al., 1978; Takano Hiroko, Abe Kazuhiro, 1987), либо прогрессивное уменьшение числа клеток Лейдига и других клеток интерстиция, как у человека (Kaler L.W., Neaves W.B., 1978; Neaves W.B., Johnoson L., Petty C.S.,

120