Занятие 4. Кровь

Цель занятия: изучение морфофункциональных особенностей крови, сопоставление строения и соотношения клеточных элементов крови у представителей различных классов позвоночных животных, ознакомление с гемолимфой насекомых.

1. Мазок крови человека (окраска эозин-азуром II)

При малом увеличении видно, что основную массу клеток составляют эритроциты.

При большом увеличении, передвигая препарат, рассмотреть и зарисовать все форменные элементы крови. При зарисовке необходимо учитывать размеры клеток, сравнивая их величину с эритроцитами.

Эритроциты в мазке крови – округлые безьядерные клетки, диаметром 7,2–8,5 мкм. Количество их у взрослого человека равно 6–8 тыс. на 1 мм3 крови. Нейтрофилы (нейтрофильные гранулоциты) составляют 65–75% от общего числа лейкоцитов (диаметр их 10–12 мкм). В цитоплазме нейтрофилоцитов содержатся мелкие гранулы, окрашивающиеся в розово-фиолетовый цвет. Специфические гранулы содержат лизоцим, щелочную фосфатазу, белок лактоферрин (способствует склеиванию бактериальных клеток). Зрелые нейтрофилоциты имеют сегментированные ядра, состоящие из нескольких соединенных между собой долек (сегментоядерные нейтрофилы), кроме них встречаются нейтрофилоциты, имеющие ядра в виде палочки, подковы или буквы S (3–5%). Основная функция нейтрофилов – фагоцитоз микроорганизмов (микрофаги). В очаге воспаления убитые бактерии и погибшие нейтрофилы образуют гной.

Эозинофилы (ацидофильные гранулоциты, ацидофилоциты) составляют от 2 до 5 % клеточных элементов и имеют размеры 12–14 мкм, в цитоплазме содержатся крупные ацидофильные гранулы, ядро двух-, трехдольчатое. В специфических гранулах находится главный основной белок (MBP), участвующий в антипаразитарной функции эозинофилов, перексидаза, гистаминаза. Эозинофилы также локализуют воспалительные реакции, снижая содержание гистамина в тканях.

Лимфоциты составляют 20–30 % численности клеточных элементов. Малые лимфоциты – клетки диаметром 4–7 мкм, ядро крупное, круглое, хроматин конденсирован по периферии, цитоплазма в виде тонкого ободка. Средние лимфоциты диаметром 7–10 мкм, имеют круглое или овальное ядро с более рыхлым хроматином, цитоплазма образует более широкий ободок. Основная функция лимфоцитов – участие в реакциях клеточного и гуморального иммунитетов. Выделяют 3 функциональных класса – T-лимфоциты, B- лимфоциты, и нулевые лимфоциты.

Моноциты (6–8%). Диаметр их колеблется в пределах от 18 до 20 мкм, ядро неправильной формы с мелкими глыбками хроматина и с 1–2 ядрышками, цитоплазма окрашивается в серовато-дымчатый цвет. Моноциты периферической крови представляют собой пул относительно незрелых клеток. Выселяясь в ткани, превращаются в макрофаги.

43

Кровяные пластинки (название тромбоциты является менее правильным) имеют вид очень мелких телец округлой, веретеновидной, овальной или неправильной формы. Как правило, они встречаются группами. Можно различить слабооксифильный гиаломер и базофильный грануломер (скопление гранул в центре). Специфические гранулы содержат белки и гликопротеины, принимающие участие в процессах свертывания крови, факторы роста, литические ферменты (катепсин, кислая фосфатаза), серотонин, адреналин.

Базофилы (базофильные гранулоциты) встречаются в мазке крайне редко. Их содержание составляет 0.5–1%. Цитоплазма клетки заполнена крупными метахроматическими базофильными гранулами, маскирующими ядро. Они содержат протеогликаны, гепарин, вазоактивный гистамин, энзимы. Ядро слабодольчатое, реже сферическое. Базофилы участвуют в аллергических реакциях гиперчувствительности немедленного типа. Пусковым механизмом является IgE-рецептор для иммуноглобулина E.

На рисунках отметить ядро, цитоплазму, зернистость у гранулоцитов, гиаломер

игрануломер (хрономер) у кровяных пластинок.

2.Мазок крови лягушки (окраска эозин-азуром II)

При большом увеличении найти и зарисовать все форменные элементы крови амфибий: эритроциты, нейтрофилы, лимфоциты, эозинофильные и базофильные гранулоциты, тромбоциты. Обратить внимание на иное соотношение размеров и числа клеток по сравнению с форменными элементами крови человека, а также на наличие ядер у эритроцитов и тромбоцитов.

3. Мазок крови птицы (окрашивание по Романовскому)

Основная масса клеток на препарате представлена эритроцитами – клетками овальной формы с ядром, заполненным гемоглобином. Относительное число лейкоцитов больше, чем в крови млекопитающих. Гранулоциты представлены базофилами, эозинофилами и псевдоэозинофилами. Псевдоэозинофилы составляют 23–24 % от общего числа лейкоцитов и функционально соответствуют нейтрофилам млекопитающих. Это клетки с сегментированным (обычно из двух сегментов) ядром, в цитоплазме содержат оксифильные гранулы веретеновидной формы. Эозинофилы птиц составляют 15% от общего числа лейкоцитов, их гранулы также оксифильны, но имеют округлую форму. Базофилы (их 3%) сходны с таковыми у млекопитающих. Агранулоциты (к ним относятся лимфоциты и моноциты) крови птиц морфологически и функционально сходны с таковыми у млекопитающих. Следует обратить внимание на наличие ядра у тромбоцитов.

44

Рис. 10. Форменные элементы крови птиц

1 – псевдоэозинофил; 2 – эозинофил; 3 – базофил; 4, 5 – лимфоциты; 6 – моноцит; 7 – эритроцит; 8 – тромбоцит

4. Мазок гемолимфы насекомого (окрашивание по Романовскому)

Клетки гемолимфы насекомых, или гемоциты, очень разнообразны по размерам и форме у разных групп. По внешнему виду можно выделить две основные категории гемоцитов: с тонкогранулированной цитоплазмой (агранулярные амебоциты) и с цитоплазмой, в которой хорошо видны отдельные гранулы, число которых может быть различно (гранулярные амебоциты). У насекомых также встречается еще один хорошо идентифицируемый тип клеток: прогемоцит. Он представляет собой малодифференцированную клетку (бласт), дающую начало остальным типам, имеет округлую форму и крупное ядро.

На препарате видны плазмоциты – крупные клетки с неровными краями и тонкогранулированной протоплазмой, относящиеся к агранулярным амебоцитам, гранулоциты – клетки немного крупнее прогемоцита с многочисленными, относительно крупными гранулами, и прогемоциты, напоминающие малые лимфоциты позвоночных животных. На большом увеличении найти и зарисовать описанные выше клетки. На препарате могут встретиться и другие клеточные элементы, которые можно также зарисовать.

45

Рис. 11. Клетки гемолимфы насекомых

1 – прогемоцит; 2 – плазмоцит; 3 – гранулоцит; 4 – эноцит; 5 – цистоцит; 6 – сферическая клетка; 7 – адипогемоцит; 8 – подоцит

46